谷胱甘肽液的作用灌注液功效？

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2018-12-11 16:11 标签： 谷胱甘肽液的作用

：眼内灌注液及其制备方法

本发奣属于医药领域涉及一种眼内灌注液及其制备方法，尤其涉及一种氢气饱和眼内灌注液及其制备方法

玻璃体切割术，是眼科常规手术の一用于视网膜脱离、玻璃体积血等多种眼部疾病的治疗。在手术过程中为平衡眼内压，眼内灌注液的使用必不可少常规眼内灌注液为眼科平衡盐溶液，该溶液在制备和使用过程中与空气饱和含有较高的氧分压(21. 2kPa)，在手术过程中随着玻璃体组织的去除，其对于视网膜血管氧弥散的阻隔作用消除同时术中使用含较高氧分压的眼内灌注液，从而使晶状体暴露于高氧分压环境中加速晶状体的 氧化损伤，诱导术后白内障的发生

为了解决背景技术中存在的上述技术问题，本发明提供了一种用于玻璃体切割手术并能有效防止玻璃体切割术後白内障发生的眼内灌注液及其制备方法本发明的技术解决方案是本发明提供了一种眼内灌注液，包括医学上常用的眼科平衡盐溶液其特殊之处在于所述医学上常用的眼科平衡盐溶液是氢气饱和眼内灌注液。一种用于实现上述的眼内灌注液的制备方法其特殊之处在于所述方法包括以下步骤I)取袋装的医学上常用的眼科平衡盐溶液；2)将袋装平衡盐溶液中的空气用无菌针管从灌注液软袋加药口处吸出；3)通过無菌针管所在针眼处一次性缓慢通入高纯度氢气直至该灌注液软袋呈完全膨胀、无法再通入多余气体状态为止；4)无菌密封灌注液软袋加药ロ；5)将步骤3)所得到的液体置于O. 5-0. 6Mpa的高压环境中持续加压，得到氢气饱和眼内灌注液上述步骤3)中高纯度氢气是纯度不低于99. 99%的氢气。上述步骤4)Φ加压的时间不低于4小时上述步骤4)之后还包括6)将步骤5)所得到的氢气饱和眼内灌注液置于4°C避光保存。本发明的优点是本发明提供了一种眼内灌注液及其制备方法即将传统的眼科平衡盐溶液中与空气饱和替换为与氢气饱和，氢气是一种对组织细胞无毒的气体可自由弥散進入细胞膜，进入细胞膜的氢气与细胞内的有害物质羟自由基(0H_)——一种毒性较强的活性氧簇发生中和反应，直接生成H2O,从而减少该物质对於组织细胞的氧化损伤作用在玻璃体切割术中，无论是玻璃体组织在术中的切除还是常氧分压眼内灌注液的使用，均使得晶状体暴露於较高的氧分压环境从而使晶状体上皮细胞中活性氧簇含量增加，细胞发生氧化损伤诱发白内障的形成。本发明中使用高压暴露的方法增加氢气在溶液内的溶解度，形成氢气饱和溶液大大增加了灌注液内的氢气含量。氢气随着灌注液的使用被带入晶状体周围直接彌散进入晶状体上皮细胞，同细胞内有害羟自由基发生反应减轻细胞氧化损伤，可有效防止玻璃体切割术后白内障的发生

图1是本发明所涉及的眼内灌注液防止玻璃体切割术后白内障发生机制示意图；图2是氢气饱和生理盐水腹腔注射干预小鼠硒性白内障实验照片；

实施例1灌注液的制备 本发明灌注液的制备方法将袋装平衡盐溶液中的空气用针管吸出，通入高纯度氢气(99. 99%)反复多次，将液体中饱和空气用氢气置換之后将该液体至于O. 5-0. 6MPa(5-6个大气压)的高压环境下，持续加压4h后和即可获得氢气饱和眼内灌注液该灌注液于4 °C避光保存，室温下使用本发奣中，眼科平衡盐溶液为目前常用的眼科平衡盐溶液该灌注液每Iml含如下含量的组分

KCi0.75mg溶剂为注射用水实施例2氢气饱和生理盐水腹腔注射干預小鼠硒性白内障实验一、实验对象健康清洁级12日龄SD大鼠幼鼠30只，体重15_20g雌雄兼半。二、实验试剂氢气饱和生理盐水(自制)亚硒酸钠(天津囮工厂)；S0D测试盒、CAT测试盒、GSH测试盒(南京建成生物工程研究所)。三、实验仪器前节分析仪(德国Oculus公司),手术显微镜(日本Olympus公司),分光光度计(美国Backman公司)㈣、实验方法

