相对湿度75的溶液配制 完美作业网 www.wanmeila.com
相对湿度为60%的恒湿溶液怎么配制 蔗糖和NaCl的饱和溶液保持的相对湿度为60%。NaCl饱和溶液(相对湿度75.1%,15.5~60 C),KNO3饱和溶液(相对湿度92.5%, 25 C).
如何用饱和盐溶液制造固定相对湿度环境 1 恒湿溶液是指特定盐的饱和溶液，该饱和溶液在特定温度和压力下，保持三相热力学平衡。2 由恒湿溶液复现的物理量是在给定的温度和压力下的饱和盐溶液上方空气的相对湿度值。3 对于压力P和温度T的湿空气，其相对湿度Uw是水蒸气的摩尔分数XV与相同压力和温度下的饱和湿空气中水蒸气的摩尔分数XVW之比，以百分数表示。恒温溶液是由一组11个湿度固定点(HFP)组成，饱和盐溶液标准相对湿度值借助于11种(饱和)盐获得。在温度20℃下，标准相对湿度值的范围大致从4％到98％。相对湿度值由以下饱和盐组成HFP4 氟化铯CSF 温度从15℃至80℃HFP7 溴化锂LiBr 温度从5℃至80℃HFP11 氯化锂LiCl 温度从5℃至80℃HFP23 醋酸钾CH3COOK 温度从10℃至30℃HFP33 氯化镁MgCl2 温度从5℃至80℃HFP43 碳酸钾K2CO3 温度从5℃至30℃HFP59 溴化钠NaBr 温度从5℃至80℃HFP70 碘化钾KI 温度从5℃至80℃HFP75 氯化钠NaCl 温度从5℃至80℃HFP85 氯化钾KCl 温度从5℃至80℃HFP98 硫酸钾K2SO4 温度从5℃至50℃
如何计算不同温度下饱和盐溶液的相对湿度 相湿度指某温度空气湿含量与该温度空气饱湿含量比饱氯化钠溶液确实控制相湿度前提溶液表面水充进气相空间（体系例假密闭体系装水该体系相湿度100%实际情况难实现比说相湿度超90%）能保证条件氯化钠溶液控制相湿度相湿度该温度溶液饱蒸汽压除该温度空气饱蒸汽压
饱和盐溶液 相对湿度 平衡多久 A、食盐饱和溶液中再加入食盐晶体，不能继续溶解，所以饱和溶液的质量不变，故A错；B、食盐饱和溶液中再加入食盐晶体，不能继续溶解，所以饱和溶液的质量分数不变，故B错；C、食盐饱和溶液中再加入食盐晶体，不能继续溶解，所以晶体质量不变，故C正确；D、食盐饱和溶液中再加入食盐晶体，不能继续溶解，所以晶体质量不变，故D错．故选C．
请问在密闭容器中怎么通过饱和盐溶液获得需要的相对湿度啊？我急着做实验用，谢了 好像有个饱和盐溶液的顶对湿度表，需要什么样的相对湿度，就配置饱和溶液就好了；至于容器，根据个人需要自己选择了，以前我用的是硅胶干燥器（透明、可密封），实验环境是在恒温实验室做的，然后买个湿度计，校验一下。
那里可以学习、参考到ASTM D 用甘油溶液法保持恒定相对湿度？ 北京实华可正石油化工书店—标准图书专业发行网---国家标准 国外标准行业标准SY SH HG ASTM A场ME API
如何用饱和盐水控制湿度 相对湿度是指某一温度下空气中的湿含量与该温度下空气饱和时湿含量之比。饱和氯化钠溶液确实可以控制相对湿度，但是有个前提，就是溶液表面水分可充分的进去气相空间（以你的体系为例，假如你密闭体系中装的是水，那么该体系的相对湿度就是100%，但是实际情况很难实现，比如说相对湿度不会超过90%），如果你能保证这一条件，那么氯化钠溶液就可以控制相对湿度。相对湿度为该温度下溶液的饱和蒸汽压除以该温度空气饱和蒸汽压！
不同浓度的NaCl溶液平衡相对湿度怎么计算 1、根据盐的浓度计算出阴阳离子的总浓度，即阴离子浓度+阳离子浓度，使用质量摩尔浓度；2、根据溶液的依数性计算出蒸气压降低以及溶液的蒸气压；3、根据纯水的饱和蒸气压和溶液的实际蒸气压求得平衡时相对湿度：溶液的饱和蒸气压/纯水的饱和蒸气压 * 100%
关于恒湿溶液 蔗糖和NaCl的饱和溶液保持的相对湿度为60%。NaCl饱和溶液(相对湿度75.1%,15.5~60 C),KNO3饱和溶液(相对湿度92.5%, 25 C).当然可以改变，只要改变温度和压力条件，恒湿条件就改变了。恒湿溶液是指特定盐的饱和溶液,该饱和溶液在特定温度和压力下,保持三相热力学平衡.3.2 由恒湿溶液复现的物理量是在给定的温度和压力下的饱和盐溶液上方空气的相对湿度值.3.3 对于压力P和温度T的湿空气,其相对湿度Uw是水蒸气的摩尔分数XV与相同压力和温度下的饱和湿空气中水蒸气的摩尔分数XVW之比,以百分数表示.XveUw=100(Xvw)p·t=100(e w)其中:p,t表示每项所处的压力,温度条件打同.饱和水蒸气压e′w由下式确定rwe w=0.6220+rwp=Xvwp其中:rw为与液态水平展表面达到平衡的饱和湿空气的混合比.e′为湿空气中的水蒸气分压.参考资料：[]
请问哪本书或者文献里可以查到具体的不同的盐饱和溶液在不同温度下的相对湿度啊 很急用 在线等 你可以参考一下这个文献 船舶货舱温湿度仪技术要求及实验方法 里面的表A1 A2 就有你需要的。您现在的位置：&&&正文
Biorelevant FaSSIF溶液配制指导说明书（一）
FaSSIF溶液配制指导说明书--缓冲液：无水，（全球12大顶级药物生产商使用本公司产品）该公司另外公司产品能最佳地模拟人体/动物体不同饮食状态下胃肠道液体的生理状态，并且配制简单快速。&一、FaSSIF粉末&粉末是biorelevant研发的，利用biorelevant介质FaSSIF粉末测试您的产品后差异常规的随时随地准确&二、FaSSIF介质粉末包装分布粉末&瓶装&三、FaSSIF介质溶液配制的缓冲液分类粉末粉末粉末&四、FaSSIF介质溶液配制比例所需粉末重量&g固体&五、配制1L FaSSIF溶液的操作方法及步骤下面介绍怎样以无水NaH2PO4作为缓冲液原料，配制FaSSIF溶液1L，用于生物溶解度和溶出度检测。1. 1L溶液FaSSIF的配制Step1.&FaSSIF缓冲液的准备*将原料0.42gNaOH，3.44g无水NaH2PO4，6.19g NaCl0.9L的纯化水中溶解；Step2.&调节缓冲溶液pH*&NaOH或1&HCL调节溶液至6.5，并在室温下，用纯净水补充缓冲液体积至1L。Step3.加入FaSSIF粉末配制FaSSIF溶液*2.24g FaSSIF粉末加入约0.缓冲液中；*；*）；Step4. 静置待用*将配制溶液静置2小时，即得到可使用FaSSIF溶液。&2.配制需注意事项*FaSSIF。建议在室温或37&C下使用。在这些温度下可使用长达24小时。*为防止微生物的生长，需配制FaSSIF。*使FaSSIF避免阳光直射，最好在黑暗中。*对于缓冲液的制备，我们建议使用去离子水并对其进行脱气。*3个月。建议对这种缓冲液进行消毒并保持冷藏。*FaSSIF粉末储存在冰箱（2-8&C）中，盖子盖紧。*如果FaSSIF的乳白光干扰了UV分析，建议在使用前让介质静置4小时（而非通常的2小时）。&六、FaSSIF使用优点☆操作简单：过去，生物相关的溶解度测试介质需要从原始药物开始制备，过程费时费力，本公司产品FaSSIF，配制超级简单快速，省时省力。不需要昂贵的设备或技术，即可在数十秒内配制出任何体积的介质溶液，你仅需要将我们的介质粉末加入预先配制的缓冲体系即成（您只需要输入缓冲体系名称及配制体积，您需要的缓冲液配方即可在我们在线的公式中计算得出）☆完全满足实验要求：无论您需要的介质体积大小（小的溶解度测试或大的溶出的测试），我们均有适合您的包装☆强大的技术支持：我们与德国Goethe大学的制药工艺学的Jennifer Dressman教授合作，我们的专业的技术支持团队将在48小时内解决您遇到的任何问题。&☆配置方法：本公司在线计算公式，首先下拉菜单中需要配制的生物介质（FaSSIF），然后选择配制体积即可得出稀释缓冲液配方及配置方法，以及后续本品稀释方法与步骤。将我们的介质粉末加入预先配制的缓冲体系即成（您只需要输入缓冲体系名称及配制体积，您需要的缓冲液配方即可在我们中计算得出）&&
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双向电泳实验过程及相关溶液配置A． 实验过程一、 实验原理：2-DE的第一向电泳等电聚焦是基于等电点不同而将蛋白粗步分离，第二向SDS-PAGE是基于蛋白质分子量不同，而将一向分离后的蛋白进一步分离。这样就可以得到蛋白质等电点和分子量的信息。二、 实验步骤：1. 样品的溶解取纯化后的晶体蛋白3.0mg，加入300ul裂解液(1mg蛋白:100ul裂解液)振荡器上振荡10min左右，共处理一个小时。其中每隔10～15分钟振荡一次，然后13200rpm离心15min除杂质，取上清分装，每管70ul，―80oC保存。2. Bradford法测蛋白含量取0.001g BSA（牛血清白蛋白）用1ml超纯水溶解,测定BSA标准曲线及样品蛋白含量。取7个10ml的，首先在5个中按次序加入0ul, 5ul, 10ul, 15ul, 20ul 的BSA溶解液，另2管中分别加入2 ul的待测样品溶液，再在每管中加入相应体积的双蒸水（总体积为80ul），然后，各管中分别加入4ml的Bradford液（原来配好的Bradford液使用前需再取需要的剂量过滤一遍方能使用），摇匀，2min在595nm下，按由低到高的浓度顺序测定各浓度BSA的OD值，再测样品OD值。(测量过程要在一个小时内完成)。例如：编号 蛋白量（ul） Buffer(ul) Bradford(ml) OD595值1 0 80 4 02 5 75 4 0.0243 10 70 4 0.0614 15 65 4 0.0915 20 60 4 0.116Bt4 2 78 4 0.079Bt4 4 76 4 转Bt4 2 78 4 0.075转Bt4 4 76 4 标准曲线方程式：Y= aX+b.其中Y为 OD值，X为蛋白含量。 a、b通过作图输入数据可知 相关系数通过输入数据，作图，分析可得OD值测量过程：比色皿用70%的乙醇保存，待用时用双蒸水冲洗，再用无水乙醇冲洗，双蒸水冲洗，再加入待测样品溶液润洗，然后，加入样品，测定OD值。3. 双向电泳第一向---IEF（双向电泳中一律使用超纯水）3.1 水化液的制备称取2.0mg 的DTT，用700ul水化液储液溶解后,加入8ul 0.05% 的溴酚兰，3.5ul（0.5%v/v）IPG buffer (pH 3-10)振荡混匀，13200rpm离心15min 除杂质，取上清。在含300ug 蛋白（经验值）的样品溶解液中加入水化液，至终体积为340ul， 振荡器上振荡混合,13200rpm离心15min除杂质，取上清。 3.2 点样，上胶分两次吸取样品，每次170ul, 按从正极到负极的顺序加入点样槽两侧，再用镊子拨开Immobiline DryStrip gels (18cm，pH 3―10)胶条，从正极到负极将胶条压入槽中,胶面接触加入的样品。注意：胶条使用前，要在室温中平衡30分钟；加样时，正极要多加样，以防气泡的产生；压胶时不能产生气泡；酸性端对应正极，碱性端对应负极；样品加好后，加同样多的覆盖油(Bio-Rad)，两个上样槽必须与底线齐平。3.3 IPG聚焦系统跑胶程序的设定（跑胶温度为20oC）S1 (30v, 12hr, 360vhs, step)S2 (500v, 1hr, 500vhs, step)S3 (1000v, 1hr, 1000vhs, step)S4 (8000v, 0.5hr, 2250vhs, Grad)S5 (8000v, 5hr, 40000vhs, step) 共计44110vhs, 19.5小时其中S1用于泡胀水化胶条，S2和S3用于去小离子，S4和S5用于聚焦3.4 平衡用镊子夹出胶条,超纯水冲洗后，在滤纸上吸干（胶面，即接触样品那一面不能接触滤纸，如果为18cm的胶条要将两头剪去），再以超纯水冲洗，滤纸吸干（再次冲洗过程也可省略），然后用镊子夹住胶条以正极端（即酸性端）向下，负极端（即碱性端）向上，放入用来平衡的试管中（镊子所夹的是碱性端，酸性端留有溴酚兰作为标记），用平衡液A，平衡液B先后平衡15min。 注:平衡时要注意保持胶面始终向上,不能接触平衡管壁。平衡第二次时，在沸水中煮Marker 3min,剪两个同样大小的小纸片，长度与一向胶条的宽度等同，然后吸取煮好的Marker，转入SDS―PAGE胶面上，保持紧密贴合；同样在第二次平衡时，煮5%的琼脂糖10ml。4. 双向电泳第二向---SDS-PAGE 4.1 配胶(两根胶条所用剂量)分离胶：（T=8% 80 ml）：溶液于真空机中抽气后再加APS和TEMED30 % 丙烯酰胺储液 21.28ml分离胶buffer 20ml 10%APS 220ul TEMED 44 ul双蒸水 38.72ml 浓缩胶：（T=4.8% 10ml）30 % 丙烯酰胺储液 1.6ml浓缩胶buffer 2.5ml 10%APS 30ul TEMED 5ul双蒸水 5.9ml4.2 灌胶将玻璃板洗净后,室温晾干,然后,将电泳槽平衡好,玻璃板夹好,再在玻璃板底部涂上凡士林以防漏胶,倒入正丁醇压胶,凝胶后(这时会出现三条线),用注射器吸去正丁醇,超纯水洗两次,再用滤纸除水后,倒入浓缩胶,正丁醇压胶,凝胶后,用注射器吸去正丁醇,超纯水洗两次,再加入超纯水,用保险膜封好。4.3 转移剪两个小的滤纸片，吸取Marker后，放入SDS―PAGE胶面的一端。