如何设置阴性阳性对照和阳性对照

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  生物抓重点开始了!绍兴鲁迅高级中学韩丽琴老师要和我们分享的是生物选考实验题中阳性对照的设计方法。
生物达人们,开始学习吧!
  浙江新高考生物选考试题第33题,基本确定为实验设计题,根据考试说明中对“实验与探究能力”的考查要求,试题内容基本包括确定实验目的、分析实验原理、提出完整的实验思路、表达和分析实验结果等,在历次考试中,该题一直是区分度最高的试题之一。
  阳性对照和阴性对照
  对照性原则是实验设计需要遵循的最基本原则之一,其中,对照组的设定是关键,一般对“对照组”的定义是:实验中不加入任何研究因素的对象组。由于多数对照实验中“不加入任何研究因素”的对象就处于自然状态,所以很多学生想当然地认为:处于正常或自然状态的对象组就是对照组――浙江省迄今为止进行的三次选考也恰好印证了这一点。
  实际上,处于正常或自然状态的对象组,只是实验中不产生任何实验现象的“空白对照”,通常情况下,空白对照即阴性对照,而很多实验目的的实现,除了阴性对照外,还必须设置阳性对照。
  “阴阳对照”是针对预期结果而言的。实验中肯定会出现某种不同于自然状态的预期结果的,称为阳性对照,肯定不会出现该预期结果的,即为阴性对照。一般的药理学实验(如疗效试验、毒性试验、致畸性试验)或者是探究某种试剂对某一变量的“作用效果”时,都需要同时设置阴性对照和阳性对照。
  阳性对照的作用及设置方法
  2.1 保留具有阳性反应的实验对象,作为实验组“消除阳性反应效果”的参照。
  如:探究某种新药X对高血压大鼠的治疗效果实验,除设置正常大鼠组为阴性对照外,还需要用药物制备高血压大鼠,待其血压升高并相对稳定后形成高血压模型组,再将其分为两组,一组作为实验组,一组作为阳性对照组,用适量新药X处理实验组后,将实验组平均血压分别与阴性对照组和阳性对照组比较,以判定新药X的降血压效果。
  2.2 用已知效果的试剂给出有效干预的标准,判断实验新试剂的有效性水平。
  如:为研究降血压新药X的开发价值,往往需要将新药X的作用效果与已知疗效的常用药物(如心得安)进行比较。实验时可设置一组高血压模型大鼠使用适量心得安处理,作为阳性对照。
  2.3 药物毒性和致畸性试验,利用阳性对照组作为“致畸模型”。
  在判断某种药物是否适合孕妇和婴儿使用时,必须进行致畸性试验。实验中需要用致畸性已知的同类型药物制作“致畸模型”。如镇痛、抗炎、抗风湿类药物,往往使用阿司匹林作为致畸阳性对照试剂处理阳性对照组。
  阳性对照在实验设计题中的应用实例
  例1.家鸡感染某种鸡瘟病毒两天后开始逐渐发病死亡,约一周内全部死亡,研究发现注射某种多肽P可有效预防鸡瘟发生,请设计实验验证多肽P的作用。
  (要求与说明:实验各种处理手段的具体操作不做要求)
  材料:正常且相近生理状态的鸡若干只、某种鸡瘟病毒、多肽P制剂、注射器等
  请回答:
  1)实验思路
  ①……
  (2)预测实验结果(设计一个坐标系,并绘制各组鸡的存活率随时间变化的曲线图)
  【解析】本实验的目的是验证多肽P对鸡瘟病的预防作用。根据题意,以是否预先接种多肽P为自变量,以感染后一段时间内实验鸡的存活率为因变量。为了排除无关变量对实验结果的干扰,需要设置正常且不感染鸡瘟病毒的对象组作为空白对照;为了对实验组的预防效果进行量化,同时还需要设置感染鸡瘟病毒且不进行预防接种的阳性反应组作为阳性对照。
  【设计方案】
  (1) ① 将正常且相近生理状态的鸡若干只,随机平均分为3组,编号为A、B、C组。
  ② A组:先提前适当的时间接种多肽P,再注射适量等量的某种鸡瘟病毒。
  B组:与A组同时注射适量等量的某种鸡瘟病毒;
  C组:不做任何处理,作为空白对照;
  ③ 各组鸡在相同且适宜条件下隔离饲养,每天观察鸡的存活情况并记录,及时清除死亡个体。
  ④统计各组的存活率,进行数据分析。
  (2) 多肽P对某种鸡瘟病的预防效果:
  例2.某植物提取液X(注射剂)具有降低血糖的作用。为探究提取液X对治疗糖尿病的效果,并与药用胰岛素进行疗效比较以确定其开发价值,请利用以下材料完成实验设计:
