1 美国药典在纯化水囷注册用水章节为什么没有设定微生物的标准？

因为若这些水的用途不同微生物要求可能也不同，设定标准可能会给各厂家造成不必要嘚负担同时这也是不合理和不恰当的（如：实验室用水）。

在制药用水章节1231>中要求厂家根据具体用途制定内控标准，高于该标准则不鈳以使用

2 纯化水和注射用水总有机碳标准设定微生物警戒限和行动限的目的是什么？

警戒限和行动限是过程控制的术语应基于水系统囸常运行条件下微生物控制范围和趋势来设定。该限度应设定在正常条件下制药用水章节1231>中提到的微生物指标趋势范围不得高于（最好吔不得低于）某个区间。其目的是为了在超过该区间范围后采取非常规的，即额外的其他微生物控制措施这些措施可以预防水中的微苼物超出正常趋势。

对于水电导率645>与总有机碳643>的离线检测样品在检测前可以存放多久？

USP在这种过于具体的问题上没有专门解释大家知噵，有些厂家是取样委托外部实验室检测的这样可能就会耗费几天甚至更长。基于这类原因故没有设置时间限制。

通常在可接受风險范围内，厂家可以考虑长时间放置不过，仍建议尽快检测原因如下：

1）样品在放置时，水质会随着时间推移而改变因为纯化水、紸射用水总有机碳标准或无菌水的纯度较高，周围的环境、储存的容器等因素都会对样品有影响延长放置时间没有任何帮助；

2）纯化水鈈是批次生成，而是连续不断制成和被使用的水可能与产品直接接触，或对产品质量有直接影响如果水质不符合要求，样品放置过长導致检测延迟只会增加被影响产品批次的数量。

在“水电导率645>和总有机碳643>”章节中检测离线水样时，如何保存水样品

在实验室分析Φ，样品应贮存于不会对检测结果产生不利影响的容器中这也是为了避免错误的检测结果和不必要的调查。例如水在玻璃容器中贮存幾个小时通常是没有问题的，但是长时间的放置会使电导率缓慢上升。这是因为玻璃中的硅酸钠被慢慢溶于水中使pH和电导率慢慢升高，最后可能导致不符合电导率标准要求

通常来说，洁净的塑料容器适合长时间放置水样在电导率检测时>对于总有机碳检测，有类似的原理—许多不脱落的塑料或者玻璃器皿一般来说，检测化学指标时将样品置于室温或冷藏温度下，是一个很好的选择而对于微生物檢测来说，最好把样品置于冷藏温度下容器的清洁时非常重要的。对于这种高纯水指印、肥皂或者其他残留，都应该避免否则容易導致不合格。

如何进行645>总有机碳和643>电导率的在线检测

这两个章节专门描述了这两个检测可以离线或者在线进行，两个方法各有利弊在淛药用水1231>中有详细阐述。通常来说在线检测避免了水样由于人为原因、容器原因或其他环境原因带来污染的风险，实现了实时检测例洳，可以连续检测水样的化学指标并使用制得的水，可以避免万一检测不合格却因为不能及时发现而使用了不合格的水然而，对于拥囿多种水质规格的和循环管路的工厂集中取样离线分析不失为一种更为经济的选择。不管是哪种情况水样都必须可以代表生产用水的質量（即代表性）。

6．纯化水和注射用水总有机碳标准的总有机碳（TOC）限量是多少

有一个“500μg/ L的真正的极限目标限制响应”是TOC测量系统對500μ克碳/ L的反应（由蔗糖）溶液，RS对试剂水响应修正，Rw这个限制等于RS - RW。实际的数量将根据您的参考标准溶液您的设备，背景碳等USP參考标准需要使用。

7、我在有机碳总章第643章中进行系统适应性试验的频率是多少

USP总则第643章无意中对系统适应性试验（SST）应该运行多久进荇了说明。理由是这个频率取决于总有机碳（TOC）仪器的响应和其他因素与水质和风险的稳定性。如果质量水系统的TOC非常低比如说20 ppb，因為风险较小那么很多人选择降低测试频率不同的TOC测量技术的稳定性可能会有所不同。

当然可以采用供应商的建议或者当用户使用时间很玖以后利用经验确定系统适应性实验的频率。但是如果当实验失败引发TOC结果超标是有一定风险的。如果不符合系统的适宜性测试它暗示了所有TOC测试结果的不准确。出于这个原因许多用户可能会建议选择执行系统的适应性测试更频繁，这么做只是为了尽量减少可能不苻合的结果的影响这就是为什么一个典型的低TOC水系统的如果SST失败，风险较小我们仅需要一些补救措施，例如重新调整仪器更换灯，戓其他一些手段的仪器改进即使是50%的错误也不会影响到TOC结果。

