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溃疡性结肠炎与5
第2 中国中西医结合消化杂志 1 卷第 6 期第 2 8 4页 V o l 2 1N o 6P2 8 4                     2 0 1 3年6月 C h i n J I n t e r T r a d  W e s t M e d D i J u n 2 0 1 3             g g: / . i s s n . 1 6 7 1 d o i 1 0 . 3 9 6 9 0 3 8 X . 2 0 1 3 . 0 6 . 0 2 - j溃疡性结肠炎与 5 - 羟色胺转运体基因多态性的关系朱炳喜 ,   罗冠琴( ) 徐州医学院附属医院 消化内科 , 江苏 徐州 2 2 1 0 0 2 [ 目的 ] 探讨溃疡性结肠炎 ( 与5 基 因 多 态 性 的 关 系。[ 方法] 聚 U C) 5 T L P R)    摘要 : -羟 色 胺 转 运 体 启 动 区 ( -HT 合酶链反应技术检测 3 病例组 ) 与3 结 果 ]病 例 组 0例 U C 患者 ( 0 例健康对照组 5 T L P R 多态性的分布频率 。 [ -HT / / 健康对照组 S 5 T L P R的S S 基因频率为 5 0 . 0% , S 基因频率为 3 3 . 3% , 2 组之间比较差异有统计学意义 ( P< -HT ) 。 病例组 5 / / / / 健康对照组 L 0 . 0 5 T L P R的L S、 L L 的基因频率分别为 4 0 . 0% 、 1 0 . 0% , S、 L L 的基因频率分别 -HT ) 。[ / 为4 差异无统计学意义 ( 结论 ] 3 . 3% 、 2 3 . 3% , 2 组之间比较 , P>0 . 0 5 5 T L P R的S S基 因 型 可 能 与 U C的 -HT 发病有关 。 结肠炎 , 溃疡性 ;    关键词 :  5 -羟色胺转运体基因 ;   多态性 ) R 5 7 4 . 6 2    文献标志码 : A    文章编号 : 1 6 7 1 0 3 8 X( 2 0 1 3 0 6 0 2 8 4 0 3    中图分类号 : - - -e n e o l m o r h i s m s A s s o c i a t i o n b e t w e e n s e r o t o n i n t r a n s o r t e r a n d             g p y p p u l c e r a t i v e c o l i t i s  ZHU  B i n x i, L U O  G u a n i n - g- q( , , D e a r t m e n t o f G a s t r o e n t e r o l o t h e A f f i l i a t e d H o s i t a l o f X u z h o u M e d i c a l C o l l e e                 p g y p g , ) J i a n s u P r o v i n c e X u z h o u 2 2 1 0 0 2, C h i n a     g : , : C o r r e s o n d i n a u t h o r Z HU B i n x i E-m a i l 8 2 2 0 0 4 9 6@1 6 3 . c o m   - p g g   : [ ] o l m o r b s t r a c t O b e c t i v e T o e x l o r e t h e a s s o c i a t i o n b e t w e e n u l c e r a t i v e c o l i t i s( U C)a n d t h e    A                 - p y p j [ ] o f s e r o t o n i n t r a n s o r t e r( S E R T) l i n k e d r e i o n( 5 T L P R) . M e t h o d s P o l h i s m s e n e o l m o r h i c        g -     -HT - p g y p p y p m e r a s e c h a i n r e a c t i o n( P C R)w a s u s e d t o d e t e c t 5 T L P R o l m o r h i s m o f S E R T e n e i n 3 0p a t i e n t s             -HT             p y p g [ ] / w i t h U C a n d i n 3 0c o n t r o l s u b e c t s . R e s u l t s T h e S S f r e u e n c o f 5 T L P R a l l e l e s w a s s i n i f e n o t e                   -HT       - j q y g g y p   ) i c a n t l h i h e r i n U C t h a n i n c o n t r o l s( 5 0 . 