s1锌指核酸酶技术实验中,edta需要加入多少

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-06-21 06:12 标签： 微球菌核酸酶
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重组核酸酶的制备及应用,核酸酶..
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重组核酸酶的制备及应用
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3秒自动关闭窗口s1核酸酶制图法是什么样的方法
s1核酸酶制图法是什么样的方法
09-12-08 &匿名提问
应用聚合酶链反应（PCR）技术测定临床标本中的病原体核酸成分，是一种高度敏感，且最为直接的检测手段。由于临床标本中含有蛋白质、脂类等物质，可干扰PCR反应，故在做PCR反应前必须进行核酸提取。经典的核酸提取方法通常是加去污剂（SDS等）裂解细胞，经蛋白酶处理、有机溶剂提取及乙醇沉淀等步骤。由于样本的处理及保存对DNA和RNA（尤其是RNA）的影响较大，因此在核酸测定时标本的处理及适当保存对测定结果的准确有效非常重要。临床常见的标本有血清（浆）、全血、分泌物、棉拭子、脓液、体液、新鲜组织、石蜡切片等，这些临床标本的处理和保存方法各有不同。一、临床标本的处理1、血清（浆）标本  一些病原体，如乙肝病毒（HBV）、丙肝病毒（HCV）、人类免疫缺陷病毒（HIV）等的PCR检测常采用血清或血浆标本。HBV：标本通常由医护人员采集，应注意避免溶血，如为血浆标本注意抗凝剂的选 择，一般用EDTA-Na2或枸橼酸纳，不可使用肝素。标本为全血时，及时分离出血浆，提取病毒DNA进行检测。HCV：检测RNA病毒。由于RNA极易降解，标本的制备和保存方式往往可以影响测定结果。若用血浆标本，应使用EDTA抗凝。严禁使用肝素，因其对PCR扩增有抑制作用, 且无法在核酸提取过程中去除。抗凝后6小时内分离血浆。如用血清标本，则应尽快（2小时内）分离血清 进行检测，或-20oC保存。
请登录后再发表评论!EDTA配制和标定实验中加入氨缓冲液和NaOH各起什么作用?
酱油哥¤林龙40
在不同ph下,EDTA的络合能力是不同的,加入氨缓冲液,为了增加络合能力,也为了避免其它金属离子的干扰,加NaOH是调节ph,有的溶液酸度强,就先加2滴NaOH再加氨缓冲液.
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扫描下载二维码　　S1核酸酶S1核酸酶来源于稻霉(Aspergillusoryzae)，是一种高度单链特异的核酸内切酶，在最适的酶催反应条件下，降解单链DNA或RNA，产生带5，-磷酸的单核苷酸或寡核苷酸。对双链DNA、双链RNA和DNA-RNA杂交体相对不敏感。通常水解单链DNA的速率要比水解双链DNA快75000倍。这种酶需要低水平的zn2+的激活，最适pH范围为4．0～4．3。一些螯合剂(如EDTA和柠檬酸等)能强烈地抑制s1核酸酶活性，此外和0．6％左右的SDS溶液也可以抑制它的活性，但它对尿素以及甲酰胺等试剂则是稳定的。S1核酸酶的单链水解功能可以作用于双链核酸分子的单链区，并从单链部位切断核酸分子，而且这种单链区可以小到只有一个碱基对的程度。由于具备这种功能，使S1核酸酶在分析核酸杂交分子(RNA-DNA)的结构、给RNA分子定位、测定真核基因中间隔子序列的位置、去除DNA片段中突出的单链尾，以及打开在双链cDNA合成期间形成的。
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