12小时动168次算正常人24小时血压波动吗?

综合工时制按174小时算正常班正确吗? - 相关问题 - 110网法律咨询
我公司是综合工时制,但是每月都是174小时以外的算加班合理吗?比如这个月一共上了260个小时 扣去174
也就是说加班时间是86个小时,这个合理吗?麻烦各位了!
还是平均每月不超过总工时167和加班36小时就可持续加班?综合工时制也必须至少每周按排休息一次,不得强制加班吗?
劳动法规定每周至少休息一天,如果不超过加班时间,是否可以不休息?
请回答两个问题,说清楚,谢谢!
你好,今天同事跟我说每月总工时应减167小时,我们是综合工时制,请问我们上班12小时转班,上班几年了都是每月总工时减去174合理吗,请问可以找公司补偿吗?
综合计算工时员工全年工时比正常班工时少,是否存在欠单位工时的说法?
电子厂实施综合工时制合法吗?他们要求1个月不管礼拜6礼拜天都算正常工时上够166.64小时以后才算1.5倍,1.5倍上53.36小时以后才算双倍,而且每个月控制我们上24天班根本就没有双倍工时,
我是按月综合工时制计算的。从每月26到25号。是做1休息1。上班12小时。
我所在公司为节省成本预推行12小时综合工时制(上4休2,每天有1小时算吃饭休息时间,多出工作时间结算加班费),原先实行8小时标准工时制。我是三班一线员工,公司目前让我签署同意意向书,今后还需要重新签署综合工时制合同。我是8小时标准工时制长期合同,我对重新签署综合工时制合同有顾虑,暂时还没有签字。公司现在的政策是不同意的员工待岗,有8小时岗位时让你竞聘,竞聘不成功就让我们自动辞职。请问这是否符合劳动法规定?如果不参加竞聘,直接要求公司安排8...
综合工时制按月计算的,安排上班时间不足月工作时间167小时,应支付不低于月最低工资标准吗?
我司是不定时工作制,1.当员工在当月工作时间超出全日制工作时间,将把所超出的工作时间作为超班费发放,2.当员工在当月工作时间未超出全日制工作时间的、企业也按你已经上足全日制工作时间进行发放包月工资、但下月超班时将你上月不足的时间扣除、如扣除不够的将累计到再下一个月、一直将你差公司的工时扣回为止,哪怕改名员工离职也将一次性要扣回所欠公时扣回。
以上公司无任何文件,只是讲这时综合工时计算法!请问企业这样做法是否正确。还有每班次工作12小时,但发放是11....
1》我与公司签定的是经过劳动局审批的综合计算工时工作制,但现因公司加班超时时间太长,(已超过劳动法规定综合计算工时制每月不得超过的36小时)基本每月都有120多小时的加班,与其公司协调减少加班时间,公司不与理会。故我现在能否以加班时间太长,身体不适,依此理由单方面解除劳动合同并要求经济补偿呢?
2》如果可以单方面解除劳动合同并要求经济补偿请详细给我指出劳动法中的法律条文规定。一天工作12小时的聪明方法
时间: 10:05:08 作者:Laura Vanderkam
  最近每周40小时工作制引起了越来越多的关注。Bob Rosner的《老板生存指南》一书提倡以更少工作来提高效能。Sara Robinson最近在AlterNet网发表关于每周40小时工作制的论文,被人们广泛转发阅读。关于利润递减,我们都有自己的看法。从"研究我自己的时间日志"开始,我知道我的对策是每周工作45 - 50小时,这样如果算上年假、半天假之类的,每年的平均数大概也是每周工作40小时。  但是,要满足40小时的平均值--或者因为个人投入一项工作并且享受这项工作--有时你需要某天工作更长时间。有没有一种办法,让你在一天工作12小时后,其余的时间仍然有效能?还有另外一个问题,有没有一种办法,让你在一天工作12小时时,仍然享有个人生活?  我想答案是肯定的。你只需要使用每一个长跑选手都知道的小技巧,许多人在成为父母时也都发现的小技巧:分割和换挡。  想要提高长跑里程的人发现有两种方法,可以让他们每天跑12英里。