肝炎病毒及检验(一)_电子教案_《微生物学检验》_精品课程_安康职业技术学院
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专业 医学检验&& 科目 微检& &&&&&&&&&&&&学年 第& 学期&&& 第& 周
单元&& 肝炎病毒及检验(一)
1、列出肝炎病毒的种类.
2、叙述HAV、HBV的主要生物学特性.
3、说出HAV、HBV的微生物学检验方法.
2、教学内容：
肝炎病毒及检验(一).
教研室主任签字
教务科签字
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&年& &月& &日
　　肝炎病毒是引起病毒性肝炎的病原体。病毒性肝炎是当前危害人类健康的疾病之一。目前认为病毒性肝炎病原体至少有五种，包括甲型肝炎病毒（HAV）、乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、丁型肝炎病毒（HDV）、戌型肝炎病毒（HEV），它们的特性、传播途径、临床经过均不完全相同，但它们均能引起肝炎病变。
第一节　甲型肝炎病毒
　　1973年Feinslone 首先用免疫电镜技术在急性期患者的粪便中发现甲型肺炎病毒(Hapatitis A virus,HAV ) 。属微小RNA病毒科，新型肠道病毒72型。人类感染HAV后，大多表现为亚临床或隐性感染，仅少数人表现为急性甲型肝炎。一般可完全恢复，不转为慢性肝炎，亦无慢性携带者。
一、生物学性状
（一）形态与结构
病毒呈球形，直径约为27nm。无囊膜。衣壳由60个壳微粒组成，呈20面体立体对称，有HAV的特异性抗原(HAVAg)，每一壳微粒由4种不同的多肽即VP1、VP2、VP3和VP4所组成。&
HAV结构模式
在病毒的核心部位，为单股正链RNA。除决定病毒的遗传特性外，兼具信使RNA的功能，并有传染性。
（二）病毒感染模型与培养
　　黑猩猩和狨猴对HAV易感，且能传代，经口或静脉注射可使动物发生肝炎，并能在肝细胞冻中检出HAV。病毒在组织培养细胞中虽可增殖。但不引起细胞病变，且增殖与细胞释放均甚缓慢。
（三）抵抗力
　　初步实验证明，HAV对乙醚、60℃加热1小时及pH3的作用均有相对的抵抗力（在4℃可存活数月）。但加热100℃5分钟呈用甲醛溶液、氯等处理，可使之灭活。非离子型去垢剂不破坏病毒的传染性。
二、致病性与免疫性
１、传染源：病人和隐性感染者。
２、传播途径：
（1）粪----口，粪便污染环境，食物、水源--口―人体消化道（主要的）
（2）输血，注射（次要的）.
（二）致病机理与免疫
致病机制：HIV--肠粘膜和局部淋巴结增殖--入血--入肝细胞--&&&& 损伤。在甲型肝炎的显性感染或隐性感染过程中，机体都可产生抗HAV的lgm 和lgG抗体。另外有活力的NK细胞，特异性细胞毒T细胞（CD8+）在消灭病毒、控制HAV感染中亦很重要。
三、微生物学诊断
　　目前对甲型肝炎的微生物学检查，以HAV的抗原和抗体为主。应用的方法包括免疫电镜、补体结合试验、免疫粘附血凝试验、固相放射免疫和酶联免疫吸附试验、多聚酶链反应、cDNA-RNA分子杂交技术等。抗HAVLgm 具有出现早、短期达高峰与消失快的特点，故它测得是甲型肝炎新近感染的标志。抗HAVIgG 的检测有助于流行病学检查。
第二节　　　乙型肝炎病毒
　　1970年在电子显微镜下观察到HBV的形态。
一、生物学性状
（一）形态与结构
1．大球形颗粒：亦称Dane颗粒，直径约42nm。核衣壳为20面体对称结构，Dane颗粒表面含有HBsAg ，核心中还含有双股有缺口的DNA链和依赖DNA的DNA多聚酶。目前认为Dane颗粒即完整的HBV。
