南通通州区金沙镇金沙金丽，父亲好像做兽医妈妈做医生的

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国营北京市北郊农场兽医院
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国营北京市北郊农场兽医院简介:畜禽疾病医治
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当前位置: &日本血吸虫C1qBP基因的克隆表达及补体调节功能研究--《中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会论文集》2015年
日本血吸虫C1qBP基因的克隆表达及补体调节功能研究
【摘要】：血吸虫对终末宿主的感染及寄生的过程与其逃避补体杀伤作用有关,研究其分子机制对探索血吸虫与宿主相互作用有重要意义。血吸虫C1qBP蛋白可能具有与宿主C1q补体成分结合的能力,推测其在血吸虫逃避补体杀伤作用中发挥重要作用。据此利用PCR技术扩增了日本血吸虫C1qBP基因片段,测序分析表明该基因ORF为729bp。分析表明,sjC1BP基因编码242个氨基酸,理论分子量为27.58kD,理论等电点为4.728;利用Signa1P预测显示sjC1BP不存在信号肽,TMHMM预测显示SiC1BP不存在跨膜区;二级结构分析表明,该多肽以无规则卷曲为主,SMART软件分析含有结构域为Pfam-MAM33,可能为补体C1q结合位点。利用EcoRI、Xho I限制性内切酶将该片段亚克隆至pET-32a(+)构建重组表达质粒pET-32a(+)-C1qBP。重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG诱导后获得表达,表达量在诱导后5h表达量较高。SDS-PAGE分析结果表明重组蛋白以包涵体形式存在,但可溶解于8 mol/L尿素溶液中。在变性条件下用His—Bind亲和层析方法可纯化获得重组蛋白,分子量约为50kDa。将纯化的重组蛋白逐级用含不同浓度梯度尿素/PBS溶液透析,最后对PBS透析,可获得复性重组蛋白。应用重组蛋白rsjC1qBP免疫BALB/c小鼠,可诱导较高水平的特异性IgG抗体,Western-blot分析表明rsjC1qBP具有较好的免疫原性。结果为评估C1qBP分子作为抗血吸虫疫苗候选分子的潜力及研究sjC1qBP的生物学功能提供了基础。
【作者单位】：
【分类号】：S852.7
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