牛种布鲁氏菌2308基因缺失株经紫外线照射后对昆明系小鼠的免疫效果研究
布鲁氏菌是一种革兰氏阴性胞内寄生菌,对人和动物易感,近些年,我国布病的发病率正在呈上升趋势,对经济和健康带来了严重的危害,但是现有疫苗仍然存在一定缺陷,为了能够研制出一种新型疫苗,本试验采用传统的物理方法对牛种布鲁氏菌2308缺失株进行诱变,缺失株为本试验室所构建,将2308△ery、2308△wbkA、2308△omp25缺失株在37℃摇床中培养至OD值为0.6左右,用PBS稀释至10-3后,用移液器吸取50μL在布鲁氏菌固体培养基上涂匀,然后在紫外灯下30cm处分别照射0min、4min、6min、8min、10min后放入37℃恒温培养箱3~5d,挑取单菌落,至此为第一代,共诱变20代,然后送至中国疾控中心进行生化鉴定。为了检测牛种布鲁氏菌2308紫外诱变株毒力和免疫效果,本试验以S19疫苗株为对照,用牛种布鲁氏菌基因缺失株紫外线照射组(2308△rwbkA、2308△romp25、和2308△rery)和非照射组(230&
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1961年Dandliker等提出了一种荧光极化法(Fl~~e Polarization~y),此法是均质法的一种。1988年Rhys Willams重新对其研究,将其用于均质免疫法,效果很好。19%年K.vielsen等人用该法进行牛种布鲁氏菌抗体检测方法的研究,试验证明,用其法检测牛种布鲁氏菌为最理想的检测方法。其原理是:某种荧光染料可以被某种波长的平面极化光所激化。假如分子是静止的,当受到极化光极化时,则会在同一平面上产生光。然而分子是在不断运动的,在任何平面上围绕一个轴旋转。大分子比小分子旋转的慢,因而产生的光更多地限制在某一平面上,即更多的被极化。而小分子旋转的较快,则产生更多的去极化光。应用这个原理建立了检测牛种布鲁氏菌抗体...&
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牛种布鲁氏菌的自然宿主是牛,从人体和羊体中分离出牛种布鲁氏菌曾有报道。但从狗体内分离出牛种布鲁氏菌的报道却是罕见的。 本文报告,于1987年3月从牧犬中分离出1株牛种布鲁氏菌3生物型菌株。该菌株分离自新疆阿勒泰地区,菌株编号87—11。当时该地正进行犬种布鲁氏菌的血清学调查,在一牧场的种畜队发现一只土种狗的血清对S型布鲁氏菌凝集滴度为1:200,对R型布鲁氏菌凝集滴度为1:100。当即将这只狗解剖做布鲁氏菌分离。几天后从含CO。环境培养脾的培基斜面上长出了布鲁氏菌。经鉴定为牛种布鲁氏菌第3生物型菌。菌株的特征见表1。 鉴定结果菌株87—11显示出牛种布鲁氏菌3生物型的特征。 历年从阿勒泰地区分离出的牛种布鲁氏菌有1生物型和3生物型,而以牛种布鲁氏菌3生物型占优...&
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布鲁氏菌病(Brucellosis,简称布病)是布鲁氏菌(Brucella)属的细菌侵入机体引起的传染变态反应性的人畜共患传染病。布病传染源主要是发病及带菌的家畜,其分泌物、排泄物、流产胎儿、乳汁中都带有大量病菌[1]。布鲁氏菌对怀孕的子宫适应性较强,易于生长繁殖,当侵入子宫后可引起胎盘化浓和坏死性病变,使胎儿发育不良,并发生严重的疾患而导致胎儿死亡。死胎对子宫是一种异物刺激,而使胎盘失去其正常生理机能,引起流产。新疆某牛场牛只自繁自养,仅从外购买少量。牛群未免疫过布病疫苗,每年4月、9月开展布病检测,一直未检测出阳性。2011年末,一怀孕牛流产,采集流产胎儿组织样品进行病原分离、培养,并进行鉴定,确诊为布鲁氏菌病。1材料与方法1.1材料1.1.1病料收集新疆某牛场的流产胎儿,剖检,无菌采集其心、肝、脾、肺、肾、子宫、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结、胃内容物;无菌采集流产母畜以及同群畜全血,分离血清。1.1.2试剂革兰氏染液、柯兹罗...&
