如何在选择性标记基因内引入具有多种限制性内切酶识别及酶切位点的DNA序列,即多聚接头_百度知道
如何在选择性标记基因内引入具有多种限制性内切酶识别及酶切位点的DNA序列,即多聚接头
有没有详细步骤
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（1）先在标记基因上面选好插入位置，也就是找到一个合适的序列符合某个酶切位点（A）。（2）设计你的多聚接头，让它具有多种酶切位点（BCDEF...）并且和插入位置的位点（A）有区分，同时在末端设计好和插入位置酶切位点（A）相匹配的序列。（3）设计好后送去合成，然后把多聚接头和标记基因各自酶切一下，再连接起来，就OK了。
采纳率：71%
是的，有限制性酶切位点。
如何实现？
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《基因工程》答案 课堂用篇子
全部名词。
限制酶（限制性核酸内切酶）、DNA连接酶、载体、质粒、运载体的条件；基因文库、基因组文库、cDNA文库、cDNA文库构建方法；PCR扩增、Taq酶、引物、原料、变性、复性、延伸；人工化学合成法；表达载体、重组DNA分子、重组质粒、表达载体的结构、启动子、终止子、标记基因的作用、目的基因；受体细胞、转化、感受态细胞、农杆菌转化法、Ti质粒、T-DNA、基因枪法、花粉管通道法、显微注射技术；DNA分子杂交技术、分子杂交技术、抗原抗体杂交技术、接种实验；工程菌、乳腺生物发生器、生物反应器、基因诊断、基因治疗；基因工程原理和步骤、蛋白质工程原理和步骤。
重点问题。
1、DNA重组技术的基本工具有：“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）；“分子缝合针”——DNA连接酶；“分子运输车”——载体。
2、限制酶识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，故体现为“限制”酶。
3、限制酶在原核生物中的作用是防止外来病原物的侵害，将外源DNA切割保证自身安全。
原核生物的限制酶不切割自身DNA的原因是：原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。
4、DNA连接酶连接的是磷酸二酯键，从而将两个DNA片段连接在一起。
5、载体能够让目的基因在受体细胞中稳定保存、复制及表达，它需要满足①能在受体细胞中复制并稳定保存；②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入；③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
6、通过从基因文库中获取、人工化学合成、PCR、反转录法等。
7、cDNA不含有内含子和调控序列（如启动子，终止子等）。
8、作为目的基因的真核生物基因导入原核受体细胞时一般都要选择反转录产生的
cDNA，因为原核生物没有内含子剪接系统，带有内含子的真核生物基因在原核生物内部可能无法正常表达。
9、启动子、终止子、限制酶酶切位点、标记基因、复制原点等。
10、可以通过载体中的标记基因筛选；DNA分子杂交筛选。
11、植物：采用最多的是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等，动物：显微注射法，细菌：钙离子转化法。
12、见选修三12-13页。
13、分子水平：DNA分子杂交检测是否含有目的基因、DNA-RNA分子杂交检测是否转录、抗原-抗体杂交检测是否完成翻译；个体水平：接种实验。
14、实现了种间育种（打破远缘杂交不亲和），减少了农药的使用，但是可能面临基因污染的问题，引入的新蛋白经消化产生的短肽可能有一定毒性等。
15、基因诊断：又称为DNA诊断，是采用基因检测的方法来判断患者是否出现了基因异常或携带病原体；基因治疗：把正常基因导入病人体内，使该基因表达的产物发挥功能的治疗方法。具体过程见选修三23-24页。
16、见选修三26-28页。
17、可以通过核酸电泳，利用DNA分子在缓冲液中带负电，在电场中，穿越介质的速率与其分子量成反比。
18、可以采用凝胶色谱法，相对分子质量较小的蛋白质分子越容易进入凝胶内部，导致移动速度越慢；也可以采用二维聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的方法，其结合了等电聚焦技术(根据蛋白质等电点进行分离)以及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(根据蛋白质的大小进行分离)。这两项技术结合形成的二维电泳是分离分析蛋白质最有效的一种电泳手段；组成：第一向：等电聚焦电泳（IEF），第二向：SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳（SDS-PAGE）；应用：①用于原核生物和真核生物总蛋白的分离。②用于发现未知蛋白。
19、PCR是体外进行快速的DNA复制过程，可以用于大量扩增目的基因、可以检测细胞中是否存在特定的基因片段，主要是通过设计特异性的引物对，专门扩增想要的基因片段来完成。参加PCR反应的物质主要有五种即引物、Taq酶、dNTP、模板和缓冲液（其中需要Mg2+).