0% v s 3 3 . 3% ; b o t h P<0 . 0 5 . T h e 5 T L P R a t i e n t s e n o                   -HT   - y g p g   / / , / / a t i e n t s t e s f r e u e n c i e s s h o w e d t h a t L L w a s 1 0 . 0% , L S w a s 4 0 . 0% i n U C a n d L L 2 3 . 4% , L S                       p y p q , ) 4 3 . 3%i n c o n t r o l s u b e c t s t h e r e w a s n o d i f f e r e n c e b e t w e e n U C a t i e n t s a n d c o n t r o l s s u b e c t s( P <0 . 0 5 .                       j p j [ ] / e n o t e l a a t h o e n e s i s C o n c l u s i o n 5 T L P R L L m a a n i n o r t a n t r o l e i n t h e o f u l c e r a t i v e c o l i t i s . -HT                       g y p p y p g y p     : ; ; e w o r d s u l c e r a t i v e c o l i t i s e r o t o n i n t r a n s o r t e r e n e o l m o r h i s m   K    s    g   p p y p y  收稿日期 : 2 0 1 2 1 0 2 4 - - : ) 基金项目 : 江苏省徐州市科技局基金资助项目 ( N o X F 1 0 C 0 6 7 作者简介 : 朱炳喜 , 主任医师 , 主要研究领域为炎症性肠病发病机制 : 通讯作者 : 朱炳喜 , E-m a i l 8 2 2 0 0 4 9 6@1 6 3 . c o m[ ] 中国慢性胃炎研 讨 会 共 识 7   中华医学会消化病学分会 . ] ( ) : 意见 [ 现代消化及介入诊疗 , J . 2 0 0 7, 1 2 1 5 5-6 0 . [ ] 慢性 8   中国中西医结合学会消化系统疾病专业委员 会 . [ ] 胃炎的中西医结 合 诊 治 方 案 ( 重庆) 现代消化及 J . ( ) : 介入诊疗 , 2 0 0 5, 1 0 3 1 8 1-1 8 4 . [ ] 王 丽, 石灯汉, 等 . 慢性胃炎中医证候归类的 9   朱飞叶 , ] : 世界 中 西 医 结 合 杂 志 , 流行病学研究 [ J 2 0 0 8, 3( 2) 9 5-9 7 . [ ] 窦肇华 , 张远强 , 郭顺根 . 免疫细胞学与疾病[ 北 1 0 M] . 京: 中国医药科技出版社 , 2 0 0 4: 8 6 0-9 0 1 . [ ] 徐跃荣 , 文介夫 , 卢放根 , 等 . 疣状胃炎与 幽 门 螺 杆 菌 、 1 1 ] 胃泌素和表皮 生 长 因 子 三 者 的 关 系 [ 中国内镜杂 J . ( ) : 志, 1 9 9 8, 4 6 5 6-5 6 . 朱炳喜 , 等 . 溃疡性结肠炎与 5 -羟色胺转运体基因多态性的关系?2 8 5?, 为肠道 u l c e r a t i v e c o l i t i s U C)    溃 疡 性 结 肠 炎 (   慢性非特异性炎症 , 近年来国内报道日渐增多 , 成为 消化系常见疾病[ 1]检验 。 用 S P S S 1 3 . 0 统计软件对数据进行统计分析 。 2  结果 2 . 1 5 T L P R 多态性位的基因型电泳图结果 -HT 5 T L P R 多态性位的基因型电泳图见图 1。 -HT。U C 的发病机制至今仍不完全清楚 , 无理想的治疗方法 , 探讨其发病机制及寻找新 一 直 是 本 病 研 究 的 热 点, 近年来5 的治疗手 段 , -羟 , 色胺 ( 信号系统在炎症 5 h d r o x t r t a m i n e 5 - -HT) y y y p2] 。 