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【求助】在材料上种细胞时使用的培养板问题
我现在做载体材料，要在孔板里放上载体以后种细胞，想买那种适合悬浮细胞培养的孔板，就是不想让细胞大量的贴在孔板底面，不知道各位同行有没有推荐的？网上的信息太多了，怕买了假的孔板
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【求助】三维细胞培养&[精华]
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FX-5000 可牵张应变三维细胞组织水凝胶支架培养系统 真正意义上的三维培养系统 在体外培养细胞组织、构建组织在结构上和功能上需要一些基本条件，如1）细胞2）矩阵3）培养基和生长因子和4）机械刺激。自然体内的细胞组织无时无刻不受到应力负荷刺激,在施加机械力刺激作用的同时进行三维细胞组织培养，更能真实模拟体内真实自然环境,研究出更真实的东西。所以可牵张应变三维细胞组织水凝胶支架培养系统是您进行三维培养的首选.系统功能及亮点：真正三维培养: 以立体三维基质水凝胶为支架，充分保障三维状态下的细胞组织水分、营养交换和细胞粘附能力.水凝胶支架在液态时包裹细胞，固态时形成交联网络，具有细胞粘附力强,良好水分、养分交换特性.因此水凝胶支架可以更好地模拟细胞生长所需的类组织样物理和空间结构， 并且可塑性高、制作工艺相对简单、临床应用方便。 由于胶原蛋白是人体内含量最丰富的蛋白(约占总蛋白25％)，是细胞外基质中最常见的蛋白质，胶原蛋白纤维上还有精氨酸一甘氨酸一天冬氨酸等氨基酸序列，可以为细胞表层整合蛋白所识别和贴附。 并且胶原蛋白本身是天然材料免疫排斥反应小，而且其交联过程不需其他化学试剂的引入，可自我交联形成凝胶三维支架，其生物相容性更为突出。因此，胶原水凝胶支架倍受人们的广泛关注。 自然体内的细胞组织无时无刻不受到应力负荷刺激,在施加机械力刺激作用的同时进行三维细胞组织培养，更能真实模拟体内真实自然环境,研究出更真实的东西。三维组织培养模具和三维细胞培养板类型丰富：使用三维组织培养模具和三维细胞培养板可进行三维细胞培养. 系统配套的三维培养板包被材料丰富： Flexcell三维系统培养板具有亲水氨基酸、胶原（I型或IV）、弹性蛋白、ProNectin（RGD）包被表面、层粘连蛋白（YIGSR）包被表面，细胞粘附能力强。科研者根据自己的细胞，有针对性的选择适合包被表面三维培养板.三维状态下细胞组织应力加载刺激培养：? 通过Flexcell应力加载传导控制器可对生长在三维环境下的细胞进行单轴向或者双轴向的静态或者周期性的应力加载实验.Flexcell应力加载传导控制器对生长在三维环境下的细胞进行单轴向或者双轴向的静态或者周期性的应力加载刺激培养，在体外，更逼真模拟体内自然环境癌细胞、肿瘤细胞生活环境。便于细胞形变研究和细胞生长动力学研究（肿瘤细胞、癌细胞往往形态发生变化）.动力模拟实验：可建立特制的各种模拟实验：心率模拟实验，步行模拟实验，跑动模拟实验和其他动力模拟实验.生物人工组织构建：可构建长度达35mm的生物人工组织观察细胞应力下实时反映：使用显微镜实时观察细胞在三维状态下的反应.细胞粘附能力强：多种基质蛋白包被的尼龙网锚可以加强细胞与网锚的结合.系统配套三维培养培养板:该系统组成部件包括：预装FlexSoft控制软件电脑控制系统FX5KTMTension FlexLink应力加载控制器Tissue Train 基板和四个密封垫片三维培养模具Arctangle Loading Posts弧矩形应力刺激加载模具4块Tissue Train 三维细胞培养板亚克力板，胶管，快拆接头，润滑油真空负压泵PR-4000稳压储压器
