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【求助】细胞培养液隔天变混，轻轻一晃呈白色烟雾状，是细胞污染么？
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昨天我将6瓶细胞统一传代，都是同一瓶培养基、PBS和胰酶，昨天晚上看过细胞，细胞贴壁良好，今早再看细胞时，发现其中3瓶细胞培养液变浑浊，轻轻一晃，培养液呈白色烟雾状，镜下观察细胞，整体发现呈流沙状，细胞边界模糊，这是污染了么？污染的细胞培养基不是均匀的浑浊么？而这几瓶不晃时仍清澈，一晃白色呈烟雾状，继而浑浊，是什么原因呢？求解~同一时间传代的另外3瓶细胞生长良好
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应该是细菌污染，可以测一下PH，污染后一般会PH下降。结合显微图片就能进一步确定。希望能帮到你。
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是不是有很多黑点点,那应该是细菌污染了
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细胞污染了，我的最近也出现了这种情况，扔掉吧。他那浑浊的一片应该是细胞死掉的原因
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看到这个帖子还以为是我自己发的呢，哈哈。我细胞和你的情况一毛一样，我是短时间内很多瓶细胞都出现楼主说的情况，肉眼流沙样浑浊，低倍下黑色小颗粒。不知道是什么东西，后来就扔掉了。
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同意细菌污染，肉眼可见的混浊和流沙样物质……
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当然，如果想弄清楚，可以做个培养看看
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现在确定是污染了，低倍镜下看是有黑色的短杆状东西，仔细看还会动，这是细菌污染么？加双抗有用么？
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show-1989 现在确定是污染了，低倍镜下看是有黑色的短杆状东西，仔细看还会动，这是细菌污染么？加双抗有用么？依照你的描述应该是杆菌，你的细胞都已经浑浊成这样子了，加双抗效果不大了。
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谢谢各位战友……
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常规培养基里的双抗感觉就是心理作用啊，该污染的时候 还是会污染~
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典型的污染。速丢，免得污染蔓延。同时建议消毒下培养箱。
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小鱼279 常规培养基里的双抗感觉就是心理作用啊，该污染的时候 还是会污染~ 那是抑制剂量而已，如果错误太严重的时候一样会污染说白了，临床现在还不是有很多用了抗生素还无法抑制的感染？情节操作才是预防的根本，而不是双抗，我现在大部分细胞系都是不添加抗生素培养的（实验要求）用久了你会发现产生耐药菌株，然后大爆发。我之前从朋友那里弄来的一瓶细胞就是，常规剂量的双抗无法防治的污染，问了才知道他那里环境脏乱差，为了预防可能的感染，都是用的2x双抗，来我这1x的双抗自然扛不住
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的确是细胞污染了，可能是你的培养箱或者操作上的问题。另外看一下你的双抗和血清还有培养基是不是有菌呢？
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那是抑制剂量而已，如果错误太严重的时候一样会污染说白了，临床现在还不是有很多用了抗生素还无法抑制的感染？情节操作才是预防的根本，而不是双抗，我现在大部分细胞系都是不添加抗生素培养的（实验要求）用久了你会发现产生耐药菌株，然后大爆发。我之前从朋友那里弄来的一瓶细胞就是，常规剂量的双抗无法防治的污染，问了才知道他那里环境脏乱差，为了预防可能的感染，都是用的2x双抗，来我这1x的双抗自然扛不住 说的太对了，我们这细胞间条件还是比较好的，所以有些来做实验的研究生从来没养过细胞，操作不是很规范的，也从来没污染过，所以说环境很重要，我们是每天都有清理地面，每周都是大清扫消毒~ 简单说下我们细胞间，绝对不是显摆哈，有双层门，换鞋，手套口罩帽子，原代培养单独一个培养箱，每天都新洁尔灭拖地，每周一次彻底清理，包括操作台~做到这样，基本上不污染的，即使操作不是很好
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小鱼279 edited on
