求教 哪位高手做过软琼脂克隆实验形成实验

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2017-01-12 14:36 标签： 软琼脂克隆形成
请高手指教悬浮细胞软琼脂克隆形成实验(软琼脂克隆形成实验,悬浮细胞) - 细胞实验 - 生物秀
标题: 请高手指教悬浮细胞软琼脂克隆形成实验(软琼脂克隆形成实验,悬浮细胞)
摘要: [请高手指教悬浮细胞软琼脂克隆形成实验(软琼脂克隆形成实验,悬浮细胞)] 我马上要做软琼脂克隆形成实验，请高手指教！ 关键词:[软琼脂克隆形成实验 悬浮细胞]……
我马上要做软琼脂克隆形成实验，请高手指教！
回复给你找了几个试验方法：1.双层软琼脂集落形成率实验　　于24 孔板中, 下层低熔点琼脂浓度为0. 5 % , 上层为0. 33 %,每孔上层低熔点琼脂含细胞数为2 000 个,每种细胞共铺5 孔。把培养板移入CO2 孵箱,在37 ℃、5 %CO2 及饱和湿度环境下培养2～3 周后下计数直径大于100μm或含50 个细胞以上的克隆,并计算克隆形成率(克隆形成数/ 接种细胞数×100 % = 克隆形成率) 。2.软琼脂克隆形成实验 将p27Kip1转染组、空载体转染组和未转染组细胞以每组600个细胞接种于60 mm含底层5 g/L琼脂糖和顶层3 g/L琼脂糖的软琼脂中;37℃培养箱中培养14下观察克隆形成情况.计算克隆形成率. 软琼脂克隆形成率=克隆数/接种细胞数×100% 对照组克隆数-实验组克隆数抑制率= ×100% 对照组克隆数3.软琼脂克隆形成实验　用去离子水配制7 g．L-1和12 g．L -1琼脂溶液，高温高压灭菌后，于45℃保温备用. 配制2×DMEM培养液，高温高压灭菌后45℃保温. 将2×DMEM与12 g．L-1溶液等体积混匀后，按1 mL/孔加入24孔培养板，4℃放置30 min使之凝固. 再将2×DMEM与7 g．L-1溶液等体积混匀，之后加入单细胞悬液并调整细胞终浓度为1×106个．L-1，此混悬液按每孔0.5 mL加入上述24孔板，铺平后室温放置使琼脂凝固，之后置于37℃，50 mL．L-1 CO2孵箱中培养2 wk，观察细胞克隆形成情况并计算克隆形成率. 同时设HO-8910为空白对照和8910-pc3为空载体对照.4.软琼脂克隆形成试验 细胞在 35 mm的平皿中长至 70％～80％铺满，然后与 20 μμmol· I-1的AS－ODN。共孵育4h，之后将细胞重悬于新鲜培养液配制 6mL· L-1的底层琼脂，lml／孔加入 24孔板中，调整细胞浓度并与 4 mL· L-1的琼脂混合，以每孔 0.5 mL中含 500个细胞加到底层琼脂上，置37℃培养 2Wk后计数克隆形成数克隆大于100个细胞着计数。回复thanks!回复我想问问，这个浓度的确定是要设定浓度梯度后，才可以寻找合适的细胞浓度吗？我也在尝试做这个试验，但是我不确定细胞的浓度到底是多少个，有的资料上是1000，有的是2000，麻烦赐教！！
相关热词：
..........
生物秀是目前国内最具影响力的生物医药门户网站之一，致力于IT技术和BT的跨界融合以及生物医药领域前沿技术和成功商业模式的传播。为生物医药领域研究人员和企业提供最具价值的行业资讯、专业技术、学术交流平台、会议会展、电子商务和求职招聘等一站式服务。
官方微信号：shengwuxiu
电话：021-京 东 价：
[定价：￥]
PLUS会员专享价
支　　持：
重　　量：
搭配赠品：
服务支持：
加载中，请稍候...
加载中，请稍候...
加载中，请稍候...
分子生物学实用实验技术
商品介绍加载中...
扫一扫，精彩好书免费看
京东商城向您保证所售商品均为正品行货，京东自营商品开具机打发票或电子发票。
凭质保证书及京东商城发票，可享受全国联保服务（奢侈品、钟表除外；奢侈品、钟表由京东联系保修，享受法定三包售后服务），与您亲临商场选购的商品享受相同的质量保证。京东商城还为您提供具有竞争力的商品价格和，请您放心购买！
注：因厂家会在没有任何提前通知的情况下更改产品包装、产地或者一些附件，本司不能确保客户收到的货物与商城图片、产地、附件说明完全一致。只能确保为原厂正货！并且保证与当时市场上同样主流新品一致。若本商城没有及时更新，请大家谅解！
