甜瓜子叶组织培养的研究--《山东农业科学》2002年02期
甜瓜子叶组织培养的研究
【摘要】：以厚皮甜瓜状元、伊丽沙白 ,薄皮甜瓜新玉、白玉种子的子叶为材料 ,设置 15种激素组合的诱导芽分化培养基 ,进行甜瓜子叶组织培养试验 ,结果表明 ,BA是甜瓜再生分化的关键物质 ,以BA浓度为 2
0mg/L时最有利于子叶外植体的再分化。在MS +BA2
0 和MS +BA2
2 两种培养基中 ,薄皮甜瓜的子叶组培再生能力高达 10 0 %。
【作者单位】：
【关键词】：
【分类号】：S652.035.3【正文快照】：
在甜瓜的组织培养方面 ,目前已能够通过子叶、真叶等多种外植体再生植株 ,有的还建立了比较高效的离体培养再生体系。有报道表明 ,不同甜瓜品种的组织培养条件差异极为显著。而近些年主要以厚皮甜瓜为材料进行研究 ,对薄皮甜瓜的研究却极少见。本文旨在建立适用于遗传转化的
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京公网安备74号同源四倍体不结球白菜再生体系的研究--《南京农业大学》2005年硕士论文
同源四倍体不结球白菜再生体系的研究
【摘要】：白菜类蔬菜是离体培养再生困难的一类作物,而基因工程等高科技育种技术都是建立在稳定可靠的高频率离体再生体系的基础上。探讨不结球白菜,特别是迄今未见报道的同源四倍体不结球白菜的高频离体再生体系具有重要的理论和实践意义。
本文以6个同源四倍体不结球白菜和2个二倍体不结球白菜的子叶为材料,研究离体培养过程中基因型对不定芽再生的影响,正交试验确定二、四倍体不结球白菜再生优化培养基;探讨材料再生能力与内源激素之间的相关性;并以四倍体不结球白菜雄性不育系为材料,研究外植体类型、生理苗龄、琼脂浓度、不同生长素类及细胞分裂素类生长调节剂等对离体不定芽再生的影响;再以二、四倍体不结球白菜雄性不育系的子叶为外植体,研究离体培养下不定芽诱导过程中生理生化的变化。最后对二、四倍体不结球白菜不定芽生根获得再生植株,对其驯化。进行形态及染色体等倍性鉴定,旨在建立同源四倍体不结球白菜稳定、高频的再生体系。结果表明:
材料的基因型是影响离体再生的关键因素。本试验通过正交设计研究TDZ(0.1、0.5和1.0 mg·L~(-1))、NAA(0.1、0.5和0.8 mg·L~(-1))和AgNO_3(0、5.0、和10.0mg·L~(-1))3因素3水平对二、四倍体不结球白菜子叶离体培养,诱导不定芽。正交设计极差分析确定二、四倍体不结球白菜再生优化培养基和各因素的优水平及因子的影响顺序。在相同配方下对四倍体材料再生能力比较和根据最高诱导率进行再生能力比较,2种方法表明再生能力强弱与外植体内源激素细胞分裂素(ZRs)和生长素(IAA)含量的绝对值无显著相关,而与ZRs/IAA比值的大小显著相关,相关系数分别是0.7。比较2组二、四倍体不结球白菜再生能力表明四倍体不结球白菜再生能力强的其二倍体不结球白菜再生能力也强。二、四倍体不结球白菜内源激素含量表明四倍体不结球白菜内源激素含量比相应二倍体不结球白菜的有所增加。
以同源四倍体不结球白菜雄性不育系(4xCMS)为材料,研究发现外植体不同,不定芽再生能力大不相同。供试的三种外植体在相同条件下不定芽再生能力依次为子叶下胚轴根。外植体是子叶时,以5d为最佳苗龄,琼脂浓度为0.8%时,4xCMS的不定芽再生率最高,为83.3%。通过对不同细胞分裂素类和生长素类生长调节剂的配合使用,表明NAA和TDZ的配合可显著提高不定芽的再生率。
以二、四倍体不结球白菜雄性不育系为材料,研究在MS+0.5mg·L~(-1)TDZ+0.5 mg·L~(-1)NAA+10.0mg·L~(-1)AgNO_3+0.8%琼脂+3%蔗糖培养基上,子叶离体培养中3种抗氧化酶:过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的酶活变化、可溶性
【关键词】：
【学位授予单位】：南京农业大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2005【分类号】：S634【目录】：
中文摘要7-9
英文摘要9-12
主要缩略词表12-13
第一部分 文献综述14-30
1 多倍体植物概况14-16
1．1 多倍体植物的产生途径14-15
1．2 多倍体植物的鉴定方法15
1．3 多倍体植物在农业中的应用15-16
2 多倍体植物离体培养的研究进展16
3 白菜类蔬菜离体培养的研究进展16-18
4 植物离体培养中的影响因素18-22
