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目录1 拼音zhì lì2 英文参考plasmid[2010年版药典三部]3 注解质粒（Plasmid）是一种能自主的环状额外元件。它通常携带一定数量的，其中有些基因可对不同产生抗性，该抗性常作为依据，以是否含有此种质粒而识别生物体。许多除了染色体外，还有大量很小的环状DNA，这就是质粒（plasmid）。质粒上常有抗生素的抗性基因，例如，抗性基因或抗性基因等。有些质粒称为附加体（episome），这类质粒能够进细菌的染色体，也能从整合位置上切离下来成为游离于染色体外的DNA分子。有些质粒能够整合进细菌的染色体，当细菌时将随同“雄性”细菌染色体而进入“”细菌，所以质粒也是细菌的一种可动。但有些质粒不能整合进细菌染色体，因而在细菌接合时也就无法转移到另一个细胞中，这类质粒是不移动的遗传因子，这种质粒上所带的基因也无法转移。上面所说的是指天然状态下的情况，在的实验条件下，各种质粒都能经过处理的感受态细菌细胞（competent cell）而转移进细菌。质粒在细胞中的拷贝数取决于质粒和宿主细胞的组成。由此，质粒可分为两种类型：一种是松弛型质粒，它们可于宿主染色体的复制而自行增殖，一个宿主细胞均有10～200份拷贝；另一种是严紧型质粒，它们随宿主染色体复制，所以每个宿主细胞中只有一份或很少几份拷贝。质粒是环状双链DNA分子，同线状DNA分子相比，围绕双螺旋主轴连续排列的的旋转角度稍有变动，就更容易使DNA分子的构象改变，即出现超螺旋的（supercoiled）构象。这是比环状更为的一种构象，因此当沉降或时，超螺旋构象的DNA分子的沉降速度和电泳速度都快于分子和环状分子。以前曾认为超螺旋构象是在实验条件下出现的一种现象，现在在细胞里也发现有超螺旋构象的DNA分子，而且发现超螺旋的程度是受拓扑异构酶（topoiso—merase）和旋转酶（gyrase）的，并和DNA调控蛋白与DNA链的接触有关。细菌质粒是独立于细菌染色体的自主复制的环状双链DNA分子，只有的杀伤质粒（killerplasmid）已知是RNA分子。环形双链DNA分子有三种构型。第一种是共价闭合环状DNA（covalently close circular DNA，ccc DNA），它的两条链持完整的环状，通常呈超螺旋构型。第二种是开环DNA（open circularDNA，oc DNA），它的双链中的一条完整的环状结构，另一条单链上有一到几个。第三种是线状DNA，这种质粒的双链断裂呈线状。这三种构型的同一种质粒在糖中电泳时，出现不同的速率，走得最快的是超螺旋构型，其次是线性构型，最慢的是开环构型。细菌细胞中质粒的数目有很大差异。多的每个细胞里可以达几十乃至几百份拷贝，少的则只有一到几份拷贝。高拷贝数的质粒称为松弛型质粒（relaxed plasmid），独立于细菌细胞而自主复制；低拷贝数的质粒一般是严紧型质粒（stringent plasmid），它们的复制随细菌染色体的复制同步进行。实明，同一个细胞里一般不会同时有两种不同的质粒，这是质粒不（plasmid incompatibility）。在细菌细胞增殖过程中，其中必有一种会被逐渐排斥。这样的两种质粒被称为不相容质粒。带有外源DNA的质粒转化到大肠杆菌细胞以后，会产生一系列生理，影响自身的性。特别是表达型的质粒载体，外源基因的表达会使宿主细胞的速率下降，以及质粒载体的丢失等。这种质粒的不稳定性包括不稳定性（segregational instability）和结构不稳定性（structural instability），前者指细菌细胞分裂过程中，有一个没有得到质粒拷贝，最终使质粒丢失的细胞成为优势；后者主要是指由于转座和，使质粒DNA重排或缺失。影响质粒载体稳定性的主要因素有：①宿主细胞负荷增加 质粒载体可使宿主细胞的代谢负荷加重，有的能延长其时间15％左右。质粒载体的同宿主细胞生长延缓的程度呈正，这可能是由于质粒载体大，则对宿主细胞的负荷更大的缘故。同样，宿主细胞如维持质粒载体源基因的表达活性，势必在DNA和上承受更多的额外负担。②细胞中所含质粒载体的拷贝数 细胞中所含质粒载体的拷贝数各不相同，也是影响质粒丢失的一个因素。拷贝数差别不大时，质粒载体相对地稳定；拷贝数相差悬殊，则很容易造成一些细胞丢失质粒，并逐渐发展为优势群体。③宿主细胞DNA重组的 质粒载体之间发生重组会形成二聚体、三聚体，甚至四聚体等所谓的质粒寡聚体（plasmid oligomer），其稳定差。此外，质粒载体中外源DNA片段的大小同质粒寡聚化的程度也密切相关。
4 参考资料 [1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：2010年版.三部[M].北京：中国医药科技出版社，2010. 相关文献
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你可能喜欢下图为DNA分子的平面结构示意图.属于DNA双螺旋结构特点的是 A．由两条脱氧核苷酸链组成 B．磷酸和核糖排列在外侧 C．内侧的碱基随机配对 D．碱基对通过肽键连接 题目和参考答案——精英家教网——
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下图为DNA分子的平面结构示意图，属于DNA双螺旋结构特点的是A．由两条脱氧核苷酸链组成&&&&B．磷酸和核糖排列在外侧C．内侧的碱基随机配对&&&&&&&&D．碱基对通过肽键连接&
【答案】A【解析】试题分析：DNA双螺旋结构特点有三点：DNA是由两条脱氧核苷酸链反向平行组成的，磷酸和脱氧核糖交替排列在外侧，内侧碱基按照碱基互补配对原则通过氢键连接，故选A。其余都错误。考点：本题考查DNA结构相关知识，意在考察考生对知识点的识记掌握程度。&
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科目：高中生物