然后，将平衡好的IPG胶条贴靠在玻璃板上,加少量的5%的琼脂糖溶液在胶面上(琼脂糖凝胶在转移前十几分钟的时候配好,水浴加热溶解,并保持烧杯中水处于沸腾状态,至用之前再拿出来),再将IPG胶条缓缓加入SDS―PAGE胶面,其中不断补加5%的琼脂糖溶液,注意不能产生气泡。4.4 跑胶浓缩胶 13mA 分离胶 20mA 共约5.5个小时5. 银染(两根胶条所用剂量)（银染特别注意用超纯水）5.1 固定 30min 无水乙醇 200ml+乙酸50ml，用超纯水定容至500ml5.2 敏化 30min 无水乙醇 150mlNa2S2O3&#O 1.5688g无水乙酸钠 34g 先用水溶解Na2S2O3&#O和乙酸钠,再加乙醇,最后定容至500ml5.3 洗涤 5min × 3次5.4 银染 20min AgNO3 1.25g 用超纯水定容至500ml5.5 洗涤 1min × 2次5.6 显影 无水Na2CO3 12.5g 用超纯水定容至500ml甲醛(37%)0.1ml, 临时加5.7 终止 10min EDTA―Na2&#O 7.3g 用超纯水定容至500ml5.8 洗涤 5min × 3次注：整个双向电泳实验中全部使用超纯水，尽量减少离子的影响。B． 实验相关配制1． Bradford 工作液95%乙醇 25ml 先用乙醇溶解考马斯亮兰G250，溶解完后再加磷85%磷酸 52ml 酸，最后超纯水定容至500ml。过滤后置于棕色瓶考马斯亮兰G250 0.035g 外加油皮纸保存（Bradford不稳定，一周内有效） 2． 裂解液尿素 8M硫脲 2MCHAPS 4%DTT 60 mMTris―base 40 mM（如果有条件可以添加PMSF 0.5mM和5%的Pharmalate）3. 水化液储液尿素 8M 硫脲 2MCHAPS 4%Tris―base 40 mM4. 分离胶buffer (pH8.8) 250mlSDS 0.4% 1gTris―HCl 1.5M 45.4275g5. 浓缩胶buffer (pH6.8) 100mlSDS 0.4% 0.4gTris―HCl 0.5M 6.07g6. 凝胶储存液（30%的丙烯酰胺） 250mlAcr 29.2% 73gBis 0.8% 2g7. 电极缓冲液（跑一次要配制2500ml）甘氨酸 43.2g 36gTris 9g 或 7.5gSDS 3g 2.5g 超纯水定容至3000ml 超纯水定容至2500ml8． 0.5M Tris ―HCl pH 6.8储液6.1g Tris先用30ml超纯水溶解，再用46ml，3M HCl调pH6.8,再加水定容至100ml9． 平衡液储液脲（即尿素） 36g甘油 30% 30mlSDS 1% 1g0.5M Tris―HCl pH6.8 10ml 超纯水定容至100ml10. 平衡液A（一根胶条）DTT 20mg平衡液储液 10ml11．平衡液B（一根胶条）碘乙酰氨 300mg平衡液储液 10ml0.05%溴酚兰 15ul (平衡液A、B均需临时配制)12．0.5%琼脂糖10ml琼脂糖 0.05g电极缓冲液 10ml溴酚兰 25ul补：4、5、6的溶液需过滤后储存于4OC备用。C． 药品CHAPS 兼性离子去垢剂 去垢剂可破坏蛋白质分子之间的疏水相互作用，SDS 离子型去垢剂 提高蛋白质的溶解性，防止在等电聚焦时析出尿素 离液剂 可改变或破坏氢键等次级键的结构，使蛋白质硫脲 离液剂 变性并使蛋白失活。尿素和硫脲联合使用，可以大大增加蛋白质的溶解性DTT 还原剂 断裂蛋白质分子中Cys残基之间形成的二硫键，增加蛋白质的溶解性。但过分提高DTT的浓度，由于它pKa在8左右，因而会影响pH梯度。DTT在碱性pH下会去质子化，等电聚焦时会损耗，导致二硫键复原，蛋白质沉淀BSA Bradford中制作标准曲线用无水乙醇 和磷酸一起，提供Bradford中的环境磷酸 提供Bradford中的酸性环境Tris 构成缓冲液的成分，可用于抗衡pH的变化 IPG buffer覆盖液 即矿物油，防止水分蒸发，样品干燥。丙烯酰胺（Acr） 以丙烯酰胺为单体，甲叉二丙烯酰胺为交联剂，甲叉二丙烯酰胺 （Bis） 在催化剂（Aps）和引发剂（TEMED）作用下，聚合交联成三维网状结构 琼脂糖溴酚兰 指示剂作用碘乙酰氨（IAA） 平衡液B中使用，中和A液中的DTT正丁醇 比聚丙烯酰胺密度小，用于凝胶制作过程中的压胶甘油 无机盐的良好溶剂，热稳定性好Marker考马斯亮兰G250（Bradford法用） 考马斯亮兰G250有红、蓝两种不同颜色的形式在一定浓度的乙醇及酸性条件下，可配成淡红色的溶液，当与蛋白结合后，产生蓝色化合物，反应迅速而稳定，反应化合物在465~595nm处有最大的光吸收值，化合物颜色 深浅与蛋白浓度的高低成正比关系，因此可检测595nm的光吸收值的大小计算蛋白的含量甘氨酸 与Tris构成缓冲系统AgNO3EDTA 金属螯合剂，可以结合银离子，终止银染过程
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实验室常用试剂配制
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&实验室常用溶液配制(希望对大家有帮助)
实验室常用溶液配制(希望对大家有帮助)
作者 Eric6007
一.& && &&&常用贮液与溶液
1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，
须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。或转移100mg的二硫苏糖醇
至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA&#O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。
1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH（6.8-8.2），然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
25mg/ml IPGT：溶解250mg的IPGT（异丙基硫代-β-D-半乳糖苷）于10ml水中，分成小份贮存于-20℃。
1mol/LMgCl2:溶解20.3g MgCl2&#O于足量的水中，定容到100ml。
100mmol/L PMSF：溶解174mg的PMSF（苯甲基磺酰氟）于足量的异丙醇中，定容到10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹
或贮存于-20℃。
20mg/ml蛋白酶K（proteinase K）：将200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中，轻轻摇动，直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。
10mg/mlRnase（无DNase）（DNase－free RNase）：溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中（pH 5.0）。溶解后于水浴中煮沸15min，使DNA酶失活。用1mol/L的Tris－HCl调pH至7.5，于-20℃贮存。（配制过程中要戴手套）
5mol/L氯化钠（NaCl）：溶解29.2g氯化钠于足量的水中，定容至100ml。
10N氢氧化钠（NaOH）：溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9L水的烧杯中（磁力搅拌器搅拌），氢氧化钠完全溶解后用水定容至1L。
10％SDS（十二烷基硫酸钠）：称取100gSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯中，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至1L。
2mol/L山梨（糖）醇（Sorbitol）：溶解36.4g山梨（糖）醇于足量水中使终体积为100ml。
100％三氯乙酸（TCA）:在装有500gTCA的试剂瓶中加入100ml水，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。（稀释液应在临用前配制）
2.5％ X－gal（5-溴-4-氯-3-吲哚－β-半乳糖苷）：溶解25mg的X－gal于1ml的二甲基甲酰胺（DMF）,用铝箔包裹装液管，贮存于-20℃。
100×Denhardt试剂（Denhardt’s regent）
成分及终浓度 配制100ml溶液各成分的用量&&
2%聚蔗糖（Ficoll，400型）& & 2%聚乙烯吡咯烷酮（PVP-40）& & 2%BSA（组分V）
水& && && &&&2g& && && && && && && && &&&2g& && && && && && && && & 2g
加水至总体积为100ml ,依照上表称取各组分，溶于水中定容。过滤除菌及杂质，分装成小份于-20℃贮存。
10×标准DNA连接酶缓冲液（standard DNA ligase buffer）（粘端、平端连接）
成分及终浓度 配制10ml溶液各成分的用量&&
& && &0.5mol/L Tris-HCl:5ml1mol/L 贮液 ,100mmol/L MgCl2:1ml 1mol/L 贮液,100mmol/L DTT:1ml 1mol/L 贮液,2mmol/L ATP: 200ul 100 mmol/L 贮液,5mmol/L 盐酸亚精胺（可选）:50ul 1 mmol/L 贮液,0.5mg/ml BSA（组分V）（可选）:0.5ml 10 mg/mL 贮液 ,水: 2.25ml&&
将配制好的缓冲液分装成小份，贮存于-20℃ 。
100 mmol/L dNTP 溶液（dNTP solutions）
可以购买到100mmol/L纯dNTPs贮液，-80℃可贮存至少6个月。
10mmol/L dNTP混合液
成分及终浓度 配制20ul溶液各成分的用量&&
10mmol/L dATP
10mmol/L dCTP&&
10mmol/L dGTP
10mmol/L dTTP
水&&2ul 100 mmol/L dATP 贮液
2ul 100 mmol/L dCTP 贮液
2ul 100 mmol/L dGTP 贮液
2ul 100 mmol/L dTTP 贮液
20％PEG M NaCl
成分及终浓度 配制10ml溶液各成分的用量&&
质量浓度为20％聚乙二醇
2.5mol/L 氯化钠
50ml 5 mol/L 氯化钠 或 14.6g 固体氯化钠
补足100ml& &
加聚乙二醇于含有氯化钠的烧杯中，加水至终体积100ml，用磁力搅拌器搅拌溶解。
成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量&&
300mmol/L 柠檬酸三钠（二水）
3mol/L 氯化钠
溶解柠檬酸三钠（二水）和氯化钠于约0.9L水中，加几滴10N NaOH溶液调pH为7.0，用水补足体积至1L。
DEPC（焦碳酸二乙酯）处理水
加100ul DEPC 于 100ml 水中，使DEPC的体积分数为0.1％。在37℃温浴至少12h，然后在15 psi 条件下高压灭菌20min，以使残余的DEPC失活。DEPC会与胺起反应，不可用DEPC处理Tris缓冲液。
甲酰胺（deionized formamide）
直接购买或加Dowex XG8 混合树脂于装有甲酰胺的玻璃烧杯中，用磁力搅拌器轻轻搅拌1h，可去除甲酰胺中的离子。经Whatman 1号滤纸过滤除去树脂后分成小份，充氮气于-80℃贮存（防止氧化）。
磷酸缓冲液（phosphate buffer）
按照下表所给定的体积，混合1 mol/L 的磷酸二氢钠（单碱）和1mol/L 磷酸氢二钠（双碱）贮液，获得所需pH的磷酸缓冲液。配制1 mol/L 的磷酸二氢钠（NaH2PO4•H2O）贮液：溶解138g于足量水中，使终体积为1L;1mol/L 磷酸氢二钠（Na2HPO4）贮液:溶解142g于足量水中使终体积为1L。
1mol/L 磷酸二氢钠（ml） 1mol/L 磷酸氢二钠（ml） 最终pH值&&
TE（用于悬浮和贮存DNA）
成分及终浓度 配制100ml溶液各成分的用量&&
10mmol/L Tris－HCl
1mmol/L EDTA
水&&1ml 1mol/L Tris-HCl（pH7.4-8.0，25℃）
200ul 0.5 mol/L EDTA（pH 8.0）
Tris缓冲液（Tris-HCl buffer）
将121g的Tris碱溶解于约0.9L水中，再根据所要求的pH（25℃下）加一定量的浓盐酸（11.6N），用水调整终体积至1L。
浓盐酸的体积（ml） pH&&
二.电泳缓冲液、染料和凝胶加样液
电泳缓冲液
50×Tris-乙酸（TAE）缓冲液
