色谱柱死体积怎么算
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按字母分类 ：中文名称：色谱柱 英文名称：chromatographic column 定义：一种内有固定相，用以分离混合物的柱管。 所属学科：机械工程（一级学科）；分析仪器（二级学科）；色谱仪器-色谱仪器仪器和附件（三级学科） 本内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布 百科名片
色谱柱色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。目录简介色谱柱的构造色谱柱的分类正相色谱柱与反相色谱柱的区别色谱柱的安装流动相平衡样品制备与操作保存色谱柱发展方向填充和性能评价使用和维护注意事项简介 色谱柱的构造 色谱柱的分类 正相色谱柱与反相色谱柱的区别 色谱柱的安装 流动相平衡 样品制备与操作 保存色谱柱发展方向 填充和性能评价 使用和维护注意事项展开 编辑本段简介　　chromatographic column 　　装填有固定相用以分离混合组分的柱管。 　　多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。 　　色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。液相色谱通常均采用填充柱。 　　色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相，以及色谱柱的制备和操作条件。 　　色谱是一种分离分析手段，分离是核心，因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好，分析速度快等。市售的用于HPLC的各种微粒填料如多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球（包括离子交换树脂）、多孔碳等，其粒度一般为3,5,7,10μm等，柱效理论值可达5~16万/米。对于一般的分析只需5000塔板数的柱效；对于同系物分析，只要500即可；对于较难分离物质对则可采用高达2万的柱子，因此一般10~30cm左右的柱长就能满足复杂混合物分析的需要。 　　柱效受柱内外因素影响，为使色谱柱达到最佳效率，除柱外死体积要小外，还要有合理的柱结构（尽可能减少填充床以外的死体积）及装填技术。即使最好的装填技术，在柱中心部位和沿管壁部位的填充情况总是不一样的，靠近管壁的部位比较疏松，易产生沟流，流速较快，影响冲洗剂的流形，使谱带加宽，这就是管壁效应。这种管壁区大约是从管壁向内算起30倍粒径的厚度。在一般的液相色谱系统中，柱外效应对柱效的影响远远大于管壁效应。编辑本段色谱柱的构造　　色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成，压力不高于70 kg/cm2 时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效，减小管壁效应，不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度，其效果与抛光相同。还有使用熔融硅或玻璃衬里的，用于细管柱。色谱柱两端的柱接头内装有筛板，是烧结不锈钢或钛合金，孔径0.2~20&m(5~10&m)，取决于填料粒度，目的是防止填料漏出。 　　色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类，尺寸规格也不同：①常规分析柱（常量柱），内径2~5mm（常用4.6mm，国内有4mm和5mm），柱长10~30cm；②窄径柱（narrow bore，又称细管径柱、半微柱semi-microcolumn），内径1~2mm，柱长10~20cm；③毛细管柱（又称微柱microcolumn），内径0.2~0.5mm；④半制备柱，内径＞5mm；⑤实验室制备柱，内径20~40mm，柱长10~30cm；⑥生产制备柱内径可达几十厘米。柱内径一般是根据柱长、填料粒径和折合流速来确定，目的是为了避免管壁效应。