性 肠 病 发 病 机 制 中 的 作 用 引 起 研 究 学 者 的 重 视[基因多态性参与 5 5 T L P R) -HT 转运体启动区 ( -HT 3] , 了5 已证实其与多种胃肠道疾病有关 [ -HT 调控 , 但在 U C 中的意义未见报道 。 本文研究了 U C 患者 与健康 对 照 者 的 5 探讨其 T L P R 基 因 多 态 性, -HT 在U C 的发病机制的意义 。 1  对象与方法 1 . 1  对象 ― ― ―2 均为2 病例组 : 0 0 5 0 5 0 1 2 0 5期间住院的 - - 轻、 中度 U 男1 女2 年龄 2 C 患者 , 3 0例, 0例, 0例, 4 ( )岁 ; 平均 3 主要临床表现为腹泻 、 黏液脓 0 8 . 2 6 ~6 腹痛 、 里急后重 , 部 分 患 者 有 肠 外 表 现, 血便 、 U C的 诊断符合 2 0 0 7 0 5 中华消化疾病学术会议上通过的 - 《 我国炎症性肠病诊治规范共识意见 》 。[ 4]/ / / / / 归入 L 1: L S; 2: S S; 3: L L; 4: X L L( L) 图 1 5 T L P R 多态性位的基因型电泳图 -HT2 . 2  病 例 组 与 对 照 组 5 T L P R 基因型频率比 -HT 较 / 病例组 5 T L P R的S S 基因频率为 5 0 . 0% -HT ( , / 健康对照组 S 1 5 例) S基因频率为3 3 . 3% ( 1 0 , , ( ) 。 例) 组间比较 差异有统计学意义 病 2 P<0 . 0 5 / / 例组 5 T L P R的L S、 L L 的基因频率分别为 -HT 、 , / / 健康对照组 L 4 0 . 0% ( 1 2 例) 1 0 . 0% ( 3 例) S、 L 、 L的基因频率分别为4 3 . 3% ( 1 3 例) 2 3 . 4% ( 7 , ) 。 例) 差异无统计学意义 ( 2 组间比较 , P>0 . 0 5 3  讨论 其病因 U C 被 世 界 卫 生 组 织 列 为 疑 难 病 之 一, 如何治愈 U 和发 病 机 制 尚 未 阐 明 , C 成为研究的难 点和重点 。 探讨其 发 病 机 制 及 寻 找 新 的 治 疗 手 段 , 一直是本病研究领域中的热点问题 。 近年来 5 -HT 信号系统在炎症性肠病发病机制 2] 。5 中的作用引 人 关 注 [ -HT 通 过 作 用 于 5 -HT 受 体参与胃肠 道 运 动 、 感 觉 和 分 泌 功 能 的 调 节, 其合 成、 贮存 、 释放和重吸收的任一环节发生改变都会引 内脏反应高敏感和分泌功能 起胃肠运动功能失 调 、5] 。而 5 异常 [ s e r o t o n i n t r a n s o r t -羟 色 胺 转 运 体 (   - p健康对照组 : 为 同 期 健 康 体 检 者, 男1 3 0 例, 2 )岁 。 例, 女1 年龄 2 平均 4 8例, 3~5 8( 0 . 2 2 年龄 比 较 差 异 无 统 计 学 意 义 。 U 2 组间性别 、 C 、 患者入组前 1 个月 均 未 使 用 水 杨 酸 制 剂 糖 皮 质 激 免疫抑制剂及生物制剂等 。 素、 1 . 2  方法 1 . 2 . 1  提取基因组 D NA  所有受试者肘静脉采血 , 采用 K 2m l E D TA?K 2 抗凝 , I法提取 D NA。 1 . 2 . 2 D NA- P C R 扩增   根据 B o r r o n i的研究 5 并 参照 P 设 r i m e r E x r e s s S o f t w a r e 5 . 0 的 设 计 原 则,       p[]上海 生 工 生 物 工 程 技 术 服 务 有 限 公 司 计 2 对引物 ( 。 引物序列如下 : 合成 ) 5 T 基因转运体连锁区 ( -HT 5 T e n e l i n k e d o l m o r h i c r e i o n, 5 T L -HT   -     -HT - g p y p g 多态 性 : 上游引物5 P R) ′ G C C AG C A C C TAA C -AT - 下游引5 C C C TAAT G T-3‘ ′ GA C C G C AAG G T -G - ; G G G C G G GA 3 ′ P C R 反 应 体 系: 1 5 ×P C R  m a i x - , ) , , 上下游引 物 ( 各1 加双 7 . 5 l 2 5 m o l l D NA 1 l   p μ μ μ ; : 蒸水 至 总 反 应 体 积 1 5 l 反应条件 9 4℃ 预 变 性 5 μ , 、 、 继以 9 m i n 4℃ 变 性 3 0s 5 8℃ 退 火 3 0s 7 2℃ 延 伸 , 、 、 继以 9 4 5 s 3 个循环 , 4℃ 变 性 3 0s 6 0℃ 退 火 3 0s , 7 2℃ 延 伸 4 5 s 2 5个循环7 2℃ 后 延 伸 5 m i n。