4．1 植物材料基因型影响不定芽的再生19
4．2 植物外植体类型及生理状态影响不定芽的再生19-20
4．3 植物激素对不定芽再生的影响20-21
4．4 生长调节物质对不定芽再生的影响21
4．5 AgNO_3影响白菜类蔬菜不定芽的再生21-22
4．6 培养基影响不定芽的再生22
5 植物形态发生过程中生理生化特性的研究22-23
参考文献23-30
第二部分 研究报告30-67
第一章 四倍体及二倍体不结球白菜不定芽诱导培养基的筛选及与内源激素含量的相关性30-42
1 材料与方法31-32
1．1 材料31
1．2 方法31-32
1．2．1 无菌苗的培养31
1．2．2 子叶的离体培养31
1．2．3 正交实验设计31-32
1．2．4 内源激素的测定32
2 结果与分析32-39
2．1 四倍体不结球白菜不定芽诱导培养基的筛选32-34
2．2 二倍体不结球白菜不定芽诱导培养基的筛选34-35
2．3 不结球白菜子叶内源激素含量的测定35-37
2．4 四倍体不结球白菜子叶再生能力与内源激素含量的相关性37-39
3 讨论39-40
参考文献40-42
第二章 关于四倍体不结球白菜雄性不育系离体不定芽再生率的影响42-50
1 材料与方法42-43
1．1 材料42
1．2 方法42-43
1．2．1 无菌苗的培养42-43
1．2．2 不同苗龄的子叶对不定芽再生的影响43
1．2．3 琼脂浓度对子叶不定芽再生的影响43
1．2．4 外植体类型对不定芽再生的影响离体培养43
1．2．5 不同细胞分裂素类生长调节剂对子叶不定芽再生的影响43
1．2．6 不同生长素类生长调节剂对子叶不定芽再生的影响43
2 结果分析43-47
2．1 子叶苗龄与琼脂浓度对不定芽再生的影响43-44
2．2 外植体类型对不定芽再生的影响44-45
2．3 不同细胞分裂素类生长调节剂对子叶不定芽再生的影响45-46
2．4 不同生长素类生长调节剂对子叶不定芽再生的影响46-47
3 讨论47-48
参考文献48-50
第三章 二、四倍体不结球白菜诱导不定芽过程中生理生化的研究50-59
1 材料与方法50-52
1．1 材料50
1．2 方法50-52
1．2．1 无菌苗的培养50-51
1．2．2 子叶的离体培养51
1．2．3 可溶性蛋白质含量的测定51
1．2．4 POD酶活的测定51
1．2．5 CAT酶活的测定51
1．2．6 SOD酶活的测定51
1．2．7 酯酶同工酶电泳51-52
2 结果分析52-56
2．1 子叶培养过程中可溶性蛋白质含量的变化52-53
2．2 子叶培养过程中SOD酶活变化53-54
2．3 子叶培养过程中CAT酶活变化54
2．4 子叶培养过程中POD酶活变化54-55
2．5 子叶培养过程中酯酶同工酶分析55-56
3 讨论56-57
参考文献57-59
第四章 二、四倍体不结球白菜再生植株驯化培养59-67
1 材料与方法59-60
1．1 材料59
1．2 方法59-60
1．2．1 不定芽的生根59-60
1．2．2 再生植株的驯化60
1．2．3 再生植株的倍性鉴定60
2 结果与分析60-66
2．1 生长素类生长调节剂对4xCMS不定芽生根的影响60-61
2．2 再生植株的驯化61-63
2．3 二、四倍体不结球白菜倍性鉴定63-66
2．3．1 间接形态学鉴定63-65
2．3．2 直接染色体鉴定65-66
参考文献66-67
全文结论67-68
发表论文情况68-69
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甜瓜子叶离体培养直接再生不定芽的形态学和解剖学观察
【摘要】：对甜瓜品种“西莫洛托”子叶离体培养直接再生不定芽过程进行了形态学和解剖学观察。结果表明 :以子叶远轴面接触培养基培养能直接再生不定芽 ,以子叶近轴面接触培养基培养只能得到无序组织块 ;不定芽再生过程中 ,培养 4 d时 ,子叶变绿 ,但还不见有细胞分裂。约 6 d时 ,在子叶外植体的形态学下端切口处的近轴面观察到有局部的表皮细胞和亚表皮细胞分裂活跃 ,初步形成了拟分生组织。 7～ 9d时 ,这些拟分生组织形成了肉眼可见的小突起。 10～ 14 d时 ,这些突起变得狭长 ,发育成幼叶或叶状体 ,它们在外植体上成簇存在 ,但此时还没有典型的“芽”结构出现。 15～ 2 0 d时 ,成簇突起形成幼叶
【作者单位】：
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