肺吸虫的囊蚴及后尾蚴提纯法--《温州医学院学报》1982年02期
肺吸虫的囊蚴及后尾蚴提纯法
【摘要】：正 在进行肺吸虫病实验研究时,常需用大量纯净囊蚴及后尾蚴,如肺吸虫异常感染方式的研究、囊蚴或后尾蚴抗原的研究等。此等研究工作的前提是需要较纯净的囊蚴或后尾蚴。目前常用的囊蚴提纯法,是将石蟹捣碎成糊状通过大约30目、40目的铜丝筛后,在放大镜下用滴管从滤液沉渣中逐个吸取囊蚴,效率较低。并且由于沉渣中含有许多碎蟹壳与蟹肉,故在吸取
【作者单位】：
【关键词】：
【正文快照】：
在进行肺吸虫病实验研究时,几常需用大量纯净奥勤及后尾拗,如肺吸虫异常感染方式的研究、裹勤:戈后尾坳抗原的研究等。此等研究工作的前提是需要较纯净的键坳或后尾勤。目.讨常用的健趁勤提一纯法,是一冷石蟹捣碎成糊伏通过大约30目、40目的铜丝筛后,在放大镜下用滴管从滤液
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中药材中酚酸类与黄酮类抗乳腺癌活性成分群的筛选及测定
目的：　　本论文在前期基础上进一步拓展、研究了中空纤维细胞捕获-高效液相色谱法（Hollow fiber cell fishing with high performance liquid chromatography, HFCF-HPLC）在中药活性筛选中的应用，并提出和建立了两相/三相中空纤维液相协同微萃取（ Two-phase/three-phase hollow fiber liquid phase synergistic microextraction,2p/3p-HF-LPSME）法，对筛选出的已知活性成分进行定量测定。　　方法：　　将种植MCF-7细胞的中空纤维插入中药金银花、蒲公英和杜仲水煎液中，对酚酸类和黄酮类化合物进行同时筛选、捕获，通过与对照品的保留时间比对，确定了部分被筛选出来的活性化合物的结构；另外，我们应用从MCF-7活细胞中分离得到的细胞膜和细胞器以及与癌细胞相关的受体（雌激素受体，表皮生长因子受体和环氧酶-2），初步研究酚酸类和黄酮类化合物在 MCF-7细胞上的结合部位和结合位点，比较并讨论了活性化合物与这些靶点的结合能力。在基本明确金银花、蒲公英、杜仲活性成分和作用特点的基础上，我们将内腔载有水溶性和脂溶性接受相的不同中空纤维置于同一中药提取液中，对酚酸类和黄酮类活性成分分别进行萃取和浓缩。萃取结束后，将2支纤维内的接受相用注射器推出转移到同一Ep管中，并用适量甲醇稀释，混合均匀后，进行HPLC分析。　　结果：　　对HFCF-HPLC，详细考察了种植人乳腺癌细胞MCF-7的中空纤维表面特性，种植细胞的存活率，筛选活性成分后细胞的死亡率；纤维活性中心与目标分析物间的非特异性结合；阳性和阴性对照试验，HFCF-HPLC法的重现性和可靠性；重新定义和完善了活性化合物的细胞/靶点捕获因子。对2p/3p-HF-LPSME，优化了萃取剂种类，样品相和接受相的pH，萃取时间，搅拌速率，样品溶液中盐浓度和体积等影响2p/3p-HF-LPSME萃取结果的主要因素；考察了2p/3p-HF-LPSME结合HPLC分析测定方法的方法学参数，该法对酚酸类和黄酮类活性成分的富集倍数的范围为9-171、线性范围为绿原酸：0.μg mL-1；咖啡酸：0.μg mL-1；对羟基桂皮酸：0.μg mL-1；阿魏酸：0.μg mL-1；芦丁：0.μg mL-1；木犀草苷：0.μg mL-1；槲皮素：0.μg mL-1；（r=0.6），精密度为2.3％-10.4%，回收率为90.0%-106.3%，检测限为0.3-4.0 ng mL-1。　　结论：　　HFCF-HPLC是一种简单、快速、有效的筛选中药生物活性成分、研究活性成分作用靶点的方法；2p/3p-HF-LPSME结合HPLC是一种高浓缩、高灵敏的低丰度活性成分测定技术。HFCF-HPLC结合2p/3p-HF-LPSME已成功应用于金银花、蒲公英和杜仲中微量酚酸和黄酮类活性成分筛选、识别和测定。因此， HFCF-HPLC与2p/3p-HF-LPSME-HPLC或其他现代定量分析方法结合为我们分析中药多成分、多靶点的作用特点，阐释基于细胞的中药药效物质基础，对活性成分进行质量控制提供了新的思路与方法。
