请问加封闭血清的作用和原理是什么(血清,原理,非特异性,抗体) - 免疫实验 - 生物秀
标题: 请问加封闭血清的作用和原理是什么(血清,原理,非特异性,抗体)
摘要: [请问加封闭血清的作用和原理是什么(血清,原理,非特异性,抗体)] 看到好多资料上都说是封闭非特异性位点，但搞不清楚封闭血清到底是和切片上的什么东西反应，而这对以后所加的抗体又有什么具体的帮助呢，请各位高手赐教！！！ 关键词:[血清 原理 非特异性 抗体 切片 位点]……
看到好多资料上都说是封闭非特异性位点，但搞不清楚封闭到底是和切片上的什么东西反应，而这对以后所加的抗体又有什么具体的帮助呢，请各位高手赐教！！！
回复加封闭的作用是减少非特异性染色，使片子的背景更为清晰。一般血清种属的选择和二抗的种属相同，一抗中如果含有正常血清，也可以免去此步骤。回复膜上或切片上有剩余的位点可以非特异性吸附，造成后续结果的假阳性！加小牛血清封闭的目的就是防止膜或切片对特异性的吸附作用，意即没有剩余的空位供其吸附，这样实验结果就会更可靠，定量就会更准确！回复加封闭血清的作用是减少非特异性染色，使片子的背景更为清晰。一般血清种属的选择和的种属相同，一抗中如果含有正常血清，也可以免去此步骤。为什么要用和种属相同的血清呢，具体原理是什么呢？回复膜上或切片上有剩余的位点可以非特异性吸附抗体，造成后续结果的假阳性！加小牛血清封闭的目的就是防止膜或切片对特异性抗体的吸附作用，意即没有剩余的空位供其吸附，这样实验结果就会更可靠，定量就会更准确！会不会把片子上需要检测的抗原位点也封闭掉呢？？？回复血清的作用主要是两方面：1.组织上有些非特异性位点能吸附蛋白质，所以预先用血清封闭，以免加入抗体检测时对抗体造成非特异吸附。2.封闭血清一般是和二抗同一来源的，血清中动物自身的抗体，预先能和组织中有交叉反应的位点发生结合，否则在后面的步骤中如果和二抗发生结合，会造成背景。
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为什么抗原抗体的结合具有特异性?
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由于抗体和对应的抗原具有独特的分子结构,他们能通过吻合的氢键、分子间作用力等完美的结合,该抗体和其他的抗原或物质即使有分子间作用力或氢键作用,但由于不能完美匹配结合,则不能“特异性识别”.仅供参考.
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本来就是啊，楼上的也没必要将那么详细，那会问那么复杂的问题让你做。特异性免疫当让具有特异性啊我想问你是否懂什么是特异性免疫，什么又具有特异性啊/特异性免疫就相当于一对一的对抗，比如有抗原1，2，抗体a只能去对抗1，抗体b只能去对抗2，就像是明确分工了的一样，非特异性如皮肤有抗原入侵，都把12挡在外面了。淋巴细胞有特异性，能区别非己的糖蛋白。...
