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间充质干细胞治疗支气管哮喘研究进展(附支气管哮喘治疗新进展)论文
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官方公共微信间充质干细胞治疗支气管哮喘研究进展（附支气管哮喘治疗新进展）--《山西医科大学》2012年硕士论文
间充质干细胞治疗支气管哮喘研究进展（附支气管哮喘治疗新进展）
【摘要】：支气管哮喘是一种气道慢性过敏反应炎症性疾病,长期慢性炎症导致气道反应性增高和可逆性气流阻塞。目前全球哮喘发病率及死亡率仍呈不断上升趋势,以吸入性糖皮质激素+长效β2受体激动剂为首的传统药物治疗方法并不能达到哮喘的理想控制及逆转哮喘病理改变,因此寻求新的治疗策略成为哮喘防治的首要任务,间充质干细胞作为一种免疫调节细胞,可有效改善哮喘气道炎症反应及免疫紊乱,将成为哮喘防治的新方向。
间充质干细胞是来源于发育早期中胚层的具有高度自我更新能力和多向分化潜能的多能干细胞,具有低免疫原性,其来源广泛,易于培养,目前已在心血管系统疾病、骨组织工程、肝脏疾病、神经系统疾病及自身免疫性疾病等领域取得一定进展。在呼吸系统疾病中,间充质干细胞也被证实可有效治疗各种原因所致的急性肺损伤、肺间质纤维化、肺动脉高压、慢性阻塞性肺疾病等,并对支气管哮喘也有一定治疗作用。
研究表明,间充质干细胞可定植到肺组织并分化为肺上皮细胞,显著减轻哮喘小鼠气道炎症反应及气道重塑,改善哮喘Th1/Th2失衡状态,上调CD4+CD25+调节性T细胞功能,通过细胞接触及分泌可溶性细胞因子等机制缓解哮喘病情。然而间充质干细胞治疗哮喘的研究仍停留在动物实验阶段,临床应用尚未开展,间充质干细胞治疗哮喘的具体机制及移植是否对人体产生影响、细胞植入人体内的命运及分化机制等仍是需要进一步解决的问题。
【关键词】：
【学位授予单位】：山西医科大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2012【分类号】：R562.25【目录】：
摘要5-6Abstract6-7缩略词表7-8前言8-91、支气管哮喘9-12 1.1 概述9 1.2 发病机制9-11
1.2.1 各种细胞及细胞组分、细胞因子参与哮喘发病9
1.2.2 Th1/Th2失衡是哮喘发病的重要机制9-10
1.2.3 CD4CD25+Treg 及 Thn 细胞与哮喘10
1.2.4 遗传因素与其它10-11 1.3 治疗现状11-122、 MSCs12-16 2.1 MSCs的来源、分离与培养12 2.2 MSCs的形态特点及表面标记12-13 2.3 MSCs的归巢与分化13-14 2.4 MSCs的免疫学特性14 2.5 MSCs在呼吸系统疾病中的应用研究14-16
2.5.1 MSCs治疗急性肺损伤研究14-15
2.5.2 MSCs与肺间质纤维化15
2.5.3 MSCs对肺气肿的治疗作用15
2.5.4 MSCs与肺动脉高压15-16
2.5.5 MSCs治疗哮喘的实验研究163、lyiscs治疗啤喘的可能机制16-19 3.1 MSCs定植并分化为肺上皮细胞修复肺组织炎性损伤16-17 3.2 MSCs通过免疫调节作用改善哮喘病情17-18
3.2.1 MSCs通过改善Th1/Th2失衡减轻哮喘气道炎症反应17-18
3.2.2 MSCs通过上调GD4+CD25+Treg治疗哮喘18 3.3 细胞接触与可溶性细胞因子18-194、问题与展望19-20参考文献20-24附：支气管哮喘治疗新进展24-39 参考文献35-39个人简介39-40致谢40
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Establish the egg albumen sensitization / provoke allergic pulmonary inflammation of mice model, lay the foundation for further test. 2. Discuss the egg Qing ovalbumin sensitized and provoked asthma mice lung pathology and alveolar lavage fluid (BALF) cell shape and molecular biology irrigation and preliminary analysis of the asthma allergic inflammatory disease mechanism. Measures 20 only 4 to 6 weeks old female BALB / c mice were randomly divided into two groups, with 10 rats in each group. The experimental group use egg Qing albumen on days 0 and 14 sensitization, 24 of the 26 day provoke mice, in contrast to the group with physiological saline. End time excite stop after 48 hour death in mice, the specimens of serum and lung pathology, alveolar irrigation lotion, lung frozen tissue samples, compared two groups of lung pathological changes, and bronchoalveolar lavage fluid cell count and cell classification count. Results 1. The pathological changes of the lung in mice were in conformity with the allergic inflammation. 2. Compared with the normal control group, the total number of cells in the BALF cells of the mice was significantly increased, and the number of cells classified and counted. 3. And plasma IL levels were significantly decreased in mice induced by sensitization and the Y was significantly decreased in IFN and plasma BALF. Conclusion 1. Take the egg ovalbumin sensitized mice stimulated / set, victory in a mouse model of asthma. 2. Through the process of serum and bronchoalveolar lavage fluid of cytokines in the determination of that asthma clutter types is the ratio of Th1 / Th2 unbalance, Th2 cells increased and excretion of various cytokines in asthma produced growth play an important role. Goal 1. Respectively, to create a mouse bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs), for further testing of the supply of experimental data. 2. Not Yacha bone marrow mesenchymal stem cell shape change flow cytometry determined outside of the cell markers, rudimentary knowledge of bone marrow mesenchymal stem cell characteristics. Methods under asepsis condition completely separately mice femur and tibia, extraction of cells in the marrow cavity, seedless red cell lysis of red blood cells, bone marrow mononuclear cells for 37 DEG C, 52 created box created in. The suspension cells were removed by repeated transfer, and the adherent macrophages and fibroblasts could be removed by repeated passage, and the purification of bone marrow mesenchymal stem cells could be reached. The expression of CD44, CD34 and CD29 were detected by P2 cells. Results 1. Under the microscope, the bone marrow mesenchymal stem cells were adherent to the development, and the shape was uniform, the shape was uniform, the shape of the sample was uniform. 