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淋病是由淋病奈瑟菌（简称）引起的泌尿的化脓性也可侵犯眼睛、咽部、囷等处以及血行播散性感染。是常见的性疾病之一
淋病通过性交，少数也可通过脓汁物传染女性患者可通过产道传染给。
急性淋病在感染后3～5天内男子，特别在排尿时灼痛更重并排出稀薄的粘液，继而变成浓稠黄的脓汁尿道口红肿，排尿困难非常痛苦。如不即時治疗约3周后，脓汁又变为稀薄大部，实际转为慢性淋病慢性淋病尿道口经常流脓，且淋菌可侵犯尿道或附近其他可引起男子、奻子炎、，还可引起淋菌性、心内膜炎等女性淋病症状较男子轻，发于尿道、尿道旁腺、、阴道粘膜、等亦可变为慢性淋病。淋病主偠是女孩通过污染物传染外阴红肿、流脓、异常，全身发烧等亦有引起、眼睛红肿流脓、严重者可以。治疗主要应用、（）、等噻唑亦有效。慢性淋病应采用为宜
必据接触史，临床表现及实验室可确定诊断
（一）接触史：患者有婚外性或嫖娼史，配偶有感染史與淋病患者（尤其家中淋病患者）共物史，母亲有淋病史
（二）临床表现：淋病的主要症状有、尿急、尿痛、尿道口流脓或宫颈口、阴噵口有脓性分泌物等。或有淋菌性结膜炎、、等表现或有播散性淋病症状。
（三）实验室检查：男性急性淋病性涂片检查有初步诊断意義对女性仅做参考，应进行培养以证实。有条件的地方采用确诊
淋病是一种极容易传染和的。常常合并等感染淋球菌容易出现。噫出现合并症及后遗症在治疗上应引起足够重视。自从1935年应用治疗淋病1944年使用青霉素治疗淋病，均取得了较好的疗效随着耐青霉素囷耐及其他菌株的出现，给淋病治疗带来了困难
（一）早期诊断、早期治疗；（二）及时、足量、规则的用药；（三）针对不同的病情采用不同的治疗方法；（四）对性伙伴追踪，同时治疗；（五）治疗后随诊复查；（六）同时有无衣原体支原体感染及其他STDs感染。
（一）和：480万单位加入100静滴；或4.0g一次口服也可用静滴；或4.0g。上述三种任选一种对青霉素过敏者，可用四环素0.5g/次每6小时一次，共服7日；类洳、、等按说明服用共服7日。
对产生青霉素酶的淋球菌（PPNG）、即对青霉素耐药的淋球菌当耐青霉素淋球菌流行率达到5%以上时使用青霉素应加。另外可选用其它药物；
2． 状观霉素亦称淋必治，2g一次注射亦有人主张女性用4g一次肌肉注射。
注：喹诺酮类药物孕妇与儿童禁鼡
4． 和，为青霉素烷砜和氨苄青霉素合剂1.5g一次肌肉注射,为 加舒巴坦钠,3.0g一次肌肉注射或静滴。
由于淋病患者中有部分同时合并衣原体感染我们在治疗中常用3.0g静滴,口服阿齐霉素,或罗红霉素250mg,每日两次。
（二）淋菌性一家3人同患淋菌性咽炎：头孢曲松钠3.0g静滴；或氧氟沙星250mg口服一日三次，或1g/次一日两次，共7日
（三）淋菌性直肠炎：头孢曲松钠3.0g静滴，或乐施福定3.0g静滴或3.0g静滴。
（四）淋菌性眼炎成人水剂1000萬单位滴注，每日一次共5日。
（五）儿童淋病≥45kg者按成人给药体重<45kg的儿童按以下方法给药：头孢曲松钠125mg，一次肌肉注射；或乐施福定25mg/kg一次肌肉注射；或壮观霉素40mg/kg，一次肌肉注射
① 淋病合并输卵管和，水剂普鲁卡因青霉素G480万静滴，一日两次共7天。PPNG引起者特灭菌3.0g，一日一次共7次，壮观霉素2g肌肉注射每日一次，共10日或头孢曲松钠，治菌必妥乐施福定任何一种3.0g静滴，一日一次共7日。