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& HBV大球形颗粒
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& HBV小球形颗粒
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& HBV管形颗粒
　　2．小形球颗粒：直径约22nm，它由HBsAg，即病毒的囊膜组成。目前认为HBV的小颗粒不是HBV，可能是它感染肝细胞时合成过剩的囊膜而游离于血循环中。
　　3.管形颗粒：直径约22nm，长度可在100～700nm之间。实际上它是一串聚合起来的小颗粒，但同样具有HBsAg的抗原性。
（三）HBV的抗原组成
（1）ＨＢＶ表面抗原（ＨＢsＡg）
& 抗原性强，刺激机体产生抗HBs，可抵抗HBV的再感染。
& 检测HBsAg可作为诊断乙肝的重要依据。
（2）前S1和前S2抗原（PreS1、PreS2）
刺激机体产生抗PreS1和PreS2。
（3）HBcAg（HBV核心抗原）
存在于Dane颗粒核心表面，血液中不容易检出。
抗原性强，刺激机体产生抗HBc对HBV无中和作用。
检出HBC―IgM标志HBV在肝细胞内持续复制。
（4）HBeAg
隐藏或镶嵌于HBcAg之中。
刺激机体产生抗HBe有一定的抗感染作用。
HBeAg出现代表体内有HBV复制和血液具有传染性的一个指标。
４、抵抗力：强100℃10分钟。
（四）HBV的培养
　　HBV的组织培养尚未成功。应用各种肝组织在体外培养HBV仍很困难。黑猩猩是HBV的易感动物，狨猴虽可感染但不如前者敏感。国外用黑猩猩研究HBV的发病机理，检测自动免疫、被动免疫的效果以及HBV疫苗的安全性。但黑猩猩的来源短缺，难以广泛应用。
（五）抵抗力
　　HBV对外界的抵抗力较强。对低温、干燥、紫外线和一般化学消毒剂均耐受。乙肝病毒的传染性和HBsAg的抗原性在对外界抵抗力方面完全一致。二者在37℃活性能维持7天，在-20℃可保存20年，100℃加热10分钟可使HBV失去传染病，但仍可保持表面抗原活性。HBV对0.5%过氧乙酸、5%氯酸钠和3%漂白粉敏感，可用它们来消毒。
二、HBV的致病性与免疫性
1、传染源：病人和HBsAg携带者。
2、传播途径：（1）血液，极少量的血即可。接种0.00004ml含病毒的血液足以使人发生感染。
&&& &&&&&&&&&（2）母婴传播，1/3～1/2的HBV携带者经此途径传播。
&&&&&&&& &&&&（3）其它的：
3、致病机制：体液和细胞免疫的病理损害、其它的。
三、微生物学诊断
（一）乙肝抗原与抗体的检查法
　　目前已建立对HBsAg 、HBcAg 及HBeAg及其抗体系统的检测法。以放射免疫法及酶联免疫法及酶联免疫法最为敏感，其次为反向被动血凝及免疫粘附血凝法。免疫扩散与对流电泳法虽不甚敏感，但仍为我国广泛采用。三种抗原体系统中以检测HBsAg最为常用。
（二）检测乙肝抗原抗体的实际意义
检测乙肝抗原与抗体的实际用途
　　1．筛选供血员：通过检测HBsAg ，筛选去除HBsAg 阳性的供血者，可使输血后乙肝发生率大幅度降低。
　　2．可作为乙肝病人或携带者的特异性诊断。
　　3．对乙肝病人预后和转归提供参考。一般认为急性乙肝患者，如HBsAg持续2个月以上者，约2/3病例可转为慢性肝炎。HBeAg阳性者病后发展成为慢性肝炎和肝硬化的可能性较大。
　　4．研究乙肝的流行病学，了解各地人群对乙肝的感染情况。
　　5．判断人群对乙肝的免疫水平，了解注射疫苗后抗体阳转与效价升高情况等。
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