成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量&&
2mol/L Tris碱
1mol/L 乙酸
100 mmol/L EDTA
57.1 ml的冰乙酸（17.4 mol/L）
200ml的0.5 mol/L EDTA（pH 8.0）
5×Tris-硼酸（TBE）缓冲液
成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量&&
445 mmol/L Tris碱
445 mmol/L 硼酸盐
10 mmol/L EDTA
27.5g 硼酸
20 ml的0.5 mol/L EDTA（pH 8.0）
1％溴酚蓝（bromophenol blue）
加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。
1％二甲苯青FF（xylene cyanole FF）
溶解1g二甲苯青FF于足量水中，定容到100ml。
10mg/ml的溴化乙锭（ethidium bromide）
小心称取1g溴化乙锭，转移到广口瓶中，加100ml水，用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管，于4℃贮存。
凝胶上样液（gel loading solutions）
6×碱性凝胶上样液（室温贮存）
成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量&&
0.3 N 氢氧化钠
6 mmol/L EDTA
18％聚蔗糖（400型）
0.15％溴甲酚绿
0.25％二甲苯青FF
水&&300ul 10N 氢氧化钠
120ul 0.5mol/L EDTA（pH8.0）
补足到10ml& &
6×聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存）
成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量&&
0.15％溴酚蓝
0.15％二甲苯青FF
5 mmol/L EDTA
15％聚蔗糖（400型）
水&&1.5ml 1％溴酚蓝
1.5ml 1％二甲苯青FF
100ul 0.5mol/L EDTA（pH8.0）
补足到10ml& &
6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存）
成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量&&
0.25％溴酚蓝
0.25％二甲苯青FF
15％聚蔗糖（400型）
水&&2.5ml 1％溴酚蓝
2.5ml 1％二甲苯青FF
补足到10ml& &
6×甘油凝胶上样液（4℃贮存）
成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量&&
0.15％溴酚蓝
0.15％二甲苯青FF
5 mmol/L EDTA
水&&1.5ml 1％溴酚蓝
1.5ml 1％二甲苯青FF
100ul 0.5mol/L EDTA（pH8.0）
6×蔗糖凝胶上样液（室温贮存）
成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量&&
0.15％溴酚蓝
0.15％二甲苯青FF
5 mmol/L EDTA
40％聚蔗糖
水&&1.5ml 1％溴酚蓝
1.5ml 1％二甲苯青FF
100ul 0.5mol/L EDTA（pH8.0）
补足到10ml& &
10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液（室温贮存）
成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量&&
0.2％溴酚蓝
0.2％二甲苯青FF
200 mmol/L EDTA
50％甘油&&
4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
100ul 10％ SDS
补足到10ml& &
三.常用培养基
将下列组分溶解在0.9L水中：
蛋白胨 10g&&
酵母提取物 5g&&
氯化钠 10g&&
如果需要用1N NaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
将下列组分溶解在0.9L水中：
蛋白胨 20g&&
酵母提取物 5g&&
氯化钠 0.5g&&
1 mol/L 氯化钾 2.5ml&&
用水补足体积到1L。分成100ml的小份，高压灭菌。培养基冷却到室温后，再在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。
成分、方法同SOB培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后，除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外，再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖（18g葡萄糖溶于足够水中，再用水补足到100ml，用0.22um的滤膜过滤除菌）。
将下列组分溶解在0.9L水中：
蛋白胨 12g&&
酵母提取物 24g&&
甘油 4ml&&
各组分溶解后高压灭菌。冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/0.72 mol/L K2HPO4的溶液（2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中，使终体积为100ml。高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌）。
2×YT培养基
将下列组分溶解在0.9L水中：
蛋白胨 16g&&
酵母提取物 10g&&
氯化钠 4ml&&
如果需要用1N NaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
将下列组分溶解在0.9L水中：
蛋白胨 20g&&
酵母提取物 10g&&
葡萄糖 20g&&
用水补足体积为1L后，高压灭菌。建议在高压灭菌之前，对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加1.6g色氨酸，因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。为了配制平板，需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉。
四.常用抗生素
氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）
溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）
溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）
溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）
溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）
溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
链霉素（streptomycin）（50mg/ml）
溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml）
溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
四环素（tetracyyline）（10mg/ml）
溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
几种溶液的配制方法
& && &&&取ZLI-9061 PBS溶于1000ml的蒸馏水中，混匀，测pH值应在7.2~7.4之间，若偏离此范围，请用0.1N的HCL或NaOH调整。
& && &&&2.1 Tris缓冲液配方：（0.5 M&&pH7.6）
& && && && && && && && &Tris（三羟甲基氨基甲烷）& && && && && & 60.57g
& && && && && && && && &1N HCL& && && && && & 约420ml
& && && && && && && && &双蒸水& && && && && & 加至1000ml
& && &&&Tris缓冲液配制方法：
& && && && &先以少量双蒸水（300~500ml）溶解Tris，加入HCl后，用HCl（1N）或NaOH（1N）将pH调至7.6， 最后双蒸水加至1000ml。此液为储备液，4℃冰箱中保存。
& && &&&2.2 TBS配方：
& && && && && && && && &Tris-HCI缓冲液（0.5M&&pH7.6）& && && && && & 100ml
& && && && && && && && &NaCI& && && && && & 8.5~9g (0.15mol/L)
& && && && && && && && &双蒸水& && && && && & 加至1000ml
& && &&&TBS配制方法：
& && && && &先以少量双蒸水溶解NaCl，再加入Tris-HCl缓冲液，最后加双蒸水至1000ml，充分摇匀。
& && &&&3、枸橼酸盐缓冲液（Citrate buffer）：
& && &&&3.1 储存液：
& && &&&A. 0.1M枸橼酸溶液：称取21.01g枸橼酸（C6H8O7•H20）溶于1000ml蒸馏水中。
& && &&&B. 0.1M枸橼酸钠溶液：称取29.41g枸橼酸钠（C6H5Na3O7&#）溶于1000ml蒸馏水中。
& && &&&3.2 工作液：
& & 0.1& & 取9ml A液和41ml B液加入450ml蒸馏水中，溶液pH值应为6.0
& && &&&4、胰酶（Trypsin）：
& && &&&4.1 ZLI-9011胰蛋白酶消化液：
& && &&&常用浓度为0.125%，即使用前将一滴试剂1胰酶溶液和三滴试剂2胰酶稀释液均匀混合（1:3稀释），则可直接滴加使用。胰酶的最终浓度可以根据使用者的要求进行调整，浓度范围可以从0.05%（1:10稀释）至0.25%（1:1稀释）。
& && &&&4.2 ZLI-9010胰蛋白酶：
& && &&&取0.05g或0.1g胰蛋白酶加入到100ml 0.05%或0.1% pH7.8的无水氯化钙水溶液中，溶解即可。
& && &&&5、胃酶（Pepsin）：
4%胃蛋白酶，用0.1mol/L HCL配制。
（我公司备有ZLI-9013胃蛋白酶消化工作液，不需稀释直接滴加使用，欢迎选购）
& && &&&6、DAB：
& && &&&6.1 ZLI- DAB Kit：
& && &&&使用前只需将试剂盒提供的A、B、C三种试剂各一滴加至1ml双蒸水中，即可获得1ml DAB工作液，简单易用。
& && &&&6.1 ZLI-9030 DAB：
& && &&&6mgDAB溶于10mlTBS（0.05M&&pH7.6），再加入0.1ml浓度为3％的H2O2，过滤掉沉淀物，即可。
4mg AEC溶于1ml二甲基甲酰胺中，加入14ml浓度为0.1M的醋酸缓冲液（pH5.2），然后加入0.15ml 3%H2O2，过滤掉沉淀物。
1×PBS，1%NP 40，0.5 sodium deoxycholate，0.1% SDS（此液体可长期保存）。以下抑制剂以储存液方式保存，临用前加入RIPA中。
8.1 10mg/ml l/ml）PMSF异丙醇溶液（用量为10
l/ml）&# Aprotinin（Sigma产品，用量为30
8.3 1000mM sodium orthovanadate冷冻液
l/ml）（用量为10
9、Blotto A：
常规使用1×PBS，5% milk，0.05% Tween 20。
10、Blotto B：
与Phosphotyrosine抗体共用，1×PBS，1% milk，0.05% Tween 20。部分实验中milk可完全去除，但可能引起背景增高。
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实验室常用贮存液的配制参数
一、核酸及蛋白质常用数据
化合物& &分子量& &λmax(pH7.0)& &1摩尔溶液（pH7.0）中λmax时的最大吸收值& &OD280/OD260
ATP& && & 507& && && &259& && && && && && &15400& && && && && && && && && && &0.15