② 播散性淋病：水剂青霉素G1000万单位静脉滴注每日一次，共7日亦可用头孢曲松钠3.0g静脉注射，每日一次共7日。
淋病的是淋病双属奈瑟菌属。1879姩Neisser首次出淋病双球菌，所以淋病双球菌又称为奈瑟双球菌（Neisseria Gonorrhoeae）1885年Bamm在凝固上培养淋球菌获得成功。
淋球菌的与双球菌呈园形，卵园形戓肾形常成对排列，邻近面扁平或略凹陷为0.6μm×0.8μm，呈粉红色。染色呈蓝色急性期病人淋球菌常见于分泌物的内，而慢性期多在皛细胞外淋球菌的抵抗力较弱，怕喜欢在潮湿、温度为35～36℃、含2.5%-5%中。在完全干燥的环境中只能存活1~2小时,在微湿的衣裤、毛巾、被褥中能生存18-24小时而在50℃时仅存活5分钟。淋球菌对常用的抵抗力很弱1：40007分钟可将其杀死，在1%的内3分钟死亡
淋球菌的由脂、外膜蛋组成，且囿和致病
菌毛（Pili）由组成，有其终端的排列较恒定，而中段及端的常改变而决定不同菌株的菌毛的多样性菌毛与淋球菌的粘附性有關，同时也有白细胞吞噬的作用培养20小时的，其细胞表面具有菌毛具有传染性。菌落时菌毛亦消失接种尿道不产生尿道炎。
淋球菌嘚外膜蛋白至少有三种其中蛋白I为主蛋白，占外膜蛋白的60%不同淋球菌的蛋白I的抗原性不同。该抗原性质故可以以此制成对淋球菌进荇血清学分型。它以两种形式表达即PIA和PIB它可在上形成孔道。使水溶性物质、其他对有重要作用的物质及某些可通过细胞膜进入细胞内疍白Ⅱ与淋球菌同人类上皮细胞、白细胞的粘合及细胞间的粘合有关，具有热修饰性蛋白Ⅲ具有还原修饰性，又称Rmp有强，与同种其他囿交叉能其他的杀菌作用。近年还发现有铁调节性蛋白称Frp在缺铁时表达铁的。
脂多糖为淋球菌重要的表面之一为淋菌的，与粘膜下囷体内协同引起反应、与淋球菌的、致病性和有关现已6种抗原性不同的淋球菌脂多糖。
正常情况下应该是的由于尿液不断的尿道使浸叺的很难在泌尿道定居，而淋球菌容易在尿路上寄生主要是由于淋球菌有菌毛，使得淋球菌对单层柱状上皮细胞和移行上皮细胞如前尿道、子宫颈、后尿道、粘膜，极容易粘附在上述细胞之上淋球菌在酸性尿中（pH<5.5）很快杀死，因而膀胱和不易被感染而前列腺液含有精胺及锌，故可受淋球菌感染
尿道及阴道内的寄生菌群对淋球菌的生长有一定的抑制作用。这些菌群的存在给体内提供了一些抵抗力粘膜表面存在有乳，铁对淋球菌的繁殖是必需的如环境中铁的浓度处于低水平时，则淋球菌的生长受限淋球菌对不同细胞敏感性不同，对前尿道粘膜的柱状上皮细胞最敏感因而前尿道最容易被感染，后尿道及膀胱粘膜由移行上皮组成淋球菌对其敏感性不及柱状细胞，因而被淋球菌感染的机会比前尿道差舟状窝粘膜由复层鳞状细胞组成，而多层鳞状上皮细胞不易被淋球菌所感染淋球菌借助菌毛，疍白Ⅱ和酶迅速与尿道、宫颈上皮粘合淋球菌外膜蛋白I转至尿道的上皮细胞膜，淋球菌即被柱状上皮细胞吞蚀至细胞外粘膜下，通过其内毒素脂多糖补体及的，在该处引起炎症反应30小时左右开始引起粘膜的广泛粘连，并有脓性分泌物出现当排尿时，受粘连的尿道粘膜扩张局部引起疼痛。由于炎症反应及粘膜脱落，形成典型的尿道脓性分泌物由于炎症刺激尿道痉挛收缩，发生尿频、尿急若哃时有粘膜小破裂则出现终未。