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猪流感病毒的进化特点和流行状况.ppt64页
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猪流感病毒的进化特点和流感大流行
流感大流行
也称世界性大流行,是由于新亚型毒株的出现,人群普遍缺乏免疫力,因而传播迅速,流行广泛波及全世界,发病率高并有导致大量的死亡。世界性大流行常有2-3个波。一般说来，第一波持续时间短，发病率高，第二波则拖的时间长，发病率较低，有时还有第三波。在一般情况下，第一波主要发生在城市和交通方便的地方，第二波主要发生在农村交通不方便的地方。
流感大流行 第一次为年由猪型（H1N1）流感病毒引起的大流行，是流感流行史上最严重的一次，估计全球患病人数在5亿以上，发病率约20%-40%，死亡人数2-5千多万，超过第一次世界大战战亡总人数；第二次流感大流行由H2N2亚型毒株引起民，于1957年2月首发于我国贵州西部，3-4月发生全国大流行，5-6月波及日本和东南亚各国，8个月内席卷全球；第三次流行由H3N2亚型毒株引起，1968年7月中旬首发于我国香港特区（经追溯调查，我国内地即上海和广东地区比香港特区还早些些）；第四次流行由H1N1亚型毒株引起，1977年首发于我国东北地区，传播速度比前面任何一次都慢，半年后才到我国南方，约一年后才波及全球。
流感大流行 流感大流行出现的主要原因，就是出现新亚型流感病毒。由于人群对新的毒株普遍易感，人群缺乏免疫屏障，故一旦新亚型毒株完全适应人体，可实现人与人之间的方便传播，则具备了流感大流行的基本条件。 流感大流行 近年，世界卫生组织在流感监测与防控方面做了大量的工作，其出发点，主要是担心在沉寂数十年之后，流感大流行会再次发生。2005年始，人感染高致病性禽流感病例陆续出现，给流感大流行敲响了警钟。幸运的是，至今发现的人感染高致病性禽流
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鸭瘟病毒gh、k、ul24基因的克隆与病毒转移质粒的构建.pdf83页
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鸭瘟病毒gh、k、ul24基因的克隆与病毒转移质粒的构建
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伪狂犬病毒重组细小病毒vp2基因活载体疫苗株的研究.pdf125页
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伪狂犬病毒重组细小病毒vp2基因活载体疫苗株的研究
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中文摘要 本研究从四川某猪场流产死骀及本乃伊胎中分离了一株猪细小病毒，愈名为
髓并引起细胞痫变，细胞出现聚集、融食现象；分离毒能凝集2％的豚鼠红细胞，血
凝效徐可达21。，盘凝撺魏效徐可达2～；荧光挠体潦色在缨臆挟秘细胞质中均可见
特异性荧光，呈苹果绿色：电镜正染斌察病毒为无囊膜、球形、大4、约23nm的病毒
粒子。 NADL-2椽病毒麓最缀廖列设诗了一对包食焚结梅 辗据AriaI．Ranz等嘏遨的PPV kb的DNA
鬣白VP2基嚣的PCR引物，以复制型DNA为模板，遴过PCR扩增如长约2．0 VP2
片段，将其攒入克隆载体质粒pUCl9，构建了重组质誊妻pPVP2，测序显示PPV～SCl VP2基因在 圆保守性强，仅存在个剐钓差异：密娼予偏商牲分析结果表明，PPV―SCI NSl基阑在密 同一氨基酸的不同密码子的选择上存猩一定的偏向性，并且与PPV―SCI
避子鲍馕自?陵上兵鸯楣嗣蕊属性，主嚣偏离于使展以A结尾斡密弼子；氨基酸骧水往 分析表明，PPV-SCi 点存在较明照的亲水区段；跨膜区结构分析显示浚缀白不存在显蒋意义的跨膜区：分 以CMV牮蠲启动子控制的增强型绿色荧光蛋自 EGFP 基因作为报告基闲，将其 DNA为 及其pPI一2．EGFP多克隆能点的酶切位点，重新设计一对引物，以质粒pPVP2 模板扩增得到用于表达的PPV VP2基因后，将其插入转移载体质粒pPI一2．EGFP中， 稳建了含PPVVP2基瓣及其EGFP擐誊基因躲PRV基毽袋失表达载体质粒 DNA真核转染黯24h的荧光观察和转染液的ELISA pPI一2．EGFP．VP2，pPI一2。EGFP．VP2 检测结果表明同时表达PPVVP2基因和EGFP报告纂因的PRV基因缺失表达载体质粒 pPl一2．EGFP．VP2毒每建戒渤，菇进～步褥建PRV重缝PPVVP2基羧活鼗体瘼毒夔定了 基础。 髂覆粒pPI-2．EGFP。VP2 I酶
杂交筛选得到几株重组病毒，将
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我国j亚群禽白病病毒的流行病学调查和囊膜蛋白env基因的克隆及序列分析.pdf86页
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我国j亚群禽白病病毒的流行病学调查和囊膜蛋白env基因的克隆及序列分析
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山东农业太学硕士学位论文 200i 英文缩略表
AIjV：avianleukosisvirus Jofavian
virus leukosis
A1V．J：subgroup
env：envelopeprotein 85 protein
gp85：envelope
IFA：indirectfluorescenceantibodv aSsay 37