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0引言【研究意义】布鲁氏菌病(布病)是由布鲁氏菌(Brucella)引起的以流产和发热为特征的人兽共患病,严重地威胁着人和多种动物的生命健康。人感染布鲁氏菌后,需要长时间的抗生素治疗,而且往往会留下严重的后遗症[1-2]。目前布病在世界范围内呈反弹趋势,包括拉丁美洲、中东地区、亚洲、非洲、地中海地区等,每年新增病例50余万人[3-4]。中国也是布病流行极为严重的国家之一,根据卫生部网站上公布的布病疫情,2012年中国布病发病人数为41 131人,创历年新高,布病防控形势十分严峻。在布病流行病学调查研究中,越来越多的布鲁氏菌分离株从动物或人体内被分离和鉴定[5-9],为布病的病原学研究提供了丰富的资源。【前人研究进展】不同布鲁氏菌分离株和参考株是布病病原学研究的基础,特别是参考株的应用,使国内外学者能在不同条件下统一或比较其研究结果。目前为止,国内外主要使用的布鲁氏菌参考株强毒株有牛种布鲁氏菌,羊种布鲁氏菌16M...&
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某县的沿海渔民村,为回民聚居、饲养肉用黄牛为自食的村落。1989年该县在进行布鲁氏菌病监测时检出血清学阳性牛11头,全部扑杀处理,并定为重点监测观察对象。由于该村不断补充牛源,从外地购入部分未经检疫的黄牛,结果在1989年11月至1990年3月间,全村57头妊娠牛,有31头流产。由该县兽医站对全月戴群进右布病血清学检验,确定5(头牛均为阳性,全部集中扑杀处理。采其病料进行菌株分离工作,现将检验结果报告如下。 一、材料来源 (一)病料采集:某县渔民村的布病阳性牛剖杀后,经无菌采集血液、肝、脾、淋巴结、母‘牛乳腺、子宫及胎儿等病料,冷藏保存由专人送至本站化验室,待检。 (二)试验动物:豚鼠体重30。、400克由沈阳医学院动物室提供。 (三)药品与制剂 1.多粘菌素B、放线菌酮和杆菌肤(进口)、Tb噬菌体等,由中国兽药监察所布病室提供。 2.试管凝集抗原,布病阴、阳性标准血清由哈尔滨兽药一厂提供(抗原批号9091)。 二、方法与步骤 ...&
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③手指交错掌心对掌心搓擦
④两手互握互搓指背
⑤拇指在掌中转动搓擦
⑥指尖在掌中搓擦 （1）洗手指征 ①接触病人前后； ②接触血液、体液和被污染的物品后； ③处理清洁或无菌物物品前； ④进行无菌操作前后； ⑤进入和离开隔离病房穿脱隔离衣前后； ⑥在同一病人身上，从污染操作转为清洁操作之间；
⑦戴手套之前，摘手套之后。
（2）手的消毒指征
①接触传染病人之后； ②接触感染的伤口和血液、体液之后； ③进入和离开隔离病房、ICU等部门带口罩和穿脱隔离衣前后； ④检查、护理、治疗免疫功能低下病人之前； ⑤接触传染病病原污染的物品之后； ⑥双手需保持较长时间抗菌活性时。 常用的手部皮肤消毒剂有 75%乙醇溶液或70%异丙醇溶液； 有效碘含量3000mg/l、5000mg/l的碘伏消毒液； 2%的碘酊； 酸性氧化电位水（原液）； 来素芬快速手消毒剂； 0.5%的氯己定醇液； 0.1-0.5%的新洁尔灭等
（四）、疫点的随时消毒技术要求