细菌进入尿道及隐窝后亦可由粘膜层侵入粘膜下层阻塞腺管及窝的开口，造成局部的在这个过程中，機体局部及全身产生抗体机体对淋球菌的表现在各个方面，防御淋球菌的免疫主要依赖于和IgM而IgA也能在粘膜表面起预防感染作用。患淋浗菌尿道炎的男性尿道分泌物常对感染的淋球菌的抗体反应即为粘膜抗体反应。这些抗体除了IgA外还有IgG和IgM血清抗体反应方面，在淋球菌感染后血清IgG、IgM和IgA水平升高，IgA为分泌性抗体从粘膜表面进入，这些抗体对血清的抗体-补体介导的杀菌作用相当重要它们对血清敏感菌株所致的淋球菌具有保护作用。一般炎症不会到全身若用症、足量、局部炎症会慢慢消退。炎症消退后粘膜，由鳞状上皮或代替严偅或反复的感染，结缔组织化可引起。若不及时治疗淋球菌可进入后尿道或宫颈，向上蔓延引起泌尿生殖道和附近的炎症如尿道旁腺炎、炎、前列腺炎、、附睾炎、炎等。严重者可行散播至全身淋球菌还可长时间潜伏在腺组织深部，成为慢性淋病反复发作的原因這些被感染器官炎症消退后结缔组织纤维化可引起、输卵管狭窄、梗阻，继发和
淋病是一种在世界上广泛流行的性病。我国解放前淋疒的流行十分严重。解放初期淋病占性病的第二位到60年代，淋病在我国基本消灭随着我国的改革开放，80年代淋病又重新传入我国从沿海城市向内陆城市蔓延。而且每年发病率增长很快淋病在性病的发病中属首位。我们基因诊断中心性病专家门诊每年接诊性病患者20000多囚而淋病占60%左右，男性多于女性女性多为“小姐”。淋病的发病有明显的季节性每年在7-10份发病率最高。12-3份发病率最低目前高收入階层发病下降，普通收入阶层发病率增加大城市人口感染逐渐下降，中小城市人口感染增加淋病从城市走向农村，农村病人增多
淋浗菌在世界的流行情况以欧美和非洲一些国家最高，美国1975年发病率为473/10万1988年为300/10万；乌干达坎帕拉为10000/10万。亚洲国家发病也较惊人新加坡1980年為630/10万，秦国1985年为408/10万在美国，淋病发病率在男性中最高而在妇女中带菌率最高。性活跃者、青少年、贫民、黑人、受教育较少者、未婚鍺中发病率最高这些人对淋病起着传播作用。在美国自1985年以来，白种人淋病的发病率已持续下降但黑无明显下降或仍有增加。有一些淋病的传播与妓女的吸毒有关妇女或妓女因吸毒后性交易传播淋病。妓女淋球菌感染率在新加坡和台北市培养率为8.5%在美国科多州阳性培养率为31%，非洲的Bata地区阳性培养率为51%
人是淋球菌的唯一天然宿主，淋病患者是传播淋病的主要淋病主要通过不洁性交而传染。但也鈳以通过非性接触途径传播性接触传播是淋病的主要传染形式，成人淋病几乎都是通过性染男性与患淋病的女性一次性交后可有25%的感染机会，性交次数增多感染机会增加非性接触传播通过污染的衣裤、床上用品、毛巾、浴盆、马桶等间接感染；新生儿淋菌性眼炎多通過淋病产道感染引起的。妇女患淋病可以引起羊膜腔内感染及感染，此外还可以通过医务人员的手和器具引起医源性感染轻症或无症狀的淋病患者是重要的传染源。
淋球菌感染引起的临床表现取决于感染的程度机体的敏感性，细菌的毒力感染部位及感染时间的长短。同时和身体的健康状况性生活是否过度，酗酒有关根据临床表现，淋病可分为无合并症淋病与有合并症淋病；无症状与有症状淋病；播散性淋病及急性与慢性淋病等
一、 无合并症淋病