说的太对了，我们这细胞间条件还是比较好的，所以有些来做实验的研究生从来没养过细胞，操作不是很规范的，也从来没污染过，所以说环境很重要，我们是每天都有清理地面，每周都是大清扫消毒~ 简单说下我们细胞间，绝对不是显摆哈，有双层门，换鞋，手套口罩帽子，原代培养单独一个培养箱，每天都新洁尔灭拖地，每周一次彻底清理，包括操作台~做到这样，基本上不污染的，即使操作不是很好 太勤快了……我这跟你差不多，但地面清洁两周一次，一个月一次大清扫（彻底清洁，去污剂+消毒剂二次擦拭）太勤快的话对人员和细胞不是太好吧？特别是每周大清扫消毒（不知道你那边大清扫是如何，我这边是涵盖培养箱内二次擦拭的）
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momus2013 的确是细胞污染了，可能是你的培养箱或者操作上的问题。另外看一下你的双抗和血清还有培养基是不是有菌呢？ 我是没有加双抗培养的，血清和培养基后来验证过了，没有污染，培养箱其他人也在养细胞，貌似没有污染的情况。操作的话我想应该没问题，我养了一年多的细胞了，都没加双抗，之前细胞都很好，就最近很奇怪，之前另外3瓶没有污染的细胞，后来也陆续出现这种污染迹象，现在全丢了，但是还是没有找到污染原因
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说的太对了，我们这细胞间条件还是比较好的，所以有些来做实验的研究生从来没养过细胞，操作不是很规范的，也从来没污染过，所以说环境很重要，我们是每天都有清理地面，每周都是大清扫消毒~ 简单说下我们细胞间，绝对不是显摆哈，有双层门，换鞋，手套口罩帽子，原代培养单独一个培养箱，每天都新洁尔灭拖地，每周一次彻底清理，包括操作台~做到这样，基本上不污染的，即使操作不是很好 你们那好勤快，都是你们自己打扫的么？我们这组内人员比较多，人员有点杂，每个人好像都不高兴打扫，负责地面卫生的阿姨好像也比较偷闲，没怎么看过她来拖地
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我是没有加双抗培养的，血清和培养基后来验证过了，没有污染，培养箱其他人也在养细胞，貌似没有污染的情况。操作的话我想应该没问题，我养了一年多的细胞了，都没加双抗，之前细胞都很好，就最近很奇怪，之前另外3瓶没有污染的细胞，后来也陆续出现这种污染迹象，现在全丢了，但是还是没有找到污染原因 养细胞污染基本上都是操作时污染的，还是注意操作习惯吧。污染是概率性问题，再熟悉的人也不敢打包票自己不会污染，能做到的就是降低污染风险
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要不你就在培养基中加入双抗。或者查一下和你同期培养的人的细胞中又没污染的，
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这明显属细菌污染了
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楼主问题解决了么？最近我也遇到同样的问题，分离的淋巴细胞做成永生化，连续三次污染，其他细胞跟都没有问题
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楼主，你好！我养了一年多的原代细胞，从没污染。也是最近今天做的原代，隔天就污染，也是浑浊，泥沙状，跟楼主的很像。不知后来楼主是怎么好的？？一直老鼠接种三个孔，有时候两个孔污染，有时候一个，有时候都污染了，不知道源头在哪里？怎么消灭掉呢？
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show-1989 momus2013 的确是细胞污染了，可能是你的培养箱或者操作上的问题。另外看一下你的双抗和血清还有培养基是不是有菌呢？ 我是没有加双抗培养的，血清和培养基后来验证过了，没有污染，培养箱其他人也在养细胞，貌似没有污染的情况。操作的话我想应该没问题，我养了一年多的细胞了，都没加双抗，之前细胞都很好，就最近很奇怪，之前另外3瓶没有污染的细胞，后来也陆续出现这种污染迹象，现在全丢了，但是还是没有找到污染原因楼主，你好，我最近出现了和你同样的情况，请问你找出原因了么？急求答案。快被折磨疯了。
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xujuan 楼主，你好！我养了一年多的原代细胞，从没污染。也是最近今天做的原代，隔天就污染，也是浑浊，泥沙状，跟楼主的很像。不知后来楼主是怎么好的？？一直老鼠接种三个孔，有时候两个孔污染，有时候一个，有时候都污染了，不知道源头在哪里？怎么消灭掉呢？同学你好，我之前养原代也出现了和你同样的情况，请问你找出原因了么？我一直没找到原因，现在都不敢养原代了。
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我的231细胞出现培养基模糊，液体是均匀的浑浊，不知道是细胞长得太快还是什么原因，同一个培养基，其他细胞养了没事，不知道这种细胞怎么了。两天后就成浑浊，也没有明显的大颗粒状的东西，细胞形态还行，贴壁也可以，边缘也没有很明显的模糊，就是液体浑浊。
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细胞培养液里的小东西是什么，是污染了吗？
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我用红色圈起来几个，在显微镜下观察是很小的黑色东西，静止不动的时候可以看到这个东西在抖动。刚开始不会影响细胞的贴壁和生长，随着细胞长起来，它也会慢慢变多，培养基不会变黄变浑浊。用PBS洗后不能完全去除，也会一点点多起来。传代也无法去除，而且接板做MTT后OD值高达3以上，怀疑是不是细菌。请大家帮我看看这到底是不是污染是什么东西？很着急，谢谢！
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各位高手帮忙看看啊！
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有可能是细胞碎片。如果是污染的话，有可能是血清的问题，你用的血清是什么样的
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楼主照片拿什么拍摄的，看不太清楚~~不过，我在做CHO细胞悬浮培养的时候有碰到类似小黑点，会浮动~有点类似球菌、但也比较像细胞碎片~有同事讲是 “黑胶虫”？菌株构建的时候掺入的，有时候会随着培养的进行消退，有时候一直都还在~期待话题进一步进行~
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01晓红帽 有可能是细胞碎片。如果是污染的话，有可能是血清的问题，你用的血清是什么样的血清是BI的。
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yt 楼主照片拿什么拍摄的，看不太清楚~~不过，我在做CHO细胞悬浮培养的时候有碰到类似小黑点，会浮动~有点类似球菌、但也比较像细胞碎片~有同事讲是 “黑胶虫”？菌株构建的时候掺入的，有时候会随着培养的进行消退，有时候一直都还在~期待话题进一步进行~手机照的，不清楚哈。细胞碎片会自己动吗？还有如果是球菌或者黑胶虫的话培养箱里的其他细胞会不会被污染？
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01晓红帽 有可能是细胞碎片。如果是污染的话，有可能是血清的问题，你用的血清是什么样的细胞碎片应该不会自己动吧？如果是血清的问题，是不是应该过滤一下血清呢？
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黑胶虫会做布朗运动，可能是
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参考这个链接看看，建议可以买一些市面上的去支原体试剂盒试试，我们之前也出现过类似的，用了那个试剂才好的
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懒羊羊要当学霸 黑胶虫会做布朗运动，可能是我也怀疑是这个
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参考这个链接看看，建议可以买一些市面上的去支原体试剂盒试试，我们之前也出现过类似的，用了那个试剂才好的好的谢谢你
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worldnews 01晓红帽 有可能是细胞碎片。如果是污染的话，有可能是血清的问题，你用的血清是什么样的细胞碎片应该不会自己动吧？如果是血清的问题，是不是应该过滤一下血清呢？血清怎么过滤，过滤了里面的蛋白就没有了。
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关于丁香园求助，请教大家一个细胞培养的问题！ - 本科教育与基础医学版 - 爱爱医医学论坛
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求助，请教大家一个细胞培养的问题！
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才可以下载或查看，没有帐号？
我养的是A549细胞（肺癌细胞），用的是1640+10％小牛血清培养基（以前师姐是这么用的，没有问题）
发现我的细胞生长比较慢。但是培养基颜色确变的很快！在细胞没有长满的情况下，一天就由红色变为黄色了（颜色比较深！）书上说应该是淡黄色的！而且应该是细胞较多的情况下才应该变色这么快吧？
请问这是什么原因？
是否是培养基配置的时候污染？准备用培养瓶单独装4ml放在培养箱里面试试！看
它是否变色！
请问污染还会有什么表现？镜下呢？
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微生物污染主要包括：真菌、细菌、病毒、支原体等
污染的检测首先是肉眼观察。
细菌大量繁殖时，培养基迅速变黄、变浑浊。镜下观察可见球状、杆状的菌体，体积比细胞小许多。
真菌污染时，若是霉菌课件灰色或白色菌落漂浮在培养基之上，镜下观察可见纵横交错的菌丝体；若是酵母菌污染，可见白色混浊物，镜下观察呈椭圆形，成串、出芽，体积比细菌大。
支原体污染肉眼难以观察，可从几个方面判断：1、Giemsa或地衣红染色可见细胞间颗粒状着色，同时细胞收缩，间隙加大。2、将培养基上清液接种于牛心肌浸出液琼脂培养基上可形成“煎荷包蛋”样菌落。3、电镜下支原体具有三层结构外膜，内部有细微分枝状染色质和较多的核糖核蛋白体。4、特异性酶比色法。
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培养基变黄比较快
但是木有见到明显混浊……
请问个设是怎么回事？
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支原体可能性大，人的呼气中容易带有支原体。
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