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辐照氟银脐动脉植后的内膜增生及ki-67的表达.pdf31页
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辐照氟银脐动脉植后的内膜增生及ki-67的表达
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论文作者签名 纠年Ir月，r日 ◇％年哆月f厂日 中
要 目的观察辐照氟银脐动脉移植到家兔颈动脉后的内膜增生情况及k一67的表达， 以此评估人胎儿脐动脉是否能够成为冠状动脉血管重建的新的血管材料源。 方法无菌条件下取人胎儿脐动脉20条制成辐照氟银脐动脉o30只家兔的左、右
两侧颈动脉同时分别植入辐照氟银脐动脉 实验组 和自体颈动脉 对照组 ，作为自身对
照，术后2周和6周观察血管通畅情况，分别取材作大体、组织形态学观察和免疫组织化
学检测，同时对吻合口通畅血管段内膜厚度及k一67的阳性表达进行分析。 结果1．移植术后血管内皮细胞再生良好，总通畅率为89．6％o 2．光镜检查移植段血管壁三层结构均存在，管壁有少量单核及淋巴细胞浸润，内腔 由内皮细胞覆盖o
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【眼肿瘤论坛】关注结膜色素痣的恶变
摘自公众号：发布时间： 14:59:07
王蕾 马建民 首都医科大学附属北京同仁医院 眼部黑色素瘤是一种严重危害人类健康的恶性病变，几乎可以累及眼部所有的组织结构。在眼部脉络膜为黑色素瘤最常见的好发部位；原发于结膜的黑色素瘤少见，占所有眼部黑色素瘤的2%-5%，位居结膜恶性肿瘤的前三位[1-3]。 病例报道 患者女性，50岁，因发现左眼结膜色素痣逐渐增大就诊。患者自述幼年时左眼颞侧球结膜就有色素痣，大小约1mmX2mm，扁平状，呈棕黑色。1.5年前患者发现色素痣体积明显增大，颜色加深，故来就诊。发病以来，患者无眼红、眼痛、分泌物增多及视力下降等症状。眼科检查：双眼视力均为0.8，左眼颞侧球结膜棕黑色肿物，约5X7mm大小，肿物表面血管扩张，眼球前节及后节正常;右眼未见异常。双眼MRI检查结果显示：左眼前节下方实性肿物，边界欠清，TWI1呈等信号，TWI2呈稍低信号，增强扫描可被不均匀强化，提示结膜黑色素瘤可能性大（图1）。初步诊断为左眼结膜色素痣恶变，左眼结膜黑色素瘤。经过积极术前准备，在全麻下行左眼结膜肿物切除术，术中见肿物累及部分眶前部脂肪组织，待术中冰冻病理检查结果确诊为黑色素瘤后，对创面再进行扩大切除，尽可能无肿瘤细胞残留。术后患者恢复好，5天后出院。出院后患者到肿瘤医院行生物治疗。手术后10个月，再次发现左眼下方球结膜局部有棕色肿物生长，又来诊。眼科检查：视力右眼0.8，左眼0.3，右眼未见异常。左眼下方球结膜局限性色泽改变，可扪及硬结，活动度差；MRI扫描显示左眼眶内占位性病变，病变累及球后组织，包绕眼球下壁、下直肌和下斜肌，眼球受压变形，TWI1呈稍高信号，TWI2呈稍低信号，欠均匀，TWI1增强扫描可被不均匀强化（图2）。经患者同意，全麻下行左眼眶内容物剜除术，术后病理检查结果为黑色素瘤。1周后患者出院，转肿瘤医院继续治疗，随诊至今无复发。 ▲图1双眼第1次手术前MRI影像 ▲图2双眼第2次手术前MRI影像 讨论 黑色素瘤是一种高度恶性肿瘤，以皮肤组织为多发，眼部软组织也可以发生黑色素瘤。结膜黑色素瘤好发于白种人，美国年发病率为0.12-0.5/百万，在白人男性中呈现发病率逐渐升高的趋势；亚洲人（包括中国人）发病率为0.15/百万[4-7]。结膜黑色素瘤好发于中老年人，男性多于女性，儿童罕见[8]。 研究表明结膜黑色素瘤多继发于结膜色素痣及结膜原发性获得性黑变病(primary acquired melanosis, PAM)的恶变[9]。国外研究报道，410例结膜色素痣患者随访7年，1%的患者最终发生恶变[10]。结膜PAM被认为是结膜黑色素瘤的癌前病变，存在异型性的PAM其转化为结膜黑色素瘤的风险大于10%[11]，资料显示近80%的结膜黑色素瘤来源于结膜PAM[3,12]。原发性结膜黑色素瘤与眼部日光暴露呈明显相关性[13]；近年来部分病例报道发现结膜黑色素瘤的发病还与神经纤维瘤病有一定关系[14-16]。 结膜黑色素瘤临床表现多变，患者多因发现眼表无痛性棕黑色肿物逐渐生长而就诊。结膜黑色素瘤可发生于结膜任何部位，多见于穹隆部、内眦部或外眦部结膜，但很少发生于角膜缘及睑结膜。肿瘤生长方式因发生部位不同而有所差异。睑结膜下基质较致密以及睑结膜内面与眼球相接触，睑结膜黑色素瘤通常呈扁平状、浸润性生长，侵及睑板和睑缘皮肤；球结膜黑色素瘤通常呈结节状生长；穹隆部、内眦部和外眦部结膜下组织比较疏松，瘤细胞容易侵犯到眼眶前部组织[9]。由于肿瘤的色素成分多少不一，故肿瘤可呈现为黑色、灰色、棕色、粉色、黄色等，甚至可无色素；肿瘤表面凹凸不平，质脆易出血，周围可见明显扩张的供养血管，部分可见周围扁平PAM。黑色素瘤生长迅速，容易发生局部扩散，可沿着角膜缘和穹窿结膜进行播散，可越过角膜缘长入角膜，也可向眼内、眶内、鼻旁窦及局部皮肤蔓延。眼内播散多见于手术后，因手术不充分及Bowman膜被破坏所导致。20%-30%病例可发生远处转移，多转移到患眼同侧的耳前及下颌下淋巴结、肝脏、颅内、肺脏等部位，转移与下列因素相关，包括肿瘤位置（如泪阜）、肿瘤厚度（＞2mm）、组织学分型以及淋巴侵润等[1,3,17,18]。 影像学检查在判断黑素瘤病变范围及转移方面具有重要参考价值。B型超声和MRI对于发现黑色素瘤球内转移很有帮助。当肿瘤眶内转移时，MRI扫描可见眶内实性占位，TWI1呈稍高信号，TWI2呈稍低信号，肿物可被强化，同时MRI还可发现脑转移[19]。 结膜黑色素瘤应与发生于结膜的其他色素性病变相鉴别，如结膜色素痣、PAM、种族黑变病等[20,21]。结膜色素痣多发现于儿童时期，表现为局限的、表面微隆起的色素沉着，多位于睑裂部球结膜，色素痣一般较为稳定，仅有约1%的恶变率。PAM常发生于肤色较白的老年人，好发年龄为60-70岁[22]，表现为棕色的弥漫的、扁平状、非囊性病灶，色素沉着不均匀；随着时间推移，病变可逐渐缩小，但如前所述，PAM恶变几率较大。种族黑变病患者肤色大多较深，表现为双眼扁平的色素沉着，病变多360°环绕角膜缘，部分少见病例导致穹窿部结膜、睑结膜受累，恶变为黑色素瘤的罕见。 组织病理学结果是黑色素瘤确诊的金标准。结膜黑色素瘤多由上皮样黑色素瘤细胞组成，肿瘤细胞突破基底层，在结膜下组织内浸润性生长或形成大小不一的结节，常排列成巢状、小梁状或片状；瘤细胞含黑色素颗粒不均一；瘤体内血管丰富，有些血管高度扩张[23,24]。免疫组化方面，S-100蛋白和HMB-45染色在肿瘤鉴别诊断及判断邻近结膜上皮侵犯程度中有较高价值[23]；近年来，Ki-67作为处于增生期细胞的标记物，在判断肿瘤恶性程度中应用广泛，Ki-67阳性细胞率这一指标已经被用于典型性和非典型性PAM的鉴别诊断以及肿瘤恶性程度的判断[25,26]。国内有研究发现，Ki-67在黑色素瘤中的阳性细胞率平均为17.9%，但Ki-67在伴随的PAM病变部位阳性细胞明显增多[27]。 结膜黑色素瘤的治疗以手术切除为主。50%的结膜黑色素瘤极易局部复发，复发病例多见于多灶性病变、病变位于非角膜缘区、手术切缘残留肿瘤细胞及部分仅行手术治疗而未行辅助治疗的患者，术中手术器械接触正常组织可能会造成潜在医源性播散[3,18]。因此，为减少肿瘤复发，有文献建议应扩大切除范围，将肿瘤邻近约4-5mm的结膜一并切除，术中行冰冻病理切片检查确保切缘无肿瘤细胞残留，手术边缘可应用冷冻疗法处理[17,28]。但是有研究显示，尽管手术切除彻底，术后5年内仍有26%、15年内有65%的患者因PAM复发[29]。近年有报道术后局部滴用0.04%丝裂霉素C滴眼液，对残留病变有一定抑制效果并可减少肿瘤复发[30-32]。睑结膜黑色素瘤应扩大切除范围，切除后可行异体巩膜替代睑板及唇黏膜移植进行眼睑重建[33]。若肿瘤侵犯眼眶，需要行眶内容物剜除术[17]。结膜黑色素瘤恶性程度高，易复发及血行转移，据统计，10年内死于肿瘤全身转移的患者约占20%[10,34]，预后不良。 本例患者结膜黑色素瘤为结膜色素痣恶变所致，第一次彻底切除肿物后10个月再次发生结膜肿物，且发现肿瘤向眼眶侵犯，导致眼球变形及轻度突出，考虑到此次病变范围侵犯广泛，建议患者行眶内容物剜除术，手术后转肿瘤医院进行药物治疗，随访至今未见复发。 通过对本例患者的治疗及此案例提示：（1）结膜色素痣可以恶变，一旦发现色素痣的大小、形态、颜色及血管增生等改变，应该尽早手术切除，以防恶变发生；（2）结膜黑色素瘤可以累及眶内组织，如果病变范围广泛，需行眶内容物剜除术。（3）结膜黑色素瘤应该尽可能彻底切除，手术后也应密切随访，警惕肿瘤复发及转移。（4）如何减少结膜黑色素瘤复发几率，仍需深入研究。 参考文献
