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应用共焦显微镜评估bFGF对LASIK术后角膜胶原和神经修复的影响
背景 角膜损伤后分泌的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对细胞再生、胶原纤维重建、神经轴突再生具有重要作用,然而局部分泌的bFGF并不能满足机体修复需要.目的 研究应用活体共焦显微镜观察外源性bFGF即重组bFGF(rbFGF)对兔准分子激光原位角膜磨镶术(LASIK)术后角膜胶原、神经纤维的修复作用及安全性.方法 建立34只成年新西兰大白兔双眼LASIK模型.于术后第1天双眼用妥布霉素地塞米松滴眼液点眼共10d,右眼加用rbFGF点眼3个月,左眼同法用玻璃酸钠点眼.术后1周、2周,2、3、5个月时共焦显微镜下观察前部基质细胞密度、上皮基底膜下神经纤维密度、前基质神经纤维密度、角膜haze分级、灰度差、角膜缘新生血管等指标,分析角膜胶原、神经纤维修复及前基质细胞情况.结果 共19只兔符合LASIK模型标准纳入研究.术后2个月时前基质细胞密度最高,haze改变与之相反.术后各时间点2组间平均前基质细胞密度、haze评分、灰度差值的差异均无统计学意义(P&0.05).LASIK术后2组的神经纤维密度均呈递增趋势,上皮基底膜下神经纤维更明显;术后2周时,rbFGF组前部基质神经纤维密度明显高于玻璃酸钠组,差异有统计学意义(Z=-2.070,P=0.038),5个月时上皮基底膜下神经纤维密度明显高于对照组(Z=-2.060,P=0.039).实验期间2组均无角膜新生血管(CNV)发生.2组组内术后灰度值与haze分级值呈正相关(rbFGF组:b=22.687,F=37.975,P=0.000,玻璃酸钠组:b=20.410,F=18.516,P=0.000),而haze程度与基质细胞密度无明显相关(rbFGF组:b=0.001,F=0.164,P=0.668;玻璃酸钠组:b=-0.002,F=1.896,P=0.178).结论 外源性bFGF可安全、有效地促进LASIK术后角膜神经修复及基质胶原细胞规则再生,有利于术后角膜胶原的规则重建.
Abstract：
Background Basic fibroblast growth factor(bFGF)secreted by cornea after injury is important to cytothesis,collagen fibers reconstruction and axons recovery.However,the local bFGF is not enough for the reparation process.Objective This study aimed to observe the findings of corneal collagen and nerve recovery under the confocal microscopy through focusing(CMTF) in the eyes with intervene of exogenous recombinant bFGF(rbFGF) after excimer laser in situ keratomileusis(LASIK).Methods LASIK rabbit models were binocularly created in 34 clean New Zealand white rabbits.The tobramycin combined with dexamethasone were dropped after operation for 10 days in bilateral eyes.rbFGF was topically administered in the right eyes of rabbits from 1 day through 3 months after LASIK,and lubricant was used in the left eyes at the same way.The corneal collagen and nerve recovery,keratocyte and endothelial cell counting were observed with CMTF at the 1st week,2nd week,2nd month,3rd month and 5th month after LASIK.Results Total 19 rabbits were meted the request of LASIK models.The keratocyte densities in anterior stroma of both groups reached the lowest level at the 2nd week and the highest level at the 3rd month.Otherwise,haze changed on the contrary.No statistically significant differences were found in anterior stroma keratocyte densities,haze grade,grey value between rbFGF group and lubricant group at various time points after operation(P＞0.05).The nerve cord densities of both groups were increased gradually,and those under the epithelial basement membrane were more dominant.The nerve density of the anterior stroma of rbFGF group was significant higher than the lubricant one in the 2nd group(P=0.038).The considerably elevated the subepithelial nerve density value was also seen in rbFGF group compared with lubricant at 5 months after operation(Z=-2.060,P=0.039).No any corneal neovascularization occurred in both groups through experiment duration.The positive correlation was found between grey value with haze grade in rbFGF group(b=22.687,F=37.975,P=0.000) and lubricant group(b=20.410,F=18.516,P=0.000).However,haze grade was not significant correlated with stromal keratocyte density(rbFGF group:b=0.001,F=0.164,P=0.668;lubricant group:b=-0.002,F=1.896,P=0.178).Conclusion Exogenous bFGF can improve the recovery of corneal nerve and regeneration of keratocyte after LASIK.No evidence of bFGF promoting corneal neovascularization is found in this experiment.