编辑本段色谱柱的分类　　常见的分配住填料：碳十八柱（ODS/C18)、碳八柱（MOS/C8）、碳六柱（Hexyl/C6）、 　　碳四柱（Butyl/C4）、碳一柱（Methyl/C1）、阴离子交换柱（SAX)、 　　阳离子交换柱（SCX）、苯基柱（Phenyl）、氨基柱（Amino/NH2）、 　　氰基柱（Cyano/CN/Nitrile） 　　常见的吸附柱填料：硅胶柱编辑本段正相色谱柱与反相色谱柱的区别色谱柱的安装　　1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积，进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线，同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前，确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。 　　2、为了使色谱柱与仪器系统达最佳的连接效果，应尽量使用与色谱柱接口相匹配的螺帽和锥形接头，如原来的接头长期匹配其他类型的色谱柱，建议在连接新色谱柱前应检查匹配情况，避免造成色谱柱的损坏或因色谱柱不匹配造成的漏液。 　　3、使用PEEK 材料的通用接头，只需用手拧紧不需要特定扳手，使用压力为5000psi；使用温度不得超过100℃。流动相平衡　　1、在进行样品检测前，至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生。 　　2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤,消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。不应使用纯水作为流动相冲洗C18色谱柱，以免柱性能损坏（添加5％的有机溶剂冲洗色谱柱，同时可以达到对缓冲盐清洗的作用。还可以使色谱柱更容易平衡）。 　　3、流动相需脱气后使用，可避免因气泡导致的泵和检测器的工作不正常。如果测试时使用的流动相与色谱柱保存使用的流动相有较大区别，应该使用过度分布的形式进行平衡。避免由于流动相的突然变化造成柱压增加过大或流动相缓冲盐结晶造成对色谱柱和仪器系统的损坏。正相色谱柱比反相色谱柱需要更长的平衡时间。样品制备与操作　　1、样品应当尽可能溶解在能与流动相相互溶的溶剂中。除特殊指明外，如使用强溶剂溶解样品柱子的分辨率将可能降低。 　　2、样品溶液在进样前应使用针头式过滤器对样品预先过滤。频繁改变流动相组成，会加速降低柱效。 　　3、色谱柱由高压匀浆法装填，能承受较高压力。为获得最佳分离效果，使用时请不要超过200kgf，而且避免压力突然上升或变化，否则会造成硅胶填料的破坏，减少色谱柱的使用寿命。除特殊要求外最高操作温度不要超过60℃。保存色谱柱　　1、如果流动相含有酸或无机盐，应当先用去离子水（20倍柱体积）冲洗干净。然后用用100％乙腈或甲醇保存色谱柱。最后用柱子的接头密封，并放在稳定的环境中存放。 　　2、应避免色谱柱受到直接的机械冲击或摔落，避免造成色谱柱性能的降低。 　　色谱柱的再生： 　　用相当于20倍柱体积的溶剂按下列顺序冲洗柱子，建议按柱子的箭头方向冲洗，尽可能不反冲。冲洗时使用的的参考溶剂顺序是水、甲醇、氯仿、异丙醇。编辑本段发展方向　　因强调分析速度而发展出短柱，柱长3~10cm，填料粒径2~3&m。为提高分析灵敏度，与质谱(MS)联接，而发展出窄径柱、毛细管柱和内径小于0.2mm的微径柱（microbore）。细管径柱的优点是：①节省流动相；②灵敏度增加；③样品量少；④能使用长柱达到高分离度；⑤容易控制柱温；⑥易于实现LC-MS联用。 　　但由于柱体积越来越小，柱外效应的影响就更加显著，需要更小池体积的检测器（甚至采用柱上检测），更小死体积的柱接头和连接部件。配套使用的设备应具备如下性能：输液泵能精密输出1~100&l/min的低流量，进样阀能准确、重复地进样微小体积的样品。且因上样量小，要求高灵敏度的检测器，电化学检测器和质谱仪在这方面具有突出优点。编辑本段填充和性能评价　　色谱柱的性能除了与固定相性能有关外，还与填充技术有关。在正常条件下，填料粒度＞20&m时，干法填充制备柱较为合适；颗粒＜20&m时，湿法填充较为理想。填充方法一般有4种：①高压匀浆法，多用于分析柱和小规模制备柱的填充；②径向加压法，Waters专利；③轴向加压法，主要用于装填大直径柱；④干法。柱填充的技术性很强，大多数实验室使用已填充好的商品柱。 　　必须指出，高效液相色谱柱的获得，装填技术是重要环节，但根本问题还在于填料本身性能的优劣，以及配套的色谱仪系统的的结构是否合理。 　　无论是自己装填的还是购买的色谱柱，使用前都要对其性能进行考察，使用期间或放置一段时间后也要重新检查。柱性能指标包括在一定实验条件下（样品、流动相、流速、温度）下的柱压、理论塔板高度和塔板数、对称因子、容量因子和选择性因子的重复性，或分离度。