gp37：envelopeprotein
rTM：redundanttransmembrane segment
CEF：chickenfibroblast embryo chainreaction
PCR：polymerase leukosis
ML：myloid free
SPF：specificpathogen avianretrovirus
EAV：endogenous terminal
LTR：long repeat 张志：我国J亚群禽白血病病毒的流行病学调查和囊膜蛋白蚰v基因的克隆及序列分折 摘要 J亚群禽白血病病毒 AL、，．J 是90年代初期从肉用型鸡群中分离鉴定的新亚
型．不同品系的蛋鸡和肉鸡均可感染。肉鸡感染后主要引起髓样细胞癌，而蛋鸡
感染后一般不表现明显的病理变化和临床症状。本研究是对山东省内不同地区和
宁夏、河南等省份随机收集到的肉鸡和肉种鸡的病料进行了病理学检查和ALv．J 3’-UTR
的分离鉴定，并对分离株的基因组DNA 2．2kb片段进行了PCR、克隆和
测序分析． 结果发现92份商品代肉鸡病料和15份父母代种鸡病料中，有3l份病
料可以见到程度不同的肝脏肿大、脾脏肿大、心脏肿大，11份病料的肝脏、心脏、
脾脏、肾脏和睾丸等出现弥漫性、米粒大小的白色肿瘤，4份病料的肋骨长满白
色的肿瘤结节，取上述脏器的病变部位做组织切片，镜检发现，这些脏器的组织
之间均存在大量的髓样瘤细胞浸润，髓样瘤细胞的胞浆内充满嗜酸性颗粒．这是
典型的J亚型白血病的病理特征。商品代肉鸡的病科中有6份，父母代肉种鸡病料
中有5份观察到髓样瘤细胞，从、爱维因、科宝等品系的肉种鸡均可见到髓样瘤
细胞。 将病料分别进行处理后接种于9―11日龄SPF鸡胚制备的单层成纤维细胞，培
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鸭瘟病毒av121株ul24基因的克隆与原核表达.pdf44页
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鸭瘟病毒av121株ul24基因的克隆与原核表达
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青岛农业大学硕士学位论文 摘要 原核表达 摘要 将鸭瘟强毒AVl221株一百倍稀释，接种12日龄鸭胚绒毛尿囊腔，增殖病毒。根
定筛选出阳性克隆进行序列测定，用生物学软件将所测序列进行编辑，然后将其与弱毒
苷酸位点发生变异，氨基酸的同源性为99．8％，仅有一个核苷酸位点发生变异，与禽疱
疹病毒的亲缘性较近．上述结果表明，UL24基因在不同毒株间高度保守。 用生物学软件分析UL24蛋白的抗原性选取其中一段抗原性较好的区域，命名为
处出现了与预期大小相符的目的条带。对表达蛋白做可溶性分析，证实该蛋白主要以包
涵体形式存在。 关键词t鸭瘟病毒；UL24基因；PCR；原核表达 重鱼奎些查兰堡主堂堡笙奎 垫墨 and ofUL24 Expression CloningProkaryocyte ofDuck virusAVl221strain gene plague ABSTRACT Inthis of were and tothe dataof primersdesignedsynthesized study,twopairs accordingsequences UL-24andTK of inGenBanlcthese DNA herpesvirus
Using primers，allexpected long gene 414一bp UL24-TKandall DNA namedtruncatedUL24-25 namedtruncated expected1813-bplong product product were chainreaction thevirulence as amplifiedbypelymerase O,cR taking virus AVl221strain DNA doneto a DNA the nestedPCRwas showedDNA template．A amplifyspecific195bp product．It product the ofFUL24-TK．The werecloned ofFUL24-25was obtainedDNA flankingsequences sequences upper vectorto therecombinantvectorandthe
wastransformedintoE．coll into construct recombinant pMDl8一T recombinantcloneswcreselectedthe WasidentifiedPCRand
DH5a．The by positive Ampngarplate．It by showedthatthe fr-／lnleofUI．,-24
ofDPVAVl221strain result openreading gene
sequencing．The insizeandencoded409aminoacides．The ofnucleicacidesandaminoacids
wasl230-bp homology the thevaccinestrainsDPV
GenBankWere99．8
betweenvirulencevirus AVl221 main and reportedby and1 aminotideverified．
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