透析纸袋子一般怎么检验

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透析袋胀袋!!怎么办??
我的是小分子除盐,我用100分子截留的透析袋透析氯化钠,加了1ml,用的5cm长的透析袋,第二天还是胀的很严重!!没破,但是真的鼓起来很大很大。这样是不是氯化钠没出来?效果会不会不好??如何解决这种问题?感觉就像只进水,不出物质的感觉。怎么办????求助
在半透膜将纯液体与含有溶质的液体分开情况下,纯液体的化学势高于含有溶质的溶液的化学势,而物质移动规律是从化学势高移动到化学势低的,因此溶剂分子经半透膜移向另外一边的溶液。
用透析袋就是这样,透析袋内浓度较高,为了促使两边平衡,外面的水会进入透析袋内,里面的无机盐也会渗透到外面。但是氯化钠没有颜色,你看不出来而已。 楼主!你用100Da 的透析袋透析什么?蛋白吗?你的透析袋里都有些什么?有有机物吗?有肌氨酸钠?有Triton X-100吗?你的透析buffer是什么?水吗?············你的问题问的·····诶!!!!!
关键原因在于:透析袋里面的渗透压大于外面!而你的透析袋体积又不够大!
你先要明白道尔顿是什么,他其实就是表示原子质量单位,在生物化学、分子生物学和蛋白组学中经常用D或KD,定义为碳12原子质量的1/12,1D=1/N g,N为阿弗加德罗常数,其实最开始道尔顿计算出的原子量是我们现在用的当量.
分子量是没有单位的,它是相对分子质量,比值是固定的,用原子量算出来的。
比如你要透析掉的NaCl,它的分子量就是58.44Da!
但是你的透析袋是截留100Da分子量以上,例如假设你的要透析的样品中含有多种有机物质(分子量较大)!而你的透析buffer却是ddH2O,虽然NaCl是透析出来了!但是其中的有机物质呢!!!不还在里面吗,导致里面的渗透压比外面的大,为了平衡!水就不断进入透析袋中!直到膨胀不能在膨胀为止,有时还会透析袋破裂!
1. 因为你只脱盐!所以建议你在你的透析buffer中加入与你要透析的样品相同的溶剂(NaCL除外)!这样可以减小透析袋内外渗透压之差!
2.如果你已经保持你的透析buffer与你要透析的样品是相同的溶剂(NaCL除外),可能是盐浓度太高了!那么建议你再将透析袋的长度剪长一点,10cm试试!
3.透析不一定是换buffer的最好办法,你可以试一试脱盐柱G25,方面,快速!
就这么多吧,希望能给你点帮助!
建议你一下,下次问问题的时候,最好将问题阐述清楚,稀里糊涂的,别人没办法给你解答!:D:D:D 问题不太大,透析袋没那么弱,下次不要用这个透析袋了,记得放长一点 这种现象很正常,可以用透析袋内外相同的溶液进行透析,就不会胀袋,或者你在磁力搅拌器上透析4h以上,胀袋应该没这么严重,或是透析后浓缩一下,能保证浓度 : Originally posted by 不转录的DNA at
楼主!你用100Da 的透析袋透析什么?蛋白吗?你的透析袋里都有些什么?有有机物吗?有肌氨酸钠?有Triton X-100吗?你的透析buffer是什么?水吗?············你的问题问的·····诶!!!!!
关键 ... 我分子量大概1000多点,就是氯化钠和水,想去掉氯化钠。用了个G25的柱子脱盐,但是盐峰和样品分不开,我用的GE的hitrap desalting 脱盐柱5ml的,3个串起来的,盐峰先出的,但是不完全分的开 你的蛋白体积多少?如果量大建议你用48ml的G25脱盐柱! 一般我们过分子筛蛋白的上样量是你柱体积的0.5%~5%!这个上样量具有较好的分离效果! : Originally posted by 不转录的DNA at
你的蛋白体积多少?如果量大建议你用48ml的G25脱盐柱! 我不是蛋白,分子量很小,上了G25脱盐柱,基本分不开 : Originally posted by jiantunyu at
我不是蛋白,分子量很小,上了G25脱盐柱,基本分不开... 1KD的东西!能告诉我是什么吗?