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大麻哈鱼同志，想看你那篇文献，上了你的邮箱，时间太久远了，56邮箱共享功能没有了能不能发到我邮箱里 多谢了！
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3D Cell Culturing with the Bio-Assembler3D磁悬浮细胞培养系统 三维细胞培养的新进展【摘要】
传统的二维细胞培养并不是细胞生长的天然状态，因而细胞的基因表达、信号转导和形态学都可能与天然有异。最近，美国莱斯大学和德克萨斯大学M.D. Anderson癌症中心研究人员阐明了一种更为简单的三维培养技术，文章发表在3月14日的《Nature Nanotechnology》上。
研究小组开发出一种生物装配器（bioassembler）。这个系统使用磁力让细胞悬浮，并促使细胞生长成三维的形状。悬浮过程是基于一种生物无机的水凝胶（hydrogel），这种水凝胶由三部分组成：噬菌体、磁性氧化铁和金纳米颗粒。研究小组使用的噬菌体是M13来源的，展示了RGD-4C配体肽段，以靶定金纳米颗粒和磁性氧化铁。这种基于磁性环的技术与所有标准的培养技术兼容，因此可推广到大部分实验室。
为了构建培养系统，研究人员在包含细胞的水凝胶中加入了纳米颗粒和噬菌体。由于噬菌体上表达了配体肽段，它就能靶定纳米颗粒。当噬菌体感染细胞，也就将纳米颗粒运输到细胞内。研究人员随后洗掉凝胶，在充满基质的Petri dish中接种含有纳米颗粒的细胞。一旦细胞装有纳米颗粒，它们就会对磁力有反应，研究人员在Petri dish的顶部安装磁力环。
为了评估这种技术下的细胞生长，研究人员在8天的时间内肉眼观察并定量监测了人胶质母细胞瘤细胞的形成率、大小和存活率。他们利用红色荧光蛋白来监测细胞。
24小时后，多细胞聚集物开始悬浮在液体中。在接下来的72小时到192小时，椭球体的最大直径达1mm。在检测了胶质母细胞瘤体外产生的蛋白后，研究人员发现三维培养表达了适当的蛋白，而对应的二维培养没有。他们认为，三维培养适合这些肿瘤的研究。而二维培养中蛋白的缺乏，表明它不是研究癌症的有效方法。
莱斯大学生物工程系的副教授Robert Raphael认为：“这种方法的美就在于它利用天然的细胞间相互作用来驱动三维结构的形成。此方法相当简单，任何对药物开发、干细胞或再生医学感兴趣的实验室都可以此作为三维细胞培养的起点。”
这种三维组织培养有望应用在疾病研究上。M.D. Anderson癌症中心的Wadih Arap教授表示：“对于癌症研究，磁场所产生的‘隐性支架’已经不再是单纯的细胞培养，而让它们更像真正的肿瘤。我们下一步将应用这种磁性来探索肿瘤成像和治疗上的应用。”
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美国flexcell 再生医学组织构建力学系统平台，可利用水凝胶、种子细胞构建和测试人工生物组织Tissue Train 组织工程体系介绍 体外培养在与真实组织在结构上和功能上相似的人工组织需要以下几个基本条件：（1）细胞（2）支架矩阵组织（3）培养基和生长因子（4）的机械刺激。这些条件彼此相互影响，并且相互之间共同来促进形成能够承受生物机械力的，且结构比较稳定的组织。而在人工组成形成的过程中，这些细胞按照发育途径形成具有一定几何形状的细胞外基质结构。其中一些信号转导途径参与了细胞外基质组合物的形成。这些途径中，有些是由细胞基质的机械变形调节，并通过膜结合蛋白，如整合素，粘着斑复合体，细胞粘附分子和离子通道传递到细胞内。这些途径中细胞还可以响应配体，如细胞基质形变所释放的细胞因子，激素或生长因子等。