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微信号：iophthal研究乳腺癌Bcl-2和Ki-67蛋白表达及临床意义。方法
应用免疫组化S-P法检测50例随访5年以上的乳腺癌患者标本中Bcl-2和Ki-67的表达情况，分析其临床病理特性以及相关性关系。结果
Bcl-2和Ki-67蛋白表达的阳性率分别为64%（32/50）和60%（30/50）。Bcl-2高表达与乳腺癌组织学分级，腋淋巴结转移、分期呈显著负相关，与生存期呈正相关。Ki-67的高表达与组织学分级、肿瘤的大小，腋淋巴结的转移，复发和转移呈显著正相关（P<0.05）。结论
（1）乳腺癌Bcl-2蛋白表达阳性提示肿瘤分化程度高，淋巴结转移少。（2）Ki-67表达阳性提示肿瘤分化程度低，恶性度高，病期较晚，复发、转移多。两种标志物反映乳腺癌病理参数特性有不同意义。
【关键词】& 乳腺癌；Bcl-2；Ki-67；免疫组织化学；病理
&& The expression of Bcl-2 and Ki-67 in breast carcinoma and its clinicopathological significance
&&& XU Dong-zhe, JIN Zhe-zhu,LI Rui-yong.Department of general surgery, Affiliated Hospital of Yanbian University.Jilin 133000,China
&&& 【Abstract】&& Objective&& To study the expression and clinical significance of Bcl-2 and Ki-67 in breast carcinoma.Methods&& The expression of Bcl-2 and Ki-67 were detected by immunohistochemical S-P methods in tissue samples from 50 cases of breast carcinoma.Results&& The overall positive rate of Bcl-2 and Ki-67 was 64%（32/50）and 60%（30/50）respectively.The high expression of Bcl-2 showed to be negative correlation with histological grade and axilla lymph node metastasis,and to be positive correlation with survival period.The high expression of Ki-67 was positively related to the tumor size ,axilla lymph node metastasis,histological grade , recurrence and metastasis （P<0.05）. Inverse correlation was found between the expression of Bcl-2 and Ki-67 （P<0.05）.Conclusion&& （1） The positive expression of Bcl-2 occurs more in well differentiated breast cancer and negative lymph node state. （2） The positive expression of Ki-67 revealed the low differentiation of tumor and with high recurrence and metastasis as well as a later clinical stage.& Both Bcl-2 and Ki-67 could act as a marker to evaluate different biological behavior of breast cancer.
&&& 【Key words】&&& Bcl-2 ; Ki-67;& & pathology
&&& Bcl-2是第一个被发现的细胞凋亡抑制基因，在细胞凋亡调控过程中起着关键作用。Ki-67是细胞增殖和合成代谢相关的非组合蛋白，有关对Bcl-2和Ki-67在乳腺癌中表达的研究提示，对评估乳腺癌特性有意义。但其表达的观点不一，本文检测乳腺癌Bcl-2和Ki-67，探讨其表达与乳腺癌临床病理特性关系。
&&& 1&& 材料与方法
&&& 1.1&& 材料&& 材料来自我院年资料完整的乳腺癌根治标本50例,患者均为女性，年龄23～67岁，平均年龄为47.6岁。其中朝鲜族20例，汉族30例。组织学类型：浸润性导管癌23例，单纯癌11例，其他癌16例。组织学分级：Ⅰ级16例，Ⅱ级19例，Ⅲ级15例，TNM分期中Ⅰ～Ⅱ期48例，Ⅲ期2例。
&&& 1.2&& 试剂&& 鼠抗人Bcl-2 单克隆抗体、 鼠抗人Ki-67核抗原单克隆抗体和通用型SP kit 均为美国ZYMED公司产品。
&&& 1.3&& 染色方法&& 筛选出50例乳腺癌简化根治标本癌组织蜡块，做4&ｍ厚的组织切片，脱蜡后放入盛有枸橼酸缓冲液（工作液）的容器中，置微波炉内（95℃，15min）行抗原修复，取出冷却至室温。经PBS冲洗后用通用型SP kit中的正常山羊血清封闭，室温孵育10min，弃血清分别滴加1:50浓度的Bcl-2-抗和Ki-67-抗，置４℃冰箱过夜。PBS冲洗后，滴加通用型SP kit中的生物素标记二抗，室温30min，PBS冲洗后滴加通用型SP kit中的生物标记二抗，室温30min；PBS冲洗后滴加通用型中的辣根酶标记的链霉卵白素，室温30min。PBS冲洗后DAB显色剂显色，自来水冲洗后，苏木素复染，中性树胶固定，封片。对照：以PBS代替一抗作为阴性对照。用已知阳性切片作阳性对照。
&&& 1.4&& 阳性结果的判断&& Bcl-2阳性着色组织学特征为以癌细胞胞浆着色为主，胞膜和核膜上呈现棕黄色颗粒， 而Ki-67为细胞核成深棕色。根据阳性细胞在同类细胞中所占的比例判定结果。着色细胞50％为（＋＋＋）。
&&& 1.5&& 统计学分析&& 采用SPSS11.0统计软件进行&2检验、Fisher精确检验和相关分析。
&&&& 2&& 结果
&&& 2．1&& Bcl-2、Ki-67蛋白在乳腺癌细胞中表达情况&& Bcl-2蛋白位于癌细胞的胞浆、胞膜和核膜，以胞浆为主，总阳性率为64%。Ki-67的阳性标记位于细胞核内，呈棕色颗粒，胞浆阴性。总阳性率为60%。