权利声明：京东上的所有商品信息、客户评价、商品咨询、网友讨论等内容，是京东重要的经营资源，未经许可，禁止非法转载使用。
注：本站商品信息均来自于合作方，其真实性、准确性和合法性由信息拥有者（合作方）负责。本站不提供任何保证，并不承担任何法律责任。
印刷版次不同，印刷时间和版次以实物为准。
价格说明：
京东价：京东价为商品的销售价，是您最终决定是否购买商品的依据。
划线价：商品展示的划横线价格为参考价，该价格可能是品牌专柜标价、商品吊牌价或由品牌供应商提供的正品零售价（如厂商指导价、建议零售价等）或该商品在京东平台上曾经展示过的销售价；由于地区、时间的差异性和市场行情波动，品牌专柜标价、商品吊牌价等可能会与您购物时展示的不一致，该价格仅供您参考。
折扣：如无特殊说明，折扣指销售商在原价、或划线价（如品牌专柜标价、商品吊牌价、厂商指导价、厂商建议零售价）等某一价格基础上计算出的优惠比例或优惠金额；如有疑问，您可在购买前联系销售商进行咨询。
异常问题：商品促销信息以商品详情页“促销”栏中的信息为准；商品的具体售价以订单结算页价格为准；如您发现活动商品售价或促销信息有异常，建议购买前先联系销售商咨询。
加载中，请稍候...
加载中，请稍候...
加载中，请稍候...
加载中，请稍候...
加载中，请稍候...
加载中，请稍候...
加载中，请稍候...
浏览了该商品的用户还浏览了
加载中，请稍候...
联系供应商
七日畅销榜
新书热卖榜
iframe(src='///ns.html?id=GTM-T947SH', height='0', width='0', style='display: visibility:')相关资源推荐
作者其它资源推荐
软琼脂克隆形成实验.doc的用户评论当前位置：
&软琼脂克隆形成实验
软琼脂克隆形成实验
简介：软琼脂克隆形成实验主要用于非贴壁生长的细胞，这种方法主要用于细胞分化的基础研究等领域。本文档介绍了软琼脂克隆形成实验的实验原理、实验所需试剂、实验具体操作步骤以及实验中的一些注意事项。
大小：0.1M 所需积分：0点
提示信息_生物产品通
MySQL Query:SELECT company,linkurl,thumb,groupid,business from [pre]company where groupid=6 AND username='weijiali' LIMIT 0,1
MySQL Error:You have an error in your SQL check the manual that corresponds to your MariaDB server version for the right syntax to use near 'e groupid=6 AND username='weijiali' LIMIT 0,1' at line 1 MySQL Errno:0 Message:MySQL Query Error君，已阅读到文档的结尾了呢~~
软琼脂克隆形成试验[技巧]
扫扫二维码，随身浏览文档
手机或平板扫扫即可继续访问
软琼脂克隆形成试验[技巧]
举报该文档为侵权文档。
举报该文档含有违规或不良信息。
反馈该文档无法正常浏览。
举报该文档为重复文档。
推荐理由：
将文档分享至：
分享完整地址
文档地址：
粘贴到BBS或博客
flash地址：
支持嵌入FLASH地址的网站使用
html代码：
&embed src='/DocinViewer--144.swf' width='100%' height='600' type=application/x-shockwave-flash ALLOWFULLSCREEN='true' ALLOWSCRIPTACCESS='always'&&/embed&
450px*300px480px*400px650px*490px
支持嵌入HTML代码的网站使用
您的内容已经提交成功
您所提交的内容需要审核后才能发布，请您等待！
3秒自动关闭窗口

我要回帖

更多关于 软琼脂克隆形成 的文章

 

随机推荐