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万方数据电子出版社降血糖中药筛选及黄精降血糖活性成分的研究--《西南大学》2010年硕士论文
降血糖中药筛选及黄精降血糖活性成分的研究
【摘要】：
糖尿病是以持续高血糖为基本的生化特征的一种综合病症,主要是因为体内得胰岛素相对或绝对不足所引起的糖代谢紊乱而致。西药治疗糖尿病疗效值得肯定,但各种西药降糖药物都有一定得消化道反应、肝、肾损害等副作用,且不能有效控制并发症。而中医治疗糖尿病,疗效稳定,作用温和,不良反应少,能有效防治并发症。
对46味药食两用的降糖中药进行筛选,筛选结果表明,黄精具有良好的降血糖效果。通过对黄精活性部位的分离,筛选出具有降血糖活性的部位,发现黄精中起降糖作用的是黄精多糖。进一步研究多糖组分与多糖抑制a-葡萄糖苷酶活性之间的关系,对开发降血糖中药具有重要的现实意义。
本研究的主要内容有：(1)改进传统的a-葡萄糖苷酶抑制剂活性检测方法；(2)对46味中药进行抑制a-葡萄糖苷酶活力的筛选；(3)黄精活性部位提取分离及成分鉴定,研究黄精不同分子量级的多糖组分对a-葡萄糖苷酶的抑制作用,探究黄精多糖分子量大小、单糖组成、单糖比例和黄精对a-葡萄糖苷酶抑制作用之间的联系；(4)应用高血糖小鼠实验模型验证所分离活性部位的降血糖效果。
通过以上实验,得到如下研究结果：
(1)a-葡萄糖苷酶抑制剂活性检测方法的改进。本法具有简便,快捷,精密度好等特点。与传统的方法相比筛选结果更加可靠。
(2)通过对46味药食两用中药的筛选,获得了9味对a-葡萄糖苷酶抑制效果好的中药。本研究选取黄精为研究对象,对其进行进一步的研究。
(3)实验结果表明,黄精多糖对a-葡萄糖苷酶具有很强的抑制作用。进一步的分析发现,单一葡萄糖形成的多糖抑制a-葡萄糖苷酶活性最强,降糖活性也最强。
(4)高血糖小鼠实验证明,与模型组相比,黄精多糖具有较好的降血糖效果。
【关键词】：
【学位授予单位】：西南大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2010【分类号】：R285【目录】：
ABSTRACT7-9
第一章 文献综述9-20
1.1 研究背景9-10
1.2 糖尿病与和a-葡萄糖苷酶的关系及其降血糖药物研究现状10-12
1.2.1 糖尿病与a-葡萄糖苷酶的关系10
1.2.2 降血糖药物研究现状10-12
1.3 黄精研究进展12-20
1.3.1 概述12-14
1.3.2 黄精的化学成分研究进展14-16
1.3.3 黄精的药理活性16-18
1.3.4 黄精多糖的提取纯化分离、鉴定及含量测定18-20
第二章 引言20-21
2.1 研究目的和意义20
2.2 主要研究内容20-21
第三章 a-葡萄糖苷酶的提取及其抑制剂活性检测方法的改进21-26
3.1 实验材料21
3.1.1 主要实验试剂21
3.1.2 主要仪器设备21
3.2 实验方法21-23
3.2.1 溶液的配制21-22
3.2.2 a-葡萄糖苷酶的制备22
3.2.3 实验原理22
3.2.4 酶反应条件优化22-23
3.3 结果与讨论23-24
3.3.1 实验用酶量的确定23
3.3.2 底物PNPG用量的确定23-24
3.3.3 酶促反应时间的确定24
3.3.4 葡萄糖苷酶反应体系的建立24
3.4 小节24-26
第四章 抑制a-葡萄糖苷酶活性中药的筛选26-29
4.1 实验材料26-27
4.1.1 主要实验材料和试剂26