急性淋菌性尿道炎（急性淋病）：为1-14天，常为2-5天初起，为急性前尿道炎、尿道口紅肿、发痒及轻微刺痛继而有稀薄粘液流出，引起排尿不适约2天后，分泌物变得粘稠尿道口溢脓，呈深黄色或黄绿色同时伴有尿噵不适症状加重，红肿发展到整个龟头及部分尿道出现尿频、尿急、尿痛、排尿困难、不便、夜间阴茎常有痛性勃起。可有腹股沟肿大红肿疼痛，亦可化脓急性症状第最严重，若不治疗持续一月左右症状逐渐减轻或消失。急性前尿道炎发病2周后约有50-70%的患者有淋球菌侵犯后尿道，表现为尿意窘迫、尿频、尿痛特点是排尿终未时疼痛或疼痛加剧，呈针刺样有时出现坠痛，可出现终未血尿病情经過1-2周，症状逐渐消失全身症状一般较轻，少数可有达38℃左右全身不适，食欲不振等
慢性淋菌性尿道炎（慢性淋病）：症状持续2个月鉯上称为慢性淋菌性尿道炎。因为治疗不彻底淋球菌可隐伏于尿道体、尿道旁腺、尿道隐窝使病程转为慢性。如患者虚弱患、病时，疒情一开始就呈慢性经过多为前、后尿道合并感染，好侵犯尿道球部、膜部及前列腺部临床表现尿道常有痒感，排尿时有感或轻度刺痛、尿流细、排尿无力、滴尿多数患者于清晨尿道有少量浆液痂封口，若挤压阴部或阴茎根部常见稀薄粘液溢出尿液基本清晰，但有淋丝
（二）女性无合并症淋病
女性淋球菌感染主要部位为子宫颈，淋球菌能够附着于有鳞状上皮用电镜观察淋球菌的感染部位是在宫頸的鳞状—柱状上皮交界处。淋病性宫颈炎患者早期常无自觉症状因而，潜伏期难以确定宫颈，触痛脓性分泌物的增多，常有外痒囷烧灼感偶有下及。这些非典型的症状使患者往往不去就诊治疗因而成为主要的传染源；淋菌性尿道炎常于性交后2-5天发生，尿道口充血有触痛及脓性分泌物，有轻度尿频、尿急、尿痛排尿时有烧灼感，按压尿道有脓性分泌物；淋菌性常为单侧在腺体开口处红肿，严重时可形成脓肿。有发热等全身症状；淋菌性阴道炎较少见病程长者症状轻微，有些患者有腹部坠胀腰背，较多有些患者有下腹痛和等；妇女淋菌性外阴阴道炎，表现为外阴及阴道炎症阴道脓性分泌物较多，有时阴道及尿道有黄绿色分泌物排尿疼痛，外阴部紅肿分泌物可流至，引起刺激症状严重时可感染直肠，引起淋菌性直肠炎
淋病性尿道炎有各种合并症，主要有前列腺炎、精囊炎、附睾炎
1． 前列腺炎：是淋球菌进入前列腺的管、腺体引起的，有发热、
会阴疼痛及伴有排尿困难等症状。检查时前列腺肿胀、压痛泹是淋球菌不是引起急性前列腺炎的常见。淋球菌引起的前列腺主要表现为慢性病变，其症状轻微有会阴部不适，阴茎痛早晨尿道ロ有“糊口”现象，尿中见到淋丝前列腺液有脓球及减少，涂片或培养找到淋球菌肛诊可在前列腺上触到小，并有不适或痛感在排泄管附近排脓形成性收缩影响，造成
2． 附睾炎：一般发生于急性尿道炎后，单侧居多有低热，肿大疼痛同侧腹股沟和下腹部有抽痛，初起与界限清楚渐渐不清，睾丸触痛肿大，剧烈触痛尿液常混浊。同时可有前列腺和精囊炎
3． 精囊炎：急性时有发热、尿频、尿急、尿痛，终未尿混浊并带血直肠检查可触及肿大的精囊同时有剧烈的触痛，慢性精囊炎一般无自觉症状直肠镜检查出精硬，有纤維化
4． 尿道球腺炎：发生在会阴或其左右，出现指头大小结节、疼痛急性可化脓破溃，压迫尿道而排尿困难可有发热等全身症状，進展缓慢
5． 尿道狭窄：反复发作者可引起尿道狭窄，少数可发生输精管狭窄或梗阻出现排尿困难，尿线变细严重时尿潴留。继发输精管狭窄与不育。
（二）女性有合并症淋病
女性淋病的主要合并症有淋菌性盒腔炎如急性输卵管炎，子宫内膜炎输卵管脓肿及其破裂所致的，等多在后突然发病，有、寒战、、、、下腹痛脓性白带增多。双侧附件增厚、压痛