特异性免疫就相当于一对一的对抗，比如有抗原1，2，抗体a只能去对抗1，抗体b只能去对抗2，就像是明确分工了的一样，非特异性如皮肤有抗原入侵，都把12挡在外面了。淋巴细胞有特异性，能区别非己的糖蛋白。
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特异性免疫
特异性免疫(specific immunity)又称或，这种免疫只针对一种病原。是获得免疫经后天（病愈或无症状的感染）或人工（、、、等）而使机体获得抵抗感染能力。一般是在微生物等物质刺激后才形成的(免疫球蛋白、免疫)，并能与该抗原起。
特异性免疫种类
特异性免疫细胞免疫
淋巴细胞的分化示意图
是参与细胞免疫的，受到刺激后，转化为，并表现出特异性免疫应答，免疫应答只能通过致敏淋巴细胞传递，故称细胞免疫。免疫过程通过感应、反应、效应三个阶段，在反应阶段致敏淋巴细胞再次与抗原接触时，便释放出多种（转移因子、，激活因子，皮肤反应因子，淋巴毒，），与，杀伤性T细胞协同发挥免疫功能。细胞免疫主要通过抗感染；；；参与起作用。其次与抑制性T细胞还参与的调节。
特异性免疫体液免疫
是参与的致敏B细胞。在刺激下转化为浆细胞，合成，能与靶抗原结合的免疫球蛋白即为抗体。免疫球蛋白（Immunoglobulin,Ig）分为五类。
①IgG是血清中含量最多的免疫球蛋白，唯一能通过胎盘的抗体，具有抗菌、抗病毒、等特性，对毒性产物起中和、沉淀、补体结合作用，临床上所用即为IgG。
②IgM是分子量最大的免疫球蛋白，是个体发育中最先合成的抗体，因为它是一种，故不能通过胎盘。血清中检出特异性IgM，作为早期诊断的标志，揭示新近感染或，具有调理、杀菌、凝集作用。
③IgA有两型即分泌与。存在于鼻、支气管分泌物、唾液、胃肠液及中。其作用是将粘附于粘膜表面，阻止扩散。血清型IgA，免疫功能尚不完全清楚。④IgE是出现最晚的，可致敏及嗜碱性粒细胞，使之脱颗粒，释放。，血清IgE含量增高。
⑤IgD其免疫功能不清。
还有一类无T与标志的细胞，具有能杀伤特异性抗体结合的，又称杀伤细胞（Killer cell），简称，参与ADCC效应，在，抗寄生虫感染中起杀作用。再一类具有自然杀伤作用的细胞，称为（natural killer cell）即。在杀伤靶细胞时，不需要抗体与补体参与。
特异性免疫特点
特异性免疫特异性
B细胞分化、成熟和抗原诱导的关系
1、具有特异性（或称专一性）：机体的二次应答是针对再次进入机体的，而不是针对其他初次进入机体的抗原；
特异性免疫免疫记忆
2、有：免疫系统对初次刺激的信息可留下记忆，即一部分成为效应细胞与入侵者作战并歼灭之，另一部分分化成为记忆细胞进入静止期，留待与再次与进入机体的相同抗原相遇时，会产生与其相应的抗体，避免第二次得相同的病。
特异性免疫正反应和负反应
3、有正反应和负反应：在一般情况下，产生特异性抗体或（和）以发挥免疫功能的称为正反应。在某些情况下，免疫系统对再次刺激不再产生针对该抗原的抗体或（和）致敏淋巴细胞，这是特异性的一种低反应性或无反应性，称为负反应，又称；
特异性免疫多种细胞参与
4、有多种细胞参与：针对刺激的应答主要是T细胞和B细胞，但在完成特异性免疫的过程中，还需要其他一些细胞（、粒细胞等）的参与；
特异性免疫个体的特征
5、有个体的特征：特异性免疫是机体出生后，经的反复刺激而在的基础上建立的一种保护个体的功能，这种功能有质和量的差别，不同于非特异性免疫。
特异性免疫形成过程
在刺激下，机体的特异性免疫应答一般可分为感应、反应和效应3个阶段。分为三个阶段：1感应阶段 是抗原处理、呈递和识别的阶段；
2.反应阶段 是B细胞、分化，以及形成的阶段；
3.效应阶段是、抗体和发挥的阶段。