CTP& && & 483& && && &271& && && && && && &9000& && && && && && && && && && & 0.97
GTP& && & 523& && && &253& && && && && && &13700& && && && && && && && && && &0.66
UTP& && & 484& && && &262& && && && && && &10000& && && && && && && && && && &0.38
dATP& && &494& && && &259& && && && && && &15200& && && && && && && && && && &0.15
dCTP& && &467& && && &271& && && && && && &9300& && && && && && && && && && & 0.98
dGTP& && &507& && && &253& && && && && && &13700& && && && && && && && && && &0.66
dTTP& && &482& && && &267& && && && && && &9600& && && && && && && && && && & 0.71
2．常用核酸的长度与分子量
核酸& && &&&核苷酸数& && &&&分子量
λDNA& && &&&48502（双链环状）& && &&&3.0×107
pBR322& && &&&4363（双链）& && &&&2.8×106
28SrRNA& && &&&4800& && &&&1.6×106
23SrRNA& && &&&3700& && &&&1.2×106
18SrRNA& && &&&1900& && &&&6.1×105
19SrRNA& && &&&1700& && &&&5.5×105
5SrRNA& && &&&120& && &&&3.6×104
tRNA（大肠杆菌）& && &&&75& && &&&2.5×104
3．常用核酸蛋白换算数据
（1）重量换算
1μg=10-6g　　　　　 1pg=10-12g
1ng=10-9g 　　　　　1fg=10-15g
（2）分光光度换算：
1A260双链DNA=50μg/ml
1A260单链DNA=30μg/ml
1A260单链RNA=40μg/ml
（3）DNA摩尔换算：
1μg 100bp DNA=1.52pmol=3.03pmol末端
1μg pBR322 DNA=0.36pmol
1pmol 1000bp DNA=0.66μg
1pmol pBR322=2.8μg
1kb双链DNA（钠盐）=6.6×105道尔顿
1kb单链DNA（钠盐）=3.3×105道尔顿
1kb单链RNA（钠盐）=3.4×105道尔顿
（4）蛋白摩尔换算：
100pmol分子量100，000蛋白质=10μg
100pmol分子量50，000蛋白质=5μg
100pmol分子量10，000蛋白质=1μg
氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿
（5）蛋白质/DNA换算：
1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.7×104MW蛋白质
10，000MW蛋白质=270bp DNA
30，000MW蛋白质=810bp DNA
50，000MW蛋白质=1.35kb
100，000MW蛋白质=2.7kb DNA
4．常用蛋白质分子量标准参照物
（1）高分子量标准参照& && &&&（2）中分子量标准参照& && &&&（3）低分子量标准参照
肌球蛋白& && &&&分子量& && &&&磷酸化酶B& && &&&97，400& && &&&碳酸酐酶& && &&&31，00
肌球蛋白& && &&&212，000& && &&&牛血清白蛋白& && &&&66，200& && &&&大豆脻蛋白酶& && &&&21，500
β-半乳糖甘酶B& && &&&116，000& && &&&谷氨酶脱氢酶& && &&&55，000& && &&&抑制剂& && &&&　
磷酸化酶B& && &&&97，400& && &&&卵白蛋白& && &&&42，700& && &&&马心肌球蛋白& && &&&16，900
牛血清白蛋白& && &&&66，200& && &&&醛缩酶& && &&&40，000& && &&&溶菌酶& && &&&14，400
过氧化氢酶`& && &&&57，000& && &&&碳酸酐酶& && &&&31，000& && &&&肌球蛋白（F1）& && &&&8，100
醛缩酶& && &&&40，000& && &&&大豆脻蛋白酶& && &&&21，500& && &&&肌球蛋白（F2）& && &&&6，200
　& && &&&　& && &&&抑制剂& && &&&　& && &&&肌球蛋白（F3）& && &&&2，500
　& && &&&　& && &&&溶菌酶& && &&&14，400& && &&&　& && &&&　
5．常用DNA分子量标准参照物
λDNA/HindⅢ& && &&&λDNA/EcoRⅠ& && &&&λ/HindⅢ+EcoRⅠ& && &&&pBR322/HaeⅢ
23130& && &&&21226& && &&&21227& && &&&587& && &&&123
9416& && &&&7421& && &&&5148& && &&&405& && &&&104
6557& && &&&5804& && &&&4973& && &&&504& && &&&89
4361& && &&&5643& && &&&4268& && &&&458& && &&&80
2322& && &&&4843& && &&&3530& && &&&434& && &&&64
2027& && &&&3530& && &&&2027& && &&&267& && &&&57
564& && &&&　& && &&&1904& && &&&234& && &&&51
125& && &&&　& && &&&1584& && &&&213& && &&&21
　& && &&&　& && &&&1375& && &&&192& && &&&18
　& && &&&　& && &&&974& && &&&184& && &&&11
　& && &&&　& && &&&831& && &&&124& && &&&7
　& && &&&　& && &&&564& && &&&　& && &&&　
　& && &&&　& && &&&125& && &&&　& && &&&　
pBR322/HinfⅠ& && &&&φχ174/HinfⅠ& && &&&φχ174/Hae Ⅲ& && &&&φχ174/TapⅠ
1631& && &&&726& && &&&140& && &&&1353& && &&&2914
517& && &&&713& && &&&118& && &&&1078& && &&&1175
506& && &&&553& && &&&100& && &&&872& && &&&404
396& && &&&500& && &&&82& && &&&603& && &&&327
344& && &&&417& && &&&66& && &&&310& && &&&231
298& && &&&413& && &&&48& && &&&281& && &&&141
221& && &&&311& && &&&42& && &&&271& && &&&87
220& && &&&249& && &&&40& && &&&234& && &&&54
154& && &&&200& && &&&24& && &&&194& && &&&33
75& && &&&151& && &&&　& && &&&118& && &&&20
　& && &&&　& && &&&　& && &&&72& && &&&　
二、常用缓冲液
1．分子克隆常用缓冲液
2．磷酸缓冲液
（1）25℃下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制※
pH& && &&&1mol/L K2HPO4(ml)& && &&&1mol/L KH2PO4(ml)
5.8& && &&&8.5& && &&&91.5
6.0& && &&&13.2& && &&&86.8
6.2& && &&&19.2& && &&&80.8
6.4& && &&&27.8& && &&&72.2
6.6& && &&&38.1& && &&&61.9
6.8& && &&&49.7& && &&&50.3
7.0& && &&&61.5& && &&&38.5
7.2& && &&&71.7& && &&&28.3
7.4& && &&&80.2& && &&&19.8
7.6& && &&&86.6& && &&&13.4
7.8& && &&&90.8& && &&&9.2
8.0& && &&&94.0& && &&&6.2
（2）25℃下0.1mol/L磷酸钠缓冲液的配制※
pH& && &&&1mol/L Na2HPO4(ml)& && &&&1mol/L NaH2PO4(ml)
5.8& && &&&7.9& && &&&92.1
6.0& && &&&12.0& && &&&88.0
6.2& && &&&17.8& && &&&82.2
6.4& && &&&25.5& && &&&74.5
6.6& && &&&35.2& && &&&64.8
6.8& && &&&46.3& && &&&53.7
7.0& && &&&57.7& && &&&42.3
7.2& && &&&68.4& && &&&31.6
7.4& && &&&77.4& && &&&22.6
7.6& && &&&84.5& && &&&15.5
7.8& && &&&89.6& && &&&10.4
8.0& && &&&93.2& && &&&6.8
※:用蒸馏水将混合的两种1mol/L贮存液稀释至1000ml，根据Henderson-Hasselbalch方程计算其pH值：
pH=pK’+1g([质子受体]/[质子供体])
在此，pK’=6.86(25℃)。
3．电泳缓冲液
测序凝胶加样缓冲液
98%去离子甲酰胺
10mol/L EDTA(pH8.0)
0.025%二甲苯青FF
0.025%溴酚蓝
甲酰胺：许多批号的试剂级甲酰胺，其纯度符合使用要求，无须再进行处理。不过，一旦略呈黄色，则应用在磁力搅拌器上将甲酰胺与Dowex XG8混合床树脂共同搅拌1小时进行去离子处理，并用Whatman 1号滤纸过滤2次，去离子甲酰胺分装成小份，充氮存于-70℃。
常用的电泳缓冲液
缓冲液& && &&&使用液& && &&&浓贮存液（每升）
Tris-乙酸（TAE）& && &&&1×：0.04mol/L Tris-乙酸& && &&&50×：242g Tris碱
　& && &&&0.001mol/L EDTA& && &&&57.1ml冰乙酸
　& && &&&　& && &&&100ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
Tris-磷酸（TPE）& && &&&1×:0.09mol/L Tris-磷酸& && &&&10×:10g Tris碱
　& && &&&0.002mol/L EDTA& && &&&15.5ml85%磷酸（1.679g/ml）
　& && &&&　& && &&&40ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
Tris-硼酸（TBE）a& && &&&0.5×0.045mol/L Tris-硼酸& && &&&5×：54g Tris碱
　& && &&&0.001mol/L EDTA& && &&&27.5硼酸
　& && &&&　& && &&&20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
碱性缓冲液b& && &&&1×:50mmol/L NaOH& && &&&1×:5ml 10mol/L NaOH
　& && &&&1mmol/L EDTA& && &&&2ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)
Tris-甘氨酸c& && &&&1×:25mmol/L Tris& && &&&5×:15.1g Tris
　& && &&&250mmol/L 甘氨酸& && &&&94g 苷氨酸（电泳级）（pH8.3）
　& && &&&0.1% SDS& && &&&50ml 10% SDS(电泳级)
①TBE溶液长时间存放后会形成沉淀物，为避免这一问题，可在室温下用玻璃瓶保存5×溶液，出现沉淀后则予以废弃。