为了维持肌肉骨骼组织的完整性和强度，组织内细胞需要保持一定水平的内在应力。如果缺乏这种内在的应力，组织会缺少强度导致细胞结构的破坏或者组织的断裂。目前一般认为如果在固定四肢，卧床休息或在内在应力水平的降低的情况下，将导致骨中矿物质流失，骨组织萎缩，骨骼弱化，以及合成代谢活性的降低和分解代谢活性的增加。为了在体外培养与原生组织类似的人工组织，最重要的就是能够创建模拟体内条件的环境。细胞在具有机械运动作用的环境中培养，可以促进细胞的新陈代谢，并可以改变细胞的形状和其它性能。因此，在体外形成过程中建立和保持一个具备机械作用的环境（即张力，剪切力或压缩）就成为这一过程中至关重要的。除了具备机械作用的环境，在三维环境下培养细胞可以比静态二维培养法更好地模拟原生环境。组织基质的尺寸和形状也将直接影响组织内细胞的类型、大小、排列方向以及组织基质内生理作用力分布。组织内的组成也会取决于组织所受的作用力的类型。基于解剖学一些组织所处的位置，某些组织受到了拉伸力和压缩力，并且形成了多种组织成分。比如跟腱的中部（拉伸力存在）是由致密的纤维结缔组织组成，而肌腱压靠跟骨区域（其中压缩力存在）是由纤维软骨组织组成。组织的形状也与其所处具体位置所产生的功能或者功能的丧失相关。比如连接骨骼的跟腱位于跟骨交界处，而在这个位置上的跟腱也容易断裂，其原因就在于其厚度最小。因此，特别需要对组织的原生形状进行体外模拟，以研究其失效机理以及相关组织愈合机制。FLEXCELL的Tissue Train ?培养体系的开发，就是为了解决这一组织培养过程中的难题，这个培养体系通过为细胞和基质提供三维支架矩阵组织、动态的拉伸力和多种几何模型来创建不同形状的生物人工组织（如线性，梯形和圆形）。FLEXCELL的Tissue Train ?培养体系是一个独立的三维培养系统，它允许研究者在基质凝胶中创建用于细胞培养的三维几何形状，或使细胞构建自组装矩阵，连接到锚定器在Tissue Train ?培养板。 FLEXCELL目前拥有模具和/或板，用于创建三个不同形状的水凝胶：线性，梯形和圆形。该Tissue Train ?系统可用来自心脏，肌肉骨骼，皮肤，肺，胃肠道，骨髓和脂肪组织等的细胞创建生物人工构建体，（参见Flexcell文献库，看看研究人员目前如何使用该系统）。图1说明了使用Tissue Train?培养系统创建一个线性的生物人工组织（BAT）。 简言之，Tissue Train?培养板顶上设置一个槽式Loader?，使用施加真空的FX-5000?张力系统拉动培养板的柔性底橡胶膜向下进入线性槽。用移液管把细胞和凝胶基质悬浮液分注到两个锚之间的槽式茎。聚合后，真空经由锚释放和线性的水凝胶或生物人工组织，已经建立了附着到培养板上的茎在东部和西部极点。 图1:Tissue Train?培养系统创建生物人工组织 该FX-5000?张力系统提供研究者一个不断增长的生物人工组织的具有调控单轴或等双轴应力应变工具。用户可以在一个方案，定义了一个频率??，伸长率和应变的持续时间，模拟在体内天然组织的应变环境（见进一步的信息细胞的三维培养施加机械负载）另外，该细胞将自己重塑细胞外基质随着时间的推移（图2）。这个重塑的一个措施是胶压实随着时间的推移。 SCANFLEX?是一个自动化的图像采集系统，允许用户定期扫描放置在扫描仪床上物品。该SCANFLEX?软件控制的数字扫描仪，并允许用户次数和时间间隔进行编程时，数字扫描拍摄。当结合Tissue Train?培养板结合使用时，SCANFLEX?可用于确定在生物人工组织的面积的变化。此外，BAT的区域可以使用XyFlex?图像分析软件来测量。 XyFlex?软件允许用户自动测量BAT区域中的图像的一个大的序列。图2：生物人工组织胶压实矢量图像Flexcell三维细胞组织培养及测试系统（ Flexcell Tissue Train Culture System ）规格型号： FX-5000TT对生长在三维环境下的细胞进行单轴向或者双轴向的静态或者周期性的应力加载实验；使用立体凝胶支架（胶原水凝胶支架）三维组织培养模具和三维细胞培养板可以进行真正意义上三维细胞培养；构建长度达35mm的生物人工组织
