农残快速检测试剂盒抑制率为0是什么原因

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酶抑制率法农残速测技术及常见问题探究.doc
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农残快速检测原理及操作流程
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使用农残速测仪抑制率为零的原因分析
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&&一开始使用农残速测仪时,经常出现抑制率为0的原因进行分析。
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发表于: 17:18:17
我中心在好几个超市、市场都设有农残快速检测点,近段时间发现各个检测点的快速检测结果相差很大。有的点检测结果都很低,一般都低于30%的抑制率,拿到中心实验室再测,相当部分大于60%的抑制率。我们做过仪器、人员、试剂对比,发现只要在那几个检测点,结果就低,在中心实验室或另外的检测就回复正常。觉得是那几个检测点的环境中某种成分对试剂或机器有影响,但不知道是哪种。朋友们有什么见解吗?
17:18:57 Last edit by xy_gong
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看看水吧。如果用卡片,风的影响较大
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原文由 MMYG(jl070869) 发表:看看水吧。如果用卡片,风的影响较大我们所有检测点是统一用的桶装饮用水,统一型号的农药残毒快速检测仪。
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通过做对比实验,我们发现,快速检测试剂中酶在这个检测点很容易被抑制,检测的灵敏度很低。这个检测点的就在超市里,通风不好,门口就是卖面包、食品的,定内环境不太好;但具体的什么因子致使酶被抑制,不晓得。
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温度影响很大,酶检测的话最好在同一个温度下检测。就是对照品和样品在同一个温度下检测,市场的可能是一大早做一个对照品,然后全部样品都用这个对照。毕竟酶活性跟温度有较大的关系。如果速测卡的话,不是有个控温的小盒子,用那个好像会比较准一点。
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水的话,用蒸馏水比饮用水好吧
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pH、温度、紫外线、重金属盐、抑制剂、激活剂等通过影响酶的活性来影响酶促反应的速率。而你们对比过了人员,仪器和试剂,并且检测方法应该也是一致的。抑制率=(A0-At)/A0&
而 At则是酶与底物反应后产物与显色剂反应产生的。抑制率降低 则 At增大 故酶与底物反应产物增多。如果农药是相同含量,则是酶受到农药的抑制减少。 可以试试从这方面找原因。如果是机器问题的话,真心不太了解分光光度计在正常情况下回受到多大的影响A=abc,其中a为吸光系数,单位L/(g?cm),b为液层厚度(通常为比色皿的厚度),单位cm , c为溶液浓度,单位g/L 影响吸光度的因数是b和c。a是与溶质有关的一个常量。此外,温度通过影响c,而影响A。
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肯定是温度的影响,要保证酶的活性充分发挥,必须待测液再加入酶试剂、显色剂后在37度下水浴培养一定的时间后再加底物进行检测。
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原文由 subo01(subo01) 发表:肯定是温度的影响,要保证酶的活性充分发挥,必须待测液再加入酶试剂、显色剂后在37度下水浴培养一定的时间后再加底物进行检测。这倒不至于吧,在室温就可以啦,只要保证对照和样品在同一反应温度就好啦,而且夏天温度本来就比较高,应该合适的,而且室温也可以用延长反应时间的方法来达到相同的效果,37度水浴比较麻烦,不太合适现场检查的啊,现在比较好的酶试剂都可以室温反应了。再说,楼主也告诉你了实验室和现场检查的操作时一样的,如果有水浴,应该两边都水浴的啦

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