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乙肝表面抗原弱阳性及少见模式的临床标本在2种检测法下的对比分析
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[摘要]& 目的& 探讨Els法检测五项结果中的HBsAg弱阳性结果和少见模式结果的真实性。方法& 从31200例乙肝五项Els法检测结果中筛出HBsAg弱阳性110例，少见模式结果132例，对筛出的242例标本再进行定量检测。结果& 110例HBsAg弱阳性结果用电化学发光检测，结果& 一致为90例, 符合率为81.8%。少见模式132例与电化学发光检测的符合率为10.6%，其中全部为HBsAg和HBsAb阳性。结论& Els法检测乙肝五项对HBsAg弱阳性结果报告要慎重。Els法灵敏度小于电化学发光检测，假阳性率大于电化学发光检测。HBsAg弱阳性结果中以HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性和HBsAg、HBcAb阳性标本占大多数。少见模式结果主要是HBsAg和HBsAb同时阳性的结果，且出现几率非常小。　　[关键词]& 乙肝；；电化学发光　　[Abstract]& Objective& To investigate the detection of hepatitis B Els five weak positive HBsAg results in the results and the results of the authenticity of rare models. Methods& From the 31200 cases of hepatitis B test results of five Els method to sieve out the HBsAg weakly positive in 110 cases, 132 cases of rare model results, on the screen out of the 242 specimens to conduct quantitative detection of electrochemiluminescence. Result& 110 cases of HBsAg weakly positive result electrochemical luminescence detection, the same as the 90 cases, compliance was 81.8%. 132 cases with unusual patterns consistent with electrochemiluminescence detection rate was 10.6%, of which all the HBsAg and HBsAb positive. Conclusion& Els detection of hepatitis B 5 pairs of weak positive HBsAg results report must be cautious. Els method has less than ECL detection, the false positive rate than light-emitting electrochemical detection. HBsAg weakly positive results in HBsAg, HBeAb, HBcAb positive and HBsAg, HBcAb positive samples in the majority. Rare model results are mainly positive for HBsAg and HBsAb the same time the results, and there is very little chance.　　[Key words]& hepatitis B; ELISA; electrochemiluminescence　　乙肝五项Els法(酶联免疫吸附试验)检测是各大医疗机构进行乙肝常用的检测方法，简单快捷，灵敏度和重复性好，而且价格便宜，适宜大批标本检测，但它也有不足。本文从我院31200份检测中筛出242份标本结合罗氏电化学发光定量法进行如下。　　1& 资料与方法　　1.1& 标本来源　　从我院日～日检测的门诊和住院以及体检标本中，筛出弱阳性结果和少见模式结果共计242例进行分析。其中弱阳性110例，少见模式132例。　　1.2& 仪器　　多功能自动酶标洗板机PW-960；Elx800酶标仪 37℃温箱；离心机；罗氏电化学发光仪E170。　　1.3& 试剂　　科华公司立可读乙肝检测试剂盒 ；罗氏电化学发光乙肝检测试剂盒。　　1.4& 方法与检测& 242例标本来源于我院日常检测工作。每天由具有检验技术资质人员，严格按实验的操作规程，认真完成。检验结果须由另外检验技术人员检查并签发报告。对有疑问结果，认真记录并留取标本与隔天进行定量检测并分析。　　2& 结果　　2.1& 酶联免疫吸附试验(Els法)　　HBsAg、HBsAb、HBeAg采用双抗体夹心法测定，严格按实验的操作规程，使用Elx800酶标仪读板。结果判断：样品OD值/阴性对照平均OD值≥2.1判断为阳性，否则为阴性。阴性对照OD值低于0.05以0.05计算，高于0.05按实际OD值计算。HBeAb、HBcAb采用竞争法测定，严格按实验的操作规程，Elx800酶标仪读板。