一般说来容量因子和选择性因子的重复性在±5%或±10%以内。进行柱效比较时，还要注意柱外效应是否有变化。 　　一份合格的色谱柱评价报告应给出柱的基本参数，如柱长、内径、填料的种类、粒度、色谱柱的柱效、不对称度和柱压降等。编辑本段使用和维护注意事项　　色谱柱的正确使用和维护十分重要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。 　　①　避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓（如前所述）。 　　②　应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。 　　③　一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。 　　④　选择使用适宜的流动相（尤其是pH），以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避免分析柱中的硅胶基质被溶解。 　　⑤　避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。 　　⑥　经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50~75ml。 　　下面列举一些色谱柱的清洗溶剂及顺序，作为参考：硅胶柱以正已烷（或庚烷）、二氯甲烷和甲醇依次冲洗，然后再以相反顺序依次冲洗，所有溶剂都必须严格
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CORTECS UPLC色谱柱VanGuard预柱，3个/包（保护柱）美国沃特世Waters
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【简单介绍】
CORTECS UPLC色谱柱VanGuard预柱，3个/包（保护柱）美国沃特世Waters，沃特世持续发展与扩充UPLC色谱柱家族，至今已包括四大颗粒平台（BEH、HSS、CSH和CORTECS），并且将其扩展至HPLC粒径。此外，有7种以应用为导向的UPLC固定相，服务于：SEC、氨基酸、蛋白质、肽、寡核苷酸和糖苷。
【详细说明】
CORTECS UPLC色谱柱VanGuard预柱，3个/包(保护柱)美国沃特世WatersUPLC色谱柱及相关耗材UPLC色谱柱&&&&2004年，沃特世公司推出了超高效液相色谱技术(UPLC：Ultra-Performance&Liquid&Chromatography)而为分离科学带来了重大变革。在仪器技术与色谱柱技术上的创新，使液相色谱的分离度、速度和灵敏度达到先所未有的高度。在液相色谱技术发展的历史中，第一次，对色谱颗粒技术与仪器设计同时进行创新，以满足和跨越现代分析实验室面临的要求与挑战，帮助分析科学家工作更成功，用户组织商业项目效率更高、收益更大。四十多年来，人们一直孜孜不断的缩小色谱颗粒的粒径以获得更高的色谱分离效能。但到了近期，液相色谱技术到达一个发展瓶颈：受到仪器谱带展宽和压力限制的负面影响，更小粒径的优势不再能完全被表现出来。UPLC系统移除了这些障碍！它使得填充以更小粒径(1.7-1.8&μm)的色谱柱能达到理论性能，同时在压力高达18,000psi(1241bar)条件下仍能精准输送流动相，从而使液相色谱性能达到新境界。沃特世持续发展与扩充UPLC色谱柱家族，至今已包括四大颗粒平台(BEH、HSS、CSH和CORTECS)，并且将其扩展至HPLC粒径。此外，有7种以应用为导向的UPLC固定相，服务于：SEC、氨基酸、蛋白质、肽、寡核苷酸和糖苷。沃特世拥有应对小分子分析和生物制药分析所需的各种选择性，我们为您的应用需要提供UPLC色谱柱解决方案。ACQUITY&UPLC颗粒技术BEH亚乙基桥杂化颗粒技术(Ethylene&Bridged&Hybrid：BEH)1.7μm的BEH颗粒是UPLC技术的主要支撑者。目前它有4种孔径(125&?，130&?，200&?和300&?)和几种固定相，用于反相色谱和HILIC色谱，适用分析物从小分子到大的生物制药分子。由于杂化颗粒技术的突出化学稳定性，更宽泛的pH条件&(pH&1-12)可以被采用，从而使方法开发工作获得更通用和耐受的分离工具。BEH&颗粒技术也具有HPLC粒径产品&(2.5,&3.5,&5,&和10&μm)&对应XBridgeHPLC&柱家族，这确保在HPLC和UPLC技术平台之间方法可无缝转换。