简述配制lb固体培养基的配制应遵循的几个原则?

发酵培养基的配制原则-恒鑫微生物发酵用化学品
微生物发酵用化学品
发酵培养基的配制原则
(1) 选择合适的pH
各种微生物正常生长均需要有合适pH,一般霉菌和酵母菌比较适于微酸性环境,放线菌和细菌适于中性或微碱性环境。为此,当培养基配制好后,若pH不合适,必须加以调节。另外,一个须注意问题是:高碳氮比的培养基在菌体生长过程中易使pH变低,低碳氯比的培养基在菌体生长过程中易使pH变高。这时可用加酸碱溶液、加缓冲剂、加生理酸碱性盐进行调节,同时以菌体对各种营养成分的利用速度来考虑培养基的组成。
(2)营养物质浓度及配比合适
培养基中营养物质浓度合适时菌体才能生长良好。营养物质浓度过低时不能满足菌体正常生长所需,例如氮源不足,则菌体生长过于缓慢,而培养基中的碳源供应不是时,容易引起菌体衰老和自溶。浓度过高时则可能对菌体生长起抑制作用,例如高浓度糖类物质、无机盐等不仅不能维持和促进菌体的生长,反而起到抑菌或杀菌作用。总体来讲,碳源物质浓度应以略稀薄为宜。另外,培养基中各营养物间浓度配比也直接影响微生物生长繁殖,其中碳氯比( C/N)在发酵工业中尤其重要,不同菌种、不同类型培养基的碳氮比是不同的。
(3) 氧化还原电位的影响
绝大多数微生物来说,培养基的氧化还原电位一般对其生长的影响不大,即适合它们生长的氧化还原电位范围较广。但对于厌氧菌,由于氧的存在对其有毒害作用,因而往往在培养基中加入还原剂以降低氧化还原电位。
在配制培养基时,除应注意以上几条原则外,还要考虑到营养成分的加入顺序,为避免生成沉淀而造成营养成分的损失,加入的顺序一般为先加入缓冲化合物,溶解后加入主要物质,然后加入维生素、氨基酸等生长素类的物质。
(4) 选择适宜的营养物质
虽然所有微生物生长繁殖均需要培养基含有碳源、氮源、无机盐、生长因子、水等,但由于微生物营养类型的复杂性,不同微生物所需要培养基成分不相同。要确定一个合适培养基,需要了解生产用菌种来源、生理生化特性和一般营养要求,根据不同生产菌种的培养条件、生物合成的代谢途径、代谢产物的化学性质等确定培养基。
自养型微生物培养基完全由简单无机物组成,不需要专门加入其他碳源物质,例如培养自养型的氧化硫硫杆菌的培养基。因为自养型微生物能从简单无机物合成自身需要的糖类、脂质、蛋白质、核酸、维生素等复杂有机物。对光能自养型微生物而言,除需要各类营养物质外,还需光照提供能源。
培养异养型微生物需要在培养基中添加有机物,而且不同类型异养型微生物的营养要求差别很大,因此其培养基组成也相差很远。例如培养大肠杆菌的培养基组成比较简单,而培养肠膜明串珠菌需要在培养基中添加多达33种的生长因子。
本文参考《发酵工程原理与技术》一书。
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简述配制培养基应遵循的几个原则?
简述配制培养基应遵循的几个原则?
一,目的明确.二,营养协调.三,理化条件适宜.四,经济节约.
1)目的明确;2)营养协调;3)理化条件适宜;4)经济节约选择和配制发酵培养基应遵循哪些基本原则_百度作业帮
选择和配制发酵培养基应遵循哪些基本原则
选择和配制发酵培养基应遵循哪些基本原则
发酵培养基发酵培养基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用.它既要使种子接种后能迅速生长,达到一定的菌丝浓度,又要使长好的菌体能迅速合成需产物.因此,发酵培养基的组成除有菌体生长所必需的元素和化合物外,还要有产物所需的特定元素、前体和促进剂等.但若因生长和生物合成产物需要的总的碳源、氮源、磷源等的浓度太高,或生长和合成两阶段各需的最佳条件要求不同时,则可考虑培养基用分批补料来加以满足.操作方法和注意事项如下 加水 打开灭菌锅盖,向锅内加水到水位线.立式消毒锅最好用已煮开过的水,以便减少水垢在锅内的积存.注意水要加够,防止灭菌过程中干锅. 装料、加盖 灭菌材料放好后,关闭灭菌器盖,采用对角式均匀拧紧锅盖上的螺旋,使蒸汽锅密闭,勿使漏气. 排气 打开排气口(也叫放气阀).用电炉加热,待水煮沸后,水蒸气和空气一起从排气孔排出,当有大量蒸汽排出时,维持5min,使锅内冷空气完全排净. 升压、保压和降压 当锅内冷空气排净时,即可关闭排气阀,压力开始上升.当压力上升至所需压力时,控制电压以维持恒温,并开始计算灭菌时间,待时间达到要求(一般培养基和器皿灭菌控制在121℃,20min)后,停止加热,待压力降至接近“0”时,打开放气阀.注意不能过早过急地排气,否则会由于瓶内压力下降的速度比锅内慢而造成瓶内液体冲出容器之外. 灭菌后的培养基空白培养 灭菌后的培养基放于37℃培养箱中培养,经24h培养无菌生长,可保存备用;斜面培养基取出后,立即摆成斜面后空白培养;半固体的培养基垂直放置凝成半固体深层琼脂后,空白培养.