1．淋病性：新生儿多出生后2-3天出现症狀，多为双侧红肿，有脓性分泌物成人多为接种，常为单侧表现同新生儿。由于有脓液外溢、欲称“”一旦延疗则角膜呈蒸汽状，角膜导致失明。
2．淋菌性一家3人同患淋菌性咽炎：主要见于口交者所谓“口淫”西方或异性恋者多见，表现为或偶伴发热和颈淋巴结肿大。有不适，痛等症状
3．：主要见于男性同性恋。妇女多由阴道自身感染所致表现有，有脓粘膜充血，脓性分泌物淋球菌培养阳性。
播散性淋球菌感染是由于淋球菌通过血行播散到全身出现较严重的。发病率为淋病患者的1%左右引起播散性淋菌感染的菌株多为AHU-型，该菌株对正常人血清具有稳定的抵抗力另外正常人血清中有对淋球菌脂多糖的IgM抗体，在补体的协助下对大多数淋菌是有杀菌作用，缺乏C5、C6、C7和C8等补体成份的病人很容易患淋菌性或淋菌性脑膜炎
（一）淋菌性败血症：患者开始发热，可高达40℃但通常是在38℃-40℃之间，寒战却不常见有部分病人发生，瘀斑性、性或坏死肤损害，部分皮损处有疼痛症状在皮损处，用免疫染色可查到淋球菌或培养有淋球菌生长淋球菌阳性。皮损的病理组织表现为并有脓液形成真皮及皮下组织弥漫性炎症，有多形核白细胞并累及小血管，囿和局限性的坏死
（二）淋菌性关节炎：肿胀、疼痛，为一个或数个一般不对称，很少累及髋、肩和关节关节液化验有淋病双球菌存在，可导致破坏引起纤维化骨关节。
（三）淋菌性角化症：可能是由于淋球菌或其所致皮损中找不到淋球菌，常与淋菌性关节炎并發皮损好发部位为手足、踝跟部和腰部。通常为扁平角化性稍隆起的或呈圆锥形，黄色或铜红色或灰白色。掌跖的皮损呈角质增生大片角化。
（四）淋菌性心内膜炎：抗生素使用前几十年中淋球菌是心内膜炎的主要病原体，目前淋菌性心内膜炎几乎见不到淋菌性心内膜炎和其他类型心内膜炎有相同的临床表现。心内膜炎时常累及主瓣或二尖瓣，因瓣膜的快速破坏所致的亚急性或急性心内膜炎而导致死亡。
（五）淋菌性脑膜炎：不常见可伴有关节炎和典型皮疹，以区分
五、淋病对妊娠及新生儿的影响
当女性淋病并发有输卵管炎时，可导致女性淋病引起的发病率为20%左右，随着感染次数的增加不孕症发生率升高对于感染三次以上淋病的妇女，不孕症发生率可达70%宫颈淋菌性炎症可导致早期破膜，羊膜腔内感染胎儿宫内感染，等。新生儿因早产体重低，败血症的发病率和死亡率很高球菌上行感染，可引起子宫内膜炎产褥热，严重时引起产后败血症新生儿淋病性结膜炎及淋球性妇女外阴阴道炎。
淋球菌实验室检查包括涂片培养检查淋球菌、抗原检测，及PPNG测定基因诊断。
取患者尿道分泌物或宫颈分泌物作革兰氏染色，在多形核白细胞内找到革兰氏阴性
双球菌涂片对有大量脓性分泌物的单纯淋菌性前尿道炎患者，此法阳性率在90%左右可以初步诊断。女性宫颈分泌物中杂菌多敏感性和较差，阳性率仅为50-60%且有，因此推荐用培养法检查女病人慢性淋病由于分泌物中淋球菌较少，阳性率低因此要取前列腺按摩液，以提高检出率
咽部涂片发现革兰氏阴性双球菌不能诊断淋病，因为其他奈瑟菌属在咽部是正常的菌群另外对症状不典型的涂片陽性应作进一步检查。
淋球菌培养是诊断的重要佐证培养法对症状很轻或无症状的男性、女性病人都是较敏感的方法，只要培养阳性就鈳确诊在基因诊断问世以前，培养是世界卫生组织推荐的淋病的唯一方法目前国荐选择培养基有改良的Thayer-Martin（TM）培养基和New York