如果某些病原体突破了第一道和第二道防线，即进入人体并生长繁殖，引起感染。有的有症状，就是患病；有的没有症状，称作隐性感染。不论是哪一种情况，机体都经历了一次与斗争的过程，这种专门针对某一种病原体（抗原）的识别和杀灭作用称为特异性免疫。譬如得过的人对伤寒杆菌有持久的免疫力，那是因为伤寒杆菌刺激机体产生，增加了的吞噬功能，同时在体内还产生抗伤寒杆菌的抗体。人体的免疫系统又能把伤寒杆菌这个“敌人”的特征长期“记忆”下来，如果再有伤寒杆菌进入，就会很快被识别、被消灭。
能进行免疫应答的有很多种，最重要的是。它又分成两种。两种细胞的发育成熟过程不一样，一种是在内发育成熟，称作，是在骨髓内发育成熟的为B淋巴细胞。
具有吞食异物的巨噬细胞也是一种重要的免疫细胞，它具有“加工厂”的作用，即巨噬细胞吞噬异物（如细菌、肿瘤细胞等）后，对异物进行加工处理。处理后的异物（）就与T淋巴细胞和B淋巴细胞发生，它本身也能直接杀灭异物或者产生参与免疫反应。
B受病原体刺激后，引起一系列变化，最终转化成为能产生抗体的浆细胞，所产生的抗体通过各种方式来消灭病原体，如溶解病原体，中和病原体产生的毒素，凝集病原体使之成为较大颗粒让吞食消灭。浆细胞产生的抗体存在于机体的血液和体液中，这种免疫反应就称为。
经处理后的病原体刺激T淋巴细胞后，也同样引起一系列变化，最终转化成能释放出的。淋巴因子种类很多，作用也并不相同，它们积极地参与到免疫反应中，这种免疫反应通常称为细胞免疫。体液免疫和细胞免疫二者之间不是孤立的，它们相辅相成，互相协作，共同发挥免疫作用。
特异性免疫获得方式
1．自然自动免疫。一个人得了某种，痊愈后，便不会得第二次。这种免疫力是后天获得的，是因为自然感染了某种，痊愈后，人体自动产生的；
2．。用人工的方法使人感染毒性极微的某种病原微生物，比如接种，人们便自动获得了对某种疾病，如肺结核的；
3．。婴儿由母亲身体接受的免疫力。六个月里的婴儿，其免疫系统还没有发育起来，可是他很少生病。是因为胎儿的血循环是和母亲相通的，母体的抵抗力通过血液注入胎儿。
4．。给病人注射等病人即刻获得相关的免疫力。
特异性免疫具有特异性，能抵抗同一种微生物的重复感染，不能遗传。分为细胞免疫与两类。
特异性免疫标准化治疗
标准化特异性免疫治疗（）是唯一能改变免疫机制的对因治疗，而当中更鼓励应用和发展标准化的脱敏制剂，因为只有提取物质量标准化才可持续生产高质量的脱敏，以确保治疗效果的稳定性。
在引起变应性疾病发病率上升的至多因素中，人类居住环境的改变，大量可致敏的的出现是不可忽视的原因。通过恰当、科学的变应原特异性免疫治疗，使得患者对变应原的敏感度显著降低，有效防止变应性疾病的进展，同时能预防新的的出现。
特异性免疫治疗机制
1、对辅助性T细胞亚群（Th1/Th2）功能的调节；2、“阻断抗体”理论：该理论认为由于IgG可以竞争性地阻断变应原与表面IgE的结合，从而避免肥大细胞的激活和炎性介质的释放；3、对IgE的调节；4、对和炎症应答的抑制；5、修饰（DC）诱导；6、诱导，即IL-10诱导的T细胞可以形成外周耐受；7、调节性T细胞（CD4+CD25+Tr细胞）的调节作用。
SIT的机制是错综复杂的，不同方式的免疫治疗机制也不同，取决于变应原的性质，疾病累及的组织器官，免疫治疗的方法、剂量以及持续时间，应用的辅助剂种类和个体的遗传性等。因此，机制的阐明对提高SIT临床疗效和安全性均有重要的意义。
特异性免疫特异性预防与治疗
特异性免疫可通过患病,隐性感染，，注射等方式获得。
特异性免疫免疫获得方式
自然：患病，隐性感染.
；接种菌苗，类毒素等.
自然被动免疫：通过胎盘，.
；注射，，细胞因子等.
是采用人工方法，将菌苗，类毒素等或含有某种特异性抗体，细胞免疫制剂等接种于人体，以增强机体的抗病能力.
生物制品 用于人工免疫的免疫原（菌苗，类毒素等），免疫血清，细胞免疫制剂以及诊断制剂（结核菌素，诊断血清，诊断等）等生物性制剂，统称生物制品.
特异性免疫人工主动免疫
是用人工接种的方法给机体输入抗原性物质（菌苗，，类毒素），刺激机体主动产生特异性免疫力.主要用于疾病的特异性预防.