以片都以1×TBE作为使用液（即1：5稀释浓贮液）进行琼脂糖凝胶电泳。但0.5×的使用液已具备足够的缓冲容量。目前几乎所有的琼脂糖胶电泳都以1：10稀释的贮存液作为使用液。
进行聚丙烯酰胺凝胶垂直槽的缓冲液槽较小， 故通过缓冲液的电流量通常较大，需要使用1×TBE以提供足够的缓冲容量。
②碱性电泳缓冲液应现用现配。
③Tris-甘氨酸缓冲液用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。
2×SDS凝胶加样缓冲液：
100mmol/L Tris•HCl(6.8)
200mmol/L二硫苏糖醇（DTT）
4%SDS（电泳级）
0.2%溴酚蓝
不含DTT的2×SDS凝胶加样缓冲液可保存于室温，应在临用前取1mol/L贮存液现加于上述缓冲液中。
4．凝胶加样缓冲液
缓冲液类型& && &&&6×缓冲液& && &&&贮存温度
Ⅰ& && &&&0.25%溴酚蓝& && &&&
& && &&&0.25%二甲苯青FF& && &&&
& && &&&40%（W/V）蔗糖水溶液& && &&&
Ⅱ& && &&&0.25溴酚蓝& && &&&
& && &&&0.25%二甲苯青FF& && &&&
& && &&&15%聚蔗糖(Ficoll400)& && &&&
Ⅲ& && &&&0.25%溴酚蓝& && &&&
& && &&&0.25%二甲苯青FF& && &&&
& && &&&30%甘油水溶液& && &&&
Ⅳ& && &&&0.25%溴酚蓝& && &&&
& && &&&40%(W/V)蔗糖水溶液& && &&&
　& && &&&碱性加样缓冲液:& && &&&　
& && &&&300mmol/L NaOH& && &&&
& && &&&6mmol/L EDTA& && &&&
Ⅴ& && &&&18%聚蔗糖(Ficoll400)& && &&&
& && &&&0.15%溴甲酚绿& && &&&
& && &&&0.25%二甲苯青FF& && &&&
使用以上凝胶加样缓冲液的目的有三：增大样品密度；以确保DNA均匀进入样品孔内；使样品呈现颜色，从而使加样操作更为便利，含有在电块中能以可预知速率向阳极泳动的染料。溴酚蓝在琼脂糖中移动的速率约为二甲苯青FF的2.2倍，而与琼脂糖浓度无关。以0.5×TBF作电泳液时，溴酚蓝在琼脂糖中的泳动速率约与长300bp的双链线状DNA相同，而二甲苯青FF的泳动则与长4kb的双链线状DNA相同。在琼脂糖浓度为0.5%～1.4%的范围内，这些对应关系受凝胶浓度变化的影响并不显著。
选用哪一种加样染料纯属个人喜恶。但是，对于碱性凝胶应当使用溴甲酚绿作为示踪染料，因为在碱性pH条件下其显色较溴酚更蓝为鲜明。
5．各种pH值的Tris缓冲液的配制
各种pH值的Tris缓冲液的配制　
所需pH值（25℃）& && &&&0.1mol/L HCl的体积
7．1& && &&&45．7
7．2& && &&&44．7
7．3& && &&&43．4
7．4& && &&&42．0
7．5& && &&&40．3
7．6& && &&&38．5
7．7& && &&&36．6
7．8& && &&&34．5
7．9& && &&&32．0
8．0& && &&&29．2
8.1& && &&&26.2
8.2& && &&&22.9
8.3& && &&&19.9
8.4& && &&&17.2
8.5& && &&&14.7
8.6& && &&&12.4
8.7& && &&&10.3
8.8& && &&&8.5
8.9& && &&&7.0
某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制：将50ml 0.1mol/L Tris碱溶液与上表所示相应体积（单位：ml）的0.1ml/L HCl混合，加水将体积调至100ml
（2）温度对50mmol/L Tris•HCl液pH值的影响
4℃& && &&&25℃& && &&&37℃
8．1& && &&&7．5& && &&&7．2
8．2& && &&&7．6& && &&&7．3
8．3& && &&&7．7& && &&&7．4
8．4& && &&&7．8& && &&&7．5
8．5& && &&&7．9& && &&&7．6
8．6& && &&&8．0& && &&&7．7
8．7& && &&&8．1& && &&&7．8
8．8& && &&&8．2& && &&&7．9
8．9& && &&&8．3& && &&&8．0
9．0& && &&&8．4& && &&&8．1
9．1& && &&&8．5& && &&&8．2
9．2& && &&&8．6& && &&&8．3
9．3& && &&&8．7& && &&&8．4
9．4& && &&&8．8& && &&&8．5
（6）常用缓冲液的pKa值
缓冲液& && &&&分子量& && &&&pKa值& && &&&缓冲范围
Trisa& && &&&12.1& && &&&8.08& && &&&7.1～7.9
HEPESb& && &&&283.3& && &&&7.47& && &&&7.2～8.2
MPOSc& && &&&209.3& && &&&7.15& && &&&6.6～7.8
PIPESd& && &&&304.3& && &&&6.76& && &&&6.2～7.3
MESe& && &&&195.2& && &&&6.09& && &&&5.4～6.8
a：三羟甲基氨基甲烷；b：N-2-羟乙基哌嗪-N’-2-乙磷酸；c：3-（N-吗啉代）丙磺酸；d：N，N’-双（2-乙磺酸）哌嗪；e：2-（N-吗啉代）乙磺酸。
7．温度对常用缓冲液pH的影响
缓冲体系& && &&&pKa(20℃)& && &&&△pKa/10℃
Mes& && &&&6.15& && &&&-0.110
Ada& && &&&6.60& && &&&-0.110
PiPes& && &&&6.80& && &&&-0.085
Aces& && &&&6.90& && &&&-0.200
Bes& && &&&7.15& && &&&-0.160
Mops& && &&&7.20& && &&&-0.013
Tes& && &&&7.50& && &&&-0.200
Hepes& && &&&7.55& && &&&-0.014
Tricine& && &&&8.15& && &&&-0.210
Tris& && &&&8.30& && &&&-0.310
Bicine& && &&&8.35& && &&&-0.180
Glycylglycine& && &&&8.40& && &&&-0.280
三、常用酶的配制
用水配制成50mg/ml的溶菌酶溶液，分装成小份并保存于-20℃。每一小份一经使用后便予丢弃。
2．蛋白水解酶类
　& && &&&贮存液& && &&&贮存温度& && &&&反应浓度& && &&&反应缓冲液& && &&&温度& && &&&预处理
　& && &&&0.01mol/L Tris(pH7.8)& && &&&　
链霉蛋白酶a& && &&&20mg/ml& && &&&-20℃（溶于水）& && &&&1mg/ml& && &&&0.01mol/L EDTA& && &&&37℃& && &&&自消化b
　& && &&&0.5% SDS& && &&&　
　& && &&&0.01mol/L Tris(pH7.8)& && &&&　
蛋白酶Kc& && &&&20mg/ml& && &&&-20℃（溶于水）& && &&&50μg/ml& && &&&0.005mol/L EDTA& && &&&37～56℃& && &&&无须预处理
　& && &&&0.5% SDS& && &&&　
a：链霉蛋白酶是从链球菌（Streptomyces griseus）中分离到的一种丝氨酸酶和酸性蛋白酶的混合物。
b：自消化可消除DNA酶和RNA酶的污染，经自消化的链酶蛋白酶的配制方法如下：把该酶的粉末溶解于10mmol./L Tris•HCl(pH7.5)、10mmol/L NaCl中，配成20mg/ml浓度，于37℃温育1h。经消化的链霉蛋白酶分装成小份放在密封试管中，保存-20℃。
c：蛋白酶K是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，从林伯氏白色念球菌（Tritirachium album Limber）中纯化得到。该酶有两个Ca2+结合位点，它们离酶的活性中心有一定距离，与催化机理并无直接关系。然而，如果从该酶中除去Ca2+，由于出现远程的结构变化，催化活性将丧失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。所以，蛋白酶K消化过程中通常加入EDTA（以抑制依赖于Mg2+的核酸酶的作用）。但是，如果要消化对蛋白酶K具有较强耐性的蛋白，如角蛋白一类，则可能需要使用含有1mmol/L Ca2+而不含EDTA的缓冲液。在消化完毕后、纯化核酸前要加入EGT（pH8.0）至终浓度为2mmol/L,以鳌合Ca2+。
3．无DNA酶的RNA酶
将胰RNA酶（RNA酶A）溶于10mmol/L Tris•HCl(pH7.5)、15mmol/L NaCl中，配成10mg/ml的浓度，于100℃加热15min，缓慢冷却至室温，分装成小份保存于-20℃。
四、常用抗生素溶液
四、常用抗生素溶液
抗生素& && &&&贮存液a& && &&&工作浓度
& && &&&浓度& && &&&保存条件& && &&&严紧型质粒& && &&&松弛型质粒
氨苄青霉素& && &&&50mg/ml(溶于水)& && &&&-20℃& && &&&20μg/ml& && &&&60μg/ml
羧苄青霉素& && &&&50mg/ml(溶于水)& && &&&-20℃& && &&&20μg/ml& && &&&60μg/ml
氯霉素& && &&&34mg/ml(溶于乙醇)& && &&&-20℃& && &&&25μg/ml& && &&&170μg/ml
卡那霉素& && &&&10mg/ml(溶于水)& && &&&-20℃& && &&&10μg/ml& && &&&50μg/ml
链霉素& && &&&10mg/ml(溶于水)& && &&&-20℃& && &&&10μg/ml& && &&&50μg/ml
四环素b& && &&&5mg/ml(溶于乙醇)& && &&&-20℃& && &&&10μg/ml& && &&&50μg/ml
a：以水为溶剂的抗生素贮存液通过0.22μm滤器过滤除菌。以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理。所有抗生素溶液均应放于不透光的容器保存。
b：镁离子是四环素的拮抗剂，四环素抗性菌的筛选应使用不含镁盐的培养基（如LB培养基）。
五、常用贮存液的配制
1．30%丙烯酰胺溶液
【配制方法】
将29g丙烯酰胺和1g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0，置棕色瓶中保存于室温。
丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。
一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子，在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂（MB-1 Mallinckrodt），搅拌过夜，然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。
在贮存期间，丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。
2．40%丙烯酰胺
【配制方法】
把380g丙烯酰胺（DNA测序级）和20g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理，但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。
见上述配制30%丙烯酰胺的说明，40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。
3．放线菌素D溶液
【配制方法】
把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中，1：10稀释贮存液，用100%乙醇作空白对照读取OD440值。放线菌素D（分子量为1255）纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21，900，故而1mg/ml的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182，放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中，保存于-20℃。
