如何研究两种蛋白是否有竞争性结合珠蛋白

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【求助】怎样用实验证明蛋白质A 和B对蛋白质C的结合具有竞争性?
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目前已经知道2个蛋白质A和B单独可以结合另一蛋白质C的某个结构域,怎样用实验证明这两个蛋白质之间存在竞争?用什么实验手段证明!越具体越好!谢谢!
不知道邀请谁?试试他们
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ELISA、IP都可以啊,A+B作用后加入C,用抗B、C的抗体检测,如果B能检测到说明C对B没有竞争,C检测到说明有竞争;A+C作用后加入B,用抗C、B的抗体检测,如果C能检测到说明B对C没有竞争,B检测到说明B对C有竞争。
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to diudouble 战友:初涉及此领域,这方面知识缺乏,能否详细说明?如A+B作用,是怎么作用的,可否清楚一些。有操作步骤更好。谢谢
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在A、B和C的反应体系中,分别逐步添加不同量的A和B,此时AB会分别与C以不同的效率结合,跑非变性胶,再用westerm检测ab的结合量!方法也可以扩展到co-ip上做,因为不知道具体的实验,所以无法提供具体的方法步骤!
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HPLC,分为a,b,c三组a组,A+c孵育b组,B+Cc组,A+B+C查看三组中耦合物波峰变化,如果有竞争,则AC,BC均出现在C组且高低不同
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liyi3344520 to diudouble 战友:初涉及此领域,这方面知识缺乏,能否详细说明?如A+B作用,是怎么作用的,可否清楚一些。有操作步骤更好。谢谢其实已经说了,ELISA和IP的方法,再具体就是看实验操作了,试剂配方、仪器、具体步骤。。。。。。
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谢谢各位。我的问题是需要在培养的特定细胞系内检测它们的作用以及竞争,而且我需要的3种蛋白质目前现成的只有2种。怎么办?
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金属元素组与血清白蛋白的竞争结合反应性能研究二
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