血细胞涂片可用的bouin固定液液有?

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-03-31 14:06 标签： 血细胞涂片
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第八章细胞病理学基本检验.doc38页
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第八章 细胞病理学基本检验
通过本章学习，你将能回答关于“细胞病理学基本检验”的下列问题：
1．细胞病理学标本采集和处理方法？
2．细胞病理学涂片固定和染色方法？
3．细胞病理学诊断原则和基本步骤？
4．损伤细胞的细胞形态学改变？
5．良恶性细胞的形态学区别？
6．恶性细胞的细胞病理学诊断要点？
7．女性生殖道正常上皮细胞的形态学特点？
8．女性生殖道非炎症和反应变化的细胞形态学特点？
9．女性生殖道恶性肿瘤的细胞病理学特点？
10．正常呼吸道细胞的形态学特点？
11．呼吸道良性病变细胞的形态学特点？
12．各类型肺癌细胞的形态学特点？
13．良性病变积液中常见细胞的形态学？
14．恶性病变积液细胞的形态学特点？
15．良性病变淋巴结肿大的细胞学涂片特点？
16．恶性淋巴瘤细胞的形态学特点？
17．常见淋巴结转移性肿瘤的形态学特点？ 细胞学是一门研究细胞结构和功能的科学。细胞病理学（cytopathology）是检验医学的一个分支，通过检查细胞的形态学特点，进行健康和疾病的筛查、诊断和研究，即对无症状个体进行癌前病变的筛检，对有症状或有体征患者进行诊断和鉴别诊断。根据标本采集方法不同，分为脱落细胞学（exfoliative cytology）和细针吸取细胞学（fine-needle aspiration cytology）。
第一节 细胞病理学基本检验技术
细胞病理学诊断多基于光学显微镜观察，在作出诊断前，不仅应仔细考虑相关的组织学变化，而且应考虑标本的质量。所获细胞能否代表病变靶组织或器官的细胞群体，是细胞病理学诊断结果准确和可靠的前提。
一、标本采集
（一）脱落细胞标本
细胞标本脱落自上皮表面，包括：①咳出：如痰液。②排泄、导尿或膀胱镜：如尿液。
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&& 脱落细胞标本采集和涂片制作方法
脱落细胞标本采集和涂片制作方法
正确地是诊断的基础和关键之一，故要准确地选择部位，尽可能在病变区直接采集。采集的标本必须保持新鲜，尽快制得，以免细胞或腐败。尽可能避免、粘液等混入标本内，采集方法应简便，操作轻柔，避免病人痛苦和引起严重及促进扩散，下面介绐几种常用的标本采集方法。
（一）直视采集法
外阴、、窿、宫颈、、、、部、及等部位，可以直接用刮片刮取、吸管吸取、刷洗、、胃、、和肺内则使用内镜在病灶处直接刷取细胞制片。
（二）自然分泌液的采集法
1．痰液检查：痰兴高采烈为支气管等的分泌物，对和其它细胞学诊断具有重要价值。
2．尿液涂片检查：收集尿液中脱落的泌尿道，作泌尿道肿瘤和某些疾病的细胞学诊断。
3．溢涂片检查：用于和细胞学检查。
4．液涂片检查：采用法取得分泌物，作前列腺细胞学诊断。
（三）灌洗洗
向空腔器官或腹腔、（剖腹探查时）灌注一定量冲洗，使其细胞成分脱落于液体中，收集灌洗液离心制片，作细胞学检查。
（四）磨擦法
利用磨擦工具在病变部位磨擦，将擦取物直接涂片。常用磨擦工具有海棉磨擦器、线网套、气囊等。可分别用于鼻咽部、食管和胃部病灶的取材。
（五）针穿抽吸法
当有、腹腔、及时，可用针穿抽吸部分积液作细胞学检查。此外某些深部组织器官，如、、软组织、肝等亦可作细针吸取部分细胞进行涂片诊断。
（一）涂片前准备工作及涂片方法
1．涂片前准备工作
（1）保证标本新鲜，取材后尽快制片。
（2）涂操作要轻巧，避免挤压以防止损伤细胞。涂片要均匀，厚薄要适度，太厚细胞堆叠，太薄细胞过少，均影响诊断。
（3）玻片要清洁无油渍，先用洗涤液浸泡冲洗，再用75%浸泡。
（4）含的标本可直接涂片，缺乏蛋白质的标本，涂片前先在玻片上涂薄层剂，以防止时细胞脱落，常用粘附剂为，由等量生鸡蛋白和甘油混合而成。
（5）每位患者的标本至少涂两张玻片，以避免漏诊。涂片后立即在玻片一端标上编号。
2．涂片制备方法
