&&&&重金属污染废水的微生物修复技术(&货号:)
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当当读书客户端万本电子书免费读& （2016o上海）回答下列有关微生物和酶工程的问题．枯草芽孢
本题难度：0.60&&题型：简答题
（2016o上海）回答下列有关微生物和酶工程的问题．枯草芽孢杆菌盛产蛋白酶，后者在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值，且已大规模产业化应用．（1）在培养包括枯草芽孢杆菌在内的异养型微生物时，培养基营养成分应包括水和&&&&（用序号组合回答）．①淀粉& ②蛋白质&& ③生长因子& ④葡萄糖&& ⑤无机盐为筛选枯草芽孢杆菌的蛋白酶高产株，将分别浸过不同菌株（a～e）的分泌物提取液及无菌水（f）&的无菌圆纸片置于含某种高浓度蛋白质的平板培养基表面；在37℃恒温箱中放置2～3天，结果如图1．（2）大规模产业化首选的菌株是&&&&；菌株b提取物周围没有形成明显清晰区的原因是&&&&．图2显示枯草芽孢杆菌的蛋白酶和其它酶的热稳定性数据，即酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其酶活性．在该蛋白酶的工业化生产过程中，通常需对发酵液在60～70℃保温一定时间，再制备酶制剂．（3）在60～70℃保温一定时间的作用是&&&&．A．诱导蛋白酶的热稳定性B．有利于发挥蛋白酶的最佳活性C．裂解枯草芽孢杆菌细胞D．大幅度降低发酵液中其他酶的活性（4）枯草芽孢杆菌蛋白酶制备的合理工艺步骤应为&&&&（选择正确的序号并排序）．①过滤&& ②干燥&& ③破碎&& ④浓缩．
来源：2016o上海 | 【考点】微生物的分离和培养；酶活力测定的一般原理和方法．
（2016o上海）回答下列有关微生物和酶工程的问题．枯草芽孢杆菌盛产蛋白酶，后者在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值，且已大规模产业化应用．（1）在培养包括枯草芽孢杆菌在内的异养型微生物时，培养基营养成分应包括水和&&&&（用序号组合回答）．①淀粉& ②蛋白质&& ③生长因子& ④葡萄糖&& ⑤无机盐为筛选枯草芽孢杆菌的蛋白酶高产株，将分别浸过不同菌株（a～e）的分泌物提取液及无菌水（f）&的无菌圆纸片置于含某种高浓度蛋白质的平板培养基表面；在37℃恒温箱中放置2～3天，结果如图1．（2）大规模产业化首选的菌株是&&&&；菌株b提取物周围没有形成明显清晰区的原因是&&&&．图2显示枯草芽孢杆菌的蛋白酶和其它酶的热稳定性数据，即酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其酶活性．在该蛋白酶的工业化生产过程中，通常需对发酵液在60～70℃保温一定时间，再制备酶制剂．（3）在60～70℃保温一定时间的作用是&&&&．A．诱导蛋白酶的热稳定性B．有利于发挥蛋白酶的最佳活性C．裂解枯草芽孢杆菌细胞D．大幅度降低发酵液中其他酶的活性（4）枯草芽孢杆菌蛋白酶制备的合理工艺步骤应为&&&&（选择正确的序号并排序）．①过滤&& ②干燥&& ③破碎&& ④浓缩．