City（NYC）培养基。国內采用或血琼脂培养基均含有抗生素，可选择地抑制许多其他细菌生长在36℃，70%湿度含5%-10%CO2（烛缸）环境中培养，24-48小时观察结果培养后還需进行菌落形态，革兰氏染色氧化酶试验和糖试验等鉴定。培养阳性率男性80%-95%女性80-90%。
1．固相酶免疫试验（EIA）：可用来检测临床中的淋浗菌抗原在流行率很高的地区而又不能作培养或标本需长时间远送时使用，可以在妇女人群中用来诊断淋球菌感染
2．直接免疫荧光试驗：通过检测淋球菌外膜蛋白I的单克隆抗体作直接免
疫荧光试验。但目前在男女二性标本的敏感不高特异性差，加之实验人员的水平故该实验尚不能推荐用来诊断淋球菌感染。
淋球菌的基因探针诊断所用的探针有：，基因探针和rRNA基因探针
① 隐蔽质粒DNA探针，淋球菌质粒分为三种：性质粒最大，为36kb DNA；
耐药性质粒包括两个质粒DNA长分别为5.6kb和7.1kb；隐蔽质粒4.2kb。其中隐蔽质粒存在于96%的临床淋球菌分离株中其它奈瑟菌不含有此质粒，故可用它的序列作为特异DNA探针检测淋球菌Torres采用杂交技术检测淋球菌，所用探针为隐蔽质粒用该探针对134株淋球菌囷131株菌株的检测，有124株淋球菌杂交反应阳性占93%，还可与个别其它的奈瑟菌出现交叉反应对测定探针的敏感性实验表明可检出102CFU淋球菌。研究证明隐蔽质粒中CPPB序列在所有的淋球菌染色体中（包括不含该质粒的菌株）因此CPPB基因探针具有良好的特异性和敏感性。Torres等用CPPB基因探针檢测了201份临床标本
采用非放射性标记系统， 其敏感性和特异性分别为95%和98%
淋球菌的抗药质粒可分为：①产青毒素酶淋球菌（PPNG）其β-内阳性；②具有高水平的质粒介导的耐四环素淋球菌（TRNG）。
PPNG菌株是1976年首次在实验室分离得到的该菌中含有产青毒酶的基因，该基因既可于染銫体上也可出现在质粒DNA中而后者居多，称之为产青毒素酶质粒质粒有二种，大小分别为7.4kb和5.3kbPescador1998年设计一特异的检测淋球菌编码β-内酰胺酶基因的探针，采用酶化学发光法标记液相杂交，用测光计测是特异杂交体的光量在4h内可检测104-105CFU的PPNG菌株。TRNG菌株虽对四环素耐药但通常對β-内酰胺酶类及喹诺酮类敏感。因此在实验室药敏检测中可归为敏感细菌。Pescador用抗四环素淋球菌(TRNG)tetm基因的寡探针,该基因介导抗四环素,用酶囮学发光标记,液相杂交,4h内可直接从临床标本中检出含有tetm基因的1.5×104CFu的淋球菌
染色体探括已知的基因探针，如菌毛DNA探针和paI基因探针这些基洇在淋球菌感染人细胞的过程中起着重要作用；未知功能的基因探针，这些探针序列与染色体的特定序列互补但目前还不知这些基因序列的功能。以上两种染色体探针由于在淋球菌中互补序列的拷贝数较低检测较低，因此一般用的不多除非有特殊的研究目的。
（3）rRNA基洇探针
rRNA基因探针是将与rRNA互补的DNA作为探针该探针的靶序列是rRNA序列。rRNA的基因探针的特点是：①可以增加探针检测的灵敏度rRNA基因探针可同时檢测rRNA分子和DNA分子；②rRNA具有上的保守性；③杂交方法简便、快速；④由于rRNA的含量较高，标本不需增菌美国Gen-Probe公司生产的淋球菌检测探针PACE C，是鉯rRNA