2. P2 (CD29), CD44 (), CD34 (1) cell purity was 95. Conclusion through the process of repeated experiments, we won the victory of the bone marrow mesenchymal stem cells, respectively, and the number of cells was amplified by repeated passage, and the origin of the cells was further tested. Objective to investigate whether the injection of bone marrow mesenchymal stem cells can aggravate the inflammatory response in the lungs of asthmatic mice, and to explore the mechanism of its effect. Methods test was divided into five groups: 1. T the injection and atomization of the psychological saline. 2. A OVA sensitization / provoked (the same as the first Department). 3. Asthma BMSC 2 hours before the injection of 2ml containing 1 x 107 BMSCs. 4. Asthma BMSCs created a li 2 hours before the injection of 2mlBMSCs to stimulate the formation of liquid. 5. Asthma BMSCs lysis solution treatment group, 2 hours per day of intraperitoneal injection containing 2ml containing 1 x 107 BMSCs cell lysis. Three times, 48 hours after the death of mice, the collection of lung pathology, alveolar lavage fluid, lung frozen tissue and other analysis. Results 1. Compared with the normal group, the asthma group showed significant allergic inflammation. 2. Compared with asthma group, BMSCs treatment group showed significant healing effect: pulmonary allergic inflammatory response was significantly increased, and the inflammatory factors in pulmonary alveolar and serum were significantly decreased. 3. Compared with the asthma group, BMSCs group and BMSCs treatment group also showed a certain treatment effect. 4. Compared with the BMSCs treatment group, BMSCs created liquid treatment group and MSC treatment group, the treatment effect is relatively weak. 5. BMSCs bring up liquid to treat group and BMSCs to treat the effect is similar. 6. In the test was not significant adverse reactions for BMSCs. Conclusion 1. BMSCs injection has a cure effect on acute asthma inflammation, and no significant adverse reactions. 2. BMSCs make liquid and BMSCs cracking liquid also have remedial effect to acute asthma, but this effect is treated with direct injection BMSCs is relatively weak. Effect of target through observations and BMSCs were created after the T lymphocytes, and further discusses the BMSCs to treat asthma action mechanism. Are spleen T lymphocytes, bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) and T lymphocytes in vitro were created, were created for 72 hours after collecting suspension of T cells and produced liquid, after centrifugation. The supernatant was measured IL 4 and IL 17 and IFN gamma levels. Cell extracts of T cells after protein precipitation, determination of protein in L by Western blot...目录:中英文名词对照5-7第一部分 卵清蛋白致敏/激发小鼠肺部变应性炎症模型的建立7-16&&&&摘要8&&&&Abstract8-9&&&&前言9-10&&&&材料与方法10-12&&&&结果12-13&&&&讨论13-14&&&&小结14-15&&&&参考文献15-16第二部分 骨髓间充质干细胞的分离、培养与鉴定16-27&&&&摘要17&&&&Abstract17-18&&&&前言18-19&&&&材料与方法19-20&&&&结果20-23&&&&讨论23-24&&&&小结24&&&&参考文献24-27第三部分 骨髓间充质干细胞对哮_小鼠的治疗作用27-45&&&&摘要28-29&&&&Abstract29&&&&前言29-30&&&&材料与方法30-33&&&&结果33-38&&&&讨论38-41&&&&小结41-42&&&&参考文献42-45第四部分 骨髓间充质干细胞与淋巴细胞体外共培养45-55&&&&摘要46&&&&Abstract46-47&&&&前言47-48&&&&材料与方法48-52&&&&结果52-53&&&&讨论53-54&&&&小结54&&&&参考文献54-55结论55-57致谢57-58综述58-82&&&&Reference72-82原价：￥20.00元折价：￥5.00元分享到：参考文献[1].吕志祥.[D].江苏大学.2014[2].王慧宇.[D].上海交通大学.2014[3].朱晓娟.[D].青海大学.2013[4].刘晓云.[D].长春理工大学.2013[5].刘云婧.[D].东南大学.2013[6].曹文虎.[D].东南大学.2013[7].褚纯隽.[D].苏州大学.2014[8].徐文俊.[D].苏州大学.2014[9].刘展.[D].苏州大学.2014[10].刘慧婷.[D].苏州大学.2014