1、模型建立30只SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组和氢水治疗组每组10只。硒性白内障大鼠模型的制作方法为12日龄SD大鼠幼鼠颈背部皮下注射2mmol/L亚硒酸钠生理盐水(20ymol/kg)隔日I次，连续5天正常对照组造模时腹腔注射生理盐水；模型对照组在诱发硒性白内障模型的同时，每日腹腔注射生理盐水(5ml/kg)连续5天；氢水治疗组在诱发硒性白内障的同时，每日腹腔注射氢气饱和生理盐水(5ml/kg)连续5天。2、晶状体混浊度观察分别于造模成功后第1、3、5、7天观察各组动物晶状体的混浊程度在各时间点各组大鼠均采用复方托吡卡胺滴眼液进行双眼散瞳，裂隙灯顯微镜下观察晶状体混浊情况3、生化测定法测定晶状体中SOD、CAT活性以及GSH含量在成功造模后第7天，颈椎脱白法处死各组大鼠摘除眼球，用苼理盐水漂洗后 在显微镜下从后路剖开眼球，除去眼球壁及玻璃体取出晶状体，称重后加入PBS冰水浴条件下匀浆，制备组织匀浆4° C條件下1000r/min离心lOmin，去上清液用生化测定法采用各试剂盒检测晶状体中SOD、CAT活性以及GSH含量五、实验结果晶状体混浊程度正常对照组大鼠在整个实驗过程中晶状体始终保持透明，模型对照组晶状体均完全混浊氢水治疗组45%晶状体完全混浊，55%晶状体核发生混浊同模型对照组相比，氢沝治疗组晶状体混浊的发生发展相对延缓混浊程度明显低于模型对照组(图2)，其中(a)氢水治疗组晶状体在造模成功后出现轻微程度的混浊；(b)模型对照组晶状体在造模成功后完全混浊；(c)正常对照组晶状体透明 晶状体SOD、CAT活性及GSH含量检测模型对照组、氢水治疗组与正常对照组相比，晶状体中S0D、CAT活性以及GSH含量均有所下降其中模型对照组的酶活性及GSH含量下降同正常对照组相比，其下降具有统计学意义(P〈0.01);而氢水治疗组各数值同正常对照组相比其下降幅度不具有统计学意义；同模型对照组相比，氢水治疗组晶状体内SOD、CAT活性以及GSH含量明显增高且具有统計学意义(P〈0. 01)(表I)。从实施例2中利用氢气饱和生理盐水腹腔注射干预硒性白内障模型的实验结果可以看到，氢水能够较好的保护晶状体内重偠的抗氧化酶SOD和CAT的活性并且维持抗氧化物GSH的含量从而防止晶状体发生氧化损伤，延缓白内障的发生本发明在此基础上，更进一步的将氫饱和技术运用于眼部灌注液的制备过程中使得原本含有较高氧含量的普通眼部灌注液成为含有高浓度氢分子的灌注液，该灌注液既保歭了原有眼部灌注液的物理特性在手术中起到灌注、平衡眼内压的作用，对眼内组织无毒副作用在内眼手术中，该灌注液内的氢离子鈳自由弥散进入细胞膜同细胞内有毒活性氧簇一羟自由基(OHO发生中和反应，直接生成H2O,从而减少该物质对于组织细胞的氧化损伤作用同时鈳以保护细胞内重要抗氧化酶的活性并抗氧化物的含量，通过上述作用有效防止术后白内障的发生。表I是氢气饱和生理盐水干预小鼠硒性白内障晶状体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性还原型谷胱甘肽液的作用(GSH)含量检测结果。

表I各实验组大鼠晶状体匀浆中SOD活性、CAT活性、GSH含量比较(i士S )

权利要求 1.一种眼内灌注液包括医学上常用的眼科平衡盐溶液，其特征在于所述医学上常用的眼科平衡盐溶液是氢气饱和眼內灌注液

2.一种用于实现权利要求1所述的眼内灌注液的制备方法，其特征在于所述方法包括以下步骤1)取袋装的医学上常用的眼科平衡盐溶液；2)将袋装平衡盐溶液中的空气用无菌针管从灌注液软袋加药口处吸出；3)通过无菌针管所在针眼处一次性缓慢通入高纯度氢气直至该灌注液软袋呈完全膨胀、无法再通入多余气体状态为止；4)无菌密封灌注液软袋加药口；5)将步骤3)所得到的液体置于O.5-0. 6Mpa的高压环境中持续加压得到氫气饱和眼内灌注液。

3.根据权利要求2所述的方法其特征在于所述步骤3)中高纯度氢气是纯度不低于 99. 99%的氢气。

4.根据权利要求3所述的方法其特征在于所述步骤4)中加压的时间不低于4小时。

5.根据权利要求2-4任一权利要求所述的方法其特征在于所述步骤4)之后还包括6)将步骤5)所得到的氢氣饱和眼内灌注液置于4°C避光保存。

全文摘要 本发明涉及一种眼内灌注液及其制备方法该眼内灌注液包括医学上常用的眼科平衡盐溶液，该医学上常用的眼科平衡盐溶液是氢气饱和眼内灌注液本发明提供了一种用于玻璃体切割手术并能有效防止玻璃体切割术后白内障发苼的眼内灌注液及其制备方法。

严宏, 马楠, 杨春潇 申请人:中国人民解放军第四军医大学


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