黄柏与苍术提取物对高尿酸血症小鼠血尿酸的影响　
作者单位：北京与分子工程学院，北京
100871；黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨
150040； 长春中医药大学，吉林 长春
100021【摘要】&
　　目的研究黄柏与苍术提取物对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的影响。方法选择小鼠腹腔注射尿酸生成的前体物质次黄嘌呤(hypoxanthine)的方法制备高尿酸血症动物模型, 给予黄柏、苍术提取物灌胃（含生药18.75 g/kg?d）,连续1周,采用改良尿酸酶trinder's法测定小鼠血清尿酸值。结果黄柏与苍术提取物组与别嘌呤醇组均能显著地降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平(p< 0.01), 二者对正常动物血清尿酸水平仅有一定降低的趋势,但无显著性差异。结论 黄柏与苍术提取物对高尿酸血症小鼠具有明显降低血清尿酸水平作用，是一种有开发前景的降尿酸治疗痛风中药活性成分。
【关键词】& 黄柏 苍术 提取物 高尿酸血症 血尿酸
　　effect of extract of cortex phellodendri and atractylodes lancea on hyperuricemia in mice
　　pan zhi,duan fujin,wang yinghang,zhang jianbin,wei xionghui*
　　(department of applied chemistry, college of chemistry and molecular engineering, peking university ,beijing 100871,& heilongjiang university of chinese medicine , harbin 150040, changchun university of chinese medicine , changchun 100021, china)
　　abstract：objectiveto study the effect of extract of cortex phellodendri and atractylodes lancea on hyperuricemia in mice.methodsthe hyperuricemia model of mouse was induced by injection of& the pre-substance of uric acid hypoxanthine intraperitoneally.the extract of cortex phellodendri and atractylodes lancea was investigated in the hyperuricemia model of mice after oral administration of& 18.75g/kg&d& body weight for seven days .serum uric acid level was determined by the trinder's method.resultsthe serum uric acid level was obviously decreased in hyperuricemia model of mouse treated with cortex phellodendri and atractylodes lancea(p< 0. 01),they showed the tendency to decrease the uric acid levels in the normal animal only.conclusionthe extract of cortex phellodendri and atractylodes lancea would have promising prospects as a chinese medicine of good therapeutic effects on hyperuricemia and gout.
摘自： 　　
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全刊杂志赏析网 2015　　（上海市普陀区宜川街道社区卫生服务中心 上海200065）