&&& 2．2&& Bcl-2、Ki-67蛋白表达与乳腺癌临床病理关系&& Bcl-2 、Ki-67的阳性表达与患者的年龄、民族、绝经前后无关，差异无显著性（P>0.05）。肿瘤&2cm 组Ki-67蛋白表达阳性率为28.6%，明显低于>2cm组Ki-67蛋白表达（72.2%），差异有显著性（P<0.01），呈正相关，但Bcl-2表达与肿瘤大小无关。Bcl-2的表达阳性率Ⅰ级明显高于Ⅱ级和Ⅲ级，差异有显著性（P<0.05）。Ki-67表达与组织学分级呈正相关，Ki-67的表达阳性率Ⅲ级高于Ⅱ级和Ⅰ级，差异有显著性（P0.05）。 淋巴结转移阴性组Bcl-2的阳性表达率明显高于淋巴结转移阳性组的表达率（P<0.05），其阳性表达与生存期呈正相关。但Bcl-2表达与肿瘤的复发和转移无关。Ki-67的阳性表达与腋淋巴结的转移呈正相关。淋巴结转移阳性的Ki-67的表达率（81.8%）明显高于阴性表达率（42.9%），差异有显著性（P<0.01）。Ki-67的阳性表达与肿瘤的复发和转移密切相关，复发和转移肿瘤中的Ki-67的阳性表达率为90%，明显高于无复发和转移的表达（52.5%）（P<0.05）。 见表1。
&&& 2．3&& Bcl-2和Ki-67在乳腺癌中的表达的相关关系&& 经相关检验，Bcl-2和Ki-67在乳腺癌中的表达呈负相关（P<0.05），见表2。表1&& Bcl-2和Ki-67表达与临床病理参数关系表2&& Bcl-2和Ki-67在乳腺癌中表达的关系
&&& 3&& 讨论
&&& Bcl-2是抑制细胞凋亡的重要的凋亡调控基因,在多种癌中表达［1］。Bcl-2的表达提示肿瘤的恶度较低，是一个可靠的临床预后好的指标［2，3］。本组Bcl-2表达在分化Ⅰ级组明显高于Ⅲ级，在淋巴结转移阴性中的Bcl-2的表达明显高于阳性的表达，其表达与腋淋巴结转移呈负相关。在肿瘤大小和分期中的表达，　尽管有报道显示Bcl-2表达与肿瘤大小呈负相关［4，5］，但多数报道与之无关［6］。Ki-67是反映细胞增殖活性的一种标记，半衰期短，在细胞周期中，除G0期和G1早期外，其他各期均有表达，&Mu;期达到高峰［7］。Ki-67在肿瘤的良恶性的区分、恶性程度的确定及评估预后等方面有较广泛的应用。在乳腺癌的预后研究表明，Ki-67与c-erbB-2、P53等一同被列为仅次于激素受体、组织学级别的乳腺癌第二类预后指标［8］。本组Ki-67的阳性表达与肿瘤的大小、组织学分级、淋巴结转移、复发和转移差异有显著性（P<0.05），呈正相关，而Bcl-2的表达随Ki-67表达增多明显减少，呈负相关，但复发转移无明显统计学差异，与文献报道不一致［9～11］，可能与复发、转移后带瘤生存以及实验条件不同等多因素有关。临床分析这些指标时应分别对待，为乳腺癌高危病理参数特性的了解有一定帮助。
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作者单位：133000 吉林延吉，延边大学附属医院普通外三科
日期：日 - 来自[]栏目
SOURCE: Head & Neck
近期发表在《Head & Neck》上的一篇文章指出，表皮生长因子受体强阳性可以作为筛选预后差亚型NPC患者的评价之一。来自瑞典的研究人员针对潜伏膜蛋白1(LMP1)、Ki-67、cyclin-B1、表皮生长因子在45例非地方性鼻咽癌（NPC）中的表达模式和临床特性进行了研究。结果发现33%的肿瘤表达LMP1，且与疾病的进展相关。同时Ki-67、cyclin-B1、表皮生长因子受体也有过度表达的情况，分别出现在50%, 55%,和 80% 的样本中。表皮生长因子受体强阳性与治疗预后有关，研究人员得出结论认为表皮生长因子受体强阳性可以作为筛选预后差亚型NPC患者的评价之一。
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探讨食管癌组织中survivin、P53、Ki-67和PCNA的表达及临床病理学意义。方法
收集2003年在我院接受手术治疗的60例食管癌患者的癌组织蜡块，采用免疫组织化学方法检测癌组织的survivin、P53、Ki-67和PCNA的表达水平，分析其表达水平与性别、年龄、淋巴结转移、食管癌发生部位、病理类型及浸润程度的关系。结果
食管癌组织块中survivin蛋白阳性表达在肿瘤不同分化程度组P<0.05；P53与Ki-67阳性表达在食管癌发生的不同部位组P＜0.05；Ki-67和PCNA与肿瘤分化程度、食管浸润程度及淋巴结转移组的P值均0.05。结论
survivin在肿瘤分化组中出现差异性表达；P53与Ki-67在食管下段癌出现高表达；Ki-67和PCNA在肿瘤分化程度、食管浸润范围及淋巴结转移的有无存在差异性；survivin、P53、Ki-67和PCNA的表达不能单独作为食管癌中发病的独立危险因素；survivin、P53、Ki-67和PCNA可以作为食管癌的肿瘤标志物。
【关键词】& 食管癌；免疫组织化学；survivin；P53；Ki-67；PCNA
&&& A study on expression of survivin，P53，Ki-67 & PCNA in esophageal carcinoma and their clinical pathologic significance
&&& DAI Tian-yang，SHAO Chang-qing，ZHOU Biao，et al.Department of Thoracic Surgery，Luzhou Medical College Hospital，Luzhou 646000，China.
&&& ［Abstract］& Objective& To study the expression of survivin，P53，Ki-67 & PCNA in Esophageal Carcinoma and the clinical pathologic significance.Methods& Immunohistochmical stains were used to investigate the expression of survivin，P53，Ki-67 & PCNA in 60 case of esophageal carcinoma in our hospital，and also study their pathologic feature.Results& In the study of the esophageal carcinoma，rate of the expression of survivin was positive correlated with tumour differentiation，P=0.014.The expression of P53 and Ki-67 in the location of esophageal carcinoma has si Ki-67 and PCNA have significant correlation with lymph node metastasis or not，esophageal tissue invasion degree and histopat survivin，P53，Ki-67 & PCNA all positive expression were 24 cases，that positive expression rate was 40%.Conclusion& The survivin showed significance difference between the histopathoThe expression rate of P53 and Ki-67 in the lower esophageal has sig Ki-67 & PCNA have significance difference in histopathological classification、invasion and lymph no survivin，P53，Ki-67 & PCNA，can not be independent danger factor of survivin，P53，Ki-67 & PCNA may be the important markers for esophageal carcinoma.