（一）疫苗
1.死疫苗 收获经培养增殖的强的细菌，用理化方法灭活而制成.如百日咳，伤寒，乙脑等疫苗.
2.活疫苗 亦称减毒疫苗，从自然界发掘或通过人工培育筛选的减毒或无毒力的活病原体.如卡介苗，流感，脊髓灰质炎等活疫苗.活疫苗经自然感染途径接种，免疫效果好，但具有潜在的危险性：① 毒力恢复（虽然极少发现）；② 引起其它部位并发症，如种痘后脑炎；③ 活化潜伏病毒；④ 引起等.
3.新型活疫苗 应用基因工程技术，控制病毒变异,制备可在机体内增殖，诱发抗病毒免疫应答的疫苗.
活疫苗和死疫苗各有优缺点
经自然感染途径接种，免疫效果好，产生和细胞免疫.
优点：① 增殖而不致病，用量小，次数少；
② 产生局部和全身免疫，免疫效果好；
③ 有扩大的，免疫力持久.
缺点：① 易失活，运输，保存不便； ② 有复毒的可能；
③ ，免疫抑制者禁用；
供肌肉注射，通常只激发.
优点：①便于保存，运输； ②无复毒危险； ③ 生产方法简单；
缺点：①不能产生局部免疫； ② 需多次接种，剂量较大；③局部和全身反应明显；
4.基因工程 获得带有病原体表位的目的基因，将其导入原核或真核表达系统，从而获得该病原的保护性抗原，如乙型肝炎基因工程疫苗.具安全，高效，经济，可批量生产等优点.
5. 将编码某一蛋白的基因转入减毒的病毒或细菌而制成的疫苗.
6.合成疫苗 根据病原体抗原的氨基酸序列合成的多肽，但还存在一定问题，有待进一步研究.
7.亚单位疫苗：指用人工方法裂解病毒，提取衣壳或包膜上的与感染有关的亚单位成分制成的疫苗.优点是除去病毒核酸（可能转化细胞）和其它成分（可能引起发热等副作用）.
8.DNA 又称基因疫苗或.将能编码引起保护性免疫应答的病原体基因片段和质粒重组，重组体直接注入宿主机体，使体内持续表达该抗原，进而诱导出保护性和细胞免疫的新型疫苗.这种核酸既是载体，又能在真核细胞中表达抗原，刺激机体产生特异而有效的.其优点：免疫效果好，可激发机体全面免疫应答，免疫力持久，制备简单成本低廉，便于储存运输,既能联合免疫，又具预防和免疫治疗双重功能，缺点是安全性需进一步研究证实.
9.转基因植物 将编码某一病原的基因转入植物并再植物中表达，吃这些植物性食物的同时，就完成了一次.
10.治疗疫苗 以治疗疾病为目的的新兴疫苗，如葡萄球菌的.
（二）类毒素 细菌外毒素经0.3%-0.4%甲醛处理后，毒性消失而仍保持其免疫原性，即成类毒素.如破伤风，白喉类毒素等.
特异性免疫人工被动免疫
指给机体注射含特异性抗体的免疫血清或其他细胞免疫制剂，使机体立即获得特异性免疫力.主要用于治疗或紧急预防.两种人工免疫的比较
1. 用多次给马注射，待马产生高效价抗毒素后采血，分离血清，纯化制成.临床上常用的有破伤风，白喉，气性坏疽，肉毒杆菌等抗毒素.使用时应注意防止I型超敏反应的发生.
2.抗菌血清 仅用于多重耐药菌株所致疾病的治疗.
3.胎盘 一般用于预防.
4.其他免疫制剂 现试用的有转移因子（TF），免疫核糖核酸（iRNA），，（IFN），白细胞介素-2(IL-2），细胞毒性T细胞（CTL）和LAK细胞等.您好，欢迎登录
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梅毒特异性抗体阴性，梅毒非特异性抗体阴性
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病情描述：
梅毒螺旋体抗体定性阳性，梅毒非特异性抗体阳性，trust阳性需要治疗吗
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你好梅毒血清检测为双阳，说明正是感染期，具有传染性。
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此期需规律性治疗。一般用长效青霉素进行治疗。治疗后每隔三个月复查一次。
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