发酵基质发酵时选择可靠的发酵剂就行,华夏康源基质营养土发酵剂~发酵时掌握以下要点即可:1.物料的水分务必控制在60%-65%;2.做发酵堆一般要1.5米高,宽2米,总体积不低于3立方;3.发酵处理开始后,约一周时间温度可升至60度,需要翻动一次,累计2-3次就可以发酵完成;4.发酵过程中要视具体情况适当补水。...什么是培养基?简述选用和设计培养基的原则和方法?_百度作业帮
什么是培养基?简述选用和设计培养基的原则和方法?
什么是培养基?简述选用和设计培养基的原则和方法?
培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等.有的培养基还含有抗菌素和色素,用于单种微生物培养和鉴定.(一)四个原则
1.目的明确在设计新培养基前,首先要明确配制该培养基的目的,例如,要培养何菌?获何产物?用于实验室作科学研究还是用于大规模的发酵生产?作生产中的“种子”,还是用于发酵?等等. 2.营养协调 3.物理化学条件适宜 4.经济节约(二)四种方法
1.生态模拟 在自然条件下,凡有某微生物大量生长繁殖的环境,则可认为该处一定具备该微生物生长繁殖所必需的营养和其他条件.因此,就可以模拟该天然基质或直接取用该天然基质(经过灭菌)来培养相应的微生物.在实践中,的确可以利用生态模拟的办法来配制各类“初级的”天然培养基.例如,可用肉汤、鱼汁来培养多种细菌;用水果汁来培养各种酵母菌;用润湿的麸皮、米糠来培养多种霉菌;用米饭或面包来培养根霉;用肥土来培养放线菌;以及用玉米芯来培养脉孢菌(Neurosporaspp.),等等.
2.查阅文献 一个科学工作者决不能事事都依靠直接经验.多查阅、分析和利用一切文献资料上的对自己直接或间接有关的信息,对设计有自己特色的培养基配方有着重要的参考价值.
3.精心设计 在设计、试验新配方时,常常要进行各项因素的比较或反复试验,因此,工作量是很大的.为了提高工作效率,应努力借助优选法或正交试验设计法等行之有效的数学工具.
4.试验比较 要设计一种优化的培养基,在上述三个方法的基础上,最终还得通过实际试验和比较来加以确定.试验的规模一般都遵循由定性到定量、由小而大地逐步扩大的原则.例如,可先在培养皿上作生长谱试验(auxanographicmethod),然后进行摇瓶培养试验,再进行台式发酵罐试验,最后才扩大到试验型发酵罐和生产型发酵罐的规模.
生长谱试验的基本操作是这样的:如果我们要试的是某一微生物的碳源,则先准备一个不加碳源的琼脂培养基,待融化并冷却至45℃左右时,混入供试菌悬液,摇匀后倒成琼脂平板,俟其凝固后,将待试碳源一一用小镊子夹取少许并整齐地放在平板上.经温箱培养适当时间后,凡在某碳源周围出现该菌的“生长圈”者,即为它可利用的碳源.用同样原理也可寻找合适氮源和生长因子.配制培养基的原则_百度文库
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配制培养基的原则
所​有​微​生​物​生​长​繁​殖​均​需​要​培​养​基​含​有​碳​源​、​氮​源​、​无​机​盐​、​生​长​因​子​、​水​及​能​源​,​但​由​于​微​生​物​营​养​类​型​复​杂​,​不​同​微​生​物​对​营​养​物​质​的​需​求​是​不​一​样​的​,​因​此​首​先​要​根​据​不​同​微​生​物​的​营​养​需​求​配​制​针​对​性​强​的​培​养​基​。
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