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关于丁香园体外三维细胞培养术在组织工程中的运用_百度文库
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体外三维细胞培养术在组织工程中的运用
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flexercell三维细胞动态培养系统
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公司名称：世联博研（北京）科技有限公司
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立体三维基质水凝胶三维培养系统——真正意义上的三维培养系统 FLEXCELL 三维培养系统是个独立的、具有丰富的三维培养模具和多种蛋白、氨基包被材料的全自动细胞组织三维培养系统；该系统以立体水凝胶为三维培养支架，水凝胶支架在液态时包裹细胞，固态时形成交联网络，细胞粘附力强,良好水分、养分交换，充分保障三维状态下的细胞组织的水分交换、营养交换和废物排除能力， 是真正意义上的三维培养系统。 系统功能亮点：真正意义上的三维培养:以立体三维基质水凝胶为支架，充分保障三维状态下的细胞组织水分、营养交换和细胞粘附能力.注：水凝胶是一种状似果冻的物质，具有高弹性、吸水性的聚合物组成的网状物，用于细胞、组织工程中，作为帮助细胞生长和发展的支架,优于纳米纤维支架和多微孔支架:水凝胶支架同时还可以交联生物活性因子调节细胞的生长和分化，因此水凝胶支架可以更好地模拟细胞生长所需的类组织样物理和空间结构，并且可塑性高、制作工艺相对简单、临床应用方便。由于胶原蛋白是人体内含量最丰富的蛋白(约占总蛋白25％)，是细胞外基质中最常见的蛋白质，胶原蛋白纤维上还有精氨酸一甘氨酸一天冬氨酸等氨基酸序列，可以为细胞表层整合蛋白所识别和贴附。并且胶原蛋白本身是天然材料免疫排斥反应小，而且其交联过程不需其他化学试剂的引入，可自我交联形成凝胶三维支架，其生物相容性更为突出。因此，胶原水凝胶受到人们的广泛关注.水凝胶支架三维培养优越性：A)、多微孔支架：多微孔支架使用方便，但它的孔径(-1 O0 pm)远大于平均细胞直径(一10 pm)，因此实际相当于二维培养。B)纳米纤维支架：纳米纤维支架使用纤维状的细胞外基质蛋白更好地模拟了三维结构，但是它的力学性能很难达到使用要求。而水凝胶支架因在液态时包裹细胞，固态时形成交联网络，可使大量细胞分散黏附于其中，使移植细胞都能接触基质，这才相当于真正意义上的三维培养。而且胶原凝胶是含水凝胶，营养物可以自由进出凝胶网络，使分散于网络中的细胞都能得到营养，因此胶原水凝胶具有良好的亲水性及细胞相容性。除此之外，液态胶原易于添加各种生长因子，对细胞生长及分化起到重要作用。2.三维细胞培养模和三维培养类型具丰富：使用三维组织培养模具和三维细胞培养板可以进行三维细胞培养在凝胶支架里全自动三维培养3.适合长期的三维细胞培养：细胞在Tissue Train三维培养板中生长可以自行生成3D细胞外基质，这样的细胞球体与体内组织更为相似，也可以实现与其他类型的细胞共培养，如内皮细胞、基质细胞和上皮细胞等 4.三维培养支架表面包被材料丰富：具有氨基酸包被表面、胶原（I型或IV）包被表面、弹性蛋白包被表面、ProNectin（RGD）包被表面、层粘连蛋白（YIGSR）包被表面的三维培养板，以增强细胞粘附能力。科研者根据自己的细胞，有针对性的选择适合包被表面三维培养板， 常用细胞和包被材料选择总结如下：