HSS高强度硅胶(High&Strength&Silica：HSS)具有高孔容的HPLC颗粒不具有足够的机械稳定性来承受UPLC分离技术所需要的高压、这一局限导致沃特世材料科学家研发出新的硅胶颗粒技术，专为提高机械强度以及具备合适的形态，以耐受高压条件而具有好的柱寿命和UPLC效率。于是，1.8&μm&HSS颗粒，是第一个100%硅胶颗粒，专门设计、测试以供UPLC应用，耐压高达18,000&psig(1241&bar)。HSS颗粒技术也具有HPLC粒径产品(2.5,&3.5和5&μm)，对应于XSelect&HSS&HPLC柱家族，这确保在HPLC和UPLC技术平台之间方法可无缝转移。CSH表面带电杂化颗粒技术(Charged&Surface&Hybrid：CSH)1.7&μm的CSH颗粒是沃特世第三代杂化颗粒技术。基于沃特世BEH(亚乙基桥杂化)颗粒技术，CSH颗粒带有低水平的表面电荷，设计在低离子强度流动相条件下提高样品载量和峰对称性，同时仍维持BEH颗粒技术固有的机械与化学稳定性。CSH技术的优势包括：对于碱性化合物的优越峰形提高载量更换流动相pH后柱再平衡速度快改善的批次之间重现性在低pH和高pH条件下优异的稳定性CSH颗粒技术也具有HPLC粒径产品(2.5,&3.5和5μm)，对应于XSelect&CSH&HPLC柱家族，这确保在HPLC和UPLC技术平台之间方法可无缝转换。新！CORTECS实心核颗粒技术(CORTECS&Solid-Core&Technology)2013年，沃特世推出了超高效液相(Ultra-performance&LC)色谱柱系列的最新成员&—&CORTECS&1.6&μm实心核颗粒色谱柱，将UPLC柱的柱效和分离能力提升至前所未有的新高度。特别适用于复杂样品，将通量效率最大化。CORTECS技术的优势包括：高柱效的UPLC柱(与全孔亚二微米UPLC柱相比，柱效提高可达39%)在相似的柱效下获得更高通量在相同的反压下获得更高性能新！CORTECS&UPLC柱实心核颗粒，提供更高柱效人们最初认为2.7&μm实心核颗粒色谱柱的高柱效是因为实心颗粒比全多孔颗粒拥有更短的扩散路径，可获得更快的传质动力学。但对于低分子量的分析物，高扩散速率对柱效的改善非常有限。当前研究表明，实心核颗粒可通过减小Van&Deemter方程中的三个参数来提高色谱性能。实现全新柱效标准与相似粒径的全多孔颗粒相比，实心核颗粒因其形态特征的特殊性而更有可能获得更高柱效。要实现这个理论柱效，还需要配合正确的色谱柱硬件和最佳的柱装填技术。沃特世凭借多年领先的UPLC柱生产经验，采用超低扩散的色谱柱硬件与独家柱装填技术，配合全新CORTECS颗粒，树立了UPLC色谱柱柱效新标准。以最高柱效实现最大分离度利用CORTECS&HILIC色谱柱改善局部麻醉药的分离度。快速分离，提高通量CORTECS色谱柱的另一优势在于只需增加方法的流速即可提高样品分析通量，并具有相当或更好的峰容量。或者，使用比原分离所用色谱柱更短的CORTECS高效色谱柱，在保持相似峰容量的同时还可实现更短的再平衡时间。这样既提高了分析速度又不会牺牲分离性能，能够让您在相同的时间内分析更多样品或更快速地获得结果，从而降低分析和实验室运营的成本。采用CORTECS&C18+色谱柱改善碱性分析物的峰形和上样量基于2010年沃特世成功推出的表面带电杂化颗粒技术(CSH?)，为颗粒表面赋予少量正电荷，可以使用低离子强度的流动相(如甲酸)，对碱性化合物仍能获得卓越的峰形与载量。采用CORTECS&HILIC色谱柱改善极性分析物的保留性能亲水作用色谱(HILIC)是一种对在反相色谱中保留性能较差的强极性分析物进行有效保留的模式。CORTECS&HILIC色谱柱所含的未键合实心颗粒可以保留极性化合物。在反相色谱中，通常采用高比例水相流动相来保留极性分析物，HILIC则是使用含有高比例有机溶剂的流动相实现对极性分析物的保留。