4.1.2 主要实验仪器26-27
4.2 实验方法27
4.2.1 溶液的配置27
4.2.2 中药抑制剂的制备27
4.2.3 实验条件27
4.3 实验结果27-28
4.4 小节28-29
第五章 黄精多糖的提取及其对a-葡萄糖苷酶抑制作用29-35
5.1 实验材料29-30
5.1.1 主要实验材料和试剂29
5.1.2 主要实验仪器29-30
5.2 实验方法30-31
5.2.1 黄精多糖的提取30
5.2.2 黄精多糖的分离纯化30
5.2.3 黄精多糖的鉴定30-31
5.2.4 多糖分段测含量31
5.2.5 黄精多糖中单糖的组成分析31
5.2.6 a-葡萄糖苷酶法测定抑制活力31
5.3 实验结果31-33
5.3.1 黄精多糖对a-葡萄糖苷酶影响研究结果31-32
5.3.2 多糖鉴定32-33
5.4 小节33-35
第六章 黄精多糖对高血糖小鼠降糖实验35-37
6.1 实验材料35
6.1.1 主要实验材料及试剂35
6.1.2 主要实验仪器35
6.2 实验方法35-36
6.2.1 高血糖模型的建立35
6.2.2 血样的制备35
6.2.3 数据的统计分析35-36
6.3 实验结果36
6.4 小节36-37
第七章 总结37-39
7.1 a-葡萄糖苷酶抑制剂活性检测方法的改进37
7.2 抑制a-葡萄糖苷酶中药的筛选37
7.3 黄精多糖的提取及其对a-葡萄糖苷酶抑制作用37
7.4 黄精多糖对小鼠血糖水平的影响37-39
参考文献39-43
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促进子宫收缩中药的筛选与组方试验
动物产后子宫的复旧与子宫腔净化的效果，主要由子宫的收缩能力决定；促进子宫收缩，是临床上治疗子宫内膜炎的重要措施。本试验通过观测单味中药及中药方剂对离体小鼠子宫收缩机能的影响，以筛选具有促进子宫收缩作用的中药，为临床上治疗子宫内膜炎的药物选择提供理论依据。
健康未孕小鼠，皮下注射己烯雌酚1mg/kg，48h后剖腹取出小鼠子宫。纵向切开子宫角，取长0.8cm，宽0.2cm的子宫肌条，置于盛有38.0+0.5℃台氏液中。子宫肌条的一端用金属钩固定于浴槽内，另一端经丝线与张力换能器相连。以益母草和新斯的明作为阳性对照组，利用MedLab生物信号采集系统观测实验药物对子宫平滑肌收缩活动的影响。结果表明，枳实、陈皮对小鼠离体子宫平滑肌呈明显抑制作用，并存在剂量．效应关系；干姜对小鼠离体子宫平滑肌呈抑制作用；厚朴对小鼠离体子宫平滑肌运动呈现低浓度兴奋，高浓度抑制的现象；槟榔能兴奋小鼠离体子宫平滑肌，黄连对小鼠离体子宫平滑肌运动的影响是先呈兴奋作用，后呈抑制作用；薄荷对小鼠离体子宫平滑肌运动呈抑制作用。
在观测单方药对子宫运动影响的基础上，将前述7种中草药进行组方，然后利用Medlab生物信号采集处理系统测定各组方药对动物离体子宫运动的影响。结果表明，厚朴、槟榔合煎剂，厚朴、黄连合煎剂，槟榔、黄连合煎剂，厚朴、槟榔、黄连合煎剂，薄荷、厚朴合煎剂，薄荷、槟榔合煎剂，薄荷、黄连合煎剂，薄荷、黄连、厚朴合煎剂，薄荷、槟榔、黄连合煎剂，薄荷、槟榔、厚朴合煎剂，薄荷、黄连、厚朴、槟榔合煎剂，干姜、槟榔合煎剂，干姜、黄连合煎剂，干姜、槟榔、黄连合煎剂对未孕小鼠离体子宫平滑肌呈明显的兴奋作用。
利多卡因和普鲁卡因对小鼠离体子宫平滑肌收缩均呈轻度的抑制作用，进一步试验发现利多卡因与枳实、陈皮、薄荷、干姜组合对小鼠离体子宫平滑肌收缩呈明显的抑制作用；利多卡因与厚朴组合对小鼠离体子宫平滑肌收缩呈轻度的抑制作用，作用不明显；利多卡因与槟榔、厚朴组合对小鼠离体子宫平滑肌收缩呈兴奋作用，兴奋作用比单方药弱。综上所述，利多卡因能进一步轻度抑制单方药对小鼠离体子宫平滑肌收缩的影响。
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