  (一)材料与药剂:生理状况相同的健康实验大鼠40只,植物提取液X、生理盐水、链脲佐菌素溶液(可破坏胰岛β细胞),药用胰岛素制剂,血糖测定仪等。
  (二)实验思路:
  (1)实验思路
  ①……
  (三)结果与分析(略)。
  【解析】本实验的目的是探究植物提取液X降血糖效果,并与已知疗效的经典药物胰岛素制剂进行比较,以确定新药的具体应用价值,所以将X制剂处理组分别与糖尿病阳性反应组和胰岛素消除反应组进行对照,这两个对照组都属于阳性对照组;另须设置正常大鼠作为空白对照(阴性对照),即应将实验大鼠均分成四组:一个实验组,三个对照组。
  【设计方案】
  ①将40只实验大鼠随机均分为4组,编号为A、B、C、D,给A、B、C组每只大鼠注射等量的链脲佐菌素溶液,制备成患糖尿病的大鼠。
  ②A组大鼠每天定时注射等量适量植物提取液X,B组同时注射适量胰岛素,C、D组注射等量生理盐水,四组在相同适宜条件下饲养。
  ③一段时间后,用血糖测定仪测定各组大鼠的血糖浓度,并求平均值。
  ④进行数据统计和分析。
  阳性对照的设置有利于对实验试剂的作用效果进行量化分析,证明实验试剂的有效性和灵敏度;在医学试验中,可以为新药开发和新疗法推广提供实践依据和价值评估。面对“培养学生创新意识和创造力”的新课程理念指导下的浙江新高考,学生必须具备这种科学严谨的理论设计能力。
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negative contrast and positive
阴性对照和阳性对照
基于1个网页-
提供了进行检测所需的一切,包括阳性和阴性对照。
Everything required to perform the test is supplied, including positive and negative controls.
为了预测淋巴结是否有转移,研究者使用了一种蛋白条带来鉴定肿瘤阴性和阳性对照之间的差异显著性。
To predict lymph node metastasis, the investigators used a ProteinChip?to identify biomarkers that distinguished between the tumor profile with paired positive and negative nodes.
彗星实验CASP图像分析结果显示,各试验组与阴性和阳性对照组都有显著差异性,各指标间结果略有不同。
CASP image analyze of comet assay shows, experimental groups shows statistical significance compared with negative groups and positive groups, inter-target shows different slightly.
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- 来自原声例句
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在进行时,人们常说阴性对照和阳性对照指的是什么?初学者,搞不清,敬请师哥师姐指教,多谢!
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阳性对照是,你要检测的项目对应的已知的阳性项,是检查你的系统是否工作。如果系统正常的话,可以看到阳性结果。
阴性对照是,如果实验系统正常工作,扩增不出你所要的目的片段的阴性项。所用的每一项都可设阴性对照,根据你的目的而定
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我也想知道这个。。。谁能说的具体一些呢?
签到天数: 2 天[LV.1]初来乍到
简单地说,阳性对照就是该物质应该能跑出条带,阴性对照就是该物质不应该出现条带,所以我们通常说假阳性,就是不该出现条带结果出现了条带。
该用户从未签到
阳性对照是能做出来的,也就是内参。
签到天数: 8 天[LV.3]偶尔看看II
生物秀探花
& & 谢谢!