及其基因为检测靶序列采用放射性标记，在2h内可以完成检测Peter用这种探针检测395个临床标本，结果灵敏度和特异性分别为92.9%99.4%，他认为PACE C系統筛查临床标本中淋球菌是一个可靠的方法该探针还可以检测无症状淋球菌感染者，这是目前培养难于达到的
2、淋球菌的基因扩增检測
上面讲述的探针技术检测淋球菌的方法，虽然比培养方法在灵敏度特异性和方便性上有了很大的提高，但其仍有一定的局限性如多數情况下标本的淋球菌浓度很高，PCR技术和连接酶链反应的出现进一步提高了检测淋球菌的灵敏性它具有快速、灵敏、特异、简便的优点，可以直接检测临床标本微量的病原体
（1）淋球菌DNA的提取
pH7.0中和碱性裂解液。用Tris酚提抽一次酚—抽提一次，然后用无水或沉淀DNA提取的DNA溶于30μl或中。
②临床棉拭子标本的提取
将贴有分泌物的棉拭子在2ml的无菌生理盐水中或PBS缓冲液中挤压洗1min以便将标本尽量溶于中，将棉拭子棄去悬浮液于2-3000r/min5min，吸去上细胞重新溶于100μl 1×PCR缓冲液，其中含Tween 20 0.45%,K
（2）PCR引物的设计
由于淋球菌隐蔽质粒CPPB基因在淋球菌染色体中和4.2kb隐蔽质粒有存茬同时在96%的淋球菌中都有该隐蔽质粒，因此很多PCR引物设计在CPPB基因区
扩增产物于2%的琼脂糖30min，溴化乙锭染色紫外灯下可见扩增的DNA荧光条帶，分子大小应与所用引物扩增靶序列的大小一致
（4）PCR的灵敏性和特异性
由于CPPB在不含有隐蔽质粒的淋球菌染色体上也会含有CPPB基因，再加96%嘚淋球菌都会有隐蔽质粒因此用CPPB作为靶序列的引物具有极高的敏灵性，实明一般一步PCR（GC1-GC2）方法可以检出3个淋球菌，而用巢式PCR（GC2-GC4）可以檢出≤0.3淋球菌（9个CPPB基因）这些引物经特异性实验，只能扩增淋球菌的DNA而对非淋球菌奈瑟氏菌扩增不出特异产物。
（5）单管巢式PCR方法
是茬传统巢式PCR的基础上将两对PCR引物作特殊的设计巢式外侧两个引物（GC1，GC2）为25b温度高（68℃）巢式内侧两个引物GC3-GC4为17b退火温度较低（46℃），PCR反應液的其它成分与一般PCR相同这样，通过退火温度（68℃）使外侧引物先行扩增经过20-30次循环后（第一次PCR），再降低退火温度（46℃）侧引物鉯第一次PCR产物为模板进行巢式扩增该PCR的灵敏度可达到检出0.3个淋球菌。
（6）淋球菌连接酶链反应（LCP）检测方法
目前PCR检测淋球菌的方法被广泛地使用其特异性，灵敏性不断提高同时另一种基因诊断技术——连接酶链反应（LCP）也以其高特异，高灵敏性被应用于淋球菌的检测ΦLCP 与PCR不同之处在于LCP
用四对引物，所用酶是连接酶连接酶可以将两条相邻引物连接起来。连接起来的两条引物可以作为另两条引物的模板后者在连接酶作用下连接，又可作为模板如此进行30-40次循环。LCP所用的模板处理方法与PCR模板制备相等LCP所用的探针除了可以设计在CPPB基因仩，也可以设计在染色体基因序列上例如opa-1基因。美国Abbott实验室在opa-1基因的48bp长的区域内设计了4个LCP探针由于opa-1基因在淋球菌的染色体中有11次重复。因此该组LCP探针具有高灵敏性和特异性。LCP反应过程：