结果判断：Cutoff Value计算，COV=(阴性对照平均OD值+阳性对照平均OD值)/2。样本OD值≥COV为阴性，样本OD值 ≤COV为阳性。　　罗氏电化学发光法：HBsAg阳性≥0.9COI、HBsAb阳性≥10IU/L、HBeAg阳性≥1COI、HBeAb、HBcAb阳性≤1COI。　　2.2& 31200例标本中共分离出弱阳性110例(Els法)　　HBsAg的OD值在0.115～0.315之间。用罗氏电化学发光法定量检测，HBsAg阳性90例，符合率为81.8%。110例HBsAg弱阳性结果(Els法)中，以HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性和HBsAg、HBcAb阳性标本占大多数，共83例。与罗氏电化学发光法定量检测的符合率分别为94.0%和81.2%。110例HBsAg弱阳性结果(Els法)中，单独测得HBsAg阳性的标本有25例，与罗氏电化学发光法定量检测的符合率为48.0%。另外有2例Els法测得HBsAg阴性而罗氏电化学发光法定量检测阳性的标本(见表1)。110例HBsAg弱阳性标本Els法和电化学发光法检测对比1的OD值在0.115～0.315之间。　　2.3& 31200例标本中共分离出少见模式共筛出132例& HBsAg和HBsAb同时阳性有95例，其中最多例数的是HBsAg、HBsAb、HBcAb阳性标本和HBsAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性，分别为32例和29例。与罗氏电化学发光法定量检测的符合率分别为21.9%和13.8%。HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb阳性标本和HBsAg、HBsAb阳性，分别为17例。HBeAg与HBeAb共同阳性9例。另外有1例HBsAb与HBeAg共同阳性，罗氏电化学发光法再检测也为阳性。后查实为免疫球蛋白患儿。其它少见模式未见相符。总符合率为10.6%(见表2)。132例少见模式的标本Els法和电化学发光法检测对比　　3& 讨论　　在乙肝检测中HBsAg的检测是重点，也是一个容易引发投诉的项目。由于价格成本和仪器设备等的，我国检测乙肝多用酶联免疫吸附试验(Els法)，这就导致检验中经常出现多种不好与病人和医生解释的结果。　　HBsAg主要以22nm的小球形颗粒形式存在，小球形颗粒由100个HBsAg单体组成[1]。每个单体由226个氨基酸残基构成，99～160位氨基酸构成了HBsAg主要亲水区(Major hydrophilic region， MHR)。由124～147位氨基酸构成特定空间构型的“a”决定族，是HBsAg刺激B细胞产生抗体与之结合的表位。所有血清型HBsAg 都有共同“a”决定族[2]。“a”决定族此区高度保守，目前人们公认“a”决定族是与HBsAb结合的关键性位点。此处个别氨基酸的变异足以改变其抗原性和免疫应答，导致HBsAg和HBsAb共存的少见模式出现。　　对HBsAg的定性检测我国已有多个厂家试剂，检测灵敏度多为0.5ng/ml。有资料显示目前国内主要8种试剂盒检测变异的HBsAg能力各不相同(18种变异)，总体漏检率为16.7%～44.4%[3]。HBV突变导致常规试剂检测A值降低[4]，是造成检测能力下降原因。我院110例弱阳性结果(Els法)再用罗氏电化学发光法定量检测，结果一致为90例,符合率为81.8%，罗氏电化学发光法定量试剂检测灵敏度为0.05ng/ml。得到81.8%的数据,与彭静等[5]的41份弱阳性标本用雅培试剂定量检测得到的79.59%数据相近。因此用定性试剂(Els法)检测HBsAg，出假阳性结果几率大于定量试剂(罗氏电化学发光法)。这与试剂本身质量和检验操作流程有关。　　大多数HBV感染血清中HBsAg含量在5ng/ml～600μg/ml之间，100μg/ml以上常同时检测出HBeAg。我院110例HBsAg弱阳性结果(Els法)中，以HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性和HBsAg、HBcAb阳性标本占大多数，共83例。与罗氏电化学发光法定量检测的符合率分别为94.0%和81.2%。110例HBsAg弱阳性结果(Els法)中，单独测得HBsAg阳性的标本有25例，与罗氏电化学发光法定量检测的符合率为48.0%。从数据可看出单独测得HBsAg阳性的标本(Els法)中有一半是假阳性。因此在目前的医疗环境下为病人单测一项HBsAg是非常不可取的。病人后，症状出现前6～8周可检测出HBsAg，症状初期HBsAg浓度最高。如果无出现，HBV感染后3～4月将检测不到HBsAg。如果6个月后HBsAg仍为阳性(占感染的5%～10%)，表明感染已转为慢性。相对于成人来讲，90%的会发展为慢性感染。所以婴幼儿早期接种乙肝疫苗是非常重要的。　　乙肝检测中HBsAb是感染后产生的保护性抗体。根据Robett koch协会疫苗标准委员会制定的标准，如HBsAb小于100IU/L，需要再次接种疫苗并需检测。我们检测到的132例(Els法)少见模式的标本中有95例HBsAg和HBsAb共同阳性标本，再用电化学发光法检测HBsAg和HBsAb，结果一致的有13例，符合率仅为13.6%，可以看出而HBsAg和HBsAb同时阳性的结果很少见。同时阳性可能的原因有：①人在乙肝病毒感染的恢复期。②HBsAg的携带者。③病人感染了两个不同亚型的乙肝病毒。　　