Thermo HyperSep C18 固相萃取柱 c18固相萃取柱
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的详细介绍
固相萃取柱
Feature a highly retentive alkyl-bonded phase for non-polar to moderately polar compounds
★Retentive for most non-polar compounds
★ Retains most organic analytes from aqueous matrices
★ Hydrophobic reversed phase
★ For nonpolar to moderately polar compounds
Applications:
lRetentive for non-polar compounds
lRetains most organic analytes from aqueous matrices
对非极性和中等极性化合物具有较强保留的烷基键合相 ◆可从水性样本中保留绝大多数有机样品 ◆对碱性物质的保留性强 ◆萃取产物浓度高 应用：◆生物体液中的药物及其代谢物 ◆生物体液内血清、血浆中的多肽 ◆生物样品（如多肽）的脱盐 ◆地下水中的痕量有机物 ◆食品和饮料中的有机酸
货号Cat. No.
描述Description
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参考价格Price（RMB）
HyperSep C18 SPE柱, 50mg/1ml
HyperSep C18 SPE柱, 100mg/1ml
HyperSep C18 SPE柱, 200mg/3ml
HyperSep C18 SPE柱, 500mg/3ml
HyperSep C18 SPE柱, 500mg/6ml
HyperSep C18 SPE柱, 1g/6ml
HyperSep C18 SPE柱, 2g/15ml
HyperSep C18 SPE柱, 5g/25ml
HyperSep C18 SPE柱, 10g/75ml
备注：另有多孔板式SPE产品，如果您需要更多资讯，请联系我们的在线产品咨询专员。
注：1.可以使用快捷键Alt+S或Ctrl+Enter发送信息!&&&&&&2.如有必要,请您留下您的详细联系方式!
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固相萃取C18柱如何活化？
固相萃取C18柱如何活化?
先用5ml甲醇而后用5ml水，这样就可以将柱子活化吗？
我是用这样的方法将柱子活化的，但后来觉得我的样品在柱上的保留率很低，是因为柱子的活化有问题还是因为柱子的选择有问题呢？
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扫描下载送金币CNW和SUPELCO两种C18固相萃取柱对水中全氟有机酸的萃取结果比较
CNW和SUPELCO两种C18固相萃取柱对水中全氟有机酸的萃取结果比较
朱湖地、王琳玲
华中科技大学环境科学研究所
本实验室曾采用安谱公司购买的SUPELCO C18
SPE小柱用于水中全氟有机酸的萃取分析，效果较好。2009年8月，再次购买SPE小柱时，由于当时安谱公司暂无SUPELCO公司的SPE柱，因此公司提供了CNW的SPE柱。本实验室在实际使用时发现，CNW的SPE柱对水中的全氟有机酸几乎没有萃取能力，加标回收率几乎为0。后向公司反映后，再次提供了SUPELCO
C18 SPE柱，本实验室也同时对这两种SPE柱进行了加标回收实验。结果表明，只有SUPELCO C18
SPE柱满足本实验要求。
1. 实验方法
1.1 标准溶液及加标水样的制备
标准溶液配制方法：
a、储备液：直接用玻璃容量瓶作为称量容器，准确称量25mg标准品（精确到0.0001g），溶于甲醇，稀释至25mL，浓度约1mg/mL，浓度以实际读数为准。
b、工作液：临用前准确取50μL贮备液用甲醇稀释至5ml（用10mL塑料离心管，50μL储备液+4950μL甲醇），该溶液浓度约为10.0mg/L。再取50μL该工作液稀释至5ml，其浓度为0.1
mg/L即0.1ng/μL，在测定前配制。
加标水样的配制方法：