20、PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可以分为变性、复性和延伸三步。过程：①变性，当温度上升到90度以上时，双链DNA解聚为单链；②复性，温度下降到50度左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合；③延伸，温度上升到72度左右，溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。上述三步反应完成后，一个DNA分子就变成了两个DNA分子，随着重复次数的增多，DNA分子就以2^n的形式增加。PCR的反应过程都是在PCR扩增仪中完成的。
21、人们主要在食物安全、生物安全、环境安全三个方面存在激烈的争论，具体见选修三77-83页。总之应该理性对待转基因技术：趋利避害，不能因噎废食。
核心网络。
拓展能力。
1. 引物对&&&
2. 同源&&&
基因工程&&&
交叉互换&&&
外源DNA片段与目的基因片段进行交换，染色体上置换成为外源DNA&&&
标记基因&&&
外源DNA是否置换到染色体DNA上&&&
个体性状的观察、抗原抗体杂交等
3. 亮氨酸合成基因、赖氨酸合成基因&&&
不含有亮氨酸、赖氨酸和组氨酸&&&
检测X、Y是否有相互作用，如果有AD、BD蛋白结合会开启组氨酸合成基因的表达
5.荧光素&&
基因（特定序列）
&《基因工程》答案& 习题用篇子
选择题答案 1-5 CBACB& 6-10
DDCAA& 11-15 BCADD
1.A、由于基因的选择性表达，在人的肝细胞中，没有胰岛素基因转录的mRNA，A错误；
B、表达载体的复制启动于复制原（起）点，胰岛素基因的表达启动于启动子，B错误；
C、标记基因的作用是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来，C正确；
D、启动子在胰岛素基因的转录中起作用，终止密码子在胰岛素基因的翻译中起作用，D错误．
2.A、携带链霉素抗性基因受体菌的筛选，可用含链霉素的培养基进行培养，能存活的即含有相应的抗性基因，故A选项错误；
B、产生抗人白细胞介素-8抗体的杂交瘤细胞的筛选，细胞水平的筛选只能选出杂交瘤细胞，如筛选出产生特异性抗体的杂交瘤细胞，必须用抗原抗体杂交法从分子水平上进一步检测，故B选项正确；
C、转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定，用抗虫接种实验检测即可，故C选项错误；
D、21三体综合征的诊断，可用显微镜镜检观察检测，故D选项错误．
3.A、要获得矮牵牛中控制蓝色色素合成的基因B，可提取矮牵牛蓝色花mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因B，A正确；
B、一个生物体的基因组DNA用限制性内切酶部分酶切后形成的目的基因集合体为基因文库，选取目的基因时可直接从文库中选取，B错误；
C、通常用T4
DNA连接酶将基因B与质粒连接，C错误；
D、应该把DNA分子转入农杆菌．因为大肠杆菌不能完成感染并把基因转入玫瑰细胞，D错误．
4.A、由“腺苷酸脱氨酶基因通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶”可推出每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒，但不一定含有多个重组质粒，A正确；
B、基因工程中质粒作为运载体，条件之一是含有多个限制酶切点，B正确；
C、每个限制性核酸内切酶识别位点不一定能插入一个ada，还要看限制酶切割后的黏性末端是否与目的基因的黏性末端相同，C错误；
D、题中提出腺苷酸脱氨酶得到成功表达，因此每个大肠杆菌的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子，D正确．
5.A、图中①是获取目的基因的过程，获取的目的基因是cDNA，可用于基因工程，但cDNA已不含非编码区和内含子，不能用于比目鱼基因组测序，而且基因组测序应该是该生物的一个染色体组而非一个基因片段，故A错误；