你可以一次跑完12英里,赶快把这件事做完。或者你也可以分成两段,比如说一次跑9英里,下次跑3英里。这需要的总时间更多(开始任何活动都需要付出交易成本--时间和精力),但是人们在心理上更容易面对两段较短的跑步,而不是一次长跑。实际上,在跑完9英里后,再跑3英里几乎算不上什么。  同样地,当许多人成为父母时,他们突然意识到他们正常的工作日结束了。你必须在某个时间把孩子送到日间托儿所,或者保姆需要离开,或者如果你不能在配偶烦躁的时候回家帮助看孩子,他/她会威胁要离开你。所以,即使你手中的事情都没干完,你必须停下。但随后,在你的孩子上床睡觉之后,你开动电脑,继续干你的工作。  后一种情况更像在描述我的生活。我的孩子们在晚上6点之前接受儿童托管,出于对保姆的尊重,还有要看到我的孩子的想望,这是我停止工作的时间。我从没在晚上6点前做完工作。但我已准备好要改变生活节奏。所以我陪着孩子玩,吃饭,放松,然后带他们上床睡觉。到晚上9点,房子才安静下来。这是我回到家里的办公室,带着更新的精力再次转换的时刻。我常常在晚上10:30或11点精疲力竭地干完工作。我知道,如果我一直工作到晚上8点,我将会很难做完更多的工作。但在家庭和个人生活中投入三个小时之后,在这些深夜,我可以写作最多的工作。  坏处是什么?我不看电视。但是如果你不把失去电视时间看做巨大的缺点,那么或许分割和切换工作时间,对你也会有效。  你在哪里找到额外的工作时间?
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Laura Vanderkam
个人介绍:
身在纽约市的一位记者,她是《168小时:你拥有比你想象的更多》的栏目作者,还被芝加哥论坛报评价为“内容有趣”,168小时栏目关注美国人现在以及过去都如何度过他们的时间,以及我们怎样才能更好地运用时间。劳拉也是《卖力找工作:不需交钱就能建立一份有价值的事业》的作者,该书被纽约邮报评选为2007年4本著名的职业指导书之一。
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开发用于脑脊液中多种β淀粉样肽的SPE/LC/MS/MS定量测定方法
来源:沃特世科技(上海)有限公司(Waters)
阅读数:209
&淀粉样肽(A&)的不溶性聚集物在脑中沉积/形成被看作为早老性痴呆病(AD)的一个关键事件。治疗策略集中于用以减少&淀粉样肽生成或提高其清除水平的小分子抑制剂或免疫疗法。因此,找到能对脑脊液中的淀粉样肽进行高灵敏且稳定可靠的定量分析方法以确定其与AD关系对很多研究者来说至关重要。然而,对这些A&肽的分析极具挑战性,这不仅因为其在生物液体内的丰度相对偏低,而且也因为它们可能被其它蛋白质结合并具有形成低聚体的趋势。
这些肽的测定常规采用免疫测定法(因其选择性和灵敏度)或者通过冗长的免疫沉淀之后再进行SPE。免疫测定所需的方法开发时间比LC/MS/MS方法开发时间长;它们需要对多种A&肽进行多次测定,并且与LC/MS/MS相比其线性动态范围有限。免疫测定存在交叉反应性和非特异性结合,需要使用价格昂贵的抗体,并且样品/标本的富集依赖于抗体的选择性。免疫测定的劳动强度大,并且测定不准确和基质干扰也是常见的问题。因此,需要开发一种基于LC/MS/MS的高通量、选择性好的生物分析方法,使样品制备能够实现在存在高浓度干扰蛋白和肽的情况下回收得到pg/mL水平的淀粉样肽。
虽然开发免疫测定方法所需的时间在后期药物发展过程中是可接受的,但在较早的阶段中则几乎不切实际;这时,如能有一种可定量多种肽的高通量且可靠的方法则是众望所归。
本研究工作集中于开发用于淀粉样前体蛋白(APP)的1-38、1-40和1-42片段的LC、MS和选择性SPE样品制备方法,以支持临床前研究。使用单一、高通量方法用于多种A&肽的分析测定而无需耗时的免疫沉淀步骤,被成功开发并经过验证。特别是,A&类肽存在很多独特的分析挑战,其中包括非特异性结合、溶解性差、聚集和质谱灵敏度偏低。在方法开发各阶段所进行的步骤尽可能减小或消除了这些问题所带来的影响。