a、取过滤好的水样500mL，加入加标溶液JB 1 mL，加标溶液JB的浓度见表1。
ppb级浓度ug/L
1.2 固相萃取方法
1.取样，运回后立即用盐酸调节pH至2，4℃冰箱冷藏，以抑制微生物活动。
2.水样过滤，采用抽滤装置，用0.45um醋酸纤维滤膜过滤后，再移入经去离子水洗净并甩干的矿泉水瓶（即原取样瓶）中。
3.玻璃管、样品瓶、固相萃取装置的玻璃槽、萃取管等、聚乙烯试管，乳胶管等所有会接触水样及萃取溶剂的器皿，先用自来水清洗，再用去离子水少量多次润洗，甩干，再用甲醇少量多次润洗，风干。
4.安装固相萃取装置，注意气密性，调试至正常。&
5.柱子活化：先用5mL甲醇流过SPE柱，再用5mL去离子水流过。流速均为2-3mL/min（约2滴/s）。通过调节固相萃取装置下部的排压阀以及SPE
C18柱下端的接口松紧程度来控制流量。注意压力不可超过20〃Hg。
6.上样：将与SPE
C18柱相连的乳胶管放入装有500mL水样的瓶中，装好自动萃取装置。调节排压阀，使水以5mL/min（5滴/s）的流速通过SPE柱。萃取过程中注意保持SPE柱中总是有水又不溢出。流过小柱的废液被抽入玻璃瓶中，注意观察，当第一个瓶中的水满时关闭真空泵，防止水进入泵中。倒掉瓶中的水，再安装，上样，开启真空泵，继续萃取。
7.淋洗：1mL去离子水以2-3mL/min（2滴/s）的流速通过SPE柱，直到完全抽干，并继续抽取约10min，将小柱完全抽干。
8.洗脱：5mL甲醇，以1mL/min（1滴/s）通过SPE柱，以10mL塑料管收集洗脱液，直到完全抽干。
9.氮吹浓缩及定容：将装有洗脱液的塑料管用氮吹仪吹至略小于1mL，移至2mL带刻度线的进样小瓶中，小瓶事先用离子水清洗并甲醇润洗吹干。用甲醇少量多次润洗塑料管，并将润洗液也移至同一进样小瓶中。将小瓶盖紧密封后放入样品瓶盒子中，密封放入4℃冰箱冷藏。
10.HPLC-MS分析前，从冰箱中取出进样小瓶，观察体积，如果体积大于1mL，用氮吹使体积减少至约0.5mL，加入C12内标溶液（加标后的浓度为100ppb），再用甲醇定容至1.0mL。溶液中如有沉淀物，定容后在进样前用尼龙滤膜过滤。
1.3 仪器检测方法
使用Agilent 1100 LC/MSD
Trap-XCT液相色谱/离子肼质谱联用仪（美国Agilent公司），Phenomenex
Luna色谱柱（100mm*2.1mm，100&A）对样品进行检测。检测的目标物质为PFPA、PFHxA、 PFHpA、 PFOA、
PFNA、 PFDeA、 PFUnA 、PFOS。
配制一高浓度混合标准溶液，先用AutoMS(n)模式，通过提取特征离子进行定性，由此确定各种PFCs的出峰时间：在此基础上改用MRM模式对各种标准物质进行定量检测，建立峰面积与浓度的标准曲线；检测实际水样，根据标准曲线计算水样中相应物质的浓度。
液相色谱主要参数：干燥气（N2）温度：350℃，干燥气流速：10
l/min，喷雾器压力：40psi，Skimmer电压：-40V。流动相为甲醇和1mM乙酸铵，采用梯度洗脱方式，淋洗梯度如下（以甲醇比例计）：
淋洗梯度：
0-2 min：40%-60%
2-5 min：60%-65%
5 min-25 min：65%-75%
25.01-30 min：40%
30-33 min（pause）：40%
质谱基本参数：采用ESI离子源，选择负离子模式，扫描电压：1500V。
MRM模式的时间分段如下：
5-10.7 min 219 263 269 313
10.7-18 min 319 363 369 413 499 419 463
18-26 min 469 513 519 563
26-30 min&& 569
2. 实验结果
2.1 标准溶液的HPLC-MS图
用稀释好的工作液，配制一高浓度标准样品，用于AutoMS(n)模式，提取特征离子进行定性，由此确定时间窗口并各种PFCs的出峰时间，各物质的浓度见表2，其色谱图见图1。
表2 直接进HPLC-MS检测的混标溶液浓度
高浓度标样浓度ug/L
图1 高浓度标准样品色谱图
2.2 两种SPE柱萃取效果比较
2.2.1 采用CNW C18 SPE柱的测定结果
图2-图3是采用CNW C18
SPE柱萃取后进HPLC-MS检测的色谱图，其中图2是水样色谱图，即水样过滤后，再经萃取浓缩所得色谱图；图
3是加标水样色谱图，即水样经过滤后，再加入1mL加标溶液（JB），JB浓度见表1.