&&& ［Key words］& immunohistochmical；survivin；P53；Ki-67；PCNA
&&& 食管癌的发生、发展与细胞凋亡抑制、原癌基因的激活和抑癌基因失活以及细胞增殖能力增强有着密切联系。survivin是新近发现的凋亡抑制因子；P53作为抑癌基因经突变后转变为癌基因；Ki-67和PNCA是两种增殖抗原，在不同的增殖期有着不同的表达强度，有助于了解细胞增殖强度；笔者通过免疫组织化学方法对survivin、P53、Ki-67和PCNA的表达检测，分析其与临床病理学的关系。了解survivin、P53、Ki-67和PCNA的表达有望对食管癌的诊断、治疗、预后提供科学依据。
&&& 1& 材料与方法
&&& 1.1& 病例选择& 2003年收集的四川泸州医学院附属医院手术切除并经病理鉴定的食管癌组织标本60例。其中高分化鳞癌15例，中分化鳞癌17例，低分化28例；食管中上段癌36例，食管下段癌24例；20例有淋巴结转移，均伴有2～13枚淋巴结增生；术前均未经化疗及放疗。
&&& 1.2& 主要实验试剂& 丹麦DAKO鼠抗人型P53、Ki-67和PCNA抗体，兔抗人型survivin多克隆抗体，免疫组织化学SP试剂盒。
&&& 1.3& 主要实验仪器& -20 ℃医用冰箱，显微镜，微波炉，烤箱。
&&& 1.4& 实验方法& 严格按照S-P法的实验流程进行脱蜡、漂洗、封片、观察等。
&&& 1.5& 观察标准& survivin、P53、Ki-67和PCNA表达水平的评判方法：每张切片在高倍镜下随机选择5个视野，棕黄色为阳性，每个视野记数200个细胞，共计1000个细胞，计算阳性细胞数。切片的观察和计数均由2名病理科医生独立完成，以二者结果的均数为表达的阳性数。
&&& 1.6& 统计学分析& 所有定量测定指标以均数&标准差（&s）表示，组间比较采用t检验及单因素方差分析，全部统计采用SPPS 10.0统计分析软件完成。P>0.05表示差异无统计学意义，P<0.05表示差异有统计学意义。用二项Logistic回归模型对手术比例进行多因素分析，检验水准P＜0.05为差异有统计学意义。
&&& 2& 结果
&&& 2.1& survivin在食管癌中的表达观察& survivin蛋白阳性表达59例，阳性表达率占98.33%；其表达于细胞浆及细胞核。见表1、图1。表1& survivin在不同组中的表达比较
&&& 2.2& P53在食管癌中的表达观察& P53阳性表达40例，阳性表达率占66.7%，表达于细胞核。见表2、图2。
&&& 2.3& Ki-67在食管癌中的表达观察& Ki-67在60例中阳性表达率为100%，Ki-67为阳性表达为50%以上肿瘤细胞表达率16.7%，Ki-67表达于细胞核。见表3、图3。
&&& 2.4& PCNA在食管癌中的表达观察& PCNA在60例中阳性表达率为100%，PCNA阳性表达为50%以上肿瘤细胞表达率36.7%，表达于细胞核。见表4、图4。
&&& 2.5& survivin、P53、Ki-67和PCNA的多因素分析& survivin、P53、Ki-67和PCNA共同阳性24例，阳性表达率占40%；多因素分析示survivin、P53、Ki-67和PCNA的P值均大于0.05，表明差异无统计学意义。表2& P53在不同组中的表达比较表3& Ki-67在不同组中的表达比较表4& PCNA在不同组中的表达比较
&&& 3& 讨论
&&& 3.1& 食管癌组织中survivin的表达及其临床病理分析& 本研究显示survivin在食管高分化鳞状细胞癌中的表达指数为0.6，中分化的表达指数0.5，低分化的表达指数为0.9，经统计学分析P<0.05，在食管癌的分化程度上存在差异性，具有统计学意义，肿瘤分化越低survivin在瘤组织中的阳性表达率越高；survivin在性别组、年龄组、有无区域淋巴结转移组、食管癌发生的部位组及食管癌浸润程度组中比较的P值均大于0.05，故survivin的表达与患者年龄、性别、有无淋巴结转移、食管癌的发生部位及浸润程度关系不大。Nakanishi等［1］发现survivin在低度异常非典型腺瘤性增生、高度异常非典型腺瘤性增生及细支气管肺泡癌组织中的表达率依次为9%、89%、100%，其说明survivin的表达随分化程度的加重而表达增强；任秀花等［2］发现食管高分化鳞癌组中survivin的表达低于低分化鳞癌组；本研究与Nakanishi与任秀花等研究结论相符。
&&& survivin作为一种细胞凋亡抑制蛋白，高表达于各种肿瘤组织，其机制可能是通过抑制细胞凋亡信号，使肿瘤细胞逃避机体免疫系统的监视而无法清除，从而延长了肿瘤细胞的生存期，利于食管癌的发生发展。survivin基因在癌组织中的表达是一个渐进的过程，随着癌前细胞向癌细胞的转化，survivin基因的表达逐渐升高，因正常的组织存在癌变的可能，任秀花等［2］还发现在正常黏膜-单纯增生-不典型增生-原位癌-浸润癌中，survivin蛋白表达的阳性率依次为40％、42.5％、65.0％、80.0％和85.0％。因此认为survivin的表达可能涉及细胞生物学转化的中间环节，正常及增生黏膜上皮survivin阳性表达提示形态学尚正常的组织存在癌变的可能，因而具有早期诊断的价值。国内陶琳等［3］发现在正常支气管黏膜上皮，不典型增生，肺癌及淋巴转移癌组织中survivin表达呈递增趋势。因此认为，survivin随细胞的增生及细胞核的恶性转化，其表达就越明显，故有望成为早期诊断食管癌的肿瘤标志物。
&&& 3.2& 食管癌组织中P53蛋白的表达及其临床分析& 本研究中显示P53蛋白的表达发生在食管癌的不同位置存在差异性，P53蛋白在食管中上段中的阳性表达指数为0.1，在食管下段的阳性表达指数为0.4，P＜0.05，具有统计学意义，食管下段癌的表达率明显高于食管中上段；在性别组、不同年龄组、有无淋巴结转移、不同浸润组及不同分化组P＞0.05，故P53的表达在不同性别、年龄、有无淋巴结转移、不同浸润程度及不同的分化程度的病例未表现出统计学意义。笔者认为与食管下段易受外源性致癌物或促癌物的影响如胃酸反流有关，其机制尚待进一步研究。
&&& 3.3& 食管癌组织中Ki-67和PCNA的表达及其临床病理分析& 本研究显示Ki-67和PCNA肿瘤分化程度、食管浸润程度及有无淋巴结转移组存在差异性，具有统计学意义，与年龄组、性别组无统计学意义；从表4中发现PCNA的肿瘤表达率高于Ki-67，提示PCNA含有Ki-67的表达信息，这与Botticelli的研究相符［4］，但本研究还发现Ki-67在食管癌的发生部位组中具有统计学意义，而PCNA在食管癌的不同发病部位组未显示统计学意义，提示Ki-67同P53一样易受促癌物的影响，其机制尚待进一步研究。Ki-67和PCNA均表达于细胞核，细胞过度分裂与增殖是肿瘤恶变的重要环节，Ki-67和PCNA表达高低可反应细胞增殖活性，故检测这两种蛋白的表达有助于判断肿瘤的生物学活性。王平等［5］Ki-67抗原在膀胱癌中的表达明显高于正常膀胱组织细胞，病理分期越高Ki-67表达越强；Goishi等［6］发现在胃癌中Ki-67抗原的阳性率与胃癌的淋巴结转移有显著关系；有研究发现PCNA已被证实其高表达与淋巴结转移肿瘤浸润深度及组织学类型有关［7］。杨凌等［8］研究发现Ki-67和PCNA在食管鳞状细胞癌中随分化程度的下降表达强度呈上升趋势。因此能够证明随着肿瘤细胞的增生及分化的加深、食管浸润范围及淋巴结转移Ki-67和PCNA均表现出较高的表达率。故Ki-67和PCNA的表达可作为反映肿瘤恶性程度、判断生物学行为和预测预后的重要指标。
&&& 3.4& 食管癌组织中survivin、P53、Ki-67和PCNA的表达及其回顾性多因素分析& 回顾性研究survivin、P53、Ki-67和PCNA的表达利用多因素分析各自P值均大于0.05，无统计学意义。故survivin、P53、Ki-67和PCNA任何一个指标均不能作为食管癌发病的独立危险因素，但本实验显示出Ⅲ期食管癌survivin、P53、Ki-67和PCNA均表现阳性表达，因四者共同表达阳性的而且是Ⅲ期食管癌的样本数较少，还不能得出survivin、P53、Ki-67和PCNA共同阳性表达于Ⅲ期食管癌的循证医学结论。
【参考文献】
Nakanishi K，Rauai T，Kumaki F，et al.Survivin expression in atypical adenomatous hyperplasia of the lung.Am J Clin Pathol，（5）:712-719.