ZHONG Liu-xue-ying
ZHANG Xiao
CHEN Si-yang
AI Feng-rong
CHEN Bing-jun
作者单位：
中山大学中山眼科中心,510060广州
100730北京,中国医学科学院,北京协和医学院,北京协和医院眼科
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益气活血中药对介入后急性冠脉综合征长期预后的影响
第一部分益气活血中药对介入后急性冠脉综合征长期预后的影响　　目的：观察益气活血中药干预对介入(percutaneous coronary intervention，PCI)后急性冠脉综合征(acute coronary syndrome，ACS)长期预后的影响，并分析影响预后的相关因素。　　方法：在前期多中心、区组随机、平行对照“中西医综合干预介入后急性冠脉综合征临床研究”的1年临床研究基础上，对2008年7月至2009年9月在京沪地区8家医院住院的702例PCI后ACS患者，进行长期随访观察。其中对照组(n=351)接受西医常规治疗，治疗组(n=351)接受益气活血中药(心悦胶囊+复方川芎胶囊)联合西医常规治疗，并分别于2011年9月-12月进行门诊和(或)电话随访。随访观察内容包括患者主要终点事件、次要终点事件及联合终点事件发生情况。主要终点事件包括心源性死亡、非致死性心肌梗死、再次血运重建(介入治疗及冠状动脉旁路移植术)；次要终点事件包括因ACS再入院、心功能不全、非致死性脑卒中及其他血栓并发症(支架内再狭窄、下肢动脉闭塞等)；联合终点事件定义为主要终点事件+次要终点事件。预后影响因素分析采用Cox比例风险模型，以终点事件作为结局变量，以终点发生事件时间为时间变量，将可能影响预后的因素纳入模型，分析影响PCI后ACS预后的相关因素及其影响程度。　　结果：完成随访患者621例(88.59％)，失访患者80例(11.41％)，其中治疗组失访41例(11.68％)，对照组失访39例(11.14％)，平均随访时间为35.4±3.8个月。治疗组发生主要终点事件20例(5.70％)，对照组发生主要终点事件38例(10.86％)，治疗组发生主要终点事件的危险是对照组的0.53倍[RR：0.53，95％CI(0.30，0.88)，P=0.013]，较对照组绝对降低了5.20％[ARR：-0.052，95％CI(-0.06，-0.01)]；治疗组发生次要终点事件21例(5.98％)，对照组发生次要终点事件36例(10.28％)，治疗组发生次要终点事件的危险是对照组的0.58倍[RR：0.58，95％CI(0.33，0.97)，P=0.037]，较对照组绝对降低了4.30％[ARR：-0.043，95％CI(-0.06，-0.01)]；治疗组发生联合终点事件(主要终点+次要终点)41例，终点事件发生率为11.68％，对照组发生联合终点事件74例，发生率为21.14％。治疗组发生联合终点事件的危险是对照组的0.55倍[RR：0.55，95％CI(0.36，0.76)，P=0.001]，较对照组绝对降低了9.46％[ARR：-0.095，95％CI(-0.11，-0.03)]。　　Cox比例风险模型分析影响预后相关因素，结果显示：在西医常规治疗基础上加益气活血干预与主要终点事件、次要终点事件、联合终点事件发生呈负相关(B=-0.69，P=0.014；B=-0.54，P=0.049；B=-0.66，P=0.001)；累及血管支数、纳入时生存质量得分与主要终点事件发生呈负相关(B=-0.79，P=0.024；B=-1.35，P=0.026)；左心室舒张末期前后径、高血压病史、高血脂病史与联合终点事件发生呈正相关(B=0.04，P=0.038；B=0.45，P=0.034；B=0.55，P=0.007)；纳入时生存质量得分与联合终点事件的发生呈负相关(B=-1.44，P=0.002)。　　结论：益气活血中药联合西医常规治疗干预PCI后ACS，可明显减少不良心血管事件发生的风险；高血压病史、高血脂病史、低生存质量、左室舒张末期内径扩大、冠脉多支病变是PCI后ACS不良心血管事件发生的独立影响因素。　　第二部分益气活血中药对大鼠急性心肌梗死后早期心室重构的影响　　目的：观察益气活血中药对大鼠急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)后早期心室重构的影响，并从细胞外基质代谢方面探讨可能的机制。　　方法：结扎大鼠冠状动脉前降支造成AMI模型。将90只造模成功的Wistar大鼠随机分为6组，每组15只，分别为假手术组(冠脉仅穿线不结扎)、模型组、西药组(缬沙坦)、益气组(西洋参茎叶总皂苷)、活血组(赤芍总苷)、益气活血组(西洋参茎叶总皂苷配伍赤芍总苷)，各给药组连续灌胃给药4周，假手术组和模型组灌胃等剂量蒸馏水。