（1）推片法：用于稀薄的标本，如血液，胸、等。取离心后标本一小滴滴在玻片偏右侧端，用推片用30度夹角将玻片上检液轻轻向左推。
（2）涂抹法：适用于稍稠的检液，如鼻咽部标本。用竹在玻片上涂布，由玻片中心经顺时针方向外转圈淫抹；或从玻片一端开始平行涂抹，涂抹要均匀，不宜重复。
（3）压拉涂片法：将标本夹于横竖交叉的两张玻片之间，然后移动两张玻片，使之重叠，再边压边拉，获得两张涂片。该法适用于较粘稠标本，如痰液。
（4）吸管推片法：用吸和将标本滴在玻片一端，然后将前端平行置于标本滴上，平行向另一端均速移动滴管即可推出均匀薄膜。此法亦适用于胸、腹水标本。
（5）喷射法：用配细针头的将标本从左至右反复均匀地喷射在玻片上，此法适用于各种吸取的液体标本。
（6）印片法：将切取的病变组织用手术切开，立即将切面平放在玻片上，轻轻按印。此方法为活体组织检查的辅助方法。
（二）涂片的固定
固定（fication）的目的是保持细胞自然形态，防止细胞自溶和所致的腐败；固定液能沉淀和凝固细胞内蛋白质和破下细胞内酶，使细胞不但保持自然形态，而且结构清晰，易于着色。因此标本愈新鲜，固定愈及时，细胞结构愈清晰，染色效果愈好。
1．固定液：细胞学检查常用的固定液有下列三种：第一种酒清固定液：该固定液渗透明性较强，固定效果好适用于于一般细胞学常规染色；二种是固定液：又称卡诺氏固定液。其优点同上；第三种95%酒精固定液：适用于大规模防癌普查。制备简单。但渗透作用稍差。
2．固定方法
（1）带湿固定：涂片后未待标本干燥即行固定的方法称带湿因定。此法因定细胞结构清楚，染色新鲜。适用于巴氏或HE染色。痰液、及食管拉网涂片等常任常用此方法。
（2）干燥因定：涂片后未待其自然干燥，再行固定。适用于稀薄标本如尿液、胃冲洗液等，也适用于于瑞特染色和姬姆萨染色。
3．固定时间：一般为15-30min。含粘液较多标本，如痰液、阴道分泌物、食管拉网等因定时间在适当延长；尿液、胸、腹水等涂片不含粘液，固定时间可酌情缩短。
（三）涂片的染色
1．染色的目的和原理：染色的日的是借助于一种或多种染料，使组织和细胞内结构分别着不同的染色，这样在下能清楚地观察细胞内部结构，作出正确判断。
组织细胞染色原理至今尚无满意的解释，可能是作用，也可能是作用，或者是两者综合作用的结　果。
染色的物理作用是利用现象，渗透、吸收和吸附作用，使染料的色素颗粒牢固地进入组织细胞，并使其显色。
染色的化学作用是渗入组织细胞的染料与其相应的物质起化学反应，产生有色的。
各染料都具有两种性质，即产生颜色；征收被组织形成亲和力。这两种性质主要由发因和助色基因所产生的。
发色基团：苯的具有可见光区吸收带。这些衍生物显不的吸收带与其价键的不稳定性有关，如对为无色，当其氧化后失去两个氢原子，它的或则变为有黄色的对醌，这种产生颜色的环称为发色基团。若一种化合物含有几个环，只要其中有一个醌式环就会发出颜色，称此发色基团为色原（chromogen）.
助色基团：是一种能使化合物以生的辅助原子团（酸碱性基团）。它能使染色的色泽进一步加深，并使其与被染色组织具有亲和力。
助色基团的性质决定染料是酸性碱性。碱性染料具有碱性助色基团，在溶媒中产生的带色部分为带正电荷的阳离子，吻与组织细胞内带负电荷的物质结合而显色。如内的主要化学成分脱氧糖易被素染成紫蓝色，称。酸性染料具有酸性用力色基团，在溶酶中产生带色部分为阴离子，易与组织细胞内带正电荷部分结合而显色，此性质被称为嗜酸性，如内订成分为蛋白质，易与或橘黄结合呈红色或橘黄色。
2．常用染色方法：临床日常工作中较为常用的染色方法有下列3种：
（1）巴氏染色法：本法染色特点是细胞具有多色性颜色，色彩鲜艳多彩。涂片染色的透明性好，颗粒分明，结构清晰，如过度角化细胞胞质呈橘黄色；角化细胞显粉红色；而角化前细胞显浅绿色或浅蓝色，适用于染色或观察阴道涂片中水平对上皮细胞的影响。此方法的缺点是染色程序比较复杂。
（2）—伊红（hemotoxylin eosin,HE）染色法：该方法染色透明度好，核与胞质对比鲜明。染色步骤简便，效果稳定。适用于痰液涂片，觖质核呈紫蓝色，胞质淡玫瑰红色，呈淡朱红色。
（3）—吉姆萨染色法（wrightgiemsa atain）；本方法多用于血液，细胞学检查。胞质内颗粒与核安危质结构显示较清晰。操作简便。
出自A+医学百科 “基础检验学/脱落细胞标本采集和涂片制作方法”条目
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