P C R 扩增产物的目的片段为 S 3 7 5 b L 4 1 9、 X L 5 0 7 b p、 p。 1 . 2 . 3  琼 脂 糖 凝 胶 电 泳   对 P C R 扩增产物进行 2% 的琼脂糖凝胶电泳 。 1 . 3  统计学处理方法   基因型频 率 以 % 表 示 , 差异显著性比较采用 χ2, 蛋白在5 e r S E R T) -HT 的 转 运 及 代 谢 过 程 中 发 挥 着重要作用 , 其主要 生 理 作 用 在 于 将 效 应 部 位 的 5 - 避免5 HT 再 摄 取 , -HT 聚 集 而 致 5 -HT 受 体 脱 [ 6] 敏 。5 T L P R的多态性调控了5 S E R T 的表 -HT - 达, 5 T L P R 基因多态性已证实与多种胃肠道疾 -HT3] , 而其在 U 病有关 [ C 发病机制中的作用鲜见报道 。本课 题 采 用 聚 合 酶 链 反 应 技 术 , 检测 U C 患者和健 康者 的 5 T L P R 多 态 性 的 分 布 频 率。 结 果 表 -HT / 明, 病例组 5 T L P R的S S 基因频率为 5 0 . 0% , -HT / 健康对照组 S 差 S 基因频率为3 3 . 3% , 2 组间比较 , 。病例组 5 异有统 计 学 意 义 ( P <0 . 0 5) T L P R -HT ?2 8 6?中国中西医结合消化杂志  2 0 1 3 年 6 月第 2 1 卷第 6 期/ / 的L 健 S、 L L 的基因频率分别为 4 0 . 0% 、 1 0 . 0% , / / 康对 照 组 L S、 L L 的基因频率分别为4 3 . 3% 、 , 差异无统计学意义 ( 2 3 . 3% , 2 组间比较 , P>0 . 0 5) / 本研究提示 U C 患者5 T L P R的S S基因频率 -HT7] 认为5 显著高于健 康 者 。 丁 建 华 等 [ T L P R的 -HT参考文献[ ] 1 I ANG X L, C U I H  F . A n a n a l s i s o f 1 0 2 1 8u l c e r a t i v e  J             y [ ] , c a s e s i n C h i n a J . W o r l d J G a s t r o e n t e r o l 2 0 0 2, c o l i t i s           8: 1 5 8-1 6 1 . [ ] 王海红 . 2 5   王继恒 , -羟色胺信号系统在炎症性肠病发病 ] ( ) : 胃肠病学 , 机制中的地位 [ J . 2 0 0 7, 1 2 7 4 4 6-4 4 7 . [ ] 王邦 茂, 刘玉村 . 3 5   王玉明 , -羟 色 胺 转 运 体 基 因 多 态 性 ] 与功能性肠病研究进展 [ 胃 肠 病 学 和 肝 病 学 杂 志, J . ( ) : 2 0 0 8, 1 7 4 3 3 5-3 3 7 . [ ] 对我国 4   中华医学会消化病学分会炎症性肠病协作组 . 炎症性肠病诊断治疗规 范 的 共 识 意 见 ( 济 南) 2 0 0 7年, ] ( ) : [ 中华消化杂志 , J . 2 0 0 7, 2 7 8 5 4 5-5 5 0 . [ ] 5 E R S HON  M  D . S e r o t o n i n a n d i t s i m l i c a t i o n f o r t h e  G           p [ ] m a n a e m e n t o f i r r i t a b l e b o w e l s n d r o m e J . R e v G a s           - g y , ) : t r o e n t e r o l D i s o r d 2 0 0 3, 3( S u l 2 S 2 5-3 4 .     p p [ ] 6 A I G  M  K, Z HAO R  H, WO O DHOU S E S L, e t a l .  B         V a r i a b i l i t i n s e r o t o n i n a n d e n t e r o c h r o m a f f i n c e l l s i n           y   a t i e n t s w i t h c o l o n i c i n e r t i a a n d i d i o a t h i c d i a r r h o e a a s               p p [ ] , c o m a r e d t o n o r m a l c o n t r o l s J . C o l o r e c t a l D i s 2 0 0 2,         p 4: 3 4 8-3 5 4 . [ ] 付传 刚, 赵 荣 华, 等 . 