超声心动图检查心脏结构及心功能变化、HE染色观察心肌组织病理变化，放射性免疫法检测各组大鼠血清肌钙蛋白T(cTnT)、B型钠尿肽(BNP)、炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)、心肌纤维化因子层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原氨端肽(PⅢNP)含量及心肌组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(ALD)、组织生长因子β1(TGF-β1)的含量。免疫组织化学染色法半定量检测各组大鼠心肌组织基质胶原Ⅰ、胶原Ⅲ、金属蛋白酶9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)、骨桥蛋白(OPN)、腱糖蛋白C(TN-C)的表达水平。　　结果：灌胃4周后取材，与模型组比较：(1)益气活血组大鼠心肌细胞炎性浸润减少，心肌纤维间隙水肿和心肌纤维细胞坏死变性明显减轻；(2)西药组、活血组和益气活血组心脏左室舒张末内径明显减小(P<0.05)，左室射血分数明显提高(P<0.05)，益气活血组室间隔收缩和舒张未期厚度明显增加(P<0.05)，血清BNP水平明显下降(P<0.05)；(3)西药组、活血组和益气活血组血清炎性因子TNF-α和IL-1β的含量明显降低(P<0.05，P<0.01)；(4)各给药组心肌组织神经内分泌因子AngⅡ、ALD、TGF-β1的含量明显降低(P<0.05，P<0.01)；(5)活血组和益气活血组血清纤维化因子LN、HA、PⅢNP含量明显降低(P<0.05)；(6)西药组和益气活血组心肌组织胶原Ⅰ、胶原Ⅲ表达明显降低(P<0.05，P<0.01)；(7)活血组和益气活血组心肌组织MMP-9表达明显降低(P<0.01)、TIMP-1表达明显增高(P<0.05)，MMP-9/TIMP-1比值明显降低(P<0.01)；(8)活血组和益气活血组心肌组织OPN、TN-C表达明显降低(P<0.05，P<0.01)。　　结论：(1)益气活血中药(西洋参茎叶总皂苷配伍赤芍总苷)可改善大鼠AMI后的早期心室重构，改善心功能，其机制可能涉及抑制炎症反应、降低神经内分泌因子的激活、调节细胞外基质代谢有关；(2)益气活血中药通过调节胶原代谢、基质金属蛋白酶、骨桥蛋白、腱糖蛋白等影响细胞外基质构成的关键蛋白表达水平，抑制AMI后的早期心室重构。
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万方数据电子出版社基质金属蛋白酶在心肌肥厚大鼠中的作用及强力霉素的干预效果--《临床心血管病杂志》2006年12期
基质金属蛋白酶在心肌肥厚大鼠中的作用及强力霉素的干预效果
【摘要】：目的:观察心肌肥厚大鼠模型中基质金属蛋白酶(MMP)-2,MMP-9及其抑制剂(TIMP-1)的表达及强力霉素干预后对其影响。方法:24只大鼠随机分为对照组(A组,只给予0.9%氯化钠溶液腹腔注射);造模组(B组)和药物干预组(C组)均用去甲肾上腺素1.06mg/kg腹腔注射,bid,注射15d,建立大鼠心肌肥厚模型,C组造模同时给予强力霉素10mg/kg腹腔注射,qd,给药15d。全部动物于给药后16d处死测定全心质量指数、左室质量指数、心肌胶原含量、心肌组织MMP-2,MMP-9,TIMP-1、心肌胶原容积分数(CVF)。结果:与A组比较,B组全心质量指数、左室质量指数、MMP-2、MMP-9阳性表达率、心肌胶原含量及CVF均明显增加(P0.05),TIMP-1阳性表达率明显降低(P0.05)。与B组比较,C组全心质量指数、左室质量指数、MMP-2、MMP-9阳性表达率、心肌胶原含量及CVF均明显降低(P0.05),TIMP-1阳性表达率增加(P0.05)。结论:去甲肾上腺素诱导的心肌肥厚大鼠MMPs/TIMPs系统平衡破坏,使基质胶原降解与合成平衡破坏,从而导致心室重构。强力霉素可通过抑制MMP来逆转心室重构。
【作者单位】：
【关键词】：
【分类号】：R542.2【正文快照】：
近年来研究〔1〕表明心肌肥厚存在心室重构。心脏间质也称为心脏基质,是由胶原、纤黏蛋白、层黏蛋白及弹性蛋白多聚糖等组成,其中最主要的是胶原。心脏基质在维护心脏结构和功能中起重要作用,基质的破坏能引起心肌间质纤维化,最终发展为心室重构与功能失调。基质金属蛋白酶(ma
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