（2014秋o虹口区月考）回答下列有关微生物和进化的问题莠去津是一种除草剂，它是一种在土壤中不易被降解的含氮的有机化合物．由于莠去津在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，某课题小组A的同学按下面程序选育能降解的细菌（目的菌）．（1）除草剂对土壤微生物具有&&&&作用，使长期使用除草剂的土壤中可能含有密度较高的目的菌．从图1中可判断目的菌的异化作用类型是&&&&．（2）配制图示无氮固体培养基时，在各成分都溶化后分装前，要进行的是&&&&和灭菌．对培养基进行灭菌的常用方法是&&&&．如图1示利用&&&&法将微生物接种在固体培养基上，其目的是把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，通过培养获得由&&&&个目的菌繁殖形成的菌落．另一个课题小组B对以上过程提出异议，认为A组实验过程有疏漏、不够严密．（3）若按照A组的实验过程，最终得到菌落除了能降解莠去津的细菌以外，可能还有另外一类&&&&菌．（4）B组查阅资料，发现含过量莠去津的培养基不透明，他们在A组的基础之上，将菌夜涂布在含过量莠去津且无其他氮源的培养基上，实验结果如图2．在此固体培养基中，无透明带菌落利用的氮源主要是&&&&；有透明带菌落利用的氮源主要是&&&&，据此可筛选出目的菌．
解析与答案
（揭秘难题真相，上）
习题“（2016o上海）回答下列有关微生物和酶工程的问题．枯草芽孢杆菌盛产蛋白酶，后者在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值，且已大规模产业化应用．（1）在培养包括枯草芽孢杆菌在内的异养型微生物时，培养基营养成分应包括水和（用序号组合回答）．①淀粉 ②蛋白质 ③生长因子 ④葡萄糖 ⑤无机盐为筛选枯草芽孢杆菌的蛋白酶高产株，将分别浸过不同菌株（a～e）的分”的学库宝（/）教师分析与解答如下所示：
【分析】微生物的营养成分主要有：碳源、氮源、水和无机盐等．大多数微生物是异养生物在培养微生物时需要满足其生长的温度、pH和氧气等条件．
【解答】解：（1）由于淀粉和葡萄糖都属于糖类能提供有机碳源所以在培养包括枯草芽孢杆菌在内的异养型微生物时培养基营养成分应包括水和①淀粉、②蛋白质、③生长因子和⑤无机盐或水和②蛋白质、③生长因子、④葡萄糖和⑤无机盐．（2）根据题意和图1分析可知：a周围的透明圈最大说明分泌的蛋白酶最多所以大规模产业化首选的菌株是a．菌株b提取物周围没有形成明显清晰区的原因是①不能合成蛋白酶或合成的蛋白酶量不足或②合成的蛋白酶不分泌或分泌量不足或③分泌的蛋白酶活性低．（3）根据题意和图2分析可知：在60～70℃时其它酶的相对活性明显比蛋白酶的相对活性低所以保温一定时间的作用是大幅度降低发酵液中其他酶的活性．（4）枯草芽孢杆菌蛋白酶制备的合理工艺步骤应为①过滤→④浓缩→②干燥．故答案为：（1）①②③⑤/②③④⑤（2）a&nbsp&nbsp&nbsp ①不能合成蛋白酶或合成的蛋白酶量不足②合成的蛋白酶不分泌或分泌量不足③分泌的蛋白酶活性低（3）D&nbsp（4）①④②
【考点】微生物的分离和培养；酶活力测定的一般原理和方法．
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知识点讲解
经过分析，习题“（2016o上海）回答下列有关微生物和酶工程的问题．枯草芽孢”主要考察你对
“” “” “”
等考点的理解。
因为篇幅有限，只列出部分考点，详细请访问。
微生物的实验室培养
细菌和真菌的生活需要一定的条件，如水分、适宜的温度、还有有机物．因此首先要配制含有营养物质的培养基，可以用牛肉汁加琼脂熬制，然后把培养基和所有用具进行高温灭菌，以防杂菌对实验的干扰，为防止高温杀死细菌、真菌，要等冷却后，在进行接种，接种后放在温暖的地方进行恒温培养．注意：定期观察并详细记录实验现象．
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1&&&&2&&&&3&&&&4&&&&5&&&&6&&&&7&&&&8&&&&9&&&&10&&&&11&&&&12&&&&13&&&&14&&&&15&&&&