任秀花，张孝艳，阎爱华，等.TEN，Survivin在食管癌发生发展中的作用.河南肿瘤学杂志，）：238-240.
陶琳，姚峰，李华，等.survivin基因表达与非小细胞肺癌发生、发展的关系.中国肺癌杂志，）:275-277.
Botticelli AR，Casali AM，Botticelli L，et al.Immunohitochemical detection of cell-cycle associated markers on paraffin embedded and formalin fixed needle biopsies of prostate carcinoma:correlation of P120 expression with AgNOR PCNA/cyclin，Ki-67/MIBI proliferation scores and Gleason gradings.Eur J Histochem，）:41-48.
王平，董德平，陈莉，等.Survivin、Ki-67在膀胱癌中的表达及其临床意义.中华实验外科杂志，）：765.
Goishi H，Tanaks S，Haruma K，et al.Predictive value of cathepsin D and Ki-67 expresson at the deepest penetration site for lymph node metastases in gastric cancer.Oncol-Rep，）:713-718.
Wa J，Mao Y，He L，et al.A new cell proliferating marker:cytosonic thymidine
kinase as compared to proliferating cell nuclear antigen in patients with colorectal carcinoma.Anticancer Res，C）:.
杨凌，边月红，黄淑红，等.CyclinB1、Cdk1、PCNA和Ki-67在食管癌组织中的表达.山东大学学报（理学版），）：155-157.
作者单位：646000 四川泸州，泸州医学院附属医院胸心外科（△通讯作者）日期：日 - 来自[]栏目
<font color="#07年03月23日 World J Gastroenterol. 2007 Jan 21;13(3):426-31.
为调查胃肠道间质瘤(GISTs)环氧化酶(COX-2)、增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki-67 和p53的表达以及其与组织病理学参数间的联系，研究人员采用光学显微镜和免疫组织化学方法检测了25例GISTs患者的c-kit、CD34、SMA、S-100 蛋白、COX-2、PCNA、Ki-67 和p53，评估组织病理学参数如分裂指数(MI)、肿瘤分级、肿瘤大小以及COX-2、 PCNA、Ki-67 和p53间的联系。结果可见，19例(76%)肿瘤中可见COX-2蛋白表达，且在肿瘤细胞的胞浆中表达显著。p53与MI和肿瘤分级显著相关，但COX-2、增殖指标与MI、肿瘤分级、肿瘤大小间未见联系。可见，COX-2在大多数GISTs中表达，可能在肿瘤增生和进展中发挥重要作用，成为识别GIST的指标。尽管p53免疫组化评估可以用于区分GISTs的危险，但肿瘤大小、分裂率这些指标也可同时用于参考。
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<font color="#06年12月27日 中国妇产科临床杂志 2006 Vol.7 No.3 P.196-198
（郑州）为了通过观察p27kip1、ki-67的表达探讨子宫内膜细胞增殖能力对子宫内膜异位症发病的影响。研究者应用免疫组化SP法检测36例子宫内膜异位症患者(EMs组)的异位和在位内膜及23例正常子宫内膜中p27kip1、ki-67的表达情况。结果①异位内膜p27kip1腺体胞质表达率较正常子宫内膜明显增强(P＜0.05)；异位内膜p27kip1腺体胞核表达率较正常子宫内膜明显下降(P＜0.05)。②正常子宫内膜与在位内膜腺体ki-67表达增生期显著高于分泌期(P＜0.05),异位内膜ki-67表达无周期性变化；异位内膜ki-67分泌期增殖指数显著高于在位内膜(P＜0.01)。③EMs组异位内膜p27kip1与ki-67表达呈负相关(P＜0.05)。可见ki-67增殖指数反映了子宫内膜细胞的增殖活性，异位内膜细胞增殖活跃，而p27kip1表达下降，负性调节细胞增殖能力下调，p27kip1和ki-67可能在子宫内膜异位症发生发展中起重要作用。
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　&&& 【摘要】& 目的& 探讨Ki-67、PCNA的表达与胃肠道间质瘤临床病理特征的关系，分析这些指标在GIST中的作用及其相关性。方法& 应用免疫组化SP法检测40例胃肠道间质瘤中Ki-67、PCNA的表达。结果& 40例胃肠道间质瘤中Ki-67、PCNA阳性表达率分别为60.0%、65.0%。Ki-67、PCNA表达与GIST的性别、年龄、部位、肿瘤大小、组织学分型无关，与组织学分级有关。Ki-67、PCNA的表达具有一定的正相关性。结论& Ki-67、PCNA联合应用可作为临床病理判定GIST良恶性、恶性程度、肿瘤分级及预后的重要指标。
　　【关键词】& 胃肠道间质瘤；Ki-67、PCNA；免疫组化
　&& 胃肠道间质瘤（gastrointestinal stromal tumor，GIST）是消化道最常见的间叶性肿瘤，光镜下，胃肠道间质瘤的肿瘤细胞很像平滑肌和神经鞘瘤［1］。由于GIST的生物学行为难以预测，一些可以保持多年没有症状，而另一些已发生转移［2］，影响预后因素也多种多样。本文应用免疫组化方法GIST进行Ki-67、PCNA的检测和分析研究。
　　1& 材料与方法
　　1.1& 材料& 选择我院经CD117和CD34证实为胃肠道间质瘤标本40例。良性指标：肿瘤小于5cm或核分裂小于5/50HPF，且无细胞多型性，细胞成分少，无黏膜侵犯或坏死。恶性指标：黏膜侵犯，肿瘤坏死和显著的细胞多型性，核分裂大于10/50HPF。介于良恶性之间的为潜在恶性。按此标准，40例GIST中良性15例，潜在恶性10例，恶性15例。胃15例，肠13例，其他（包括食管、肠系膜）12例。年龄36～78岁，平均54.3岁。肿瘤直径＜5cm者16例，直径≥5cm者24例。
　　1.2& 实验方法& 应用免疫组化SP法，Ki-67、PCNA单克隆抗体购自福州迈新生物技术开发公司。实验中用已知的Ki-67、PCNA阳性组织做阳性对照，用PBS代替一抗做阴性对照，DAB显色，苏木素复染，脱水，透明，封固，显微镜下观察。
　　1.3& 判定方法& Ki-67以细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性细胞，阳性细胞数≥10%为（+），＜10%为（-）。PCNA以细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性细胞，阳性细胞数≥20%为（+），＜20%为（-）。
　　1.4& 统计学方法& 进行Pearson χ2检验，Fisher精确概率法，Spearman等级相关分析和Kappa检验。P＜0.05有统计学意义。
　　2& 结果