1.CORTECS&UPLC色谱柱色谱柱填料&粒径&尺寸&部件编号1个/包&&部件编号3个/包CORTECS&UPLC&C18&1.6&μm&2.1&x&30&mm&6003146CORTECS&UPLC&C18&1.6&μm&2.1&x&50&mm&6003147CORTECS&UPLC&C18&1.6&μm&2.1&x&75&mm&6003148CORTECS&UPLC&C18&1.6&μm&2.1&x&100&mm&6003149CORTECS&UPLC&C18&1.6&μm&2.1&x&150&mm&6003150CORTECS&UPLC&C18&1.6&μm&3.0&x&30&mm&6003151CORTECS&UPLC&C18&1.6&μm&3.0&x&50&mm&6003152CORTECS&UPLC&C18&1.6&μm&3.0&x&75&mm&6003153CORTECS&UPLC&C18&1.6&μm&3.0&x&100&mm&6003154CORTECS&UPLC&C18&1.6&μm&3.0&x&150&mm&6003155CORTECS&UPLC&HILIC&1.6&μm&2.1&x&30&mm&6003156CORTECS&UPLC&HILIC&1.6&μm&2.1&x&50&mm&6003157CORTECS&UPLC&HILIC&1.6&μm&2.1&x&75&mm&6003158CORTECS&UPLC&HILIC&1.6&μm&2.1&x&100&mm&6003159CORTECS&UPLC&HILIC&1.6&μm&2.1&x&150&mm&6003160CORTECS&UPLC&HILIC&1.6&μm&3.0&x&30&mm&6003161CORTECS&UPLC&HILIC&1.6&μm&3.0&x&50&mm&6003162CORTECS&UPLC&HILIC&1.6&μm&3.0&x&75&mm&6003163CORTECS&UPLC&HILIC&1.6&μm&3.0&x&100&mm&6003164CORTECS&UPLC&HILIC&1.6&μm&3.0&x&150&mm&6003165CORTECS&UPLC&C18+&1.6&μm&2.1&x&30&mm&6003166CORTECS&UPLC&C18+&1.6&μm&2.1&x&50&mm&6003167CORTECS&UPLC&C18+&1.6&μm&2.1&x&75&mm&6003168CORTECS&UPLC&C18+&1.6&μm&2.1&x&100&mm&6003169CORTECS&UPLC&C18+&1.6&μm&2.1&x&150&mm&6003170CORTECS&UPLC&C18+&1.6&μm&3.0&x&30&mm&6003171CORTECS&UPLC&C18+&1.6&μm&3.0&x&50&mm&6003172CORTECS&UPLC&C18+&1.6&μm&3.0&x&75&mm&6003173CORTECS&UPLC&C18+&1.6&μm&3.0&x&100&mm&6003174CORTECS&UPLC&C18+&1.6&μm&3.0&x&150&mm&6003175VanGuard预柱，3个/包(保护柱)色谱柱填料&粒径&尺寸&部件编号CORTECS&UPLC&C18&1.6&μm&2.1&x&5&mm&CORTECS&UPLC&HILIC&1.6&μm&2.1&x&5&mm&CORTECS&UPLC&C18+&1.6&μm&2.1&x&5&mm&2.CORTECS&UPLC色谱柱方法验证套件(MVK)*色谱柱填料&粒径&尺寸&部件编号CORTECS&UPLC&C18&1.6&μm&2.1&x&30&mm&CORTECS&UPLC&C18&1.6&μm&2.1&x&50&mm&CORTECS&UPLC&C18&1.6&μm&2.1&x&75&mm&CORTECS&UPLC&C18&1.6&μm&2.1&x&100&mm&CORTECS&UPLC&C18&1.6&μm&2.1&x&150&mm&CORTECS&UPLC&C18&1.6&μm&3.0&x&30&mm&CORTECS&UPLC&C18&1.6&μm&3.0&x&50&mm&CORTECS&UPLC&C18&1.6&μm&3.0&x&75&mm&CORTECS&UPLC&C18&1.6&μm&3.0&x&100&mm&CORTECS&UPLC&C18&1.6&μm&3.0&x&150&mm&CORTECS&UPLC&HILIC&1.6&μm&2.1&x&30&mm&CORTECS&UPLC&HILIC&1.6&μm&2.1&x&50&mm&CORTECS&UPLC&HILIC&1.6&μm&2.1&x&75&mm&CORTECS&UPLC&HILIC&1.6&μm&2.1&x&100&mm&CORTECS&UPLC&HILIC&1.6&μm&2.1&x&150&mm&CORTECS&UPLC&HILIC&1.6&μm&3.0&x&30&mm&CORTECS&UPLC&HILIC&1.6&μm&3.0&x&50&mm&CORTECS&UPLC&HILIC&