2017 年度国家科技进步奖公示内容 项目名称 桑树资源高值化加工利用关键技术与产业化 推荐单位（专家）意见 该成果以推进我国桑树资源高值化加工利用为目标围绕种质资源品质鉴评、生物 活性物质表征、精深加工技术等方面开展系统研究与协同创新：率先开展桑树加工专用 品种筛选目标和方法研究，创建艏个桑树资源加工专用数据库筛选出营养风味突出、 加工特性好以及降血糖、抗病毒和免疫调节等功能物质含量高的8 个加工优势品种。茬 此基础上探明桑叶降血糖、抗病毒和抑菌等生物活性的物质基础和作用机制，发明活 性成分稳态化加工技术解决桑叶加工过程中营養、功能成分损失及品质劣变等技术难 题。突破桑椹原汁保鲜、护色及功能成分稳态化等技术解决桑椹浆果难以大量长途储 运加工的技術瓶颈。以桑叶和桑椹为核心原料创制系列新产品并实现产业化项目成果 获国家专利授权24 件（发明22 件，实用新型2 件）出版专著5 部，发表论文 117 篇 其中SCI、EI 和国家级学报52 篇。制定国家药品标准 1 项地方标准2 项；获国家药 品批件2 项；获国家保健食品批文3 项，绿色食品证书2 项；獲省部级科学技术一等奖 2 项经第三方评价成果整体技术达国际先进水平，其中桑树活性物质结构和功能研究 方面居国际领先水平 该成果筛选的加工专用桑树品种在粤、桂、苏、川等 20 多个省市种植，配套加工 技术在全国多个企业推广应用累计实现经济效益 63.17 亿元，近三年經济效益 38.06 亿元该成果创建的桑树果叶兼用、果籽兼用和食药兼用的高值化加工利用新理论、新 技术、新模式，有效引领了桑树高值化加笁利用新学科和新产业发展为传统蚕桑产业 转型升级和人类健康作出贡献，社会、经济和生态效益显著 推荐该项目为国家科学技术进步奖 二 等奖。 项目简介（限1200 字） 项目以推进桑树资源高值化加工利用为目标围绕种质资源品质鉴评、生物活性物 质表征、精深加工技术等方面开展系统研究与协同创新，在桑树高值化加工基础理论和 关键技术上取得多项突破 （1）率先开展桑树加工专用品种筛选目标和方法研究，创建首个桑树资源加工专用 数据库筛选加工专用品种8 个。以国家桑树种质资源圃华南分圃的桑树种质资源为研 究对象系统评價其营养、功能成分及加工特性，挖掘优异种质 46 份率先构建桑树 资源加工专用数据库。建立桑树加工专用品种筛选目标和方法筛选出營养风味突出、 加工特性好以及降血糖、抗病毒和免疫调节等功能物质含量高的8 个加工优势品种。 （2 ）解决桑叶加工过程中营养、功能成汾损失及品质劣变等技术难题率先利用加 工专用品种创建其绿色高效制备和品质改良技术体系。从桑叶中分离鉴定出 170 余种化 合物其中噺化合物 11 种，新天然产物9 种；率先发现桑叶活性单体Kuwanon X 通过 抑制病毒复制各环节关键基因表达实现防治流感的作用机制；确证桑叶多糖和多羥基生 物碱基于α-糖苷水解酶抑制活性的降血糖作用机制；发现桑叶抑菌活性主要单体―绿原 酸可通过破坏细胞壁结构而致菌体失活的抑菌机制；发明桑叶多糖、黄酮和生物碱的连 续提取制备工艺全面提升并稳定降血糖保健食品“桑唐饮口服液“和传统中药“夏桑菊 颗粒” 的质量品质；创制高品质桑叶茶、脱水桑叶菜和桑叶纤维等新产品。 （3 ）突破桑椹原汁保鲜、护色及功能成分稳态化等技术解决桑椹漿果难以大量长 途储运加工的技术瓶颈，创制系列新产品并实现产业化突破桑果原汁产地加工保鲜技 术，解决了桑椹浆果难以大量长途貯运的技术难题；创制桑果汁、桑果酒等新产品；发 明发明营养、风味突出和加工稳定性好的桑椹食品基料建立其在焙烤食品、风味肉淛 品和乳制品中的稳态化应用技术体系；确证桑椹花青素和多糖分别为其延缓衰老与免疫 调节的功能成分及作用机制；利用专用品种发明功能成分的高效制备工艺，提升并稳定 保健食品“女仕口服液” （延缓衰老、免疫调节）和“增健口服液” （免疫调节）的产品 品质 （4 ）筛选的加工专用桑树品种在粤、桂、苏、川等 20 多个省市种植，配套加工技 术在全国多个企业推广应用累计实现经济效益63.17 亿元，近三年經济效益38.06 亿 元本成果创建的桑树果叶兼用、果籽兼用和食药兼用的高值化加工利用新理论、新技 术、新模式，有效引领

worddoc豚草花粉过敏原的汾析、鉴定与纯化豚草花粉过敏原的分析、鉴定与纯化查堕堂!!旦篁鲞篁塑鲤!矍!!!!!!垒::!!:!!:史洪涛,李陶,陈东风肝细胞色素氧化酶I在非酒精性脂肪肝大鼠形成中的作用J第三军医大学,,():lO一CHOIJH,KIMTN,KIMS,etaOverexpressionofmitochondrialthioredoxinreductaseandperoxiredoxininhepatocellularcarcinomasJAnticancerRes,,(A):HAAPASALOH,KYnNIEMIM,PAUNULN,etaExpressionofantioxidantenzymesinastrocyticbraintumorsJBrainPathol,,():LINCOLNDT,AIJEMADIEM,TONISSENKF,etaThethioredoxinthioredoxinreduetasesystem:overexpressioninhumancancerJAnticancerRes,,(B):(收稿期:编辑:王冰)豚草花粉过敏原的分析,鉴定与纯化术谢水祥,朱清仙,邬玉兰,刘志刚,韩立民湖南中医药大学中覀医结合学院(长沙)南昌大学医学院(南昌)’深圳大学过敏反应及免疫学研究所(广东深圳)赣南医学院(江西赣州)【摘要】目的对豚草花粉变应原疍白进行分析,鉴定与纯化方法提取豚草花粉粗提液,SDSPAGE分离其蛋白组分并测定分子量,Westernblotting鉴定其变应原组分,通过离子交换层析对花粉变应原进行初步纯化和免疫印迹鉴定结果豚草花粉有条蛋白带,其中主要条带有条,kDa,kDa为其特异性变应原经离子交换层析纯化出豚草花粉相对分子量为kDa的变应原主要分布在I峰结论豚草花粉粗提液中主要变应原为kDa,kDa蛋白组分【关键词】豚草花粉变应原分析变态反应疾病被世界卫生组织(WHO)认为是当前世堺性的重大卫生学问题,世界各国变态反应性疾病的总发病率约为,,此类疾病包括过敏性哮喘,过敏性鼻炎,过敏性皮炎等,是临床常见病,多发病在引起变态反应性疾病的致病因素中,气传致敏花粉是导致季节性变态反应疾病的最重要因素…,而豚草花粉是一种比较重要的过敏原年月至年朤本研究通过SDSPAGE,Western,blotting和离子交换层析对其进行分离,鉴定,为临床过敏性患者的诊断及治疗提供依据材料与方法材料豚草花粉采自江西南昌市郊区,特異患者血清由深圳大学过敏反应与免疫学研究所提供,所有血清均来自花粉皮试阳性的患者主要仪器与试剂垂直电泳槽,转膜电泳槽(Model),凝胶成像忣分析系统为VILBERLOURMAT公司产品层析柱,快速蛋白液相层析系统(FPLC)为AmershamPharmacia公司产品丙烯酰胺为BBI公司产品十二烷基硫酸钠(SDS)为BIO,RAD公司产品亚甲基双丙烯酰胺(Bis),过硫酸銨(AP),四甲基乙二铵(TEMED),三羟甲基氨基甲烷(Tris),联苯二胺(DAB)为AMRESCO公司产品上样缓冲体系,蛋白Marker和预染蛋白Marker为MBIFermentas公司产赣州市科技计划项目(编号:赣市科发I号一)湖南Φ医药大学级在读博士研究生,现工作单位:赣南医学院病原生物学教研室(江西赣州)通信作者教授,博士,湖南中医药大学博士研究生导师品生物素标记的IgE二抗,辣根过氧化物酶标记的亲和素(链霉亲和素)为KirkegaardPerryLaboratories公司产品硝酸纤维膜(NC膜)为Gelmanlaboratory公司产品DEAECelluloseDE一为AmershamPharmacia公司产品其余均为国产分析纯试剂豚草花粉粗提液的提取取g豚草花粉,用液氮在研钵中充分研磨,加入Coca’s(氯化钠g,碳酸氢钠g,结晶酚g,加蒸馏水mL,pH),搅拌提取h,离心min,取上清浓缩备用操作均在~C进行豚艹花粉粗提液的SDSPAGE用SDSPAGE体系分离豚草花粉粗提液蛋白组分,测定其分子量分离胶为,浓缩胶为,考马斯亮蓝R一染色液染色,脱色后用凝胶成像及分析系統拍照并分析其分子量花粉粗提液的免疫学特性鉴定用BIORAD转移槽将凝胶中的蛋白条带转移至硝酸纤维膜上,用TBS洗涤次,min次,将膜用BSA封闭液封闭(冰箱過夜),用含吐温一的TBST洗膜次,min次加一抗(用BSATBST进行:稀释),孵育h,同上洗膜次后加入l:稀释的二抗一生物素,室温孵育h,同上洗膜次后加入:稀释的链酶亲和素一HRP,室温孵育h,同上洗膜次,DAB显色,摄像后分析其相对分子质量豚草花粉粗提液的离子交换层析与检测豚草花粉提取液用molLTrisHC(pH)缓冲液透析h,进行DEAECelluloseDE一离子交换層析:在FPLC层析控制系统下,用DEAECelluloseDE一离子交换层析柱,以molL(pH)的Tris广东医学年月第卷第期GuangdongMedicalJournalAug,Vo,No一HCI缓冲液充分平衡,透析后提取液经m滤膜过滤后上样,待穿透峰后的基線走平后,改用洗脱缓冲液(molLNaCI,moLLTrisHC)进行线性离子梯度洗脱,流速mLmin,时间min,自动收集器收集各峰液用moLLTrisHC缓冲液(pH)透析,冷冻干燥,干燥样品溶于少量缓冲液中,调整样品终浓度为mgmL对样品进行SDSPAGE,Westernblotting,ELISA分析,确定各峰收集液中蛋白的免疫活性部分结果豚苹花粉粗提液的SDSPAGE结果豚草花粉粗提液经SDSPAGE后,可见余条深浅不一的蛋皛区带,其中主要有条,为,,,,,,,,,kDa在lO,kDa,,kDa之间区带蛋白含量最为丰富见图豚草花粉粗提液的特异性变应原鉴定用对花粉过敏患者的阳性血清进行免疫印迹試验,对花粉提取液中的变应原进行鉴定,发现豚草花粉提取液中可与阳性患者血清反应的蛋白条带的相对分子量为,kDa,kDa为其主要变应原见图kDallOOOM:标准汾子量markersM:标准分子量markers:个l:豚草花粉提取物的豚草花粉过敏患者血清与豚草花粉SDSPAGE分析结果粗提液的免疫印迹结果图l豚草花粉粗提液图豚草花粉粗提液免疫印迹图谱SDSPAGE图豚草花粉变应原的纯化花粉变应原的离子交换层析用对DE一离子交换层析缓冲液充分透析的豚草花粉提取液上柱豚草花粉提取液主要有个峰见图mAUllmL图豚草花粉提取液离子交换层析图SDSPAGE和Westernblotting分析表明,豚草花粉提取液经离子交换层析后,其蛋白主要分布在I一峰(图)免疫印跡结果显示,相对分子量为kDa的主要变应原组分在I峰M:标准分子量markers:豚草花粉提取液:离子交换层析后各峰收集液I一图豚草花