实验中加标水样浓缩后的理论浓度约为高浓度标样（图1）的1/4，两者各标准物质具体浓度见表3。由图2、图3可知，原水样萃取液色谱图与加标水样萃取液色谱图几乎一致，扣除实验室空白后，CNW
C18 SPE柱的萃取回收率几乎为零。
表3 加标水样萃取浓缩液的理论浓度及高浓度标样的浓度比较
高浓度标样浓度ug/L
加标水样浓缩后浓度ug/L
图2& CNW C18 SPE柱萃取水样色谱图：
图 3& CNW C18 SPE柱萃取加标水样色谱图
2.1.1 采用SUPELCO C18 SPE柱的测定结果
图4-图5是采用SUPELCO C18 SPE柱萃取的色谱图，其中图4是水样色谱图，即水样过滤后，再经萃取浓缩所得色谱图；图
5是加标水样色谱图，即水样经过滤后，加入1mL加标溶液（JB）后，再经萃取浓缩进样分析所得色谱图。
图4& SUPELCO C18 SPE柱萃取水样色谱图
图5& 柱萃取加标水样色谱图
通过计算水样的加标回收率可知，采用SUPELCO C18
SPE柱，极性和挥发性较强的C5、C6的PFAs回收率较低，C8由于背景污染大，回收率异常高，其它PFAs的回收率在75.1-122.7%之间，萃取效果正常，满足实验需求，详见表4。
表4& SUPELCO C18 SPE柱萃取回收率结果
目标分析物
加标回收率（%）
Instrument
&&&&&Agilent
&&&&&&&C18
(15cm&2.1mm , pore size 5μm)
Mobile phase
CH3CN: A；10mM
CH3COONH4/H2O:
&&&&&&&&&&&&&&&
Linear gradient: 35%A to 45%A by 2%A/min
&&&&&&&0.2
Oven temp.
Injection volume &10 μL
Instrument:&&&&&
Agilent 1100MSD SL
Ionization:
&&&&&&&&Negative
temp:&& 275 ℃
Source voltage:
Vcap：&&&&&&&&&
N2 gas flow rate :&
SIM:&&&&&&&&&&&
&&&&&&&&&&&&&&&
老师您可以适当调整流动相达到更快速简单的分离。
使用Agilent 1100 LC/MSD Trap-XCT液相色谱/离子肼质谱联用仪
Phenomenex Luna色谱柱（100mm*2.1mm，100&A）对样品进行检测。
液相色谱主要参数：干燥气（N2）温度：350℃，干燥气流速：10 l/min，
流动相为甲醇和1mM乙酸铵，采用梯度洗脱方式，淋洗梯度如下（以甲醇比例计）：
淋洗梯度：
0-2 min：40%-60%
2-5 min：60%-65%
5 min-25 min：65%-75%
25.01-30 min：40%
30-33 min（pause）：40%
质谱基本参数：采用ESI离子源，选择负离子模式，喷雾器压力：40psi
，Skimmer电压：-40V。扫描电压：1500V。
MRM模式的时间分段如下：
5-10.7 min&& 219 263 269
10.7-18 min& 319 363 369 413 499 419 463
18-26 min&&&
469 513 519 563
26-30 min&&&
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微雨燕双飞
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ID：godblesschina
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发表于： 16:32:58
ProElut C18 与ProElut PLS 二者都为反相吸附剂，在对某些化合物的保留上二者都合适。您知道二者的具体区别吗？恭喜 yifan1117 获得奖励积分 答案：ProElut PLS兼具亲水基团（吡咯烷酮基团）和疏水基团（二乙烯基苯），属于反相吸附剂，对极性化合物和非极性化合物均有较好的保留，具有亲水亲脂平衡的特性。 与该产品性能相同的还有Oasis HLB。&
与传统硅胶键合反相吸附剂（比如C18）相比，PLS 具备以下特性：（1）真正的通用性：对亲水物质和亲脂物质具有均衡的保留能力，应用领域覆盖了非极性、弱极性极性化合物，克服了C18 吸附剂对极性化合物保留较差的缺点；（2）更高的稳定性：具有水可润湿性，填料经活化后，亲水基团（极性吡咯烷酮基团）会“锁住"部分水分，即使柱床干涸，吸附剂对目标物的保留也不会发生变化；而传统的键合反相吸附剂C18因十八烷基键合相的疏水性性质，使得填料经过水平衡后须立即上样，否则会柱床干涸，降低回收率结果；（3）更宽的pH 值适用范围：PLS 的基质为有机聚合物而非硅胶，在pH 0-14 的范围内表现稳定，而硅胶键合吸附剂只有在2-7.5 的范围内是稳定的；（4）更高的吸附容量：相同质量的吸附剂，PLS可保留更多的目标物，有效地防止了“穿透现象” 的发生，提高了重现性；（5）不存在次级相互作用：硅胶键合吸附剂的表面存在未键合的硅羟基，对碱性化合物的保留较强，用硅胶键合吸附剂处理碱性化合物，回收率通常较低；PLS 是有机聚合物基质的吸附剂，不存在次级相互作用，用于碱性化合物能够得到满意的结果。