放线菌素D是致畸剂和致癌剂，配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作，而不能在开放在实验桌面上进行，谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。
药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或盐等添加剂。只要通过测量贮存液在440nm波长处的光吸收确定放线菌素D的浓度，这类制品便可用于抑制自身引导作用。
4．0.1mol/L腺苷三磷酸（ATP）溶液
【配制方法】
在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0，用蒸馏水定容1ml，分装成小份保存于-70℃
5．10mol/L乙酸酰溶液
【配制方法】
把770g乙酸酰溶解于800ml水中，加水定容至1L后过滤除菌。
6．10%过硫酸铵溶液
【配制方法】
把1g过硫酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中，该溶液可在4℃保存数周。
7．BCIP溶液
【配制方法】
把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐（BCIP）溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中，保存于4℃
8．2×BES缓冲盐溶液
【配制方法】
用总体积90ml的蒸馏水溶解1.07g盐溶液BES[N，N-双（2-羟乙基）-2-氨基乙磺酸]、1.6g NaCl和0.027g Na2HPO4，室温下用HCl调节 该溶液的pH值至6.96、然后加入蒸馏水定容至100ml，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成小份，保存于-20℃。
9．1mol/L CaCl2溶液
【配制方法】
在200ml蒸馏水中溶解54g CaCl2&#O，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成10ml小份贮存于-20℃。
制备感受态细胞时，取出一小份解冻并用蒸馏水稀释至100ml，用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，然后骤冷至0℃。
10．2.5mol/L CaCl2溶液
【配制方法】
在20ml蒸馏水中溶解13.5g CaCl2&#O，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。
11．1mol/L二硫苏糖醇（DTT）溶液
【配制方法】
用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液（pH5.2）溶解3.09g DTT，过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。
DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。
12．脱氧核苷三磷酸（dNTP）溶液
【配制方法】
把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右，用微量移液器吸取0.05mol/L Tris碱分别调节 每一dNTP溶液的pH值7.0（用pH试纸检测），把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释，在下表中给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度，然后用水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP，分装成小份贮存于-70℃。
碱基& && &&&波长（nm）& && &&&消化系数（ε）[L/（mol•cm）]
A& && &&&259& && &&&1.54×104
G& && &&&253& && &&&1.37×104
C& && &&&271& && &&&9.10×103
T& && &&&260& && &&&7.40×103
比色杯光径为1cm时,吸光度=εM
13．0.5mol/L EDTA(pH8.0)溶液
【配制方法】
在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na&#O），在磁力搅拌器上剧烈搅拌，用NaOH调节 溶液的pH值至8.0（约需20g NaOH颗粒）然后定容至1L，分装后高压灭菌备用。
EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0，才能完全溶解。
14．溴化乙锭（10mg/ml溶液）
【配制方法】
在100ml水中加入1g溴化乙锭，磁力搅拌数小时以确保其完全溶解，然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中，保存于室温。
小心：溴化乙锭是强诱变剂并有中度毒性，使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套，称量染料时要戴面罩。
15．2×HEPES缓冲盐溶液
【配制方法】
用总量为90ml的蒸馏水溶解1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2PO4&#O、0.2g葡聚糖和1gHEPES，用0.5mol/L NaOH调节 pH值至7.05，再用蒸馏水定容至100ml。用0.22μm滤器过滤除菌，分装成5ml小份，贮存于-20℃。
16．IPTG溶液
【配制方法】
IPTG为异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（分子量为238.3），在8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后，用蒸馏水定容至10ml，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。
17．1mol/L乙酸镁溶液
【配制方法】
在800ml水中溶解214.46g四水乙酸镁，用水定容至1L过滤除菌。
18．1mol/L MgCl2溶液
【配制方法】
在800ml水中溶解203.4g MgCl2&#O，用水定容至1L，分装成小份并高压灭菌备用。
MgCl2极易潮解，应选购小瓶（如100g）试剂，启用新瓶后勿长期存放。
19．β-巯基乙醇（BME）溶液
【配制方法】
一般得到的是14.4mol/L溶液，应装在棕色瓶中保存于4℃。
BME或含有BME的溶液不能高压处理。
20．NBT溶液
【配制方法】
把0.5g氯化氮蓝四唑溶解于10ml 70%的二甲基甲酰胺中，保存于4℃。
21．酚/氯仿溶液
【配制方法】
把酚和氯仿等体积混合后用0.1mol/L Tris•HCl(pH7.6)抽提几次以平衡这一混合物，置棕色玻璃瓶中，上面覆盖等体积的0.01mol/L Tris•HCl(pH7.6)液层，保存于4℃。
酚腐蚀性很强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜，穿防护服。所有操作均应在化学通风橱中进行。与酚接触过的部位皮肤应用大量的水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。
22．10mmol/L苯甲基磺酰氟（PMSF）溶液
【配制方法】
用异丙醇溶解PMSF成1.74mg/ml（10mmol/L），分装成小份贮存于-20℃。如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液（100mmol/L）。
PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一旦眼睛或皮肤接触了PMSF，应立即用大量水冲洗之。凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。
PMSF在水溶液中不稳定。应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快，且25℃的失活速率高于4℃。pH值为8.0时，20μmmol/L PMSF水溶液的半寿期大约为85min，这表明将PMSF溶液调节 为碱性（pH&8.6）并在室温放置数小时后，可安全地予以丢弃。
23．磷酸盐缓冲溶液（PBS）溶液
【配制方法】
在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,用HCl调节 溶液的pH值至7.4加水定容至1L，在15lbf/in2(Pa)高压下蒸气灭菌20min。保存于室温。
24．1mol/L乙酸钾（pH7.5）溶液
【配制方法】
将9.82g乙酸钾溶解于90ml纯水中，用2mol/L乙酸调节 pH值至7.5后加入纯水定容到1L，保存于-20℃。
25．乙酸钾溶液（用于碱裂解）
【配制方法】
在60ml 5mol/L乙酸钾溶液中加入11.5ml冰乙酸和28.5ml水，即成钾浓度为3mol/L而乙酸根浓度为5mol/L的溶液。
26．3mol/L乙酸钠（pH5.2和pH7.0）溶液
【配制方法】
在80ml水中溶解408.1g三水乙酸钠，用冰乙酸调节 pH值至5.2或用稀乙酸调节 pH值至7.0，加水定容到1L，分装后高压灭菌。
27．5mol/L NaCl溶液
【配制方法】
在800ml水中溶解292.2g NaCl加水定容至1L，分装后高压灭菌。
28．10%十二烷基硫酸钠（SDS）溶液
【配制方法】
在900ml水中溶解100g电泳级SDS，加热至68℃助溶，加入几滴浓盐酸调节 溶液的pH值至7.2，加水定容至1L，分装备用。
SDS的微细晶粒易扩散，因此称量时要戴面罩，称量完毕后要清除残留在称量工作区和天平上的SDS，10% SDS溶液无须灭菌。
29．20×SSC溶液
【配制方法】
在800ml水中溶解175.3g NaCl和88.2g柠檬酸钠，加入数滴10mol/L NaOH溶液调节 pH值至7.0，加水定容至1L，分装后高压灭菌。
30．20×SSPE溶液
【配制方法】
在800ml水中溶解17.5g NaCl、27.6g NaH2PO4•H2O和7.4g EDTA，用NaOH溶液调节 pH值至7.4（约需6.5ml 10ml/L NaOH），加水定容至1L，分装后高压灭菌。
31．100%三氯乙酸溶液
【配制方法】
在装有500g TCA的瓶中加入227ml水，形成的溶液含有100%（M/V）TCA。
32．1mol/L Tris溶液
【配制方法】
在800ml水中溶解121.91g Tris碱，加入浓HCl调节 pH值至所需值。
pH　　　HCl
7.4　　 70ml
7.6 　　60ml
8.0　　 42ml
应使溶液冷至室温后方可最后调定pH值，加水定容至1L，分装后高压灭菌。
如1mol/L溶液呈现黄色，应予丢弃并置备质量更好的Tris。
尽管多种类型的电极均不能准确测量Tris溶液的pH值，但仍可向大多数厂商购得合适的电极。
Tris溶液的pH值因温度而异，温度每升高1℃，pH值大约降低0.03个单位。例如：0.05mol/L的溶液在5℃、25℃、和37℃时的pH值分别为9.5、8.9和8.6。
33．Tris缓冲盐溶液（TBS）（25mmol/L Tris）
【配制方法】
在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl和3g Tris碱，加入0.015g酚并用HCl调至pH值至7.4，用蒸馏水定容至1L，分装后在151bf/in2(1.034×105Pa)高压下蒸汽灭菌20min，于室温保存。
34．X-gal溶液
【配制方法】
X-gal为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷。用二基甲酰胺溶解X-gal配制成的20mg/ml的贮存液。保存于一玻璃管或聚丙烯管中，装有X-gal溶液的试管须用铝箔封裹以防因受光照而被破坏，并应贮存于-20℃。X-gal溶液无须过滤除菌。
杂交试验中用于降低背景的封闭剂
试剂& && &&&用途
Denhardt试剂& && &&&Northern杂交
& && &&&使用RNA探针的杂交
& && &&&单拷贝序列的Southern杂交
& && &&&将DNA固定于尼龙膜上的杂交
Denhardt试剂通常配制50×贮存液，过滤后保存于-20℃。可将该贮存液10倍稀释于预杂交液（常为含有0.5%SDS和100μg/ml经变性被打断的鲑精DNA的6×SSC或6×SSPE）中。50×Denhardt液中含5g聚蔗糖（Ficoll,400型，Pharmacia）、5g聚乙烯吡咯烷酮和5g牛血清白蛋白（组分V”Sigmal），加水至终体积为500ml。