B、将多个抗冻基因编码区相连形成的能表达的新基因不再是抗冻基因，所以得不到抗冻性增强的抗冻蛋白，故B正确；
C、②是基因表达载体的构建过程，基因表达载体通常由启动子、目的基因、终止子和标记基因构成，其中标记基因的作用是筛选重组质粒，质粒当中本身就有标记基因，将重组质粒转入农杆菌只是利用农杆菌侵入番茄组织块从而将重组质粒导入进去，故C错误；
D、利用DNA探针技术检测目的基因是否导入到受体细胞，但目的基因的完全表达应该检测表达产物蛋白质，即利用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否表达出来，故D错误．
6.A、严格选择转基因植物的目的基因，可避免产生对人类有害的物质，减少人们对转基因食物安全的担忧，故A选项正确；
B、当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验，特别是生殖性克隆，但不反对治疗性克隆，故B选项正确；
C、试管婴儿可以设计婴儿的性别，反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿，故C选项正确；
D、生物武器是指有意识的利用微生物、毒素、昆虫侵袭敌人的军队、人口、农作物或者牲畜等目标，以达到战争目的一类武器，干扰素为淋巴因子，并非生物武器，故D选项错误．
7.A、重组质粒的构建需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶参与，DNA聚合酶一般用于DNA复制过程，A错误；
B、③侵染植物细胞后，重组Ti质粒上的T-DNA整合到植物细胞的染色体上，B错误；
C、如果受体细胞的染色体上若含抗虫基因，但不代表该基因就一定成功表达，因此不能确定⑤是否表现出抗虫性状，C错误；
D、⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异，D正确．
8.A、该题目属于蛋白质工程，合成编码目的肽的DNA片段并不是第一步，A错误；
B、需要构建含目的肽的DNA片段的表达载体，但这不是第一步，B错误；
C、蛋白质工程的第一步是根据蛋白质的功能，设计P1氨基酸序列，从而推出其基因序列，C正确；
D、该基因表达产物为一种抗菌体和溶血性均较强的多肽P1，目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，而目的多肽是抗菌性强但溶血性弱，所以必需对其改造，保持其抗菌性强，抑制其溶血性，而筛选出具有优良活性的模拟肽作为模拟肽并不是第一步，D错误．
9.A、基因工程中，构建基因表达载体时，要用同种限制性核酸内切酶切割载体与含目的基因的DNA片段，以获得相同黏性末端，A正确；
B、由于密码子具有简并性，因此以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列不一定相同，B错误；
C、检测到受体细胞中含有目的基因还不能说明基因工程育种已经成功，还要检测目的基因是否成功表达等，C错误；
D、质粒上的抗生素抗性基因有利于重组后重组子的筛选，但不能促进质粒与外源基因连接，D错误．
10.A、①表示逆转录过程，A错误；
B、②为动物细胞培养过程，该过程中若出现接触抑制可用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，再分瓶培养，B正确；
C、一种生物的基因能在另一种生物体内表达，这说明人和动物共用一套遗传密码，C正确；
D、切割质粒和含有目的基因的DNA片段可用同种限制酶，以产生相同的黏性末端，D正确．
11.A、大肠杆菌是原核细胞，没有内质网和高尔基体等细胞器，不能对糖蛋白进行加工，A错误；
B、酵母菌具有质网和高尔基体，能对糖蛋白进行加工，使其具有生物活性，B错误；
C、T4噬菌体是病毒，无细胞结构，不能作为受体细胞，只能作为基因工程的载体，C错误；
D、质粒DNA是一种分子，不能作为受体，只能作为基因工程的载体，D错误．
12.A、图中酶切位点在ori序列上，该序列被破坏，重组质粒将无法进行复制，因此受体细胞既不能在四环素培养基上生长，也不能在氨苄青霉素培养基上生长，A错误；