10:59:50 Last edit by godblesschina
微雨燕双飞
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这是一道自我发挥题，您可以随意发表您自己的看法。
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ID：dahua1981
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ProElut C18（dikma）?单官能团C18键合相?高纯硅胶，降低杂质干扰?球形硅胶，粒径分布窄，比表面积一致，确保结果重现性 应用：a.& & &
血液，血浆，尿液中药物及其代谢物b.& & &
环境水样中有机物的富集c.& & &
饮料中有机酸的分离d.& & &
环境水样中多环芳烃，农药，除草剂等分离e.& & &
与反相液相色谱柱的相似行为例如：药物，燃料，芳香油，脂溶性维生素，杀真菌剂，除草剂，农药，碳水化合物，固类醇，表面活化剂，茶碱，水溶性维生素等的提取净化 产品指标填料：硅胶基质形状：球型粒径：50μm孔径：100A碳载量：17%封尾：Yes比表面积：300m2/g
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ProElut PLS 该吸附剂兼具亲水基团（吡咯烷酮基团）和疏水基团（二乙烯基苯），属于反相吸附剂，对极性化合物和非极性化合物均有较好的保留，具有亲水亲脂平衡的特性。与该产品性能相同的还有Oasis HLB。 吸 附 剂&
含亲水基团的聚苯乙烯/二乙烯基苯共聚物球形颗粒，粒径50 μm、孔径80 &A、比表面积800 m2 作用基团 苯基，乙烯基，吡咯烷酮基 保留机理 非极性相互作用(主)，极性相互作用(次) 适用范围 非极性、弱极性以及中等极性的中性、弱酸、弱碱化合物 应& & &
用 ①食品安全检测：动物样品中药物残留的分析，比如四环素类药物、氯霉素、磺胺类药物、阿维菌素、大环内酯类抗生素、呋喃类药物及其代谢物；植物样品中农药残留的分析 ②环境监测：水、土壤中PAHs、PAEs、酚类化合物、双酚A、三嗪类除草剂 ③生物样品：血液、尿液中药物的分析，比如四环素类药物、可卡因及其代谢物、吗啡及其代谢物、巴比妥类药物 、三环类药物、雷尼替丁等的分析 保留机理
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吸附剂：ProElut C18是硅胶基质而ProElut PLS 是含亲水基团的聚苯乙烯/二乙烯基苯共聚物球形颗粒
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孔径ProElut C18100而PLS为80比表面积ProElut C18300和PLS为800都不同
16:45:27 Last edit by dahua1981
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作用基团也不同
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原文由 dahua1981(dahua1981) 发表:吸附剂：ProElut C18是硅胶基质而ProElut PLS 是含亲水基团的聚苯乙烯/二乙烯基苯共聚物球形颗粒算是其中一项，还有其他的差异，期待大家的讨论。
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大家是不是觉得太难呀，dahua1981 已经回答出一个答案了：1. ProElut C18是硅胶基质而ProElut PLS 是含亲水基团的聚苯乙烯/二乙烯基苯共聚物球形颗粒还有很多的区别，大家再想一想，既然是硅胶和聚合物的差异，还有引起什么方面的不同呢，从硅胶和聚合物本身的性质去想，只能提示这么多了，要不我一不小心就说出来了
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作用基团：ProElut C18是硅羟基和氨基而ProElut PLS 是苯基，乙烯基，吡咯烷酮基
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原文由 dahua1981(dahua1981) 发表:作用基团：ProElut C18是硅羟基和氨基而ProElut PLS 是苯基，乙烯基，吡咯烷酮基ProElut C18 没有硅羟基和氨基呦，只有十八烷基：弱极性基团；ProElut PLS 是苯基，乙烯基，吡咯烷酮基：既有弱极性基团又有极性基团；那么这又能说明什么呢