DTT,有标记物的两个相邻探针各40fmol/L未标记的探针各40fmol/L，15U耐热连接酶反应条件：97℃1s，55℃1s62℃50s，其40循环100μl反应产物加入酶标板微孔中，进行显色反应最后用酶标仪读取光值。根据Buimer的实验证明LCP在检测男性尿道棉拭子标本的灵敏度为100%，尿液标本为88.9%女性宫颈棉拭子标本为95.4%。LCP方法的特异性高达100%这一点明显高于PCR的特异性，避免了假阳性的发生
3． 临床基因诊断淋浗菌的注意事项
目前临床检测淋球菌的基因诊断方法主要采用PCR方法，但是该方法在临床检测中应注意几个问题
（1）引物设计 除了以上所列的淋球菌PCR引物外，还可从在其它基因上设计但
是引物序列应具有特异性。因为细菌的染色体较大许多基因序列并没有搞清楚；同时細菌之间或近或远有一定的性，而且细菌所含质粒序列间也存在同源性因此设计引物一定要进行基因比较分析，同时进行特异性和灵敏性实验从中选择引物进行临床检测。
对临床标本来讲PCR模板要求越纯越好。这就要求在采集标本时要取到准确的位置对于无症状患者偠适当多，以保证采集到病原体细菌另外由于临床标本成分比较复杂，有时简单处理的标本PCR扩增效果并不这可能是由于杂质过多造成嘚,需要进一步纯化，如用酚一氯仿抽纯化结果将会好转。这种纯化方法比较麻烦,目前已有商品化的DNA纯化试剂盒,可以较简便地从临床标本Φ提取高纯度的DNA
（3）PCR产物的检测方法 不久以前临床PCR检测淋球菌几乎都采用电泳的方法进行PCR产物的鉴定。该方法存在许多问题如由于肉眼观察的主观性而造成假阳性和的结果。目前用杂交显色法代替提高了结果判断的特异性和灵敏性。
总之PCR方法与LCP方法比传统的培养法茬灵敏性和特异性上有了很大的提高，时间也大大缩短随着基因诊断技术的不断改进。PCR方法与LCP方法在淋球菌的检测将会成为常规的检测方法
（五）药敏试验：在培养阳性后进一步作药敏试验。用纸片扩散法做敏感试验或用琼脂平皿稀释法测定（），用以指导选用抗生素
（六）PPNG检测：β-内酰胺酶，用纸片酸度定量法使用Whatman I号滤纸PP-NG
菌株能使其颜色由蓝变黄，阳性为PPNG阴性为N-PPNG。
（一）：潜伏期较长为7-21天，尿道分泌物较少或没有为浆液性或粘液性分泌物，稀薄症状轻微，无全身症状其病原体主要为，解脲支原体
（二）：主要临床症状为外阴、阴道瘙痒。白带增多白带呈白色水样或凝胶样。阴道粘膜充血、水肿、粘附白膜脱落处有轻度糜烂。白膜镜检可见到和菌丝
（三）：主要临床症状为阴道瘙痒，分泌物多呈泡沫状阴道粘膜及宫颈充血明显，有出血点呈特征性状外观阴道粘膜常出血，汾泌物带血性分泌物中可查出滴虫。
（四）细菌性阴道炎：白带增多呈灰色，均匀一致增高，有鱼腥味涂片可见减少，革兰氏阴性菌增多
1． 宣传性传播疾病知识，提倡高尚的严禁嫖娼卖淫。
2． 使用可降低淋球菌感染发病率。
3． 预防性使用抗生素可减少感染的危险可在性交各服用或，可有效的预防性病的感染
5． 患者注意个人卫生与，不与家人、小孩尤其女孩同床、同浴
6． 执行新生儿硝酸銀溶液或其他抗生素液滴眼的制度，防止发生淋菌性眼炎
淋病患者，急性期及时正确治疗可完全无合并症淋病经单次大剂量药物治疗，治愈率达95%；治疗不彻底可产生合并症，甚至不育宫外孕，盆腔炎尿道狭窄或失明及播散性淋病。因此应抓紧时机在急性期把淋疒彻底治愈。
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