随着AD病情缓解策略的出现,对除了A& 38、40和42之外的多种可能与AD病征相关的A&进行定量分析可有助于提供关于此病及其发展过程的更多认识。本文所述的方法也有可能进行相应的修改,以使其适用于那些肽的定量分析。
&淀粉样1-38肽,分子量4132,pI 5.2
DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGG
&淀粉样1-40肽,分子量4330,pI 5.2
DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVV
&淀粉样1-42肽,分子量4516,pI 5.2
DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA
图1:&淀粉样肽1-38、1-40和1-42的氨基酸序列和pI数据&
UPLC&方法的条件
色谱柱:&& ACQUITY UPLC& BEH C18,300&A,2.1&150nm,1.7&m
流动相:&& A:0.3% NH4OH(按体积计算)的水溶液
&&&&&&&&&&&&&&&&&& B:90%乙腈,10%流动相A
梯度:&&&&&& 90% A保持1分钟,5.5分钟内降低至55% A并保持0.2分钟,然后返回至初始水平
流速:&&&&&& 0.2 mL/分钟
进样量:&& 10&L
温度:&&&&&& 50℃
系统:沃特世XevoTM TQ三重四极杆质谱仪,在ESI+MRM模式下运行
去溶剂化气体流速:800L/小时
源温度:120℃
去溶剂化温度:450℃
碰撞室压力:2.6&10(-3)毫巴
MRM跃迁态和条件:见表1
样品预处理
用5M盐酸胍以1:1的比例稀释200&L脑脊液(人脑脊液、猴脑脊液或加标人工脑脊液+5%大鼠血浆),并在室温下振摇45分钟。然后,用200&L 的4%H3PO4水溶液进一步稀释样品。
注意:对于加标样品而言,在加标后、用盐酸胍稀释前,可在室温下让样品平衡30分钟。
固相萃取(SPE)
基于&Elution 96孔型的Oasis& MCX&&&&&
预处理:200&L甲醇
平衡:200&L 4% H3PO4水溶液
上样:600&L预处理后的样品
清洗1:200&L 4% H3PO4水溶液
清洗2:10% ACN水溶液
洗脱:2&25&L 75:15:10 ACN:水:NH4OH浓溶液
稀释:25&L水
进样量:20&L
产物离子ID
锥孔电压(V)
碰撞能量(eV)
&淀粉样1-38肽
&淀粉样1-38肽的N15内标
&淀粉样1-40肽
&淀粉样1-40肽的N15内标
&淀粉样1-42肽
&淀粉样1-42肽的N15内标
表1:&淀粉样肽及其N15标记型内标的MRM跃迁态和质谱条件
结果和讨论
开发这些方法所遇到的最大挑战就是克服溶解性、吸附性和聚集性问题并获得能满足该应用要求的足够选择性和灵敏度。适当的流动相和进样溶剂构成以及明智选择SPE洗脱溶剂仅仅是应对这些问题的几个关键因素。
质谱分析在正离子模式下进行,因为4+前体的CID产生了几种与固有的特异性b序列离子相对应的不同产物离子(典型光谱如图2所示)。负离子模式下的MS/MS出现了明显的水分流失。图3给出了关于两种方法特异性区别的一个示例。虽然对于溶剂标准品时使用负离子模式的总体灵敏度较高,但在基质存在时负离子模式的灵敏度优势减弱,而正离子模式下的特异度和信噪比的提高对于脑脊液样品中的准确定量具有决定性作用。
超高效液相色谱分析
图4显示了对这三种&淀粉样肽的分离情况。虽然流动相中NH4OH的精确百分比对负离子灵敏度具有关键作用,但ESI+模式下的信号经证实对流动相构成的细微变化更具稳健性,可使液相色谱/自动取样器至少在24小时以上的时间段中保持稳定。与此相反,50%或以上的ESI-信号在10-12小时后因流动相中NH4OH浓度的自然变化(挥发)而损失。这进一步强调了ESI+MS方法的稳健性。