5. 三维培养与应力刺激（形变）有机结合，实验研究成果更真实: ?可以在三维状态下仿真模拟体内的细胞组织时时刻刻都经受的力学环境，更能体现生物体细胞组织的真实生存生活状态极其本质，使实验研究成果更真实。 细胞力学研究重要性：一切生物生命都是由细胞组成的,细胞的形态结构及功能，细胞的生长、发育、成熟、增殖、衰老、凋亡、死亡及癌变以及通路表达，细胞信号传导及基因表达的调控，细胞的分化及其调控机理，都与细胞的力学特性有关,细胞组织力学不仅揭示正常生命机体生长、发育和衰老的机理和自然规律，而且对于阐明机体疾病的发病机理及提供诊断和治疗的基本原理，包括新型药物和新技术的研发， 都是具有极其重要的理论和现实意义.4.1)对生长在三维状态下的细胞、组织进行静态的或者周期性的应力刺激 4.2) 系统能对力加载的实验方案、加载周期、压力大小、加载频率、加载持续时间精确智能调控与定义 4.3）力的大小和加载频率类似体外细胞力的环境 4.4）细胞力加载波形种类丰富：静态波形、正旋波形、心动波形、三角波形、矩形以及各种特制波形
5. Flexcell特有的stageflexer显微附属设备，可以三维培养的同时使用标准正立式显微镜实时观察细胞在三维状态下的反应变化
6. 在细胞特异性基质中进行三维的细胞高密度培养 7. 可以三维状态构建长达35mm的人工生物组织，便于向未来组织工程研究向迈进 8. 基于培养板方式三维培养方式，简便易学，学习成本低 9. 国外应用文献达数百篇，国内使用刚刚开始,易于出研究成果和高分值paper10. 现成配套的水凝胶套件,使用方便
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德科学家成功在新三维结构材料中培养出细胞
[导读]德国研究人员近日成功在一种新的三维结构材料中培养出细胞,首次实现细胞粘附及细胞形状的三维精确控制。但所用材料所含孔径混杂，大小不一，由此很难从结构和生化角度对实验结果进行表征。
图中的红色盒状物为具有蛋白结合能力的支撑点，细棒及其连接的支柱均具有疏蛋白性德国卡尔斯鲁厄理工学院(KIT)的研究人员近日成功在一种新的三维结构材料中培养出细胞，从而首次实现细胞粘附及细胞形状的三维精确控制。研究报告发表在最新出版的《先进材料》上。目前，三维环境中的细胞培养所采用材料多是由琼脂糖、胶原纤维或基质胶制成，由此模拟出的真实三维环境也让细胞培养实验变得更加切实可行。不过所有这些材料都有一个特性：所含孔径混杂，大小不一。由此带来的一个后果是：很难从结构和生化角度对实验结果进行表征。在这项研究中，研究人员采用了一种具有疏蛋白(protein-repellent)性的柔性聚合物，并以一种可结合蛋白材料作为聚合物的盒状支撑点，通过激光直刻法(Direct Laser Writing Method)制作出一种特殊的聚合物支架。这种支架的疏蛋白结构由25微米高的支柱组成，各个支柱之间通过细棒连接，连接点高度不一，然后盒状支撑点被精确地放在细棒中间。当含有粘附蛋白的溶液浸入支架时，蛋白只会与盒状支撑点相结合，两小时内，个体细胞占满支架，且只粘附在特定位点。由此，通过改变支撑点和细棒的位置，可实现对细胞形状的三维控制。
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[责任编辑：alonliu]
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