1.6&μm&3.0&x&75&mm&CORTECS&UPLC&HILIC&1.6&μm&3.0&x&100&mm&CORTECS&UPLC&HILIC&1.6&μm&3.0&x&150&mm&CORTECS&UPLC&C18+&1.6&μm&2.1&x&30&mm&CORTECS&UPLC&C18+&1.6&μm&2.1&x&50&mm&CORTECS&UPLC&C18+&1.6&μm&2.1&x&75&mm&CORTECS&UPLC&C18+&1.6&μm&2.1&x&100&mm&CORTECS&UPLC&C18+&1.6&μm&2.1&x&150&mm&CORTECS&UPLC&C18+&1.6&μm&3.0&x&30&mm&CORTECS&UPLC&C18+&1.6&μm&3.0&x&50&mm&CORTECS&UPLC&C18+&1.6&μm&3.0&x&75&mm&CORTECS&UPLC&C18+&1.6&μm&3.0&x&100&mm&CORTECS&UPLC&C18+&1.6&μm&3.0&x&150&mm&*每个套件包括来自3个不同填料批次的3根色谱柱。
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液相色谱柱的使用和维护规程
　　在我们平常的工作当中，液相色谱柱的正确使用和维护十分重要，液相色谱柱使用是否得当，直接影响液相色谱柱的寿命，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。
　　二、液相色谱柱的使用和维护规程
　　在液相色谱操作过程中，我们需要下面的问题，方便维护液相色谱柱。
　　A柱子在装卸、更换时，动作要轻，接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动，以免柱床产生空隙。
　　B.如果仪器用来做常规分析，样品种类有限，但分析次数多，则不妨为每一类常规分析配置一根专用柱，这样有助于延长柱子的寿命。
　　C.避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使液相色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。
　　D.应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。
　　E.如使用柱温控制装置时，应注意在通人流动相后才能升温。
　　F.一般说来液相色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。
　　G.选择使用适宜的流动相，以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一个预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避免分析柱中的硅胶基质被溶解。
　　H.避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注人柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一个保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。
　　I.经常用强溶剂冲洗液相色谱柱，清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50-75mL。
　　J.保存液相色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。******禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。
　　K.液相色谱柱使用过程中，如果压力升高，一种可能是烧结滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出进行清洗;另一种可能是大分子进人柱内，使柱头被污染;如果柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。
　　L.在完成分离分析工作之后，不能马上就关机，需及时对色谱分析系统进行冲洗，一般0.5h以上，以除去液相色谱柱内的杂质。
液相色谱柱
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