下图为DNA分子的切割和连接过程： （1）EcoRl是一种&&&&&&&& 酶，其识别序列是&&&&&&&& ，切割点是&&&&&& 与&&&&&&&& 之间的&&&&&&&&& 键。切割结果产生的DNA片段末端形式为&&&&&&& 。 （2）不同来源DNA片段结合，在这里需要的酶应是&&&&&&&& 连接酶，此酶是通过与之间形成&&&&&&& 键，而起“缝合”作用的。还有一种连接平末端的连接酶是&&&&&&& 。
科目：高中生物
来源：学年湖南省益阳市一中高二上学期期末考试理科生物试卷（带解析）
题型：综合题
降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，将人工合成的降钙素DNA与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功的在大肠杆菌中得以表达。操作大体过程如下图1、图2，据图回答下列问题：&&&（1）图1示人工合成降钙素DNA的过程。从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA。从功能看，Klenow酶是一种___________酶，合成的双链DNA有________个碱基对。（2）图2将重组质粒导入大肠杆菌最常用的方法是用&&&&&&&处理，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。（3）如果要通过基因工程获得转基因动物，将目的基因导入受体细胞最常用的方法是&&&&&&&&&&&&&。（4）以下关于蛋白质工程的说法正确的是（&&）A．蛋白质工程以基因工程为基础&&&&&&&&&&B．蛋白质工程就是酶工程的延伸C．蛋白质工程就是用蛋白酶对蛋白质进行改造&&D．蛋白质工程只能生产天然的蛋白质
科目：高中生物
来源：2014届湖南省益阳市高二上学期期末考试理科生物试卷（解析版）
题型：综合题
降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，将人工合成的降钙素DNA与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功的在大肠杆菌中得以表达。操作大体过程如下图1、图2，据图回答下列问题：&&&（1）图1示人工合成降钙素DNA的过程。从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA。从功能看，Klenow酶是一种___________酶，合成的双链DNA有________个碱基对。（2）图2将重组质粒导入大肠杆菌最常用的方法是用&&&&&&&处理，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。（3）如果要通过基因工程获得转基因动物，将目的基因导入受体细胞最常用的方法是&&&&&&&&&&&&&。（4）以下关于蛋白质工程的说法正确的是（&&）A．蛋白质工程以基因工程为基础&&&&&&&&&&B．蛋白质工程就是酶工程的延伸C．蛋白质工程就是用蛋白酶对蛋白质进行改造&&D．蛋白质工程只能生产天然的蛋白质&
科目：高中生物
来源：同步题
题型：读图填空题
下图为DNA分子的切割和连接过程。
(1)EcoRI是一种____酶，其识别序列是________，切割位点是____与____之间的____键。切割结果产生的DNA片段末端形式为____。(2)不同来源DNA片段结合，在这里需要的酶应是____连接酶，此酶的作用是在_____与_____之间形成____键，而起“缝合”作用的。还有一种连接平末端的连接酶是____。
科目：高中生物
题型：阅读理解
根据模拟制作重组DNA分子的活动，甲DNA分子、乙DNA分子被EcoRI酶切后，即可获得所需的目的基因和质粒，回答以下问题：（已知EcoRI酶识别序列为GAATTC，识别位点为G||A）（1）绿色硬纸板（甲DNA分子）的碱基序列为：&&&&&& ……ATAGCATGCTATCCATGAATTCGGCATAC……&&&&& ……TCCTAGAATTCTCGGTATGAATTCCATAC……红色硬纸板（乙DNA分子）的碱基序列为：& ……TATCGTACGATAGGTACTTAAGCCGTATG……&&&&&& ……AGGATCTTAAGAGCCATACTTAAGGTATG……&&&&&& 其中，&&&&&&&&& &DNA分子含有“目的基因”，&&&&&&&&&& &DNA分子是“质粒”。（2）用剪刀代表进行切割。酶切位点在&&&&&&& &（a处还是b处），此化学键称为&&&&&&&&&&&& &。（3）请用“||”在甲、乙两DNA分子上标出EcoRI的作用位点。&&&& （4）从基因文库中获取目的基因是常用方法，基因文库实际上就是指导入了某种生物不同基因的许多DNA片断的&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &的群体。按照其中所含基因的量又可分为&&&&&&&&&&&&& &文库和&&&&&&&&&&&& &文库。（5）基因表达载体的构建是基因工程的关键步骤之一，请根据所给的条件完成下列问题：&&&& 已知有4种限制性核酸内切酶，其中1号和4号切割DNA后产生的是平末端，2和3号酶产生的是黏性末端。含目的基因的DNA片段和质粒的酶切序列如下图所示：&&①&请设计酶切方案，构建最佳基因表达载体（重组质粒）&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&。②该重组质粒上有几个复制原点：&&& ，能用PCR技术扩增吗&&&&& （能或不能）③若用酶2和3切割重组质粒，可以得到几个DNA片段：&&&&&&&& 。& 若用酶2和1切割重组质粒，可以得到几个DNA片段：&&&&&&&& 。
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