B、图中酶切位点没有破坏三个基因，因此含重组DNA的细胞既能在四环素培养基上生长，也能在氨苄青霉素培养基上生长，B错误；
C、图中酶切位点在氨苄青霉素抗性基因上，氨苄青霉素抗性基因破坏，则含重组DNA的细胞能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长，C正确；
D、图中酶切位点在四环素抗性基因上，由于仅四环素抗性基因破坏，则含重组DNA的细胞能在氨苄青霉素培养基上生长而不能在四环素培养基上生长，D错误．
13.A、步骤①说明流感病毒的mRNA逆转录出DNA，但是不能说明mRNA是流感病毒的整个DNA分子转录而来还是DNA片段转录而来的，所以不能说明基因是具有遗传效应的DNA片段；而且流感病毒的遗传物质是单股负链RNA，并不是DNA，A错误；
B、步骤②是基因表达载体的构建，需要同种限制酶和DNA连接酶处理cDNA和质粒，B正确；
C、据题意可知，两种流感病毒单独存在时不能使猪患流感，但是通过③和④产生的活病毒可能是不同病毒间核酸重组的结果，C正确；
D、经过步骤⑤猪患流感了，说明猪的呼吸道上皮细胞可作为活病毒的宿主细胞，D正确．
14A、筛选与分离手提军需要用涂布法将受体菌群接种在培养基表面，A正确；
B、根据题干可知，目的菌能够在含有氨苄青霉素和X-gal的培养基上生存，所以筛选与分离时的培养基应含有氨苄青霉素和X-gal，B正确；
C、接种时接种环应该使用灼烧灭菌，C正确；
D、根据题干可知，导入目的基因的受体菌，由于重组质粒上的
LacZ基因已被破坏，大肠杆菌菌落呈白色，D错误．
15. A、图1中DNA片段含有2个限制酶MspI切割位点，若用限制酶MspI完全切割图1中DNA片段，会破坏4个磷酸二酯键，A错误；
B、图1中DNA片段含有2个限制酶SmaⅠ切割位点，若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，能产生2个平末端，产生3种不同的DNA片段，B错误；
C、限制酶MspⅠ和SmaⅠ的切割位点位于目的基因D内部，若用这两种酶切割会被破坏目的基因D；运载体的两个标记基因上都有限制酶MboⅠ的切割位点，用该酶切割会破坏这两个标记基因，因此只能选用限制酶BamHⅠ切割外源DNA分子和运载体，C错误；
D、用限制酶BamHⅠ切割破坏了抗生素A抗性基因，但没有破环抗生素B抗性基因，因此含有重组质粒的大肠杆菌能抗抗生素B，不能抗抗生素A，因此在添加抗生素A和B的培养基上不能存活，D正确．
一个基因可以控制多个性状，基因和环境共同决定生物的性状（答对一个给1分）
PCR&& Ti质粒&&
激素（1分）&
高盐（高浓度的NaCI）（1分）
（4）验证OrERF基因在拟南芥中高盐条件下也能表达（1分）
（5）细胞核&&&
聚合酶转录复合物（合理给分）（1分）
（1）逆转录酶&&&&&&&
（2）限制性核酸内切酶（限制酶）&&&&
质粒&&&&&&
（3）抗原-抗体杂交&&&&&
带标记的目的基因
（4）870或876&&&&&&&
（5）非特异性免疫
（1）蛋白质（2分）&&&&&&&&&
类囊体（2分）
（2）①DNA分子杂交（1分）&&&&
DNA序列（1分）
②含重组质粒的农杆菌（1分）&&&
草甘膦（1分）&&&
③全能性（2分）
④先升高后降低（2分）&&
2mg/L（2分）&&
&脱分化、再分化（2分）
已投稿到：高二生物基因工程测试题（附参考答案）
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高二生物基因工程测试题（附参考答案）
作者：佚名 资料来源：网络 点击数： &&&
高二生物基因工程测试题（附参考答案）
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文章 来源莲山课件 ww w.5 Y k j.CoM 专题1基因工程专题质量检测
(时间：90分钟，满分：100分)