在95例(Els法)HBsAg和HBsAb共同阳性标本中，例数最多的是HBsAg、HBsAb、HBcAb阳性标本和HBsAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性，分别为32例和29例。与罗氏电化学发光法定量检测的符合率分别为21.9%和13.8%。132例(Els法)少见模式的标本中其他模式标本与罗氏电化学发光法定量检测的符合率都非常低或未见相符。因此在酶联免疫吸附试验(Els法)检测乙肝五项的实验结果中，少见模式的阳性报告多为假阳性。为数不多的真阳性报告也以上面的2种模式多见。　　HBeAg是HBV复制的重要血清学指标之一，传统认为HBV感染者血清中HBeAg与HBeAb的血清学转换，提示HBV复制明显下降。但临床上10%～20%的HBeAg阴性患者仍然伴有高水平的乙肝病毒复制[6]。HBeAg是乙肝病毒复制及血清有强感染性的一个重要指标。在我们日常检测工作中由于对HBeAg和HBeAb有异议引起的患者投诉非常少，反而是临床医生多一些。这可能是在治疗过程中乙肝病毒发生前C区变异或Ｃ区变异，表达异常“HBeAg”，正常的HBeAg检测不到，表现为HBeAg阴性，HBV-DNA阳性。临床上称之为HBeAg阴性慢性乙型肝炎(e-CHB),而实际上病毒仍在复制，这种变异的病毒促使机体产生相应抗体，导致肝细胞损伤，病情进展[7]。HBsAg也处与高水平变动。定性检测表现为“小三阳”和忽高忽低ALT值及HBV-DNA始终阳性。　　在检测过程中(Els法)要时刻注意由于抗原抗体过量而引起的假阴性，即免疫学中的“勾带效应”。患者血清中如存在大量的大分免疫球蛋白如RF因子,也可引起假阳性结果。检测中HBeAg与HBsAg抗原量是一致的。得到正确的结果，需要操作者认真判读。HBeAg和HBeAb同时阳性未得到定量证实，如果在乙肝恢复期和慢性肝炎的病人血液中形成了免疫复合物，理论上是有可能测到的。HBcAg是非常强的免疫原，可持续存在数十年，故在我们检测时HBcAb的阳性率是很高的。对于HBcAb单独阳性结果，可能是HBV感染的窗口期或其它抗原抗体太少测不出，抗原抗体非特异结合也是常见的。　　参考文献　　[1]&Hsu H Y,Chang M H,Ni Y H,et al.Survey of hepatitis B surface variant infection in children 15 years after a nationwide vaccination programme in taivan[J].Gut,):.　　[2]&Seddigh-Tonekaboni S,Waters J A,Jeffers S,et al.Effect of variation in the common"a"determinant on the antigenicity of hepatitis B Surface antigen[J].Med virol,):113-121.　　[3]&田拥军,覃莉,刘慎沛,等.8种国产HbsAg试剂盒检测变异HBsAg的评价[J].临床检验杂志,):250-252.　　[4]&Coleman P F.Surveillance for hepatitis B surface antigen mutants[J].Med Virol,2006,78(suppl 1):56-57.　　[5]&彭静,管青,王斌,等.HbsAg检测结果弱反应的分析与处置[J].临床检验杂志,):284-285.　　[6]&李俊茜,庄辉,杜晰,等.乙型肝炎e抗原阴性慢性乙型肝炎和患者病毒基因型及丙氨酸氨基转移酶水平分析[J].中华肝病杂志,):491.　　[7]&Weber B.Diagnostic impact of the genetic variability of the hepatitis B virus surface antigen gene[J].J Med Virol,):59.
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乙肝表面抗体滴度是什么意思
健康咨询描述：
我们单位一年一度的体检又开始了，昨天开始的，今天报告出来了，我看了我的体检报告上写着乙肝表面抗体滴度有27.2，我完全弄不懂，问了医生，医生很忙，似乎也不是很耐心，所以我也没听懂，所以我特来咨询下我这个报告所代表的意思。
想得到怎样的帮助：我的检查报告上有乙肝表面抗体滴度，这是个什么意思？
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&&&&&&你好，一般乙肝表面抗体滴度是抗体的浓度和数量，乙肝病毒表面抗体在10以上则说明机体对乙肝病毒已经具有免疫功能。不需要再注射乙肝疫苗了。但由于检测试剂不同，检测敏感性也有差异。
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&&&&&&乙肝表面抗体滴度就是抗体的浓度和数量，滴度越高，抗体作用越强。只要滴度大于10，就说明你现在这时对乙肝是有免疫力的，这种情况下是不需要打乙肝疫苗的加强针的，而且这时也不会被传染到乙肝的，请您放心。
&&&&&&你好，乙肝表面抗体滴度就是抗体的浓度和数量，滴度越高，抗体作用越强。只要滴度大于10，就说明你现在这时对乙肝是有免疫力的，这种情况下是不需要打乙肝疫苗的加强针的，而且这时也不会被传染到乙肝的，祝您健康。
&&&&&&以上是对“乙肝表面抗体滴度是什么意思”这个问题的建议，希望对您有帮助，祝您健康！
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