　　【摘要】目的本实验用次黄嘌呤或黄嘌呤分别配合氧嗪酸钾复制小鼠代谢性高尿酸血症模型，观察造模后不同时段受试动物血清尿酸的变化，以确定持续性高尿酸血症的可靠模型。方法采用次黄嘌呤或黄嘌呤以及OAPS，分别测定造模后不同时段小鼠的尿酸值。结果采用次黄嘌呤或黄嘌呤联合尿酸酶抑制剂,可使受试动物血尿酸值明显高于空白对照组(P&0.05)，且可维持6h以上。结论以尿酸前体物质配合尿酸酶抑制剂的方法造模，所复制的小鼠代谢性高尿酸血症模型具有血尿酸值高、维持时间长的特点。
　　【关键词】高尿酸血症；尿酸酶抑制剂；模型；动物
　　【中图分类号】R749.053【文献标识码】B【文章编号】13)05-0492-01　
　　本文拟采用次黄嘌呤和黄嘌呤以及配合一定剂量的尿酸酶抑制剂造模，观察受试动物尿酸水平，以及尿酸过饱和状态的持续时间，为建立持续性高尿酸血症以及痛风的实验动物模型提供依据。
　　1材料与方法
　　实验动物：ICR小鼠，雄性，体重18~20g，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，许可证号：SCXK。适应性喂养1周，实验前一天禁食。
　　实验药品：次黄嘌呤，国药集团化学试剂有限公司，批号：F；黄嘌呤，Sigma公司；氧嗪酸钾，Sigma公司；盐酸乙胺丁醇片，上海信谊药厂有限公司，批号：110921。
　　检测指标：血尿酸由日立-7080全自动生化检测仪检测
　　实验方法：小鼠随机分组，设为模型Ⅰ组：次黄嘌呤组；模型Ⅱ组：次黄嘌呤及氧嗪酸钾组；模型Ⅲ组：黄嘌呤及乙胺丁醇组；模型Ⅳ组：黄嘌呤及氧嗪酸钾组；并设正常空白对照组。4个模型组均以腹腔注射方式造模，并在造模后1h、2h、4h、6h眼眦取血，检测血中尿酸值。每个模型组每个时间点10只ICR小鼠。
　　统计与处理：结果以X&S表示，进行t检验。
　　次黄嘌呤组和次黄嘌呤及氧嗪酸钾组腹腔注射导致小鼠高尿酸血症的时效关系：将ICR小鼠随机分组，根据上述实验方法，模型Ⅰ组：次黄嘌呤组；模型Ⅱ组：次黄嘌呤及氧嗪酸钾组。造模后1、2、4、6h眼眦取血，检测血尿酸值，结果见表1。
　　结果显示，采用腹腔注射HX 400 mg/kg ,在造模后1、2h ,尿酸值均显著高于空白对照组(P&0.01)；腹腔注射HX 400 mg/kg及OAPS 200mg/kg，造模后1、2、4、6 h 血尿酸值均显著高于空白对照组(P&0.01)；而且两种造模方式每个时间点尿酸值都有差异（P&0.01）。结果表明，单用HX虽可升高小鼠血清尿酸水平，但尿酸升高值及持续时间没有与OAPS联合应用显著，也不能较长时间将血尿酸值维持在较高水平。而将HX和OAPS配合使用，可以升高小鼠的血尿酸值，还可以维持4h 以上的血尿酸过饱和浓度，6h以上的尿酸高水平值。
　　表1单用HX与联合使用HX及OAPS的
　　不同时段的小鼠尿酸值（X&S，n=10）
　　分组血尿酸值（Uric acid /&mol&L -1）1h2h4h6h空白组67&18.49模型Ⅰ组589&103.26▲▲**165&79.28▲▲**68&20.62▲▲73&17.35▲▲模型Ⅱ组714&139.34**562&93.19**435&101.47**237&88.53
**（注：模型组与空白组相比，**，表示P&0.01；*，表示P&0.05；
　　模型Ⅰ组和Ⅱ组相比，▲▲，表示P&0.01，同表2）
　　2.2黄嘌呤及乙胺丁醇组和黄嘌呤及氧嗪酸钾组腹腔注射导致小鼠高尿酸血症的时效关系：根据上述实验方法，模型Ⅲ组：黄嘌呤组及乙胺丁醇；模型Ⅳ组：黄嘌呤及氧嗪酸钾组。造模后1、2、4、6h眼眦取血，检测血尿酸值，结果见表2。
　　结果显示，采用腹腔注射黄嘌呤900mg/kg 以及乙胺丁醇250mg/kg,在造模后1、2h，尿酸值均高于空白对照组(P&0.05)；腹腔注射黄嘌呤900mg/kg及OAPS 200mg/kg，造模后1、2、4、6 h 血尿酸值均高于空白对照组(P&0.05)。结果表明，使用黄嘌呤及乙胺丁醇造模，可升高小鼠血清尿酸水平，但仅能维持2h以上，而且尿酸升高值不能达到过饱和浓度。将黄嘌呤和OAPS配合使用可以维持小鼠2h 以上的血尿酸过饱和浓度，6h以上的尿酸高水平值。
　　人体内的血尿酸水平，取决于嘌呤的吸收和生成与分解和代谢的平衡。内源性和外源性嘌呤类物质，经过一系列酶催化生成次黄嘌呤，在黄嘌呤氧化酶的作用下，生成黄嘌呤，再进一步生成尿酸。人体内不含尿酸氧化酶，而许多动物，可将尿酸直接分解成尿囊素，随尿液排出体外。因为这一特性，利用大鼠和小鼠复制高尿酸血症的模型并使尿酸水平维持在过饱和浓度存在一定困难。
　　我们采用400mg/kg次黄嘌呤一次性腹腔注射，小鼠尿酸值比较稳定，成模率高，尿酸均值在600~700&mol/L之间。但是无论何种剂量，这种一次性腹腔注射HX的方法，只能使高尿酸值维持时间较短，2h即迅速下降。此次使用次黄嘌呤和氧嗪酸钾联合造模，小鼠高尿酸值可持续6h以上，过饱和尿酸浓度可达4h以上，持续时间远大于单独使用HX。