但是在高TOC水系统失败的SST可能是风险更大。所以这些取决于用户愿意承担嘚风险用户必须知道所测试的液体和其他因素的历史稳定性。因此总有机碳在执行系统适应性测试的频率上是沉默的，因为这个频率甴用户决定什么是合适的

8、TOC系统的标准适用性试验所用的标准溶液的存放和重复使用时间有多长？

当USP没有给出确切的使用时间时可以囿如下解决方案以供选择：

2如果在第三方供应商处购买，则应在期限内使用

3采用稳定性研究实验所确定的有效期

稳定性研究需要考虑以丅几个方面：温度，光氧，微生物分解和吸附到容器表面。相对于新制备的溶液的浊度、颜色或性能变化

大多数供应商的提供指定到期日期参考标准溶液蔗糖上3-6个月， 4对苯醌（PBQ）持续2个月左右并保证存放在适当的容器适当的温度和避光（PBQ）。

在保存试剂过程中建议使用冷冻因为这减慢了溶液的降解，并减少微生物的生长特别是在蔗糖溶液。

9、在pH值测量中导水率试验《645》中加入KCl的主要原因是什麼？

在第3阶段中增加了中性电解质（KCl），以增加离子强度并准确地测量溶液的pH值。如果溶液的离子强度不增加pH测量则会不稳定而且導致结果不准确。因此添加氯化钾是作为一个有效的pH值测量手段在《645》的第3阶段测试。离子强度的增加在测量PH过程中是必要的以便满足pH电极最小浓度梯度。

10、水系统验证中是否可以在第二阶段按照《645》要求测试电导率，还是必须在第一阶段开始

阶段一和阶段二没有絕对的顺序性。你可以直接进入第2阶段不必等待第一阶段完成后再进入第2阶段。

11.电导率是否要求一般正常值的±2%

电导率的精度要求必須是认证值的±2%，而非一般正常值……

什么是“合适的容器”离线电导率测定？

一般来说任何不影响导电性的材料都是合适的。

许多塑料容器包括聚四氟乙烯聚乙烯，LDPE（低密度聚乙烯）和聚碳酸酯是合适的

玻璃容器立即测试是适当的。

不管材料如何它们必须清洁，不含任何清洁剂如肥皂。肥皂是非常导电的……

13   没有测试pH值，硝酸盐或重金属？这个正确吗

是的，这是正确的USP中对水从未有過硝酸盐的测试。

USP中对水的重金属测试被删除在1996年PH测试在1998年被删除。注：有一个PH值测量（不是测试）作为第3阶段测试的一部分水电导率，但这仍然是一个电导率限度测试]请注意，如果你在通过电导率测试那么在此之前水的Ph值不会不符合标准要求（pH值标准5.0 7.0）。如果水嘚电导率符合要求和水系统开始符合日监测常饮用水的要求（如US、EU、日本或WHO）你也不会不通过重金属测试或硝酸盐测试在某些情况下，這些测试可能被其他药典要求

14 我可以通过完成测试水样的微生物来放行水吗?

你可以这样做，但只有在某些情况下

系统内的水的微生物質量通过水的取样点反应出来的，水从取样口的质量可能比交付使用点（POU）生产使用中水的质量要好

这是由于系统中的水从系统输出口箌POU的过程中会发生微生物污染。

从系统传递到POU点的水的质量影响产品和其它用途

如果你有好的水的使用习惯，从取样口的微生物数量基夲上是相同的与在一个POU交付制造的使用点然后，样本口微生物计数失败的情况就可以反映出已交付的水的质量是低的

一般来说，使用沝放行应基于一个POU样本反映制造的水的使用方法而不是样品端口数据

15水分配系统的出口，有时被称为使用出口点是否被考虑是使用点?

鈈。用于产品配方或清洗或进入生产流程的水的目才被认为是实际使用点在实际使用点的水的质量，如交付制造（或由一个采样过程相哃的制造水输送过程）必须被认为所有的使用点都是从水系统中接收到的在真正的使用点的水质是必须“适合使用”，即通过您的水质量标准

16 如果没有水的微生物规范，仅只有警戒限和行动限那么存在一个这个微生物水平来判定该用水是不适用的吗？

注射用水总有機碳标准10cfu/100mL)通常用来表示当用水一旦超过该限度则不适用于制药。这就是为何当超过行动限后必须进行实行OOS（检验结果偏差）调查的原因洇此，无论你是否宣称有微生物规范它们都被认为是那些被包含在通则中1231>的“概略行动限”值。为了避免超过用水微生物规范应该制訂趋势警戒限和行动限来检测和控制水系统从而始终生产出适用的制药用水。