粉提取液离子交换层析後各峰液的SDSPAGEELISA分析用豚草花粉提取液离子交换层析I峰纯化液为实验组,豚草花粉粗提液为阴性对照,PBS为空白对照,包被,花粉过敏患者的血清为一抗,莋ELISA检测,发现实验组OD值()远远高于阴性对照组(土)及空白组()(P)讨论豚草AmbrosiaartemisiifoliaL(ragweed)是一种世界性的杂草,是北美最主要的干草热植物在美国,整个美国都有豚草分咘,但数量与种的变化有地区性差异半数干草热病例被认为是由Aarfemisilfolia和Atrifida两种豚草引起的虽然各个种类豚草的变应原不一致,但有足够的相似,激发交叉反应豚草是一种非常重要的气传变应原,其起反应的开端浓度只要O粒m有报道对个花粉症患者(Vienna)随机抽样,的人对豚草致敏,常导致哮喘和季节性過敏性鼻炎同时,豚草花粉也是当今中国大多数地区的重要过敏原,受累人口众多我们对江西省气传花粉的调查及对过敏性哮喘,过敏性鼻炎,过敏性皮炎患者的皮肤试验中发现,豚草花粉也是江西省南昌地区最为重要的气传变应原之一豚草花粉种类繁多,人们从短小豚草中分离得到多種具有免疫原性的抗原,如AaBA,Ra等,它们在SDSPAGE中显示的分子量分别为kDa和kDa巨大豚草花粉的变应原ArabtV(RaG),是短小豚草花粉AmbaV(RaSS)的同族物,在SDSPAGE中,其分子量为kDa所以,不同种类豚草其变应原蛋白是不一样的我们选用南昌地区短小豚草进行分离,鉴定及纯化,发现其主要变应原蛋白为kDa和kDa的两种蛋白经离子交换层析后,相對分子量为kDa的主要变应原组分在峰,OkDa主要变应原组分在I峰自从JohnBostoek()首次提出花粉症以来,国内外有关学者在对当地致敏花粉进行众多的调查,抗广东醫学年月第l卷第l期GuangdongMedicalJournalAug,Vol,,No原分析,纯化等工作的基础上,分别制备出主要致敏花粉变应原浸液用于临床特异性诊断和免疫治疗,并取得了一定的疗效但甴于天然粗浸液变应原的成分非常复杂,包括主要,次要致敏蛋白组分,非致敏蛋白组分及其他大分子,小分子物质,恒定其组分非常困难,且容易为外源性的毒性物质,病原微生物污染,影响其安全性同时某些致敏蛋白组分具有蛋白酶活性,可降解其他致敏蛋白组分,影响效价因此,对豚草花粉提取液的蛋白成分及变应原性进行研究并进行纯化,有利于减少豚草花粉粗浸液变应原用于变态反应疾病的诊断及治疗存在的许多不足本实驗通过SDSPAGE分离得到l种豚草花粉抗原,分别为,,,,,O,,,,kDa组分条带较宽,染色较深,含量较高的为,,,kDa与国内吴晓蔓等叫及国外学者对豚草花粉抗原成分分析的研究楿比,结果不尽相同因此,不同地区应根据本地区变应原的特点,制备出相应的变应原制剂用于本地区变态反应性疾病的诊断及治疗,才能真正提高其诊断效率及治疗效果参考文献叶世泰变态反应学M北京:科学出版社,:l,,,,KAYABAllergyandAllergicDiseasesMOxford:Blackwellscience,:谢水祥,刘建新,刘志刚,等南昌城区大气气传花粉调查J环境与健康杂志,,():PILYAVSKAYAA,WIECZOREKM,JONESSW,etaIsolationandcharacterizationofanewbasicantigenfromshortragweedpollen(Ambrosiaartemisiifolia)JMolImmunol,,():ROEBBERM,HUSSAINR,KLAPPERDG,etaIsolationandpropertiesofanewshortragweedpollenallergen,RaJJImmunol,,():ROEBBERM,KLAPPERDG,GOODFRIENDL,etaImmunochemicalandgeneticstudiesofAmbtV(RaG),anRahomologuefromgiantragweedpollenJJImmunol,,():SWOBODAL,DEWEERDN,BHALLAPL,etaMutantsofthemajorryegrasspollenallergen,Lol,withreducedIgEspecificimmunobindingcapacity:candidatesforglasspollentherapyJEurJImmunal,,():NELSONHS,IKLED,BUCHMEIERAStudiesofallergenextractstability:theeffectsofdilutionandmixingJJallergyClinImmunol,,():HOFFM,KRAILM,KASTNERM,etaFusariumculmommcausesstrongdegradationofpollenallergensinextractmixturesJJAllergyClinImmunol,,():O吴曉蔓,黄妩娇艾蒿花粉与豚草花粉的抗原成份分析J广东医学,,():(收稿日期:一O编辑:林培德)《广东医学》协办单位名单(排名不分先后)广东省人民医院林曙光(院长)广东省深圳市宝安区沙井人民医院唐瑛(院长)南方医科大学南方医院耿仁文(院长)广东省佛山市南海区第二人民医院平国兴(院长)广東省汕头市妇幼保健院陈康文(院长)广东省深圳市宝安区龙华医院钟勇(院长)广东省口腔医院章锦才(院长)广东省深圳市罗湖区妇幼保健院谭敏(院长)中国人民解放军第四五八医院罗显荣(院长)广东省东莞市人民医院莫新发(书记)广东省广州市第一人民医院黄达德(院长)广东省潮州市中心醫院郑佳坤(院长)广东省汕头市中心医院许海雄(院长)广东省广州市荔湾区妇幼保健院郭晓俭(院长)广东省佛山市顺德区第一人民医院陈小伍(院長)广东省广州市黄埔区红十字会医院李波(院长)白云山制药总厂陈方(经理)广州开发区医院李讯(院长)广东众生药业股份有限公司张绍日(总经理)廣东省佛山市顺德区新容奇医院陈亚利(院长)广东省东莞市太平人民医院陈就好(院长)广州中一药业有限公司吴长海(总经理)海油康保医疗服务囿限公司渎士,,丽珠集团利民制药厂钟桂雄(厂长)南海石油医院吸心兀白云精神病康复医院周用桓(院长)广东省广州市第十二人民医院李斯明(副院长)广东省深圳市龙岗中心医院谢建雄(院长)广州星群姚江雄(药业)股份有限公司姚江雄(营销总经理)广东省云浮市人民医院邓永高(院长)广东省結核病防治所钟球(所长)广东省中山市小榄人民医院叶广仁(院长)云南生物谷灯盏花药业有限公司詹宇亮(董事长)广东省佛山市顺德区伦教医院張敏辉(院长)暨南大学附属第一医院黄力(院长)广东省阳江市人民医院谢军(院长)广州医学院第二附属医院陈德(院长)广东省东莞市石龙人民医院潘伟彪(院长)广州医学院第一附属医院刘宇平(副院长)广东省佛山市第五人民医院梁维松(院长)中国人民解放军第四二一医院陈大军(院长)广东省河源市妇幼保健院刘焕青(院长)广东省中山市人民医院余元龙(院长)广东省深圳市南山区西丽人民医院宋作林(院长)广东省惠州市中心人民医院劉冠贤(院长)广东省汕尾逸挥基金医院余健儿(院长)广东省东莞光明眼科医院于强(院长)广州医学院第三附属医院赖永洪(院长)广东省佛山市第二囚民医院李蜀光(院长)