胰酶长时间服用抗生素需补充什么

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【求助】用胰酶消化贴壁细胞一般消化多长时间?
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这个帖子发布于10年零169天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
用胰酶消化贴壁细胞一般消化多长时间?:8)消化温度是多少?:O)可以放到培养箱里消化吗?:?)
谢谢各位指教
不知道邀请谁?试试他们
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第一个问题因细胞而异如成纤维细胞很好消化(一分钟),而上皮细胞对胰酶很赖受,要很长时间。消化温度一般室温,也不能太低,25以上吧,为了加快消化可以放在培养箱内,但是我们没有这样,就在室温,边消化边观察,细胞开始变圆,就终止了。放在培养箱里不方便观察。
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心肌细胞只要0.25的酶,2-3分钟即可,不用放入培养箱
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胰酶消化贴壁细胞一般消化3-4分钟,消化温度是37。可以放到培养箱里消化
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如果需时较长,放在培养箱里,否则没必要。
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根据细胞而定了,建议一边消化一边观察,我养的是VSMC,用的是胰酶和EDTA消化 ,室温下1-2分钟就可以了。
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我的骨髓干细胞消化的时候,有的细胞已经悬浮起来了,但还有很多却还是伸展的很开的,低倍镜下可以看到很须状物,吹打的时候很多细胞吹不下来,传代后又可以看到很多细胞碎片,细胞的密度也不高,不知道是不是吹打时间太长细胞都死了还是怎么回事,但是吹的时间不长细胞又下不来,不知道什么原因
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一般不超过3分钟,我养的HepG2曾创下13分钟消化记录.我是常规放孵箱的,没必要常常观察的.不过还是根据你养的细胞特性和胰酶活性决定.
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用胰酶消化时间一般根据细胞的不同而不同,有时还与细胞状态、胰酶配制的时间、温度有关,不能确定具体要多久时间。但同一种细胞、同样的条件下消化时间基本相同。
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我完全同意chenchunyuan 同仁的意见:用胰酶消化时间一般根据细胞的不同而不同,有时还与细胞状态、胰酶配制的时间、温度有关,不能确定具体要多久时间。但同一种细胞,培养时间长短不同时,消化时长也有异.边消化边观察,这点很重要.
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不同的细胞用胰酶 消化的时间不同,主要看贴壁的牢固程度,我养的神经杂交瘤细胞用百分之0.1即可。
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不同的细胞用胰酶 消化的时间不同,主要看贴壁的牢固程度,我养的神经杂交瘤细胞用百分之0.1即可。
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感觉不同的细胞所需时间不同,如我培养的巨噬细胞,要先洗两遍后再用胰酶-EDTA37°C消化5分钟才可以。
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胰酶消化主要还是分细胞而异的,一般的细胞都是37度消化3-5分钟,培养箱37度。你如果怕消化过了,可以隔一段时间显微镜观察,细胞如果变园了,就可以了。又很多细胞很难消化,比如上面提到的HepG2,我在消化的时候要先用无血清培养基洗一下,PBS洗一下,然后再用胰酶消化,实在不行有的时候还要用移液管反复吹打才能将细胞打散,很麻烦那
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这个凭经验,没有规定的时间呀,有些细胞就好消化而有的细胞就不好消化。
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细胞变圆就终止消化以后贴壁的细胞是否都能脱落下来?有的还成片脱落?
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我在消化细胞之前会用HANKS冲洗一下,然后根据养的细胞的性质加入胰酶-EDTA,就我自己的感觉,胰酶-EDTA混合液的消化效果好一些,我用过胰酶消化,同一种细胞,单纯用胰酶消化的话,相对时间要长些。
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还有我还有个疑问,请教一下各位,EDTA对细胞生长有影响吗?
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丁香园荣誉版主
erythrocyte2005 上皮细胞对胰酶很赖受,要很长时间。牛LEC用EDTA+胰酶消化时间挺长至少4-5分钟,但HLEC-B3仅用胰酶只要1-2分钟。都是上皮细胞。leileili1225 wrote:还有我还有个疑问,请教一下各位,EDTA对细胞生长有影响吗?EDTA有利于细胞分散,但会影响细胞的贴壁,离心可去除,不放心的话再用缓冲液洗一次。feifei125 wrote:细胞变圆就终止消化以后贴壁的细胞是否都能脱落下来?有的还成片脱落?可以,至少我养的LEC可以,轻轻吹打一下就能脱落下来,再反复吹打成单细胞悬液
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tcmihujun edited on
究竟加多少胰酶可以完全终止消化?
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加胰酶终止消化?
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feifei125 究竟加多少胰酶可以完全终止消化?写错了吧:D加含血清的培养液终止消化,一般加多少消化液就加多少含10%左右血清的培养液,或者只加一半的量,自己看着办,我是加一半的,省点,细胞状态不受影响就成嘛
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消化的时间要看你的胰酶的活性,一般是刚配的胰酶的话你消化的时间就很短了,如果是保存比较久了的时间就相对较长。一般第一次用新的胰酶你可以边观察,到全部变成圆的你就可以终止消化了,下次照这次的就可以了
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我想要一本NCI的书,可以帮忙吗
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丁香李立 我想要一本NCI的书,可以帮忙吗不要在这里求助电子书籍:P
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我的是一种良性肿瘤细胞 消化时候一般镜下观察看大部分都变圆 晃晃可以动了 就加入之前的培养基终止,大家有没有推荐的好的细胞培养书参考一下 谢谢!
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我认为细胞消化时间跟胰酶浓度、细胞状态及细胞种类有关,不同的细胞消化时间不同,需要慢慢摸索,像Hela细胞在同等条件下就比293细胞消化时间要长得多。
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关于丁香园>> >>服用胰酶肠溶片要完全治好消化不良需要吃多久?
服用胰酶肠溶片要完全治好消化不良需要吃多久?
病情描述:
药在附近药店就能买到,因此不怕断药,消化不良的毛病吃这个药多久能好?
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