　　40例GIST中，24例（60.0%）Ki-67阳性表达，阳性信号定位于细胞核。通过χ2检验，不同性别、年龄、部位、肿瘤直径在小于或大于5cm之间、不同组织学类型之间Bax的表达率差别无显著性，但与GIST的组织学分级有关（χ2=24.028，P=0.000），从良性、潜在恶性到恶性的GIST，Ki-67阳性表达率逐渐升高，分别为13.3%、70.0%和100.0%，阳性表达率差异有非常显著性（P＜0.01），但潜在恶性和恶性之间的表达率差异无显著性。
　　&&& 40例GIST中26例（65.0%）PCNA阳性表达，阳性信号定位于细胞核。通过χ2检验，不同性别、年龄、部位、肿瘤直径小于或大于5cm之间、不同组织学类型之间Bax的表达率无显著性差别，但与GIST的组织学分级有关（χ2=17.875，P=0.000），从良性、潜在恶性到恶性的GIST，PCNA阳性表达率逐渐升高，分别为26.7%、70.0%和100.0%。良性和潜在恶性GIST之间PCNA阳性表达率差异有非常显著性（P＜0.05），良性和恶性GIST之间PCNA的阳性表达率差异有显著性（P＜0.01），但在潜在恶性和恶性之间的表达率无显著差异。表1& PCNA和Ki-67表达的相关性
　&&& PCNA和Ki-67在GIST中表达呈正相关。从良性、潜在恶性到恶性的GIST，Ki-67和PCNA阳性表达率逐渐升高。根据Kappa值，两者一致性较好。
　　3& 讨论
　　Ki-67是与增殖细胞相关的核抗原，仅分布于核内，其功能被认为与细胞的有丝分裂密切相关。现已知道G0期细胞无Ki-67抗原表达，在G1后期开始出现，S、G2期升高，M期达高峰，其后迅速降解［3］。本研究发现从良性、潜在恶性到恶性的GIST，Ki-67阳性表达率逐渐升高，分别为13.3%、70.0%、100.0%，说明随着GIST从良性到恶性转变的过程中，肿瘤分化越差，增殖性越强，恶性度越高，反映了肿瘤细胞增殖和分化情况。在恶性GIST中Ki-67全部表达，说明肿瘤细胞活跃的增殖能力、较强的侵袭能力、生长速度加快、复发和转移可能性增加。因此可以认为Ki-67是判断GIST良恶性及用于组织学分级的一个较好指标。
　　PCNA是细胞DNA合成期DNA多聚酶的一种辅助蛋白，参加细胞增殖过程的DNA复制，其表达反映了细胞的增殖活性。PCNA可用于预测肿瘤进程和早期复发的可能性［4］。本研究发现从良性、潜在恶性到恶性的GIST、PCNA阳性表达率逐渐升高，分别为26.7%、70.0%和100.0%，说明随着GIST从良性到恶性转变的过程中，肿瘤分化越差，增殖性越强，恶性度越高，反映了细胞增殖和分化情况。在恶性GIST中PCNA全部有表达，说明肿瘤细胞增生活跃，浸润和转移的能力增强，生长速度加快，复发和转移的可能性增加。可以认为PCNA是判断GIST良恶性及用于组织学分级的一个较好指标。PCNA与Ki-67都是检测肿瘤增殖活性的重要指标，二者联合起来应用，对于判断肿瘤的生物学行为及预后很有意义。有人认为胃肠道间质瘤中，当良恶性无法明确时，PCNA与Ki-67可联合或单独作为预后的参考指标［5］。本研究也证明，PCNA与Ki-67联合应用可作为临床病理判断GIST良恶性、恶性程度、肿瘤分级及预后的重要指标。
　　【参考文献】
　　1& Liu P,Na J,Wang Y.Study of gastrointestinal stromal tumours by light microscopy,electron microscopy and immunohistochemistry.Zhonghua Bing Li Xue Za Zhi,）:199-203.
　　2& Tornoczky T,Kover E,Pajor L.Frcquent occurrence of low grade cases among metastatic gastrointestinal stromal tumours.J Clin Pathol,）:363-367.
　　3& 李爱华，刘培淑.Ki-67与卵巢肿瘤的研究进展.肿瘤防治杂志,）:780-782.
　　4& Kushlinskii NE,Orinovskii MB,Gurcvich LE,et al.Expression of biomolecular maekers （Ki-67,PCNA,Bcl-2,BAX,Bclx,VEGF） in breast tumors.Bull Exp Biol Med,）:182-185.
　　5& 张勤，张文，朱争艳.PCNA,Ki-67对胃肠道间质瘤预后的临床病理学探讨.武警医学院学报,）:372-374.
　作者单位： 150010 黑龙江哈尔滨，哈尔滨市第一医院病理科
　（编辑：江& 宇）
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&&& 【摘要】& 目的& 观察益气清热活血法对慢性萎缩性胃炎癌前病变组织增殖相关抗原Ki-67和环氧合酶(COX)表达的影响。方法& 52例慢性萎缩性胃炎伴有中、重度肠上皮化生和不典型增生患者，分为治疗组30例，对照组22例，服用益气清热活血方为治疗组，胃复春为对照组，疗程12月，观察治疗前后症状及胃镜病理变化。结果& 治疗组临床及病理改善优于对照组，益气清热活血方能减轻Ki-67、COX-2表达，治疗组还能增加COX-1表达的作用。结论& 益气活血清热法治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变的机制可能与减少COX-2表达，减轻病变组织增殖活性，增加前列腺素合成，促进黏膜修复有关。
&&& 【关键词】& 益气清热活血法；慢性萎缩性胃炎癌前病变；增殖相关抗原Ki-67;环氧合酶(COX)
&&& 慢性萎缩性胃炎(CAG)伴有中、重度肠上皮化生(Im)和不典型增生(Dys)，与胃癌特别是肠型胃癌的发生关系密切，被认为是胃癌的癌前病变，也是胃癌化学预防的重点阶段，中医药防治具有一定的效果。笔者观察了益气清热活血方对CAG癌前病变的临床疗效及其对胃黏膜组织增殖相关抗原Ki-67、环氧合酶(COX)表达的影响，并其探讨其可能的作用机制。
&&& 1& 资料与方法
&&& 1.1& 一般资料& 江苏省中医院消化科门诊年门诊及住院CAG患者共52例，随机分为治疗组30例，其中男18例，女12例；年龄28～64岁，平均45.6±11.3岁；病程0.5～15年，平均9.7±5.4年；伴中重度肠化24例，不典型增生10例。对照组22例，其中男13例，女9例；年龄26～65岁，平均50.2±10.5岁；病程0.8～16年，平均15.1±8.8年；伴中重度肠化18例，不典型增生7例。两组患者治疗前性别、年龄和病程比较差异无显著性(P＞0.05)。
&&& 1.2& 诊断标准& 参照2000年5月井冈山全国胃炎研讨会共识意见及1989年11月中国中西医结合研究会消化系统疾病专业委员会南昌会议制定的《慢性胃炎中西医结合诊断、辨证和疗效标准》(试行方案)，选择慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生和(或)不典型增生气虚血瘀热郁证的患者共52例。
&&& 1.3& 治疗& 益气清热活血方(由黄芪、白术、薏苡仁、黄芩、仙鹤草、莪术等药物组成)口服，每日2次，3个月为1个疗程，服药4个疗程。治疗期间停服其他治疗药物。对照组采用胃复春4粒，每日3次，3个月为1个疗程，服药4个疗程。于用药前记录患者胃痛、痞满、纳差、乏力、嗳气、泛酸、嘈杂、口干口苦、大便不调、舌质、舌苔、舌下静脉、脉象等临床表现，以后间隔2周记录1次，至疗程结束。临床症状评分标准参照《中药新药治疗萎缩性胃炎的临床研究指导原则》的标准，分为轻、中、重三级，分别记为1，2，3分。病理诊断参照1982年全国慢性胃炎诊治座谈会的标准，由专人阅片，将萎缩、肠化、不典型增生的轻、中、重分别记为1，2，3分(无不典型增生积0分)。各部位组织得分之和为各项目之总积分。
&&& 1.4& 临床疗效标准& 参考卫生部《中药新药治疗萎缩性胃炎的临床研究指导原则》及1984年7月辽宁中医学院、江西中医学院和河北中医学院附属医院萎缩性胃炎研究协作会制定的疗效判定标准。
&&& 1.5& 免疫组化主要试剂及方法& 鼠抗人环氧化物酶1、环氧化物酶2单克隆抗体购自北京中杉金桥生物技术有限公司；鼠抗人Ki-67蛋白单克隆抗体(MIB-1)：福州迈新生物技术开发有限公司；过氧化酶标记的链霉卵白素染色(S-P)试剂盒：美国Ultra Sensitive TM公司产品。将石蜡标本包埋，作厚度为5μm的连续切片，每例切片2张。HE染色，光镜观察染色结果，进行病理学分类诊断；肠化分型作AB-PAS和HID-AB染色进行判断；免疫组化采用S-P染色法，常规二甲苯脱蜡，逐级酒精脱水，3%过氧化物酶阻断10min，热修复法为经多聚赖氨酸处理切片置于含0.01mol/L pH6.0的柠檬酸缓冲液的有盖容器中，沸水浴10min,然后冷却至室温，抗血清封闭非特异性抗原，加入一抗室温下温育60min，依次生物素标记二抗，SP三抗，DAB显色，苏木素衬染，用PBS液代替第一抗体作阴性对照，用已知的阳性标本切片作阳性对照。
&&& 1.6& 实验结果判断& Ki-67蛋白：阳性：细胞核有棕黄色颗粒样沉淀；阴性：细胞核无棕黄色颗粒样沉淀。COX-1、COX-2蛋白：阳性：细胞浆棕黄色；阴性：细胞浆无棕黄色染色。根据染色强度及阳性细胞数分为阴性(-)，弱阳性(+)，中等度阳性(++)和强阳性(+++)，并分别记为0，1，2，3分。
&&& 1.7& 统计学处理& t检验和卡方检验，P＜0.05为差异有显著性。
&&& 2& 结果
&&& 2.1& 两组患者临床疗效比较& 见表1。治疗组总有效率93.9%，对照组总有效率72.7%，治疗组优于对照组，两组总有效率比较差异具有显著性(P＜0.05)。
&&& 表1& 两组患者临床疗效比较& (略)
&&& 2.2& 两组患者症状积分情况比较& 见表2。两组患者经治疗后症状均有不同程度缓解，两组治疗后总积分与治疗前相比差异均具有显著性(P＜0.05)；治疗后积分相比治疗组积分更低，与对照组相比差异亦具有显著性(P＜0.05)。
&&& 表2& 两组患者症状积分情况& (略)注：a:与治疗前比，P＜0.05；b:与对照相比，P＜0.05
&&& 2.3& 两组患者病理积分情况比较& 见表3。病理疗效可见萎缩、肠化、不典型增生在两组治疗上均具有好转，积分下降，与治疗前相比差异均具有显著性；但积分下降以不典型增生最明显，肠化次之，萎缩积分下降程度最低，治疗后积分在治疗组不典型增生与对照组相比下降，差异亦具有显著性。
&&& 表3& 两组患者病理积分情况& (略)注：a:与治疗前比，P＜0.05；b:与对照组比，P＜0.05
&&& 2.4& 两组治疗前后COX-1、COX-2、Ki-67蛋白表达积分的变化& Ki-67在腺颈部细胞和少数间质细胞染色，并随着萎缩、肠化、不典型增生的加重而增加。治疗前两组间COX-1、COX-2、Ki-67蛋白表达积分差异无显著性(P＞0.05)；治疗组治疗后COX-2、Ki-67蛋白表达积分均较治疗前下降(P＜0.05)，但治疗后积分治疗组下降更明显，于对照组相比差异具有显著性，治疗组治疗后COX-1蛋白表达积分上升(P＜0.05)。见表4。
&&& 表4& 两组治疗前后COX-1、COX-2、Ki-67（略）注：a:与治疗前比，P＜0.05；b:与对照组比，P＜0.05
&&& 3& 讨论
&&& 在胃癌的发生过程中，胃黏膜的肠上皮化生和不典型增生是重要的癌前病变，多因素参与、多基因改变导致胃癌前病变向癌变发展。其中细胞增殖活性的增强和环氧合酶2(COX-2)的诱生表达是两个重要过程。在胃癌前病变发展成胃癌过程中，细胞增殖活性升高，胃癌组织增殖活性明显高于尚未发生癌变者。组织的增殖活性由参与细胞周期的细胞数和完成细胞周期的时间所决定，肿瘤细胞具有较高增殖率，并与肿瘤的恶性进展和不良预后高度相关。Ki-67抗原是典型的与细胞周期相关的核蛋白，在增殖细胞的G1、S、G2和M期表达，G0期不表达，与细胞的合成代谢有关，其表达水平能较全面客观地反映正常、癌前病变及肿瘤细胞的不同增殖状态［1］，是反映细胞增殖活性的重要生物学指标［2］，正常组织中扁桃体的生发中心细胞、上皮的基底层细胞和未分化精原细胞均表达Ki-67抗原，肝、肾和脑等细胞不表达，在受植物血凝素刺激而引起增殖的外周血淋巴细胞也可见到Ki-67抗原出现。由于肿瘤细胞具有高增殖活性，Ki-67与肿瘤的关系研究较多。王桂芝等［3］发现发展为肠型胃癌者胃癌组织中的Ki-67指数显著高于癌前病变组织。李平等［4］研究认为Ki-67核抗原表达强的胃癌具有较高的增殖活性，与胃癌的分化程度、浸润深度及TNM分期呈显著正相关。徐佶等［5］研究认为Ki-67在弥漫型胃癌中的表达显著高于肠型胃癌，有淋巴结转移的胃癌Ki-67指数高于无淋巴结转移者。大量研究表明Ki-67核抗原的表达是胃癌恶性生物学行为的指标之一。因此，在监测胃癌前病变的进展及观察中医药干预胃癌前病变的疗效中，Ki-67表达是一个良好的生物学指标。本研究结果显示，在胃黏膜癌前病变中，胃黏膜在萎缩、肠化基础上的不典型增生阶段Ki-67增殖活性明显升高，细胞增殖能力增强，是胃黏膜癌前病变向胃癌发展的机制之一。环氧合酶(COX)是花生四烯酸代谢、前列腺素生成过程中重要的限速酶，COX有两种异物体，COX-1大多呈原生性表达，存在于大多数细胞中，其功能为合成前列腺素来调节细胞的正常生理活动，一般情况下浓度保持稳定，而COX-2呈诱生性表达，大多数正常组织中表达极少，当细胞受到各种刺激，如细胞因子、生长因子、癌基因等刺激下可诱导性表达并参与炎症、细胞增殖和分化等过程。近期研究表明COX-2还可利用不同的途径来促进肿瘤的侵袭与转移。COX-2参与肿瘤的发生发展，是肿瘤防治的新靶点。大量研究表明，COX-2的高度表达与消化系统肿瘤的发生发展密切相关。益气活血清热方具有益气活血、清热消痞、标本兼顾的作用，运用与治疗慢性胃炎胃癌前期病变，临床研究结果显示，临床总有效率、胃镜及病理疗效均高于胃复春片对照组，且在改善胃黏膜萎缩、肠化、不典型增生方面的作用优于对照组。益气活血清热方能抑制COX-2、Ki-67的表达，推测益气活血清热法逆转胃癌前期病变的机制可能通过减轻肠化或不典型增生组织的COX-2的表达，从而降低病变组织的增殖活性有关，从而逆转胃癌前病变，防止其向胃癌发展。治疗组还发现益气活血清热方能增加病变组织Cox-1的表达的作用，推测益气活血清热法能增加前列腺素合成，促进黏膜修复，从而恢复正常的生理功能。
&&& 【参考文献】
&&& 1& Sawhney N,Hall PA.Ki-67-structure,function,andnewan-tibodies.J Pathol,):423-428.
&&& 2& 江继发，魏海明.检测肿瘤转移指标的临床意义.国外医学?肿瘤学分册，.
&&& 3& 王桂芝，卢书信，张克政.Caspase3、bcl-2基因及Ki-67在胃癌前病变中的表达及意义.中国临床保健杂志，)：198-200.
&&& 4& 李平，黄昌明，张祥福，等.DcR3和Ki-67在胃癌的表达及临床意义.福建医科大学学报，)：39-42.
&&& 5& 徐佶，张一楚，孙久运.等.Bcl-2，bax,Ki-67在胃癌中的表达及意义.肿瘤，)：211-212.