一、(本题共20小题，每小题2.5分，满分50分)1．基因工程技术也称DNA重组技术，其实施必须具备的4个必要条件是(　　)A．工具酶、目的基因、运载体、受体细胞B．重组DNA、RNA聚合酶、内切酶、连接酶C．模板DNA、信使RNA、质粒、受体细胞D．目的基因、限制性内切酶、运载体、体细胞答案：A2．下列关于限制酶的说法正确的是(　　)A．限制酶广泛存在于各种生物中，但微生物中很少B．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C．不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端D．限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键解析：选B。此题主要考查限制酶的有关知识。限制酶能识别双链DNA的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开；DNA分子经限制酶切割会形成黏性末端和平末端两种形式。3．镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变。检测这种碱基序列改变必须使用的酶是(　　)A．解旋酶　　　　　　　　&B．DNA连接酶C．限制酶& &D．RNA聚合酶解析：选C。要检测某种基因的碱基序列，必须将该基因先用限制酶从DNA分子中切割下来，再通过DNA扩增，检测其中的碱基序列。4．由于质粒与目的基因具有相同的黏性末端，结合过程中不可能出现下列哪种情况(　　)A．形成环状的外源DNAB．可能形成环状的载体DNAC．可能出现重组DNAD．只出现重组DNA解析：选D。DNA连接酶连接黏性末端时，处理的目的基因不是一个，所以出现的DNA有多种情况，A、B、C三种情况都可能出现。5．现有一长度为1000碱基对(bp)的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoRⅠ酶切后得到的DNA分子仍是1000bp，用KpnⅠ单独酶切得到400bp和600bp两种长度的DNA分子，用EcoRⅠ、KpnⅠ同时酶切后得到200bp和600bp两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是(　　)&解析：选D。由题干条件可知用EcoRⅠ酶切后，并不能将DNA分解为两段，故可判断为环状DNA，再根据“用EcoRⅠ、Kpn Ⅰ同时酶切后得到200bp和600bp两种长度的DNA分子”可得到答案D。6．下列哪项不是基因表达载体的组成部分(　　)A．启动子& &B．终止密码C．标记基因& &D．复制原点解析：选B。基因表达载体的组成中启动子、标记基因、终止子是必需含有的。而载体的一个必要条件是必须具备自我复制能力。7．目前科学家把兔子血红蛋白基因导入大肠杆菌细胞中，在大肠杆菌细胞中合成了兔子的血红蛋白，下列哪一项不是这一先进技术的理论依据(　　)A．所有生物共用一套遗传密码B．基因能控制蛋白质的合成C．兔子血红蛋白基因与大肠杆菌的DNA都是由四种脱氧核苷酸构成，都遵循相同的碱基互补配对原则D．兔子与大肠杆菌有共同的原始祖先解析：选D。本题考查了基因工程的理论基础。转基因生物体内的外源基因能够成功表达是建立在下列基础之上的：所有生物共用一套遗传密码；具有细胞结构的不同生物遗传物质的组成一样，即都是由四种脱氧核苷酸连接而成的长链，然后根据碱基互补配对原则组成双链；不同生物体内蛋白质的合成都要在核糖体上完成，且都需经过转录和翻译过程。8．在基因工程技术中，需要用氯化钙处理的步骤是(　　)A．目的基因的提取B．目的基因与载体结合C．将目的基因导入受体细胞D．目的基因的检测与表达解析：选C。氯化钙处理的是细胞壁，增加细胞壁的通透性，使重组质粒进入细胞内部。9．日本下村修、美国沙尔菲和钱永健因在发现绿色荧光蛋白(GFP)等研究方面作出突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。GFP在紫外光的照射下会发出绿色荧光。依据GFP的特性，你认为该蛋白在生物工程中的应用价值是(　　)A．作为标记基因，研究基因的表达B．作为标记蛋白，研究细胞的转移C．注入肌肉细胞，繁殖发光小白鼠D．标记噬菌体外壳，示踪DNA路径答案：B10．科学家已经能够通过基因工程的方法，使番茄果肉细胞含有人奶蛋白。