1. 除盐对于浓度应该也是有一定的限制的,同样的样品盐浓度高的自然要比浓度低的要在柱子上走的峰要宽些,相对需要的柱子的分辨率也要高点,但是在正常的范围如1-2M应该影响不大,不过要除得很干净还是尽量少上点样品,上样的体积毕竟比浓度的影响更大。
2. 流速和柱体积都会影响你的脱盐效果!建议选择合适的流速!
建议选择更长的脱盐柱! 楼主 我想请教你一下,你的透析袋是从哪里买的啊?sigma还是其它的什么地方,我也想买,但是不知道哪里有啊。 : Originally posted by louise0220 at
楼主 我想请教你一下,你的透析袋是从哪里买的啊?sigma还是其它的什么地方,我也想买,但是不知道哪里有啊。 随便找公司买啊,淘宝也有,我建议你起码买500的 : Originally posted by 不转录的DNA at
楼主!你用100Da 的透析袋透析什么?蛋白吗?你的透析袋里都有些什么?有有机物吗?有肌氨酸钠?有Triton X-100吗?你的透析buffer是什么?水吗?············你的问题问的·····诶!!!!!
关键 ... 你好,多糖的透析除盐,您能告诉我用多少分子量的透析袋合适呢? : Originally posted by 玉婷881213 at
你好,多糖的透析除盐,您能告诉我用多少分子量的透析袋合适呢?... 多糖,我没有做过!不太清楚,用100的截留透析袋是可以的,因为葡萄糖的分子量是128Da!多糖就更不用说了! 请问100的透析袋贵吗?淘宝一买5米起,太多!
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透析袋的规格选择
透析30kDa的蛋白来脱盐,应该买什么规格的透析袋呢?谢谢
仅仅脱盐的话随便选一个小于30kd的就行,比如比较便宜的14kd的 一般有1、50000的透析袋,根据透析袋的分子量乘以2小于目的蛋白分子量的原则,你可以选10000的。 有G25吗?透析脱盐很慢的。 Originally posted by jia1012428 at
一般有1、50000的透析袋,根据透析袋的分子量乘以2小于目的蛋白分子量的原则,你可以选10000的。 你好,我是个初学都,我想问一下,你说的:一般有1、50000的透析袋,根据透析袋的分子量乘以2小于目的蛋白分子量的原则,你可以选10000的。是那什么做的依据?谢谢。。。 Originally posted by sxlf at
你好,我是个初学都,我想问一下,你说的:一般有1、50000的透析袋,根据透析袋的分子量乘以2小于目的蛋白分子量的原则,你可以选10000的。是那什么做的依据?谢谢。。。 一般超滤或透析选择滤膜都这么考虑。
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为什么实验前要处理透析袋
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1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。 2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟。 3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。 4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。 5. 冷却后,存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋是必须戴手套。 6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。
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我打算做蛋白的透析复性,透析袋买来了,但是不知道怎么做预处理在网上搜了预处理的步骤,但是有几点不明白。我搜索的步骤如下:
& &1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段,注意带手套。
& &2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟。
& &3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
& &4. 放在1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。
& &5. 冷却后,存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋是& &&&必须戴手套。
& &6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。
我有以下几点不明白:
1.步骤二中,用&大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)煮沸&,是分别煮沸、还是两种溶液混到一块煮沸?
2.步骤四中,&透析袋必须浸没在溶液中&此处的溶液是指什么?1mmol/L EDTA(pH 8.0)?
3..新买的透析袋 直接用蒸馏水煮沸 不行吗?一定要像上面说的那样处理吗?
麻烦大家了,我是新手不大懂,还请见谅,呵呵
提问者: [] [] []
回答者: [] [] []
一级 一星助者
不能直接用蒸馏水煮,是两种溶液混到一起煮。
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2.步骤四中,&透析袋必须浸没在溶液中&此处的溶液是指什么?1mmol/L EDTA(pH 8.0)?
答:不是1mmol/L EDTA(pH 8.0),是双蒸水
作者:STT2011 时间: &共0人支持此评论
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