1、对病人应根据病情做到“三分开”与“六消毒”。 2、病人陪伴和护理人员，除做好病人的随时消毒外，应做好本人的卫生防护，护理病人后，应消毒双手。
（五）、疫点的终末消毒程序
1、在出发前，应检查所需消毒用具、消毒剂和防护用品，做好准备工作。 2、消毒人员到达疫点，首先查对门牌号和病人姓名，并向有关人员说明来意，做好防疫知识宣传，禁止无关人员进入消毒区域内。 3、对脱掉外衣应放在自带的布袋中（不要放在污染或可能受到污染的地方）。穿隔离服、胶鞋，戴上口罩、帽子。用过氧乙酸或含氯制剂时，须戴防护眼镜。
4、仔细了解病员患病前和患病期间居住的房间、活动场所，用过的物品、家具，吐泻物、污染物倾倒或存放地点，以及污水排放处等，据此确定消毒范围和消毒对象。根据消毒对象及其污染情况，选择适宜的消毒方法。 5、进入疫点时，应先消毒有关通道。 6、测量房屋、家具及地面需消毒的面积和体积，估算需消毒的污水量。 7、必要时，由检验人员对不同消毒对象进行消毒前采样。 8、消毒前应关闭门窗，将水缸盖好，将未被污染的贵重衣物、饮食类物品、名贵字画及陈列物品收藏好。 9、如系呼吸道传染病，应对室内空气进行消毒。 10、如系肠道传染病，应先于室内灭蝇，再进行消毒。 11、对室内地面、墙壁、家具和陈设物品消毒时，应按照先上后下，先左后右的方法，依次进行消毒。
12、病人用过的餐（饮）具、污染的衣物若不能集中在消毒站消毒时，可在疫点进行煮沸、浸泡或擦拭消毒。 作浸泡消毒时，必须使消毒液浸透被消毒物品。作擦拭消毒时，必须反复擦拭2次～3次。对污染重、经济价值不大的物品和废弃物，在征得病家同意后焚烧。 13、室内消毒后，必要时对厕所、垃圾、下水道口、自来水龙头、缸水和井水等进行消毒。 14、对传染源密切接触者进行人员卫生处理。 15、疫点消毒工作完毕，对消毒人员穿着的工作服、胶靴等进行喷洒消毒后脱下。将衣物污染面向内卷在一起，放在布袋中带回消毒。所用消毒工具表面用消毒剂进行擦洗消毒。 16、必要时，到达规定的消毒作用时间后，由检验人员对不同消毒对象进行消毒后采样。 17、填写疫点终末消毒工作记录。 18、离开病家前，让病家开窗通风，擦拭打扫。
四、各污染对象推荐的消毒方法
（一）、物体表面消毒
对细菌繁殖体和病毒的污染，用0.2%～0.5%过氧乙酸溶液或500mg/L～1000mg/L二溴海因溶液或1000mg/L～2000mg/L有效氯含氯消毒剂溶液喷雾。泥土墙吸液量为150ml/m2～300ml/m2，水泥墙、木板墙、石灰墙为100ml/m2。对上述各种墙壁的喷洒消毒剂溶液不宜超过其吸液量。地面消毒先由外向内喷雾一次，喷药量为200ml/m2～300ml/m2，待室内消毒完毕后，再由内向外重复喷雾一次。以上消毒处理，作用时间应不少于60min。有芽胞污染时应用0.5%～1.0%过氧乙酸溶液或30000mg/L有效氯含氯消毒剂进行喷洒。喷洒量与繁殖体污染时相同，作用时间不少于120min。
（二）、空气消毒
房屋经密闭后，对细菌繁殖体和病毒的污染，每立方米用15%过氧乙酸溶液7ml（1 g/m3），对细菌芽胞的污染用20ml（3g/m3），放置瓷或玻璃器皿中加热蒸发，薰蒸2h，即可开门窗通风。或以2%过氧乙酸溶液（8ml/m3）气溶胶喷雾消毒，作用30min～60min。
（三）、衣服、被褥、织物的消毒
被细菌繁殖体或病毒污染时，耐热、耐湿的纺织品可煮沸消毒30min，或用流通蒸汽消毒30min，或用250mg/L～500mg/L有效氯的含氯消毒剂浸泡30min；
不耐热的毛衣、毛毯、被褥、化纤尼龙制品等，可采取过氧乙酸薰蒸消毒。薰蒸消毒时，将欲消毒衣物悬挂室内（勿堆集一处），密
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