作业互助QQ群：(小学)、(初中)、(高中)四、绘图并作简要说明；1、啤酒酵母单、双倍体共存的生活史；2、青霉与曲霉的简单子实体；4、噬菌体一步生长曲线；8、当环境中葡萄糖、山梨醇同时存在时，E.col；五、简答题；1、什么是微生物？它包括那些种类？至今人类发现的；2、试述G+菌和G-菌细胞壁的特点，并说明革兰氏；G-菌细胞壁的特点是厚度较G+菌薄，层次较多，肽；经沙黄等红色染料复染，就使G-菌呈红色
绘图并作简要说明
啤酒酵母单、双倍体共存的生活史。
青霉与曲霉的简单子实体。
烈性噬菌体与温性噬菌体的生活史。
噬菌体一步生长曲线。
营养物跨膜运输的四种类型。
有氧呼吸典型的呼吸链。
色氨酸操纵子的阻遏机制。
当环境中葡萄糖、山梨醇同时存在时，E.coli生长现象并分析其原因。
什么是微生物？它包括那些种类？至今人类发现的最大和最小的微生物类群各是什么？
微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。可分为三类：原核类的细菌（真菌和古生菌）、放线菌、霉菌、蓝细菌、支原体、立克次体和衣原体；真核类的真菌（酵母菌、霉菌、和覃菌）、原生动物和显微藻类；非细胞类的病毒和亚病毒（类病毒、拟病毒和朊病毒）。最大的微生物
最小的微生物
试述G+菌和G-菌细胞壁的特点，并说明革兰氏染色的机理及重要意义？
G-菌细胞壁的特点是厚度较G+菌薄，层次较多，肽聚糖层很薄（仅2-3nm），故机械强度较G+菌弱。
机理：通过结晶紫液初染和碘液媒染后，在细菌的细胞膜内可形成不溶与水的结晶紫与碘的复合物。G+菌由于其细胞壁较厚，肽聚糖网层次多和交联致密，故遇脱色剂乙醇处理时，因失水而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇的处理不会溶出缝隙，因此能把结晶紫和碘的复合物牢牢留在壁内，使其保持紫色。而G-菌因其细胞壁薄，外膜层类脂含量高，肽聚糖层薄和较联度差，遇脱色剂乙醇后，以类脂为主的外膜迅速溶解，这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘的复合物的溶出，因此细胞退成无色，这时，再经沙黄等红色染料复染，就使G-菌呈红色，而G+菌仍为紫色。
意义：证明了G+和G-主要由于其细胞壁化学成分的差异而引起了物理特性（脱色能力）的不同，正由于这一物理特性的不同才决定了最终染色反应的不同。
如何理解“放线菌是介于细菌与丝状真菌间而更接近细菌的一类微生物”？
放线菌是一类主要呈菌丝状生长和以孢子繁殖的陆生性较强的原核生物，它与细菌十分接近。①细胞壁主要为肽聚糖，②菌丝直径与细菌相仿，③革兰氏呈阴性，④都属于原核生物，⑤都是单倍体，多核。而其细胞呈丝状分枝，形成基内菌丝，气生菌丝，气生菌丝有分化为孢子丝，与丝状真菌的基本单位“菌丝”类似，但是它们差异很大，①真菌的菌丝比放线菌粗，②细胞壁的成分完全不同，丝状真菌的细胞壁由几个质层，蛋白质层，葡聚糖蛋白网层等构成，③菌丝体分化不同，丝状真菌菌丝体分化成营养菌丝体和气生菌丝体，④繁殖方式不同，丝状真菌的气生菌丝体回转化成子实体，孢子在其里面或外面产生，放线菌则通过气生菌丝分化成孢子丝，并通过横割分裂方式，产生成串分生孢子。
如何理解“菌落特征与菌体细胞结构、生长行为及环境条件有关”？
菌落特征取决与组成菌落的细胞结构，生长行为及个体细胞形态的差异，都会密切反映在菌落形态上，如有些细菌有荚膜，在其细胞壁外就会有一层厚度不定的透明胶状物质，而有些细菌有鞭毛，也会反映与它的菌落特征上，同时菌落在不同环境条件下的形态特征也有差异，在利于生长和不利生长的情况下，细菌的形态有差异，有些细菌在恶劣的条件下能形成芽孢等休眠体结构，培养基的种类不同也会形成菌落形态的不同，使用固体，半固体，液体培养基培养同一种细菌时，其菌落特征不尽相同。
试述细菌糖被的类型及其对科学研究、生产实践的意义。