&&& (编辑：汪& 洋)
&&& 作者单位： 210029 江苏南京，江苏省中医院(Δ南京中医药大学在职博士研究生)
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　　【摘要】 目的& 探讨子宫内膜样腺癌细胞中Ki-67和CD105的表达及其意义。 方法& 应用免疫组织化学SP法检测38例子宫内膜样腺癌和13例子宫内膜单纯性增生标本Ki-67和CD105的表达。 结果& Ki-67和CD105在子宫内膜样腺癌中均呈高表达，与单纯性增生比较差异有显著性（P&0.05）;与临床分期、肌层浸润有显著性相关（P&0.05）。 结论& Ki-67和CD105在子宫内膜样腺癌的发生发展过程中起重要作用，两种抗体联合检测对子宫内膜样腺癌的预后判定有一定意义。
　　【关键词】& 子宫内膜样腺癌;Ki-67;CD105&&&&& 　　Expression of Ki-67and CD105in endometrioid adenocarcinoma and its signifi-cance
&&& SUN Feng-juan，ZHANG Guan-yu，XU Hong.
　　Department of Obstetrics and Gynecology of Liaohua Hospital，Liaoyang，Liaoning111003，China
　　【Abstract】 Objective To investigate the diagnostic significance of expression of Ki-67and CD105in endometri-oid adenocarcinoma.Methods Expression of Ki-67and CD105were detected in38cases with endometrioid adeno-carcinoma，and13cases with endometrial hyperplasia by SP immunohistochemical staining.Results Ki-67and CD105all had high level expression in endometrioid adenocarcinoma.The expression of Ki-67and CD105was dif-ferent significantly between endometrioid adenocarcinoma and endometrial hyperplasia（P&0.05），between different FIGO stages and invasion depth（P&0.05）.Conclusion Ki-67and CD105may play an important role in the de-velopment of endometrioid adenocarcinoma.The examination of Ki-67and CD105have certain significance to evalute the prognosis of endometrioid adenocarcinoma.
&&& 【Key words】 endometKi-67;CD105
　　子宫内膜样腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，本病的发病率有逐年上升趋势 ［1］ 。近年来的研究表明，肿瘤的发生发展不仅与细胞的增殖相关，而且与间质血管生长有关。本文选用38例子宫内膜样腺癌，应用免疫组化法观察Ki-67和CD105在该肿瘤的表达及其临床病理发展的关系。
　　1 材料与方法
&&& 　1.1 一般材料 38例子宫内膜样腺癌全部来自辽化医院年间妇科手术切除标本，术后病理诊断均为子宫内膜样腺癌，其中Ⅰ级28例，Ⅱ～Ⅲ级10例，年龄37～71岁，平均47.6岁。所有病例术前均未进行辅助治疗，同时选取13例单纯性增生子宫内膜作为对照。
&&&　 1.2 方法 取存档蜡块4μm连续切片，分别进行HE染色和免疫组织化学SP法染色，鼠抗人Ki-67和CD105单克隆抗体均购自福州迈新生物技术开发有限公司，并设立阳性和空白对照。
&&& 　1.3 结果 Ki-67表达定位于细胞核，CD105表达定位于血管内皮细胞胞浆。高倍镜下每张切片选取5个视野，每个视野计数100个细胞，其中阳性细胞数25%为阳性表达，25%为阴性表达 ［2］ 。
&&& 　1.4 统计学方法 采用χ 2 检验和四格表确切概率法。
　　2 结果
&&&　 2.1 Ki-67和CD105表达情况 Ki-67在子宫内膜样腺癌呈现高表达，与单纯性增生内膜比较差异有非常显著性（P&0.01）;CD105在子宫内膜腺癌中表达高于单纯性增生内膜，差异有显著性（P&0.05，见表1）。表1 Ki-67和CD105在子宫内膜样腺癌和单纯性增生内膜的表达 例（略）　注: * P&0.01; ** P&0.05
&&&　 2.2 Ki-67和CD105阳性表达与临床分期和肌层浸润的关系 见表2。Ki-67阳性表达在临床分期中，Ⅰ期与Ⅱ期、Ⅱ期与Ⅲ+Ⅳ期相比，差异有显著性（P&0.05）;CD105阳性表达在临床分期中，Ⅰ期与Ⅱ期差异无显著性（P&0.05）、Ⅱ期与Ⅲ+Ⅳ期相比，差异有显著性（P&0.05）。Ki-67和CD105阳性表达与肌层浸润深度显著相关（P&0.05）。
&&　& 3 讨论
&&&　 Ki-67是一种在细胞G 1 、S、M、G 2 期均会出现的核抗原 ［3］ ，表达的高低反映细胞增殖的程度。本研究在子宫内膜样腺癌中，Ki-67的阳性表达率为71.05%，与单纯性增生内膜组织相比差异有显著性（P&0.01），且Ki-67表达增高与临床分期、肌层浸润有关，提示增殖活性的改变与肿瘤的进展过程有关。 表2 Ki-67和CD105阳性表达与临床分期和肌层浸润的关系 例（略）&&&& 　　CD105是一类新的细胞粘附分子，是一种与增生有关的内皮细胞的细胞膜抗原，在与肿瘤有关的新生血管内皮强烈表达 ［4］ 。大量的研究表明:CD105与肿瘤有关，CD105标记口腔鳞状细胞癌的微血管密度（MVD）值明显高于邻近的正常黏膜，并且与肿瘤的分期、转移、预后显著相关 ［5］ ，另外，在乳腺癌，宫颈癌、非小细胞肺癌等恶性肿瘤组织中，CD105标识的MVD值优于CD34、Ⅷ因子相关抗原等标记的MVD值，与患者的生存期相关，可以作为独立的预后指标。
&&& 本研究结果证明，CD105表达与子宫内膜样腺癌的进展、分期和肌层浸润有关，Saad Rs等 ［6］ 亦认为CD105在子宫内膜癌的诊断中是较为灵敏的指标。
&&& 子宫内膜癌是女性生殖道3大恶性肿瘤之一，约占女性癌症总数的7%，占女性生殖道恶性肿瘤的20%～ 30% ［7］ ，严重威胁人类健康且发病率逐年上升，发病年龄趋于年轻化。近年来研究发现，肿瘤的生长和转移依赖于新生血管的形成（angiogenesis） ［8］ 。本研究通过对子宫内膜样腺癌Ki-67和CD105的表达分析，认为其在子宫内膜癌发生、发展机制的研究中有助于诊断和预后的评价，更有助于探索通过抑制子宫内膜癌组织细胞增殖、血管生长机制来治疗子宫内膜癌的新途径、新方法。
　　【参考文献】
&&& 1 李印，王志宏，刘梅，等.子宫内膜样癌55例临床病理分析.中华医学实践杂志，）:1017.
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&&& 3 汤合莲，邓杰，曹进，等.p73、Ki-67和PTEN在子宫内膜样腺癌的表达及意义.诊断病理学杂志，）:266-267.
&&& 4 Fonsathi E，Del Vecchio L，Altomonte M，et al.Endoglin:an accesso-ry comporent of the TGT-betal-binding receptor-complexwith diag-nostic，prognostic，and bioimmuno the rapeutic potential in human malig-nancies.J Call physiol，-7.
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&&& 6 Saad RS，Jasnosz KM，Tung MY，et al.Silverman JF.Endoglin（CD105）expression in endometrial carcinoma.Int J Gynecol Pathol，）:248-253.
&&& 7 乐杰.妇产科学，第6版.北京:人民卫生出版社，3.8 Li C，Guo B，Bernabeu C，et al.Angiogenesis in breast cancer:the role of transforming growth factor beta and CD105.Microsc Res Tech，-499.
　　作者单位:1111003辽宁辽阳，辽阳市辽化医院妇产科（△ 病理科）
&&& 　　　　　2124010辽宁盘锦，盘锦市第一人民医院病理科
　 （编辑:卉 梅）
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