慢传输型便秘患者5 7   丁建华 , -羟 ] 色胺转运体基因 多 态 性 的 研 究 [ 中华胃肠外科杂 J . ( ) : 志, 2 0 0 6, 9 4 3 2 8-3 3 0 . [ , 8] R O F, F R AGA S, A Z E V E D O I e t a l . I n t e s t i n a l   MAG         h d r o x t r t a m i n e a n d m a s t c e l l i n f i l t r a t i o n i n r a t 5 -             y y y p ] , c o l i t i s[ J . D i D i s S c i 2 0 0 6, 5 1: 4 9 5- e x e r i m e n t a l     g p   5 0 1 . [ ] 9 I N D E N D R, CHE N J X, G E R S HON  M  D, e t a l . S e  L           - u i n e a r o t o n i n a v a i l a b i l i t i s i n c r e a s e d i n m u c o s a o f             g y   [ ] i s w i t h TN B S i n d u c e d c o l i t i s J . Am J P h s i o l G a s     -         - p g y , t r o i n t e s t L i v e r P h s i o l 2 0 0 3, 2 8 5: G 2 0 7-2 1 6 .     y [ ] 张艳丽 , 王承党 , 余鸣秋 . 小鼠葡聚糖硫酸 钠 结 肠 炎 模 1 0 型结肠黏膜 中 5 -羟 色 胺 及 其 转 运 蛋 白 的 变 化 和 意 义 [ ] ( ) : 胃肠病学 , J . 2 0 0 7, 1 2 6 3 5 3-3 5 6 ./ S S基因型可能导致 S E R T 基 因 转 录 效 率 低, S E R TmR NA 稳 定 性 差 , S E R T 重摄取5 -HT 功 能 降低 , 以致过多5 a r o -HT 残 留 于 效 应 部 位 。 M g8] 等[ 研究表明 , 实验性 结 肠 炎 大 鼠 结 肠 炎 性 部 位 5 -非炎性部位5 HT 含量增 多 伴 肥 大 细 胞 浸 润 , -HT 亦增 多 , 注射地塞米松可阻断非炎性部位的5 -HT[] 增多 , 对炎性部位则无 效 。L i n d e n 等 9 在三硝基苯磺酸诱导的豚 鼠 结 肠 炎 模 型 中 , 发现5 -HT 含 量 升 高, 为 正 常 组 的 2 倍, 5 -HT 利 用 度 亦 明 显 升 高 。5 - 导致 5 肠道蠕 HT 利用度增高 , -HT 信 号 转 导 失 衡 , 动反射 、 分泌和运动功能增强 , 从而引起一系列临床 由于葡聚 糖 硫 酸 钠 ( 和病理改变 , D S S)结 肠 炎 模 型 因此5 与人类 U C 极其 相 似 , -HT 信 号 转 导 失 衡 也[0] 。 可能发生在人类 U C中 1/ 本研究 表 明 U C 患者5 T L P R的S S基因 -HT / 频率显著高于健康者 , 5 T L P R的S S 基因型可 -HT 能参与了 U C 的发病机制 。U C 患者中 5 T L P R -HT 基因 多 态 性 在 基 因 表 达 水 平 上 影 响 到 了 S E R T的 转运功 能 , 而S E R T 在5 -HT 的 作 用 时 间 和 强 度 上 导致 U 起着 重 要 的 调 节 作 用 , C 患者5 -HT 系 统 功 能异常 。 本研究 为 5 多 态 性 对U T L P R C 的基 -HT 临床新药 筛 选 及 个 体 化 治 疗 提 供 了 科 学 因型诊断 、 依据 , 并为进一步研究 U C 的发病机制和治疗开辟 了新的途径 。告    示随着本刊知名度及期刊质量的不断提高 , 来稿逐步增加 。 目前稿件 较 多 , 为 满 足 广 大 作 者 的 需 求, 本刊 编委会决定于 2 0 1 3 年起将每期的 4 8 页增至 5 6 页 。 页码增加后期刊价格不变 。 欢迎踊跃投稿 , 欢迎积极订阅 。 《 中国中西医结合消化杂志 》 编辑部
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