有没有人做过用SPE C18柱做土霉素碱残留分析的

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-08-29 08:36 标签： 土霉素的功效与作用
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德国Simon Aldrich PS固相萃取柱在水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测（方法）中的应用
1.&SPE柱：
2.&样品处理
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA2Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。含有EDTA2Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA2Na，溶解后作为样品提取液。
3.&净化步骤
以10mL甲醇，10mL水，5mL&EDTA2Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。
4.浓缩及定容
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定溶液进行HPLC分析
5.HPLC条件
色谱柱：Venusil&MP&C18，5um,4.6*250mm
流动相：A:B=77:23
A:咪唑缓冲液-称取68.08咪唑，10.72乙酸镁，0.37EDTA2Na溶于800ml水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL.
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Cleanert C18-N固相萃取SPE柱
参考报价：
&500mg/6mL等
&S185006-N；185006-N等
英文名称：
&Cleanert C18-N SPE
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Cleanert& S C18-N 是以高纯球型硅胶为基质的未封端反相C18萃取柱。与普通C18材料比较，球型材料均匀度更高，流速更稳定；高纯的硅胶表面，避免了对碱性与极性物质的过度吸附，更适合用于萃取低浓度分析物；
Cleanert& C18-N（未封端）是以硅胶为基质的未封端的反相C18萃取柱。表面较多的硅醇官能团提供了额外的极性相互作用。同时与封端的吸附剂相比，增强了对碱性化合物的保留。是极性和非极性化合物萃取的通用型固定相。相当于Aglient AccuBond C18，BondElute C18 OH。
平均粒径：40-60&m,球型; 平均孔径：60&A; 比表面积：480m2/g
96孔板 2/PK
S180502-NW
100mg/well
96孔板 2/PK
S181002-NW
平均粒径：40-60&m; 平均孔径：60&A; 比表面积：480m2/g
96孔板 2/PK
100mg/well
96孔板 2/PK
型号：SPE&#173;40SPE-HPLC测定制药废水中土霉素残留量_图文_百度文库
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SPE-HPLC测定制药废水中土霉素残留量
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共有&9&人回复了该问答土霉素试验心得
谈谈您在做土霉素时遇到的问题，以及解决办法，如果能讲出道理双倍得分！
回复于： 22:04:00四环素族抗生素在酸性条件下比较稳定，但是在碱性条件下不稳定。不过四环素和土霉素还好，主要金霉素特别不稳定。做时一定注意。
回复于： 16:24:00gb里面的流动相我做的不好，我用的是15：85的乙腈比磷酸二氢纳
回复于： 15:40:00回三楼，C18指的是SPE小柱，或是ALB小柱也可以做四环素类的实验。
回复于： 9:19:00主要的问题在于 1)灵敏度，可以用质谱来解决，但同时有另一个问题就是质谱的基质效应，需要选一个好看内标，最好是其同位素内标。2)SPE的回收率问题，HLB效果不错，就是要注意提取液的pH，2-3回收率会好一些，再高就很差。同时样品的蛋白沉淀要完全，不然一天做不了几个样，很容易堵柱子。3)氮吹的时候注意温度，土霉素容易破坏。
回复于： 12:40:00请问1楼说的"一般的C18柱"是指色谱柱还是指SPE小柱?楼上说用"C18或HLB小柱净化回收率更高",请说说具体的净化步骤好吗?我用过C18小柱,但回收率很差,这件事郁闷了很久,盼高手指点!
快速回复【花三五分钟，帮别人解决一个问题，快乐自己一天！】
回复于： 13:20:00
土霉素用的柱子好象要PH2左右的，我们曾经用一般的c18柱子做过但是没有响应，不知道是PH影响还是其他原因。请高手指教。
回复于： 22:06:00
土霉素是四环素族抗生素中比较好做的一种。一般牛奶、肉制品、畜禽肉中都可以用GB/T509.116来做哦。回收率可以做到80左右，不过不能再高了。不过处理过程中温度过高有影响。这个方法中高氯酸PH值会导致土霉素的峰往前漂，所以，最好在检测过程中做个添加回收。个人认为中C18柱或HLB小柱净化很好，回收率更高。
回复于： 12:40:00
请问1楼说的"一般的C18柱"是指色谱柱还是指SPE小柱?楼上说用"C18或HLB小柱净化回收率更高",请说说具体的净化步骤好吗?我用过C18小柱,但回收率很差,这件事郁闷了很久,盼高手指点!
回复于： 9:19:00
主要的问题在于 1)灵敏度，可以用质谱来解决，但同时有另一个问题就是质谱的基质效应，需要选一个好看内标，最好是其同位素内标。2)SPE的回收率问题，HLB效果不错，就是要注意提取液的pH，2-3回收率会好一些，再高就很差。同时样品的蛋白沉淀要完全，不然一天做不了几个样，很容易堵柱子。3)氮吹的时候注意温度，土霉素容易破坏。
回复于： 18:47:00
楼上的请问一下，土霉素容易分解，具体情况是怎么样的，能回答以下么，给你双倍奖励！！！
回复于： 22:04:00
四环素族抗生素在酸性条件下比较稳定，但是在碱性条件下不稳定。不过四环素和土霉素还好，主要金霉素特别不稳定。做时一定注意。
回复于： 10:00:00
楼上的能将您的前处理方法说一下么，检出限时多少？
回复于： 15:40:00
回三楼，C18指的是SPE小柱，或是ALB小柱也可以做四环素类的实验。
回复于： 16:24:00
gb里面的流动相我做的不好，我用的是15：85的乙腈比磷酸二氢纳
未解决问题

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