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阳性对照:只要操作正常,肯定能扩出来的模板
阴性对照:一般指不加模板,直接P,能出现引物二聚体,但是没有目的条带
前者说明你的操作没有问题,后者说明你的试剂没有被污染
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做TA克隆的时候,用什么做阴性对照
向老外要了个目的DNA的质粒,是用TA克隆做的,连带载体也给我寄过来了(这里要感谢老外,真的很友好,直接寄FEDEX过来),两个质粒我都转化了,且能抽出质粒,后面想想不对劲,TA克隆用的载体不是线性的吗?怎么也能够转化呢?不解?目的DNA的质粒我测过序了,的确是包含TA克隆载体的目的DNA质粒,但是载体没有送去测序。这里希望大家能够解答,谢谢!
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我的意思是没有连目的基因的质粒怎么也能转化?(老外在一张滤纸上画了两个圈一个是连有目的基因的,一个是没有连的)
确实是TA克隆,对比过了
谢谢你的回答,我最想知道的是做TA克隆的时候,阴性对照就是从公司买过来的吗(买回来的时候是环状?那不用酶切,怎么把它变成线性呢?为什么公司不把质粒先弄成线性?)
我们作为客户买到的TA克隆载体,肯定都是线性化的。
阴性对照指的是线性化的TA载体片段在加入连接酶以后进行连接转化涂板,理论上应该没有菌落,如果有菌落就说明存在环状质粒。这个质粒的来源可能是原线性化片段中存在环状质粒,或者是载体制作没加好T,发生了自连。一般长上4~5个菌斑属于正常吧,多了就不行,具体可以问公司的质检标准。
对于公司如何制作线性化的TA载体片段,就我有限的知识,一方面是通过平末端连接然后加T,或者是在载体上设计内切酶位点,用酶酶切。
谢谢你的回复!如果做阴性对照,是否就是用自连的载体?或者说没有连目的DNA但在涂板过程中长出的菌落抽取的质粒。
rol:我觉得你可能是没弄清楚做阴性对照的目的是啥。不加入任何DNA,只有细菌的,目的是检测抗生素是否有效;加入只有T载体的线性化片段,目的是检测载体的线性化情况,你的目的片段板上是否长了假阳性。
阴性对照是直接用你买来的T载体线性片段,操作上,除了不加入自己的目的DNA,其它操作与加入目的DNA的完全一样。理论上不应该长菌;如果长了,就说明线性化片段里面混有环状的DNA,说明你的目的片段板上可能有假阳性。
阴性对照绝对不能转环状的质粒,那就不叫阴性对照了,就成阳性对照了。
话说我从来不做阴性对照,阳性对照什么的,只要有我要的目的基因就好,弄那么多也没用。
也不知道我说清楚了没有。
我大致明白你的意思了,可能我没表达清楚,不好意思,我说的阴性对照是指将来转染细胞的时候用来做对照的,即没有连DNA的质粒载体转染到293T细胞里面。
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> ->->供试品的无菌检查-阴阳性对照
供试品的无菌检查-阴阳性对照
录入时间: 11:07:35
来源:海博生物
阳性对照 应根据供试品特性选择阳性对照菌:无抑菌作用及抗革兰阳性菌为主的供试品,以金黄色葡萄球菌为对照菌;抗革兰阴性菌为主的供试品以大肠埃希菌为对照菌;抗厌氧菌的供试品,以生孢梭菌为对照菌;抗真菌的供试品,以白色念珠菌
为对照菌。阳性对照试验的菌液制备同方法验证试验,加菌量小于100cfu,供试品用量同供试品无菌检查每份培养基接种的样品量。阳性对照管培养48~72 小时应生长良好。
阴性对照 供试品无菌检查时,应取相应溶剂和稀释液、冲洗液同法操作,作为阴性对照。阴性对照不得有菌生长。
无菌试验过程中,若需使用表面活性剂、灭活剂、中和剂等试剂,应证明其有效性,且对微生物无毒性。
无菌检查法包括薄膜过滤法和直接接种法。只要供试品性状允许,应采用薄膜过滤法。供试品无菌检查所采用的检查方法和检验条件应与验证的方法相同。
操作时,用适宜的消毒液对供试品容器表面进行彻底消毒,如果供试品容器内有一定的真空度,可用适宜的无菌器材(如带有除菌过滤器的针头)向容器内导入无菌空气,再按无菌操作起开容器取出内容物。
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