下列有关该基因工程的叙述中，错误的是(　　)A．采用反转录的方法得到的目的基因有启动子、终止子B．用同种限制酶处理质粒和含目的基因的DNA，可产生相同的黏性末端而形成重组DNA分子C．番茄的叶肉细胞可作为受体细胞D．启动子对于目的基因在番茄的叶肉细胞中表达是不可缺少的解析：选A。本题主要考查了基因工程的有关知识。反转录法获取目的基因时，由于是根据氨基酸的序列推测基因中的碱基序列，因此，合成的基因中并不含有启动子、终止子。在基因工程中，必须用相同的限制酶处理质粒和目的基因的DNA，这样可产生相同的黏性末端，以便能形成重组DNA分子。基因工程中，常用的受体细胞有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等，因此番茄的叶肉细胞可作为受体细胞。在基因表达的过程中，启动子对于目的基因在番茄的叶肉细胞中的表达起一定的作用，是不可缺少的，它位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。11．某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶(Amy)基因a，通过基因工程的方法，将基因a与载体结合后导入马铃薯植株中，经检测发现Amy在成熟块茎细胞中存在。下列有关这一过程的叙述不正确的是(　　)&A．获取基因a的限制酶的作用部位是图中的①B．连接基因a与载体的DNA连接酶的作用部位是图中的②C．基因a进入马铃薯细胞后，可随马铃薯DNA分子的复制而复制，传给子代细胞D．通过该技术人类实现了定向改造马铃薯的遗传性状答案：B12．人们试图利用基因工程的方法，用乙种生物生产甲种生物的一种蛋白质。生产流程是：甲生物的蛋白质D→mRNADD→①目的基因DD→②与质粒DNA重组DD→③导入乙细胞DD→④获得甲生物的蛋白质下列说法正确的是(　　)A．①过程需要的酶是逆转录酶，原料是A、U、G、CB．②要用限制性内切酶切断质粒DNA，再用DNA连接酶将目的基因与质粒连接在一起C．如果受体细胞是动物细胞，③过程可用农杆菌转化法D．④过程中用的原料不含有A、U、G、C答案：B13．科学家运用基因工程技术将人的胰岛素基因与大肠杆菌的质粒DNA分子重组，并且在大肠杆菌体内获得成功表达。图示a处为胰岛素基因与大肠杆菌质粒DNA结合的位置，它们彼此能结合的依据是(　　)&A．基因自由组合定律B．半保留复制原则C．基因分离定律D．碱基互补配对原则解析：选D。基因工程过程中构建重组DNA分子时，首先是用同一种限制酶切割后的目的基因与质粒的黏性末端通过碱基互补配对形成氢键，然后，用DNA连接酶把缺口“缝合”。14．下列叙述符合基因工程概念的是(　　)A．B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上解析：选B。基因工程是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。所以B项符合基因工程概念，而A项为动物细胞工程，C项为诱变育种，D项无人为因素不属于基因工程。15．不属于利用基因工程方法生产的药物是(　　)A．干扰素　　　　　　　　&B．白细胞介素C．青霉素& &D．乙肝疫苗解析：选C。本题考查基因工程的应用――基因工程药品异军突起。通过基因工程生产的药物现有胰岛素、干扰素、白细胞介素、溶血栓剂、凝血因子、人造血液代用品、乙肝疫苗等。而青霉素是发酵工程的产品之一。16．在烟草的叶片中含有大量的烟碱，当把烟草嫁接到番茄上时，烟草的叶就不含烟碱了。反之，嫁接到烟草上的番茄叶中却含有烟碱。这说明(　　)A．烟草根部能合成烟碱B．烟草叶受番茄的影响，遗传性状发生改变C．番茄叶受烟草的影响，遗传性状发生改变D．只有依赖烟草根部吸收某种物质，烟草叶片才能合成烟碱解析：选A。由题意知，嫁接到烟草上的番茄叶中含有烟碱说明烟碱肯定不是番茄叶合成的，只能由烟草根部合成。17．关于基因工程和蛋白质工程的说法正确的是(　　)A．都是分子水平上的操作B．基因工程就是改造基因的分子结构C．蛋白质工程就是改造蛋白质的分子结构D．基因工程能创造出自然界根本不存在的基因，蛋白质工程能创造出自然界根本不存在的蛋白质解析：选A。