BLOTTO& && &&&Grunstein-Hogness杂交
& && &&&Benton-Davis杂交
& && &&&除单拷贝序列Southern杂交以外的所有Southern杂交
& && &&&斑点印迹
1×BLOTT（牛乳转移技术优化液，Bovine Lacto Transfer Technique Optimizer）,是含5%胶脂奶粉和0.02%叠氮钠的水溶液，应保存于4℃。使用前可用预杂交液稀释25倍。BLOTTO不应与高浓度的SDS并用，因为后者会导致牛奶中蛋白质析出。如果杂交背景不合要求，可在杂交液中加入NP-40至终浓度为1%。BLOTTO不能用作Northern杂交的封闭剂，因为这一封闭剂中可能含有RNA酶，其活性之高使人无法接受。
注意：叠氮钠有毒性，取用时需戴手套小心操作。含叠氮钠的溶液应予明确标记。
肝素& && &&&Southern杂交
& && &&&原位杂交
肝素（Sigma H-7005，从猪中提取的二级产品或相当等级的产品）用4×SSPE或4×SSC溶解配制成50mg/ml的浓度，保存于4℃。肝素在含有葡聚糖硫酸酯的杂交液中用作封闭剂的浓度为500μg/ml，在不含葡聚糖硫酸酯的杂交液中的浓度为50μg/ml。
经变性并被打断的鲑精DNA& && &&&southern和Northern杂交
把鲑鱼精子DNA（Sigma,Ⅲ,盐钠）溶解于水配制成10mg/ml的浓度，必要时于室温磁力搅拌2～4h助溶。把溶液中NaCl的浓度调至0.1mol/L，并用酚和酚/氯仿各抽提一次，回收水相。合DNA溶液快速通17号皮下注射针头12次，以剪切DNA。加入2倍体积用冰预冷的乙醇沉淀DNA。离心回收DNA并重溶于水，配制成10mg/ml的浓度，测定溶液的OD260值并计算出精确的DNA浓度，然后煮沸10min，分装成小份保存于-20℃。使用前置沸水浴中加热5min，然后迅速在冰浴中骤冷。预杂交液中应含有100μg/ml经变性并被打断的鲑鱼精子DNA
六、常用凝胶的技术参数
1．葡聚糖凝胶的某些技术数据
种类& && &&&
干颗粒直径（μ）& && &&&
分子量分级范围& && &&&
床体积毫升/克干分子筛& && &&&
得水值& && &&&溶胀最少平衡时间（h）& && &&&
柱头压力（kPa）(2.5cm直径柱)
& && && && && & 肽及球形蛋白质& && &&&葡聚糖（线性分子）& && && && && && && && &室温& && &&&沸水浴& && &&&
Sephadex G-10& && &&&40～ 120& && &&&～700& && &&&～700& && &&&2～ 3& && &&&1.0±0.1& && &&&3& && &&&1& && &&&　
Sephadex G-10& && &&&40～ 120& && &&&～1500& && &&&1500& && &&&2.5～3.5& && &&&1.5±3.5& && &&&3& && &&&1& && &&&　
Sephadex G-25& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　
粗级& && &&&100～300
(≈5～100目)& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　
中级& && &&&50～150
(≈100～200目)& && &&&1,000～
5,000& && &&&100～
5,000& && &&&
4～6& && &&&
1.5±0.2& && &&&
细级& && &&&20～800(≈200～400目)& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　
超细& && &&&10～40& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　
Sephadex G-50& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　
粗级& && &&&100～200& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　
中级& && &&&50～150& && &&&1,500～& && &&&500～& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　
细级& && &&&20～80& && &&&30,000& && &&&10,000& && &&&9～11& && &&&5.0±0.3& && &&&6& && &&&2& && &&&
超细& && &&&10～40& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　
Sephadex G-75& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　
　& && &&&40～120& && &&&3,000～& && &&&1,000～& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　
超细& && &&&10～40& && &&&70,000& && &&&950,000& && &&&12～15& && &&&7.5±0.5& && &&&24& && &&&3& && &&&3.92～15.86
Sephadex G-100& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　
　& && &&&40～120& && &&&4,000～& && &&&1,000～& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　
超细& && &&&10～40& && &&&1,500,000& && &&&150,000& && &&&15～20& && &&&10.0±1.0& && &&&48& && &&&5& && &&&2.35～9.41
Sephadex G-150& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　
　& && &&&40～120& && &&&5,000～& && &&&1,000～& && &&&20～30& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　
超细& && &&&10～40& && &&&400,000& && &&&150,000& && &&&18～22& && &&&15.0±1.5& && &&&72& && &&&5& && &&&0.88～3.53
Sephadex G-200& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　
　& && &&&40～120& && &&&5000～& && &&&1000～& && &&&30～40& && &&&　& && &&&　& && &&&　& && &&&　
　& && &&&10～40& && &&&800,000& && &&&200,000& && &&&20～25& && &&&20.0±2.0& && &&&72& && &&&5& && &&&0.39～1.57
2.聚丙烯酰胺凝胶的技术数据
型号& && &&&排阻的下限
(分子量)& && &&&分级分离范围
(分子量)& && &&&膨胀后的床体积(ml/g干凝胶)& && &&&膨胀所需最少时间(室温,h)
Bio-gel-P-2& && &&&1,600& && &&&200～2,000& && &&&3.8& && &&&2～4
Bio-gel-P-4& && &&&3,600& && &&&500～4,000& && &&&5.8& && &&&2～4
Bio-gel-P-6& && &&&4,600& && &&&1,000～5,000& && &&&8.8& && &&&2～4
Bio-gel-P-10& && &&&10,000& && &&&5,000～17,000& && &&&12.4& && &&&2～4
Bio-gel-P-30& && &&&30,000& && &&&20,000～50,000& && &&&14.9& && &&&10～12
Bio-gel-P-60& && &&&60,000& && &&&30,000～70,000& && &&&19.0& && &&&10～12
Bio-gel-P-100& && &&&100,000& && &&&40,000～100,000& && &&&19.0& && &&&24
Bio-gel-P-150& && &&&150,000& && &&&50,000~150,000& && &&&24.0& && &&&24
Bio-gel-P-200& && &&&200,000& && &&&80,000～200,000& && &&&34.0& && &&&48
Bio-gel-P-300& && &&&300,000& && &&&100～400,000& && &&&40.0& && &&&48
3．琼脂糖凝胶的技术数据
型号& && &&&琼脂糖含量
%（W/W）& && &&&排阻的下限
（分子量）& && &&&分级分离的范围（分子量）& && &&&生产厂家
Sepharose 4B& && &&&4& && &&&　& && &&&0.3×106～3×106& && &&&Pharmacia
Sepharose 2B& && &&&2& && &&&　& && &&&2×106～25×106& && &&&
Sagavac 10& && &&&10& && &&&2.5×105& && &&&1×104～2.5×105& && &&&
Sagavac 8& && &&&8& && &&&7×105& && &&&2.5×104～7×105& && &&&
Sagavac 6& && &&&6& && &&&2×106& && &&&5×104～2×106& && &&&
Sagavac 4& && &&&4& && &&&15×106& && &&&2×105～15×106& && &&&
Sagavac 2& && &&&2& && &&&150×106& && &&&5×105～15×107& && &&&
Bio-gel A-0.5M& && &&&10& && &&&0.5×106& && &&&&1×104～0.5×106& && &&&
Bio-gel A-1.5M& && &&&8& && &&&1.5×106& && &&&&1×104～1.5×106& && &&&
Bio-gel A-5M& && &&&6& && &&&5×106& && &&&1×104～5×106& && &&&
Bio-gel A-15M& && &&&4& && &&&15×106& && &&&4×104～15×106& && &&&
Bio-gel A-50M& && &&&2& && &&&50×106& && &&&1×105～50×106& && &&&
Bio-gel A-150M& && &&&1& && &&&150×106& && &&&1×106～150×106& && &&&
4．各处凝胶所允许的最大操作压
凝胶& && &&&最大静水压（kPa）
Sephadex& && &&&　
G-10& && &&&9.8
G-15& && &&&9.8
G-25& && &&&9.8
G-50& && &&&9.8
G-75& && &&&4.9
5．琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分辨范围
凝胶浓度（%）& && &&&线性DNA长度（bp）
0.5& && &&&
0.7& && &&&800～12000
1.0& && &&&500～10000
1.2& && &&&400～7000
1.5& && &&&200～3000
2.0& && &&&50～2000
6．染料在变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度
凝胶浓度（%）& && &&&溴酚蓝& && &&&二甲苯青FF
5．0& && &&&35bp& && &&&140bp
6．0& && &&&26bp& && &&&106bp
8．0& && &&&19bp& && &&&75bp
10．0& && &&&12bp& && &&&55bp
20．0& && &&&8bp& && &&&28bp
7．染料在非变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度