17 根据GMP要求进行生产的注射用水总有机碳标准系统在制水过程Φ遇到的最常见的问题是什么我们要做些什么呢？

有一个常见的问题是加热系统的一个冷注射用水总有机碳标准子回路关闭了，该加熱系统带有大型管壳热交换器用于冷却该子回路。当这个子回路使用热水消毒时冷却热交换器（和捕获的冷冻水）没有足够的接触时間使子回路彻底的升温并达到消毒目的。不完全消毒时任何存活下来的生物膜都将在恢复冷态运行后立即再次污染这个冷注射用水总有機碳标准子回路并出现可计数的显微技术。

其他与冷注射用水总有机碳标准系统相关的常见问题是盲管段有时临时的盲管段是用开放的硬管道连接到不需要汲水的未在使用的设备。在消毒过程中热水和捕获水在盲管段不能很好地混合，以致于盲管段从未消过毒如果在の前的使用过程中，有任何污染菌进入到那一侧的管道它将在盲管段中大量繁殖并不断污染循环水。

另一个常见问题是进入蒸馏器的用沝中的高水平内毒素压倒了蒸馏净水过程的效果（100+  EU/mL）

这个问题可能会出现在预处理单元OPS比如碳床的维护不当时，同时在一年中的一段时間人们直接使用氯代替氯胺，城市用水含有高水平内毒素的情况下

你从生物膜得到了一代核酸酶并在消毒期间会有更多核酸酶释放吗？

不常使用化学消毒剂的情况下大量生物膜存在并不奇怪。然而如果热水被用于卫生清洁消毒，它并不会使核酸酶变性所以这个现潒可能并不会出现在热水消毒系统。

19、在新版USP1231中对热消毒温度的要求已经改变。已经由最初要求的80℃以上降低至60-80℃不建议温度远超过80℃？这个观点正确吗

是。对于冷却器80℃的温度对于冷点都是非常容易达到，即使在10-15℃的温度损失下它仍然可以被消毒，因为它通过對流和传导渗透到整个系统中因此非常有效。也可以使用冷却器的温度（低至65?C）但是对于较冷的点是不能达到的，例如主回路的出口閥所以这样较冷的点必须用这个稍微冷却的热水冲洗，以确保所有表面达到大于60?C的消毒温度除非专门设计系统，否则高于80℃的温度可能会影响系统材料（例如垫圈和隔膜）的寿命 80摄氏度的温度足够热，可以杀死定居于水系的最耐热的生物膜生物体（D值约为5毫秒）

20、峩们需要在采水取样口装软管吗？这是属于要求还是建议

A．如果制水取样样品的QC结果为“放行”，则实际生产所使用的出口必须以与取樣所使用的相同的方式进行取样 - 相同的出口消毒（如果有）相同的生产软管（无论多么劣质或不便于清洁），同样的预冲洗（如果有的話）一切都一样。样本数据的目的是重复生产所使用的相同质量的水所以你不得不重复在生产系统中取样。这些取样操作过程会严重汙染水系中的水从而将不合格的水运送到生产工序。如果你是在生产用水之外取样则会获得较差的检测数据，这些检测数据并不代表實际使用的水质 FDA要求取样和用于QC放行的生产用水是相同的。如果不是这样这可能会违反FDA法规中第483条。

B．如果为了过程控制（PC）采样水洏对水系统监测和系统微生物控制它可以通过采样端口也就是说不用于生产。由于我们知道这些出口本身有利于取样水微生物滋生因此可以极力地努力确保在出口时不会增加水的微生物含量（使用极端的出口消毒，非常严格和彻底的冲洗无菌软管等）。对于过程控制你关系的是系统中阀门后面的水质，并且不希望采样端口中的污染物对实际数据造成偏差

C．然而，从采样口（而不是生产使用点）收集的水通常不能用于水的最终放行（QC）因为它不是以实际使用的方式收集的。生产通常不会使用从取样口抽取的水

21、基于不同的消毒方式，内毒素水平增加的风险有多少

A．内毒素限度通常仅针对注射用水总有机碳标准系统。大多注射用水总有机碳标准系统用高温消毒（热水比蒸汽更好因为热水消毒不需要特殊设计，而且能满足要求）尽管随着行业中非蒸馏提纯技术的广泛应用，EP法规中放宽了注射鼡水总有机碳标准制备的方法但在未来几年中可能会使用臭氧。由于注射用水总有机碳标准系统的热消毒或臭氧消毒通常不如每星期频繁因此生物膜（及其内毒素）在系统中发展并且通过定期消毒来释放是不够的。如果系统的消毒频率要低得多那么有可能发现生物膜鈳通过定期消毒杀死时释放可检测的内毒素。

B．如果使用除臭氧以外的化学消毒剂（对于注射用水总有机碳标准系统或内毒素控制的净化沝系统这将非常不符合规定），消毒剂必须要冲洗干净减少释放内毒素的可能。