基因工程的操作对象是基因，属于分子水平上的操作；蛋白质工程的操作对象是DNA和蛋白质分子，二者都属于分子水平上的操作。18．如果科学家通过转基因工程，成功地把一位女性血友病患者的造血干细胞进行改造，使其凝血功能恢复正常。那么，她后来所生的儿子中(　　)A．全部正常& &B．一半正常C．全部有病& &D．不能确定解析：选C。改造的是造血干细胞，生殖细胞没有改造，因此她产生的卵细胞上仍然带有致病基因，所生的儿子全部有病。19．猪的胰岛素用于人体时降血糖效果不明显，原因是猪胰岛素分子中有一个氨基酸与人的不同。为了使猪胰岛素用于治疗人类糖尿病，用蛋白质工程的蛋白质分子设计的最佳方案是(　　)A．对猪胰岛素进行一个氨基酸的替换B．将猪胰岛素和人胰岛素进行拼接组成新的胰岛素C．将猪和人的胰岛素混合在一起治疗糖尿病D．根据人的胰岛素设计制造一种全新的胰岛素答案：A20．蛋白质工程是新崛起的一项生物工程，又称第二代基因工程。下图示意蛋白质工程流程，图中A、B在遗传学上依次表示(　　)蛋白质工程&中心法则A．转录和翻译& &B．翻译和转录C．复制和转录& &D．传递和表达答案：A二、非(本题共4小题，满分50分)21．(12分)下图为利用生物技术获得生物新品种的过程，据图回答：&(1)在基因工程中，A→B为________技术，利用的原理是________，其中①为________过程。(2)B→C为抗虫棉的培育过程，其中③过程常用的方法是________。要确定目的基因(抗虫基因)导入受体细胞后是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，请写出在个体生物学水平上的鉴定过程：________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析：在基因工程中，A→B为DNA扩增过程，又称PCR技术，利用的原理是DNA分子复制，其中①为解旋过程；B→C为抗虫棉培育过程，③过程为将目的基因导入细胞的过程，常用方法为农杆菌转化法。答案：(1)PCR　DNA分子复制　DNA解旋(2)农杆菌转化法　让害虫吞食转基因棉花的叶子，观察害虫的存活情况，以确定是否具有抗虫性状22．(12分)降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如图。&在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：(1)Klenow酶是一种____________________酶。(2)获得的双链DNA经EcoR Ⅰ(识别序列和切割位点―G↓AATC―)和BamH Ⅰ(识别序列和切割位点―G↓GATCC―)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。①大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它________________________________________________________________________________________________________________________________________________。②设计EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切的目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。③要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有________。(3)经DNA测序说明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。答案：(1)DNA聚合(2)①繁殖快、是单细胞、遗传物质相对较少等②保证目的基因和载体定向连接(或防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接)　③标记基因(3)合成的核苷酸单链仍较长，产生缺少碱基的现象23．