意义：①用于菌种鉴定，②用作药物和生化试剂，③用作工业原料，④用于污水生物处理。
比较生物氧化与非生物氧化的主要异同点。
非生物氧化
多步式阶梯
一步式快速反应
化学物质或无催化剂
能量利用率
线粒体（真核）细胞膜（原核）
加氧、脱氢、失去电子
加氧、脱氢、失去电子
产能（ATP）产还原力[H]、产小分子中间代谢产物
产生大量的能量
脱氢（或电子）递氢（电子）受氢（电子）
氢（或电子）递氢（电子）受氢（电子）
一次全部释放能量
列表比较细菌、放线菌、霉菌、酵母菌细胞结构、群体特征及繁殖方式的异同点。
单细胞原核生物，细胞由细胞壁，细胞膜。细胞质和内含物，核区组成，少数含有特殊结构，如鞭毛、荚膜等。革兰氏染色有G+、G-
菌落一般呈现湿润较光滑，较粘稠，易挑起，质地均匀，菌落正反面及边缘中心部位颜色一致
主要为裂殖少数为牙殖
单细胞多核原核生物，革兰氏染色显阳性，细胞壁的成分主要为肽聚糖，细胞呈丝状分枝，形成基内菌丝，气生菌丝
干燥、不透明、表面呈致密的丝绒状，上有一层彩色“干粉”难挑起，菌落正反面颜色不一致
多数进行孢子繁殖，少数以基内菌丝分裂，形成孢子状细胞进行繁殖
由菌丝构成，直径3-10μm，与酵母菌细胞类似，细胞壁主要有几丁质构成，少数含有维生素
菌落的形态较大，质地疏松，外观干燥，不透明，呈现或松或紧的蛛网状、绒毛状、棉絮状，与培养基结合紧密，不易挑起
气生菌丝转化成各种子实体，子实体上或里面产生无性或有性孢子，进行繁殖。
细胞直径为细菌10倍，是典型的真核微生物细胞主要由细胞壁，细胞膜，细胞核构成。细胞壁分为三层，成分为酵母维生素
较湿润，较透明，表面较光滑，容易挑起，菌落知底均匀，正反面以及边缘与中央部位的颜色一致。
无性繁殖：牙殖，裂殖，无性孢子有性繁殖：产生子囊孢子
列表比较微生物的四大营养类型。
光能无机营养型（光能自养型）
蓝细菌、紫硫细菌、绿硫细菌、藻类
光能有机营养型（光能异养型）
CO2及简单有机物
红螺菌科的细菌（即紫色无硫细菌）
化能无机营养型（化能自养型）
硝化细菌、硫化细菌、铁细菌、氢细菌、硫磺细菌等
化能有机营养型（化能异养型）
绝大多数细菌和全部真核生物
如何获得细菌（G+、G-）、放线菌、酵母菌、霉菌的原生质体？
细菌原生质体获得：青霉素、溶菌酶
放线菌原生质体获得：蜗牛消化酶
霉菌原生质体获得：蜗牛消化酶
酵母菌原生质体获得：蜗牛消化酶
酶的活性调节与酶合成调节有何不同，它们之间又有何联系？
酶分子水平上的调节
激活、抑制酶的活性
酶合成调节
基因水平上的调节
诱导、阻遏酶的合成
两者配合与协调，可达到最佳的调节效果，使微生物积累更多的为人类所需的有益代谢产物
试述生物素对谷氨酸发酵生产的影响，并简述其作用机制。
在谷氨酸发酵生产中，生物素的浓度对谷氨酸的积累有着明显的影响，只有把生物素浓度控制在亚适量情况下，才能分泌出大量谷氨酸。
机制：生物素是脂肪酸生物合成中乙酰-CoA羧化酶的辅基，此酶可催化乙酰CoA的羧化并生成丙二酸单酰CoA，进而合成细胞膜磷脂的主要成分――脂肪酸，因此，控制生物素的含量就可以改变细胞膜的成分，进而改变膜的透性、谷氨酸的分泌和反馈调节
写出微生物以淀粉为碳源其代谢的一般过程，鉴定其代谢产物有何意义？为什么？
鉴定其代谢产物对于判断微生物进行何种呼吸方式有重要意义，并且能够进一步了解其各步骤的生长过程便于生产和调控利用其代谢产物。
分析下述培养基各组分的作用，依据其功能推测其所属培养基的类型：
A．麦康开培养液：蛋白胨20g,乳糖10g,牛胆酸盐5g,NaCl 5g,水1000ml,PH7.4
加1%中性红5ml
分装与有发酵管的试管0.7kg/km2灭菌15min，用于肠道杆菌培养。
B.柠檬酸盐培养基：NH4H2PO4
1g，K2HPO4
0.2g,柠檬酸钠2g,琼脂
18g，水1000ml，PH6.8
加1%溴麝香草酚兰10ml，1.1Kg/cm2灭菌20分钟，制成斜面，用于细菌利用柠檬酸盐试验。