固相萃取(SPE)
SPE使用Oasis& MCX(一种混合模式的吸附剂)进行,以加强萃取过程的选择性。该吸附剂同时依赖于反相和离子交换保留机制,以从复杂脑脊液样品中的其它高丰度多肽中选择性分离&淀粉样肽组分。使用特定的96孔Oasis& &Elution提供了明显的浓缩效果,无需溶剂挥干和复溶,从而尽可能减少了肽损失。此外,通过离子交换进行肽结合为整个方法提供了正交性。
在最初的方法开发过程中,萃取人工脑脊液时观察到了大量非特异性结合(NSB)。我们添加了5%大鼠血浆(有一个不同的&淀粉样肽序列),以消除NSB。
SPE是整个方法中较为重要的环节之一。对淀粉样组分选择性极高的分离再加上标准流速下UPLC的分辨率实现了对临床前研究样品的超快分析。
线性、准确度和精确度
对每种肽均使用了N15标记型内标。对于0.1-10ng/mL人工脑脊液+5%大鼠血浆的等分样本,三种&淀粉样肽的标准曲线均呈线性。&淀粉样1-38肽的典型标准曲线如图5所示。淀粉样肽的基线水平根据同时使用过量加标的人脑脊液和&人工脑脊液+5%大鼠血浆&而得到的两条标准曲线进行定量分析,基线水平的计算值没有统计学意义上的差异。选择人工脑脊液是因为它的价格不贵,而且是一种比较易得的基质。从3种人脑脊液和1种猴脑脊液萃取得到的&淀粉样1-42肽的基线水平如图6所示。所有3种&淀粉样肽的基线水平测定值的统计结果如表2所示。
用3种人脑脊液混合样品和1种猴脑脊液混合样品配制了0.2、0.8、2和6ng/mL的过量加标的质控样品。准确度和精确度数值符合LC/MS/MS测定的控制标准。质控样品分析的典型结果如表3所示。
图3:比较使用负离子(失水产物离子)或正离子(b序列离子的产物
图4:UPLC/MS/MS分析萃取自人工脑脊液+5%大鼠血浆的&淀粉样1-38、1-40和1-42肽
图5:萃取自人工脑脊液+5%大鼠血浆中的&淀粉样1-38肽的典型标准曲线
图6:显示3种人脑脊液和1种猴脑脊液中&淀粉样1-42肽基线水平
结果和讨论
开发这些方法所遇到的最大挑战就是克服溶解性、吸附性和聚集性问题并获得能满足该应用要求的足够选择性和灵敏度。适当的流动相和进样溶剂构成以及明智选择SPE洗脱溶剂仅仅是应对这些问题的几个关键因素。
质谱分析在正离子模式下进行,因为4+前体的CID产生了几种与固有的特异性b序列离子相对应的不同产物离子(典型光谱如图2所示)。负离子模式下的MS/MS出现了明显的水分流失。图3给出了关于两种方法特异性区别的一个示例。虽然对于溶剂标准品时使用负离子模式的总体灵敏度较高,但在基质存在时负离子模式的灵敏度优势减弱,而正离子模式下的特异度和信噪比的提高对于脑脊液样品中的准确定量具有决定性作用。
超高效液相色谱分析
图4显示了对这三种&淀粉样肽的分离情况。虽然流动相中NH4OH的精确百分比对负离子灵敏度具有关键作用,但ESI+模式下的信号经证实对流动相构成的细微变化更具稳健性,可使液相色谱/自动取样器至少在24小时以上的时间段中保持稳定。与此相反,50%或以上的ESI-信号在10-12小时后因流动相中NH4OH浓度的自然变化(挥发)而损失。这进一步强调了ESI+MS方法的稳健性。
固相萃取(SPE)
SPE使用Oasis& MCX(一种混合模式的吸附剂)进行,以加强萃取过程的选择性。该吸附剂同时依赖于反相和离子交换保留机制,以从复杂脑脊液样品中的其它高丰度多肽中选择性分离&淀粉样肽组分。使用特定的96孔Oasis& &Elution提供了明显的浓缩效果,无需溶剂挥干和复溶,从而尽可能减少了肽损失。此外,通过离子交换进行肽结合为整个方法提供了正交性。
在最初的方法开发过程中,萃取人工脑脊液时观察到了大量非特异性结合(NSB)。我们添加了5%大鼠血浆(有一个不同的&淀粉样肽序列),以消除NSB。
