EDC和edc nhs活化羧基步骤出现沉淀怎么办

【求助】【求助】关于EDC和NHS偶联羧基与氨基的困惑
最近做使用EDC和NHS偶联与蛋白氨基的实验,查了一些文献发现两者在用量和配比上都有不同,有些疑惑,求助各位高手!
1、在配好负载有羧基的样品溶液后,EDC和NHS哪种应该先加入呢?从反应原理上说,应该是EDC限于羧基反应,但是文献上有先加入NHS快速搅拌后再加入EDC的,不知道哪种正确
2、EDC和NHS的摩尔比是多少呢?有些文献上是EDC/NHS=1:2或2:5;有些是EDC/NHS=2:1或5:1
谢谢大家啊!
我做的是NHS先加后加缩合剂,比例是1:1.
这个反应是羧基要和NHS反应形成一个活泼酯,EDC是缩合剂。无论你按照那种操作都是没问题的,因为这个反应说实话真的很自由,就是一个一锅煮。至于量,则根据你底物是否易得以及考虑后处理是否方便来决定了。但是理论上讲是1分子EDC能缩合1分子羧酸及NHS的
我之前做的就是把edc和nhs一起加入的,然后比例是 EDC/NHS=2:1,但是效果不是很好,文献上说edc易水解,一定要比nhs过量?
EDC是缩合剂,相当于结合一分子水变成脲了。所以你的反应体系要尽量无水,EDC可以稍微过量一些,后处理的时候水洗一下就没了
我感觉加入顺序很关键,应该先加入edc,再加入nhs,加入的量也很关键,加的太多了,含羧基的物质会变成沉淀析出!!
请问楼主,您说的效果很不好怎么判定呢?学习一下。我想知道你是怎么判定微球活化的效果的,谢谢
加入EDC/NHS后,出现絮状物,羧基微球出现团聚?请教大家了,什么原因,有什么好的解决办法没?
交联了。。。
请问楼主,您做的氨基和羧基的反应,最后那个产物是怎么处理的?
科米网全国统一客户服务热线: 客户服务邮箱:活化羧基时EDC/NHS产生的活性酯是不是很容易消失 - 爱问知识人
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C/NHS产生的活性酯是不是很容易消失
C/NHS产生的活性酯是很容易消失 的
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活化羧基时EDC/NHS产生的活性酯是很容易消失 的
一个蛋白质分子中肽键数(脱去的水分子数)=氨基酸数 - 肽链条数。(前提是形成链状的蛋白质)
一个蛋白质分子中至少含有氨基数(或羧基数)=肽链条数
因为氨基酸的氨基及羧基缩合形成肽键,最后形成了蛋白质分子,反应式如下:
A-COOH+NH2-B=A-CO-NH-B +H2O。
最后在1条肽链的N端及C端各剩...
你好,1.特点:羧基上的羟基和醇羟基上的氢结合成水,余下的成脂2.酯化反应都不会完全进行到底,且有副产物。水是生成物,把水分出时破坏了该酯化反应的平衡,所以会生...
活化能是分子从常态转变为容易发生化学反应的活跃状态所需要的能量称为活化能。 (阿伦尼乌斯公式中的活化能区别于由动力学推导出来的活化能,又称阿伦尼乌斯活化能或经验...
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采用EDC,NHS活化羧基但是后面与氨基偶联的时候pH是多少呢?
采用EDC,NHS活化羧基的适宜pH范围是4-6,但是后面与氨基进行偶联的时候pH是多少合适呢?
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【求助】EDC、NHS问题,非常急,谢谢
问题1:做羧基和氨基的交联反应,使用EDC/NHS的时候,使羧基活化,应先回EDC还是先加NHS? 
问题2:想使硫辛酸上的羧基活化,但是硫辛酸只在偏碱的水溶液中溶解,而我查到EDC只在pH 4.7-6.0有活性,请问下这种情况如何使硫辛酸的羧基活化?
请问这个反应的条件是什么呀?谢谢!
直接将羧基化合物与氨基化合物溶解在一起(一般在水里哈),将过量的EDC(1000:1)加入反应体系,反正便宜,反应十到十五分钟,加入250:1的NHS,在反应几个小时就可以了,你如果怕反应不完就过夜吧。
我觉得哈,你就不能去查查文献么,老是在论坛上求助,再说自己的实验不一样,还是要摸索条件滴。
请问你买的EDC很便宜吗?在哪里买的,能提供一下信息吗?
普通的试剂代理商都有的,你就买这个就行了,Bio Basic Inc EB0433
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