静脉血检查BE病毒核酸杂交6.39E+002是指什么

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乙肝病毒核酸荧光定量检测试剂及YMDD变异检测试剂盒
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乙肝病毒核酸荧光定量检测试剂及YMDD变异检测试剂盒
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产品说明书【药品名称】乙型肝炎病毒核酸荧光定量检测及变异检测试剂盒【汉语拼音】【使用目的和试验原理】本品系采用乙型肝炎病毒特异引物,利用核酸扩增、荧光标记探针,结合双探针技术,对人血清或血浆中乙型肝炎病毒核酸()定量检测同时对位点变异进行检测。可用于临床对乙型肝炎的辅助诊断和抗病毒药物的疗效观察。【适用仪器】本试剂盒适用于、、型荧光定量仪及相应软件。【标本要求】用一次性的针筒抽取病人静脉血,置于灭菌的一次性非肝素抗凝试管中,取分离出的血清送检。血清标本在℃~℃可放置小时,℃可长期保存,标本不宜反复冻融。【试验方法】&1.&标本、对照品的处理和加样(1)血清标本、试剂盒内阳性对照、阴性对照、对照、对照各取冻存血清或对照品使用前在室温融解,振荡混匀秒钟,分别加入核酸提取液,振荡秒,℃干浴或水浴分钟,离心分钟保留上清备用。处理后的样品应在小时内使用,或在℃~℃最长保存个月不宜反复冻融。标准品进行、、倍梯度稀释。(3)取混合液与酶()混匀为反应管数,离心秒,取上述反应混合液于适当容量离心管中,然后将样品、阳性对照、阴性对照、对照、对照处理上清液和梯度稀释的标准品各分别加入离心管中,立即进行扩增反应。扩增(1)离心管置于定量荧光仪上,、、循环参数设置:℃℃再按℃℃,循环次荧光检测在℃反应体系为。(2)荧光通道检测选择:定量检测选用通道,变异检测选用通道。(3)将定量标准品及各稀释度拷贝数浓度输入仪器软件中。【结果分析】&1.&质量控制&&&&进行定量分析,选择荧光检测模式荧光,基线调整取个循环的荧光信号,阈值设定原则以阈值线刚好超过正常阴性对照品的最高点。阴性对照拷贝数应为;强阳性对照拷贝数应、临界阳性对照拷贝数~,标准曲线相关系数应-,否则试验视为无效。进行变异检测,弱阳性对照在和通道检测值均应,血清对照、血清对照在通道检测所得值应,在通道检测为否则试验视为无效。&2.&结果判断&&&&根据工作曲线计算,仪器自动显示待检样品定量值,仪器显示表示待检样品为阴性。检测样品中,测定结果有效,可直接报告相应的拷贝数。检测样品中>,即可直接报告为>,也可用正常人血清按倍梯度做相应稀释,使其拷贝数落在~范围内再重新测定,测定结果应以稀释倍数进行校准。检测样本中<时,拷贝数仅供参考,报告为小于最低检测限。&&&&待检样品在和通道检测值,判断待检样品为野生型。待检样品在通道检测值,在通道检测为,判断待检样品为变异型。如果检测值在~之间,重复检测一次,如果检测值仍在~之间,则判为阴性。【对试验结果的解释】&&&&乙型肝炎病毒核酸定量值反映病毒在外周血中的浓度,浓度高则传染性强。乙型肝炎病毒变异情况与该病毒对药物拉米夫定的耐药性直接有关,发生变异的病毒对拉米夫定可能存在耐药性,结合临床情况综合判断。【该试验方法的局限性】&&&&该试验方法仅适用于具有和荧光通道的荧光定量分析仪,单通道荧光分析仪只能进行定量检测,不能进行变异分析。【产品性能指标】&&&&产品最低检测线;线性检测范围至;经例临床验证,产品检测变异结果与核酸序列测定结果一致。【注意事项】&开始检测前请仔细阅读本说明书全文。.整个检测过程应严格分在三区进行:反应体系的配制区;标本处理、加样区;扩增、荧光检测及结果分析区。各区使用的仪器、设备、耗材和工作服应独立专用。实验后即请清洁工作台,并进行消毒。.使用不含荧光物质的一次性手套经常替换、一次性专用离心管、自卸式移液器和带滤嘴吸头。.试剂准备和标本处理应使用超净工作台负压式或防污染罩,以防止对环境污染。.每次实验应设置阴阳性对照品.操作人员应经过专业培训,具有一定经验和操作技能。.操作台、移液器、离心机、扩增仪等仪器设备应经常用%次氯酸或%酒精、紫外线灯或臭氧消毒处理。.实验中用过的吸头、扩增完毕的离心管、标本和其它废弃物品一同灭菌后丢弃于指定地点。.试剂使用前应在室温下充分融化并混匀。.反应混合液应避&&
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乙型肝炎病毒核酸定量检测中不确定度的研究
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