SPE是整个方法中较为重要的环节之一。对淀粉样组分选择性极高的分离再加上标准流速下UPLC的分辨率实现了对临床前研究样品的超快分析。
线性、准确度和精确度
对每种肽均使用了N15标记型内标。对于0.1-10ng/mL人工脑脊液+5%大鼠血浆的等分样本,三种&淀粉样肽的标准曲线均呈线性。&淀粉样1-38肽的典型标准曲线如图5所示。淀粉样肽的基线水平根据同时使用过量加标的人脑脊液和&人工脑脊液+5%大鼠血浆&而得到的两条标准曲线进行定量分析,基线水平的计算值没有统计学意义上的差异。选择人工脑脊液是因为它的价格不贵,而且是一种比较易得的基质。从3种人脑脊液和1种猴脑脊液萃取得到的&淀粉样1-42肽的基线水平如图6所示。所有3种&淀粉样肽的基线水平测定值的统计结果如表2所示。
用3种人脑脊液混合样品和1种猴脑脊液混合样品配制了0.2、0.8、2和6ng/mL的过量加标的质控样品。准确度和精确度数值符合LC/MS/MS测定的控制标准。质控样品分析的典型结果如表3所示。
1. 我们开发了一种用于同步定量分析人和猴脑脊液中多种&淀粉样肽的SPE-LC/MS/MS生物分析方法并对其进行了验证。
2. 将基于&Elution型混合模式SPE的高选择性萃取方法与UPLC色谱分析的分辨率相结合是实现对人和猴脑脊液中3种主要&淀粉样肽进行准确、精确而可靠的定量分析的关键。
3. 正离子MS/MS和b离子序列碎片的使用提供了本应用所需的质谱特异度。
4. 用不到30分钟的时间即可完成对96份样品的萃取并作好进样准备,从而满足了临床前研究所需的样品制备处理通量要求。
5. 本文所述的方法避免了在临床前研究工作中进行耗时的免疫测定或免疫沉淀步骤。
6. Xevo TQ质谱的质量范围和灵敏度允许选择高m/z前体进行破碎并能选择特异度高的b离子碎片,从而增加了此项测定的信噪比并总体提高了其特异度。
7. 此类方法也可允许选择性的、特异性的、并按高通量方式同时测定一份样品中的几种不同&淀粉样肽,而同时仍能达到低浓度内源性&淀粉样肽分析所需的高灵敏度。这是一个明显的优点,因为ELISA测定需要使用多种抗体进行多次测定。
所选择的参考文献
1. T.A. Lanz、J.B. Schachter.神经科学方法杂志,169 (.
2. T. Oe等.质谱分析中的快速通讯,20 (-3735.
3. JR Slemmon等.色谱分析杂志:生物分析,846 (.
4. NT Ditto等.神经科学方法杂志,182 (5.
5. T.A. Lanz、J.B. Schachter.神经科学方法杂志,157 (.
6. MJ Ford等.神经科学方法杂志,168 (4.
7. E. Portelius等.蛋白质组学研究杂志,6 (-4439.
本文作者希望向Wenlin Li(辉瑞公司PDM部)表达谢意,感谢她在使用免疫亲和LC/MS/MS分析&淀粉样肽所作的前期工作。
沃特世公司
美国马萨诸塞州米尔福德Maple街34号,01757
电话:(508) 478-2000;传真:(508) 478-1990> 问题详情
初产妇,孕40周,临产14小时,阴道流水12小时,宫缩20″10′,胎心168次分,羊水Ⅱ粪染,宫口开大5cm,先
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初产妇,孕40周,临产14小时,阴道流水12小时,宫缩20″/10′,胎心168次/分,羊水Ⅱ粪染,宫口开大5cm,先露头s+1,矢状缝在左斜径上,小囟门在4~5点处,坐骨棘突,坐骨切迹小于2横指,骶骨前面平直。下列哪项诊断是错误的A.继发性宫缩乏力B.LOPC.中骨盆狭窄D.胎儿窘迫E.胎膜早破请帮忙给出正确答案和分析,谢谢!
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