NaCl、MgSO4、K2HPO4
适宜菌生长
1%溴麝香草酚兰
指示剂，判断能否利用柠檬酸钠
判断是否产气
适宜菌生长
属于半组合培养基
属于合成培养基
一、名词解释（30分） 1、质粒 2、异型乳酸发酵 3、生长因子 4、原生质体 5、温和噬菌体 6、食物中毒 二、填空（30分） 1、根霉的形态特征是具有
(有隔或无隔)；曲霉的形态特征是具 d 和
；青霉的形态特征是具
。 2、细菌一般进行
。酵母的繁殖方式分为有性和无性两类，无性繁殖又可分为，
两种形式，有性繁殖时形成
；霉菌在有性繁殖中产生的有性孢子种类有
等；在无性繁殖中产生的无性孢子种类有
等；放线菌以
方式繁殖，主要形成
。 3、霉菌细胞壁化学组成主要是
；酵母菌细胞壁化学组成是
等；细菌细胞壁化学组成主要是
；（2分） 4、细菌的个体形态主要有
等。 三、问答题（40） 1、如何控制发酵条件进行ⅠⅡⅢ型酒精发酵？ 2、简述无分支单细胞微生物的生长曲线在不同时期的特点？ 3、试述革兰氏阳性菌和阴性菌在细胞壁组成上的差别，并判断下述几种微生物的染色结果是什么。a. 枯草芽孢杆菌 b. 金黄色葡萄球菌 c. 大肠杆菌 d. 乳链球菌
1、异染颗粒 2、同型乳酸发酵 3、化能异养型微生物 4、原生质体 5、烈性噬菌体 6、菌落
二、选择题（20） 1. 营养缺陷型菌株是指
a. 有营养不良症的菌株
b. 在完全培养基上也不能生长良好的菌株 c. 培养基中营养成分缺少时获得的菌株
d. 丧失了合成某种营养成分能力的菌株 2.细菌细胞的哪一部分结构与其抗原性相关？
d. 液泡 3. 营养物质的促进扩散
a. 需要消耗代谢能 b. 需要特异性载体的参与 c. 当胞内浓度高于胞外浓度时能进行 d. 当胞内浓度低于胞外浓度时能进行 4.微生物分批培养时，在延迟期
a. 微生物的代谢机能非常不活跃
b. 菌体体积增大
c. 菌体体积不变
d. 菌体体积减小 5.溶源菌遇到同一种噬菌体或与之密切相关的噬菌体时表现为
c. 再次溶源化
d. 裂解 6.酵母菌的细胞壁主要含 。 a. 肽聚糖和甘露聚糖
b. 葡聚糖和脂多糖
c. 几丁质和纤维素
d. 葡聚糖和甘露聚糖 7.下列微生物中，_____属于革兰氏阴性菌
a. 大肠杆菌
b. 金黄葡萄球菌
c. 巨大芽孢杆菌
d. 肺炎双球菌 8.霉菌中分别是_____具有假根和足细胞
a. 米根霉和桔青霉
b. 米根霉和黄曲霉
c. 高大毛霉和黑曲霉
d. 黑根霉和红曲霉 9.光能有机异养型微生物是指_____ a. 光能为能源，CO2为碳源
b. 光能为能源，有机物为碳源 c. 光能为能源，无机化合物为供氢体
d. 有机化合物为能源，有机化合物为碳源
10、下列属于原核生物的有_____
a. 苏云金芽孢杆菌
b. 啤酒酵母
d. 醋酸菌 三、问答题（50分） 1、微生物生长需要哪些基本条件？ 2、简述烈性噬菌体的增殖过程。 3、简述细菌革兰氏染色的步骤及注意事项。 4、根霉、青霉、曲霉的哪些形态特征可作为其分类鉴定的依据？ 5、有四种细菌，分别属于金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、乳酸杆菌及梭状芽孢杆菌。由于保存菌种时标签失落，需要重新鉴别，简要叙述这四种细菌的判别方法。6、简单论述微生物与食品行业的关系。 答
案 一、名词解释（30分） 1、质粒：染色体外的遗传物质。 2、异型乳酸发酵: 发酵产物中除乳酸外，还有乙醇、乙酸及CO2等其它产物的，称为异型乳酸发酵。 三亿文库包含各类专业文献、应用写作文书、中学教育、文学作品欣赏、外语学习资料、生活休闲娱乐、71食品微生物学试卷等内容。　
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