小鼠脾淋巴细胞培养养十干扰系(a)32小鼠脾淋巴细胞培养养十干扰素(b)28正常吗?

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2017-02-20 01:58 标签： 淋巴细胞干扰素
百度拇指医生
&&&普通咨询
您的网络环境存在异常，
请输入验证码
验证码输入错误，请重新输入（一）外周血细胞分离&（二）淋巴器官中淋巴细胞的分离&
（三）人脐带血细胞分离培养&（四）巨噬细胞分离培养
以前认为红细胞、粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞等血细胞都属终末分化细胞，很难在体外培养生长或仅能短期培养而不能传代，近年来由于细胞培养技术的发展，已有血细胞培养成功的报道，正常血细胞在体外培养生长时间短，只有白血病细胞，血友病细胞、淋巴瘤细胞可培养成功并建立细胞系，但多半为EB病毒等致瘤病毒引起的转化细胞，（EBNA检查阳性），二甲基亚砜（DMSO）处理也可诱导这些细胞分化发生逆转，表现为正常细胞。所建立的细胞系多半为单核细胞系、B淋巴细胞系、T淋巴细胞系，只在IL-2产品问世后，T细胞才可在体外建系、建株。
血细胞可从外周血中用梯度液通过离心分层后分离获得。也可从脾脏、扁桃体、淋巴结中用机械法切碎过筛分离获得淋巴细胞，从腹腔刺激后的冲洗液中可获得大量的单核-巨噬细胞，从骨髓中可以获得前提血细胞，并可长期培养生长。加入或某些物质有利于细胞纯化并促进分化和生长繁殖，例如在淋巴细胞中加入IL-2（TCGF），可促进T细胞生长，建立T淋巴细胞系。在多发性骨髓瘤细胞（B细胞）培养中，加B细胞，可建立B细胞系；加入IL-6（或正常淋巴细胞培养48h的培养上清中的IL6）可使B细胞在体外长期培养，建立了IL-6依赖的B9细胞系。在骨髓单个核细胞培养中加入二羟基D3,可使单个核细胞分化为成骨细胞及破骨细胞。
（一）外周血细胞分离：
外周血中除红细胞外，还有粒细胞、单核细胞和淋巴细胞及血小板等，通常是分离这些血细胞的重要来源。其分离方法有四种：自然沉降法、差异沉降法、氯化铵分离法、Ficoll分离法。
1、自然沉降法：
将无菌抗凝血放入中，在37℃中静置，自然沉降1-2h，可见到红细胞下沉，并有明显分层，上层血浆中富含有大量的 和淋巴细胞，下层主要为红细胞。此方法简便但各层中的细胞种类多，不纯。血浆中虽以粒细胞、淋巴细胞为主，但也含有血小板，大单核细胞和少量红细胞。下层虽以红细胞为主，但也有上述各种细胞，此法适用于淋巴细胞转化试验。
2、差异沉降法：
用6%的右旋糖酐或3%的明胶溶液无菌消毒后，分装于中中，由于这些物质能使红细胞形成&串状&，比粒细胞、淋巴细胞沉降速度快，因而可使红细胞与白细胞、淋巴细胞分离开。其方法如下：用6%的右旋糖酐溶液5-10ml，经抗凝血5ml加入上层中混合后静置于37℃中30-60min，即可见红细胞下沉，上层富含大量粒细胞和淋巴细胞，下层为红细胞，使两者易于分离开，取上层可用于粒细胞、淋巴细胞培养和实验，下层可用于红细胞培养和实验，经PBS洗3次后即可加入培养基培养，可用于天然白细胞干扰素的诱生和生产。此法分离的细胞纯度也不高。
3、氯化铵分离法：
0.83%氯化铵（NH4CL）可使红细胞破裂，通常将分离获得的粒细胞。淋巴细胞中混有的少量的红细胞用0.83%氯化铵进行裂解，以排除红细胞的干扰。另外，此法也适合大量粒细胞、淋巴细胞的分离制备，在天然白细胞干扰素诱生和生产中已被广泛应用。方法如下：
将中心血站供应的健康人外周血离心分离白细胞黄层悬液先经2000r/min离心20min，吸出上清血浆，将下层的红细胞、白细胞混合后，加入0.83氯化铵，用量为血细胞悬液液量的3倍，于4℃作用20min后离心弃去上清。
在沉淀层中再加入新鲜0.83氯化铵混匀后于4℃作用20min，以便彻底清除红细胞，离心弃上清。
收货下层的细胞用PBS洗3次后，再用含5%人AB型的（含100U/ml卡拉霉素）培养基制成悬液，调整细胞浓度为（8-10）x10^9个/L，分瓶加塞在37℃普通培养箱中旋转培养（12r/h）。
混悬细胞时若加入干扰素诱导剂（NDV-F）诱导22h，收货上清就可生产白细胞干扰素。此法分离的细胞纯度更差。
4、Ficoll分离法：
采用Ficoll和泛影葡胺配制而成的淋巴细胞分离液，通过2000r/min离心后可使血细胞以不同相对密度分离开，如分离淋巴细胞可选用相对密度1.077的分离液；若分离血小板可用相对密度1.090的分离液，若分离骨髓中的单核细胞常用相对密度1.120的分离液，现以淋巴细胞分离为例，方法如下。