　　表2联合使用黄嘌呤及乙胺丁醇与联合使用黄嘌呤及
　　OAPS的不同时间的小鼠尿酸值（X&S，n=10）
　　分组血尿酸值（Uric acid /&mol&L-1）1h2h4h6h空白组67&18.49模型Ⅲ组203&64.74▲▲**125&65.26▲▲*87&23.41▲▲59&19.13▲▲模型Ⅳ组556&70.89**456&89.58**311&129.37**113&32.77*（注释见表1）
　　对于联合使用黄嘌呤和乙胺丁醇的造模方法国内外多有报道。但是我们研究发现，该方法形成的高尿酸血症，不能使尿酸值达到过饱和浓度，而且与黄嘌呤和氧嗪酸钾的造模相比，其维持高尿酸的时间和浓度都比较低。
　　使用次黄嘌呤和黄嘌呤分别配合尿酸酶抑制剂造模，这种方法能显著提高小鼠尿酸水平和高尿酸水平的持续时间。同时次黄嘌呤和黄嘌呤相比，其尿酸值过饱和浓度的时间也比黄嘌呤要长。用氧嗪酸钾联合HX造模还是略优于联合使用黄嘌呤，这可能与体内嘌呤类物质转变为尿酸的代谢途径有关。
　　现有的许多动物模型都可复制出高尿酸血症，但是尿酸值持续达到过饱和浓度才与人类发生高尿酸血症和痛风的发病机理类似。利用尿酸生成前体物质配合尿酸酶抑制剂造模，能使体内血尿酸值持续在饱和值以上，为抗痛风药物的筛选和作用机制研究提供可靠的动物模型。
　　参考文献
　　［1］时乐,徐立.痛风性关节炎动物模型的研究现状与展望［J］.中国实验动物学报,) :71～ 74.
　　［2］孟昭亨．痛风［M］．北京：北京医科大学．中国协和医科大学联合出版社，．
　　［3］徐立, 时乐. 尿酸酶抑制剂在大鼠急性高尿酸血症模型复制中的应用［J］.中国比较医学杂志，）：142～145.
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小鼠尿酸(UA)elisa定量试剂盒
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alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 1,AFP-L1 ELISA Kit ，规格： 96T/48TE-(Mu)（01）-05535 小鼠黑色素瘤标记物(MART/Melan-A)ELISA试剂盒 ，英文名： Melanoma Marker A,MART/Melan-A ELISA Kit ，规格： 96T/48TE-(Mu)（01）-05536 小鼠高分子量细胞角蛋白(CK-HMW)ELISA试剂盒 ，英文名： cytokeratin High Molecular Weight,CK-HMW ELISA Kit ，规格： 96T/48TE-(Mu)（01）-05537 小鼠肝癌抗原(PHC)ELISA试剂盒 ，英文名： primary hepatic carcinoma,PHC ELISA Kit ，规格： 96T/48TE-(Mu)（01）-05538 小鼠鼻咽癌(NPC)ELISA试剂盒 ，英文名： nasopharyngeal carcinoma,NPC ELISA Kit ，规格： 96T/48TE-(Mu)（01）-05539 小鼠膀胱癌抗原(UBC)ELISA试剂盒 ，英文名： urinary bladder cancer antigen,UBC ELISA Kit ，规格： 96T/48TE-(Mu)（01）-05540 小鼠广谱细胞角蛋白(P-CK)ELISA试剂盒 ，英文名： pan-cytokeratin,P-CK ELISA Kit ，规格： 96T/48TE-(Mu)（01）-05541 小鼠癌基因蛋白质p190/bcr-abl ELISA试剂盒 ，英文名： Oncogene Protein p190/bcr-abl ELISA KitOncogene Protein p190/bcr-abl ELISA Kit ，规格： 96T/48TE-(Mu)（01）-05542 小鼠膀胱肿瘤抗原(BTA)ELISA试剂盒 ，英文名： Bladder tumor antigen,BTA ELISA Kit ，规格： 96T/48TE-(Mu)（01）-05543 小鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)ELISA试剂盒 ，英文名： BH3 interacting domain death 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小鼠高尿酸血症模型的研究
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