凝胶浓度（%）& && &&&溴酚蓝& && &&&二甲苯青FF
3.5& && &&&100bp& && &&&460bp
5.0& && &&&65bp& && &&&260bp
8.0& && &&&45bp& && &&&160bp
12.0& && &&&20bp& && &&&70bp
15.0& && &&&15bp& && &&&50bp
20.0& && &&&12bp& && &&&45bp
七、氨基酸的特性
氨基酸名称& && && &三字母缩写& && && &单字母缩写& && && &质量& && && &侧链电离的pHa值
丙氨酸（alanine）& && && &Ala& && && &A& && && &89.09& && && &　
精氨酸（arginine）& && && &Arg& && && &R& && && &174.2& && && &12.48
天冬酰氨（asparagine）& && && &Asn& && && &N& && && &132.1& && && &　
天冬氨酸（aspartic acid）& && && &Asp& && && &D& && && &133.1& && && &3.86
半胱氨酸（systeine）& && && &Cys& && && &C& && && &121.12& && && &　
谷氨酰胺（glutamine）& && && &Gln& && && &Q& && && &146.15& && && &　
谷氨酸（glutamic acid）& && && &Glu& && && &E& && && &147.13& && && &4.25
甘氨酸（glycine）& && && &Gly& && && &G& && && &75.07& && && &　
组氨酸（histidine）& && && &His& && && &H& && && &155.16& && && &6.0
异亮氨酸（isoleucine）& && && &lle& && && &I& && && &131.17& && && &　
亮氨酸（leucine）& && && &Leu& && && &L& && && &131.17& && && &　
赖氨酸（lycine）& && && &Lys& && && &K& && && &146.19& && && &　
甲硫氨酸（methionine）& && && &Met& && && &M& && && &149.21& && && &　
苯丙氨酸（phenylanaline）& && && &Phe& && && &P& && && &165.19& && && &　
脯氨酸（proline）& && && &Pro& && && &P& && && &115.13& && && &　
丝氨酸（serine）& && && &Ser& && && &S& && && &105.06& && && &　
苏氨酸(threonine)& && && &Thr& && && &T& && && &119.12& && && &　
色氨酸（tryptophan）& && && &Trp& && && &W& && && &204.22& && && &　
酪氨酸（tyrosine）& && && &Tyr& && && &Y& && && &181.19& && && &10.07
缬氨酸（valine）& && && &Val& && && &P& && && &117.15& && && &　
八、遗传密码
密码子的第二位
密码子的第一位（5’端）& && &&&　& && &&&U& && &&&C& && &&&A& && &&&G& && &&&　& && &&&密码子的第三位（3端’）
U& && &&&UUU& && &&&Phe& && &&&UCU& && &&&Ser& && &&&UAU& && &&&Tyr& && &&&UGU& && &&&Gys& && &&&U& && &&&
& && && && && & UUC& && &&&Phe& && &&&UCC& && &&&Ser& && &&&UAC& && &&&Tyr& && &&&UGG& && &&&Gys& && &&&C& && &&&
& && && && && & UUA& && &&&Leu& && &&&UCA& && &&&Ser& && &&&UAA& && &&&终止（赭石）& && &&&UGA& && &&&终止（乳白）& && &&&A& && &&&
& && && && && & UUG& && &&&Leu& && &&&UGG& && &&&Ser& && &&&UAG& && &&&终止（琥珀）& && &&&UGG& && &&&Trp& && &&&G& && &&&
C& && &&&CUU& && &&&Leu& && &&&CCU& && &&&Pro& && &&&CAU& && &&&His& && &&&CGA& && &&&Arg& && &&&U& && &&&
& && && && && & CUC& && &&&Leu& && &&&CCC& && &&&Pro& && &&&CAC& && &&&His& && &&&CGC& && &&&Arg& && &&&C& && &&&
& && && && && & CUA& && &&&Leu& && &&&CCA& && &&&Pro& && &&&CAA& && &&&Gln& && &&&CGA& && &&&Arg& && &&&A& && &&&
& && && && && & CUG& && &&&Leu& && &&&CCG& && &&&Pro& && &&&CAG& && &&&Gln& && &&&CGC& && &&&Arg& && &&&G& && &&&
A& && &&&AUU& && &&&Ile& && &&&ACU& && &&&Thr& && &&&AAU& && &&&Asn& && &&&AGU& && &&&Ser& && &&&U& && &&&
& && && && && & AUC& && &&&Ile& && &&&ACC& && &&&Thr& && &&&AAC& && &&&Asn& && &&&AGC& && &&&Ser& && &&&C& && &&&
& && && && && & AUA& && &&&Ile& && &&&ACA& && &&&Thr& && &&&AAA& && &&&Lys& && &&&AGA& && &&&Arg& && &&&A& && &&&
& && && && && & AUG& && &&&Met& && &&&ACG& && &&&Thr& && &&&AAG& && &&&Lys& && &&&AGC& && &&&Arg& && &&&G& && &&&
G& && &&&GUU& && &&&Val& && &&&GCU& && &&&Ala& && &&&GAU& && &&&Asp& && &&&GGU& && &&&Gly& && &&&U& && &&&
& && && && && & GUC& && &&&Val& && &&&GCC& && &&&Ala& && &&&GAC& && &&&Asp& && &&&GGC& && &&&Gly& && &&&C& && &&&
& && && && && & GUA& && &&&Val& && &&&GCA& && &&&Ala& && &&&GAA& && &&&Glu& && &&&GGA& && &&&Gly& && &&&A& && &&&
& && && && && & GUG& && &&&Val& && &&&GCG& && &&&Ala& && &&&GAG& && &&&Glu& && &&&GGG& && &&&Gly& && &&&G& && &&&
九、常用酸碱技术参数
1．常见的市售酸碱的浓度
溶质& && &&&分子式& && &&&分子量& && &&&mol/L& && &&&g/L& && &&&重量（%）& && &&&比重& && &&&配制mol/L溶液的加入量（ml/L）
冰乙酸& && &&&CH3COOH& && &&&60.05& && &&&17.40& && &&&1045& && &&&99.5& && &&&1.050& && &&&57.5
乙酸& && &&&　& && &&&60.05& && &&&6.27& && &&&376& && &&&36& && &&&1.045& && &&&159.5
甲酸& && &&&HCOOH& && &&&46.02& && &&&23.40& && &&&1080& && &&&90& && &&&1.200& && &&&42.7
盐酸& && &&&HCl& && &&&36.50& && &&&11.60& && &&&424& && &&&36& && &&&1.180& && &&&86.2
　& && &&&　& && &&&　& && &&&2.90& && &&&105& && &&&10& && &&&1.050& && &&&344.8
硝酸& && &&&HNO3& && &&&63.02& && &&&15.99& && &&&1008& && &&&71& && &&&1.420& && &&&62.5
　& && &&&　& && &&&　& && &&&14.90& && &&&938& && &&&67& && &&&1.400& && &&&67.1
　& && &&&　& && &&&　& && &&&13.30& && &&&837& && &&&61& && &&&1.370& && &&&75.2
高氯酸& && &&&HclO3& && &&&100.50& && &&&11.65& && &&&1172& && &&&70& && &&&1.670& && &&&85.8
　& && &&&　& && &&&　& && &&&9.20& && &&&923& && &&&60& && &&&1.540& && &&&108.7
磷酸& && &&&H2PO4& && &&&80.00& && &&&18.10& && &&&1445& && &&&85& && &&&1.700& && &&&55.2
硫酸& && &&&H2P｀O4& && &&&98.10& && &&&18.00& && &&&1776& && &&&96& && &&&1.840& && &&&55.6
氢氧化铵& && &&&NH4OH& && &&&35.00& && &&&14.80& && &&&251& && &&&28& && &&&0.898& && &&&67.6
氢氧化钾& && &&&KOH& && &&&56.10& && &&&13.50& && &&&757& && &&&50& && &&&1.520& && &&&74.1
　& && &&&　& && &&&　& && &&&1.94& && &&&109& && &&&10& && &&&1.090& && &&&515.5
氢氧化钠& && &&&NaOH& && &&&40.00& && &&&19.10& && &&&763& && &&&50& && &&&1.530& && &&&52.4
　& && &&&　& && &&&　& && &&&2.75& && &&&111& && &&&10& && &&&1.110& && &&&363.4
2．各种浓度的酸碱贮存液的近似pH值
溶质& && &&&1Na& && &&&0.1Na& && &&&0.01Na& && &&&0.001Na
乙酸& && &&&0.40& && &&&2.90& && &&&3.40& && &&&3.90
盐酸& && &&&0.10& && &&&1.07& && &&&2.02& && &&&3.01
硫酸& && &&&0.30& && &&&1.20& && &&&2.10& && &&&　
柠檬酸& && &&&　& && &&&2.10& && &&&2.60& && &&&　
氢氧化铵& && &&&11.80& && &&&11.30& && &&&10.80& && &&&10.30
氢氧化钠& && &&&14.05& && &&&13.07& && &&&12.12& && &&&11.13
碳酸氢钠& && &&&　& && &&&8.40& && &&&　& && &&&　
碳酸钠& && &&&　& && &&&11.50& && &&&11.00& && &&&　
J a.N为光量浓度[1N≈（1mol/L）×离子价数]，
辛苦了，好好学学。
不错，呵呵
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