取中心血站供应的抗凝血细胞或初步分离的白细胞黄层细胞悬液，用无钙、镁离子的PBS稀释3-4倍。
将Ficoll淋巴细胞分离液事先分装于中，使其沉于管底，并在37℃中预热。
用将经稀释的血细胞悬液沿壁缓慢加入，不让细胞悬液冲破分层液界面，使其悬于分层液上方。
以2000r/min离心20min后，不同细胞可依相对密度不同而分布于各位置上，由于红细胞在Ficoll作用下成串下沉，故在离心管中分布在Ficoll层下方，淋巴细胞分布在Ficoll层上方。
技术频道 - 生物实验技术资料库！
细胞实验技术交流论坛：
最新发布产品
<input type="hidden" name="content" value=" " />
最新图片文章
Copyright &
易生物VIP企业推荐淋巴细胞培养+干扰素（A+B)检测结果
淋巴细胞培养+干扰素（A+B)检测结果
基本信息：男&&43岁
发病时间：不清楚
病情描述及疑问：淋巴细胞培养+干扰素（A+B)检测结果为0，请问这对这对肺结核有参考价值吗？另外三次痰荧光法抗酸染色检验结果为：前两次均为阴性，第三次为阳性（++）且第三次还同时用了萋尼法抗酸染色也为阳性（++）； 血沉，超敏C反应蛋白检测结果，血液化验都正常；
现无肺结核症状（即无低烧、咳嗽，体重减轻等）；
CT报告有条状阴影（陈旧性）。
您输入的回答少于20个中文字，请补充输入。
擅长：擅长消化、心血管内科疾病的治疗。
网友满意：
回答速度：
四川省二级综合性医院&&&内科
分析：该情况可以考虑是肺结核
痰检发现有结核杆菌是诊断肺结核的金标准，所以发同有阳性就要考虑有肺结核存在的，这需要考虑进行抗结核治疗。
有关的更多问题，
有关的健康经验
与 有关的更多经验，
疾病百科（别名：肺结核病,结核病,结核,肺痨）（别名：肺结核病,结核病,结核,肺痨）　　结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，可侵及许多脏器，以肺部受累形成肺结核pulrnonary tuberculosis)最为常见。排菌患者为其重要的传染源。人...　　结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，可侵及许多脏器，以肺部受累形成肺结核pulrnonary tuberculosis)最为常见。排菌患者为其重要的传染源。人体感染结核菌后不一定发病，当抵抗力降低或细胞介导的变态反应增高时，才可能引起临床发病。本病的基本病理特征为渗出、干酪样坏死及其他增殖性组织反应，可形成空洞。若能及时诊断，并予合理治疗，大多可获临床痊愈。肺结核外科治疗最常用的手术方法仍是肺切除术，它是消灭慢性传染病源，预防复发和治疗各种严重并发症的有效手段。就诊科室：呼吸内科 中医科典型症状： 多发人群：所有人群检查方法： 发病部位：肺疾病自测：常用药品：
广东省中医院&&&儿科
南方医院&&&内科_呼吸内科
为保障患者权益，我们仅接受有资质的医学专业人士的回答，请您先认证为医生
十万名医在线答疑，千万网友问诊经验分享
5分钟回复，10万医生，免费在线咨询不是说这个是阴性就可以排出结合么
不一定是肺结核啊
医生那做什么可以排除结核
肺结核的检查是需要结合胸片，以及痰培养的，再就是结合结核菌素实验检测才可以的
医生 那胸部ct可以排出什么
为什那个医生只让拍ct
说这个就可以什么都看出来了.
就是看看有无积液以及肿块
还有想问下医生 排除结核需要做什么检查
不只是肺结核
需要结合胸片，以及痰培养的，再就是结合结核菌素实验检测才可以的
那ct正常是不是就可以排除肺结核了么
那医生为什么说只拍 ct就可以了呢
ct不能排除肺结核
相似问答推荐
挂号科室血液科
哪些症状食欲异常、淋巴结肿大、局部淋巴结肿大
检查项目血浆铜蓝蛋白、血清锌、乳酸脱氢酶
并发疾病食欲异常、淋巴结肿大、局部淋巴结肿大
常用药物今幸胶囊、泊瑞胶囊、六甲蜜胺
相关医院根据不同医院，收费标准不一致，市三甲医院约（3000 —— 5000元）
您可能关注的推广
护士家园推荐文章
猜您可能关注的疾病
Copyright & 2011　　
提示：本网站旨在提供医患咨询互动服务，信息仅供参考，不能作为诊断及医疗的依据，医生门诊时间也请最终以医院当日公布为准。
网友、医生言论仅代表其个人观点，不代表本站同意其说法，请谨慎参阅，本站不承担由此引起的法律责任。

我要回帖

更多关于 淋巴细胞干扰素 的文章

 

随机推荐