(12分)酵母菌的维生素、蛋白质含量高，可生产食品和药品等。科学家将大麦细胞的LTP1基因植入啤酒酵母菌中，获得的啤酒酵母菌种可产生LTP1蛋白，并酿出泡沫丰富的啤酒。基本的操作过程如下：&(1)该技术定向改变了酵母菌的性状，这在可遗传变异的来源中属于________。(2)从大麦细胞中可直接分离获得LTP1基因，还可采用________方法获得目的基因。本操作中为了将LTP1基因导入酵母菌细胞内，所用的运载体是________。(3)此操作中可以用分别含有青霉素、四环素的两种选择培养基进行筛选，则有C进入的酵母菌在选择培养基上的生长情况是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)除了看啤酒泡沫丰富与否外，还可以怎样检测LTP1基因在啤酒酵母菌中的表达？解析：(1)基因重组一般是指生物体进行有性生殖的过程中，控制不同性状的基因的重新组合。题目中将大麦的LTP1基因重组入啤酒酵母菌中，也属于基因重组。(2)获得目的基因有两条途径：一是用“鸟枪法”直接分离获得目的基因，一种是用人工合成的方法获得目的基因。基因工程中常用的运载体是质粒。(3)质粒中含有抗青霉素基因，如果成功导入受体细胞，重组酵母菌在有青霉素的培养基上能存活，但不能在含有四环素的培养基上存活。(4)目的基因是否表达，可以通过检测特定的性状或者目的基因是否合成相应的蛋白质进行确定。答案：(1)基因重组(2)人工合成　质粒(3)在含有青霉素的培养基上能存活，但不能在含有四环素的培养基上存活(4)检验转基因啤酒酵母菌能否产生LTP1蛋白。24．(14分)利用动物乳腺生产产品的技术称为动物乳腺反应器技术。青岛“崂山奶山羊乳腺反应器研制”项目通过鉴定，该项目产生的药用蛋白具有表达效率高、成本低、安全性高、易于分离纯化的优点，可产生干扰素、乙肝表面抗原及抗凝血酶Ⅲ等医药产品，造福人类。请根据这一科技成果的研究过程回答问题：&(1)研究人员用DNA测序仪显示了基因组的某DNA片段一条链的碱基排列顺序图片。其中图1的碱基排列顺序已经解读，基顺序是：GGTTATGCGT，请解读图2显示的碱基排列顺序：________________________________________________________________________。(2)科学家从相关基因组中获取了目的基因，并采用________技术对目的基因进行扩增，然后将目的基因与质粒等载体组合形成了重组载体。在重组载体的构建过程中需要的工具酶有________________________________________________________________________。(3)在基因工程操作过程中，基因工程的核心是________________________，一个基因表达载体的组成必须有标记基因，其作用是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)如何检测和鉴定目的基因已被成功导入羊体内？请写出两种方法。解析：根据图1与相对应的碱基序列可知，由左到右第一列应为碱基A，第二列为碱基C，第三列是碱基G，第四列是碱基T，由此推知图2的碱基序列为GATGCGTTCG；目的基因的扩增用PCR技术；在将目的基因与载体结合时需要用到限制性核酸内切酶和DNA连接酶，标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否导入了目的基因。目的基因的检测与鉴定有：DNA分子杂交(检测是否导入了目的基因)、DNA与mRNA杂交、抗原与抗体杂交等。答案：(1)GATGCGTTCG(2)PCR(聚合酶链式反应)　限制性核酸内切酶、DNA连接酶(3)基因表达载体的构建　为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来(4)DNA分子杂交；DNA与mRNA分子杂交；抗原―抗体杂交；从羊的乳汁中提取干扰素。(以上任意写出两点即可) 文章 来源莲山课件 ww w.5 Y k j.CoM
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