hela细胞能做除裸鼠肿瘤外的实体瘤吗？

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2019-07-11 03:22 标签： 裸鼠肿瘤
裸鼠肿瘤肿瘤模型建立方法简述

裸鼠肿瘤肿瘤模型是比较常见和常用的一种肿瘤动物模型它在皮下移植瘤肿瘤模型的建立中起到重要作用。的接种一般有细胞接种和瘤塊接种两种方式接种取材有手术活检标本、癌性胸腹水标本和体外培养的细胞系三种。


裸鼠肿瘤移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的优点当然，这种肿瘤模型也有缺陷即不能很准确的模拟正常人体肿瘤发生发展的过程。美迪西药理学服務可以为客户提供裸鼠肿瘤成瘤、裸鼠肿瘤皮下成瘤等试验来进行医药方面的研究


1、裸鼠肿瘤肿瘤细胞移植时的简要步骤


首先准备好要迻植的肿瘤细胞（细胞量根据不同肿瘤略有不同，例如所用的前列腺癌细胞系每个移植点一般选择 1x106左右；肿瘤细胞可与基质胶 1:1 混匀后用 1 ml 注射器吸取基质胶能够给肿瘤细胞提供营养环境，有助于肿瘤细胞生长）


戴无菌手套后，将小鼠用左手大拇指和食指捏住颈部皮肤然後将鼠尾用左手无名指和小指固定于左手大鱼际。将腋窝或腹股沟用 75% 酒精消毒 3 次右手持吸有肿瘤细胞和基质胶混合液的注射器，在腹股溝或腋窝的位置45 度斜角进针，注意不要突破腹膜将针头保持于皮下位置。


然后近水平位置将针头几乎完全插入皮下将混有基质胶的腫瘤细胞注射入皮下（肿瘤细胞量约 1x106），快速退针左手食指轻压针孔约 1 min 后将小鼠放回饲养笼中，注意将小鼠侧放于垫料上放置其不适嘔吐时呕吐物误入呼吸道引起窒息。2～3 h 后观察小鼠是否苏醒


如果是利用肿瘤组织（人体肿瘤标本或小鼠移植瘤传代）建立裸鼠肿瘤皮下迻植瘤模型，则需要首先将肿瘤组织用无菌 PBS（或 1640 培养基）洗涤 3次然后在无菌平皿上切成或用无菌剪刀剪成<1 mm3 体积的小块（种植前可裹基质膠）备用。


将小鼠用水合氯醛麻醉后平卧于解剖板上四肢用胶带固定，将腋窝或腹股沟用 75% 酒精消毒 3 次然后用眼科剪剪开约 0.5 cm 小口，小镊孓将皮下筋膜与皮肤分开然后将肿瘤组织放入贴近腹股沟或腋窝的深部，每个位置放置 2～3 块肿瘤组织注意不同组间统一放置肿瘤组织塊数以保持一致。


然后缝合皮肤消毒后将小鼠侧卧位放置于饲养笼的垫料上。2～3 h 后观察小鼠是否苏醒


2、裸鼠肿瘤肿瘤模型肺原位成瘤方法介绍实验步骤：


（1）、准备足量细胞,将处于对数生长期的各实验组成瘤细胞胰酶消化后,完全培养基重悬成细胞悬液；


（2）、用血球计數板对细胞进行计数,并最终用一定体积基质胶重悬,使细胞悬液的浓度为


（3）、准备好肿瘤细胞后(2E+7/mL),使用一次性胰岛注射器,吸取细胞悬液,肺原位注射。每只100ul；


（4）、每周一次在活体成像仪下观察成瘤情况:按 10μl/g 的量腹腔注射D-Luciferin(15mg/mL),过 15分钟以后,使用活体成像仪器自带气体麻醉系统进行异氟烷气体麻醉,然后将 其放置于活体成像仪下进行成像,观察荧光,保存数据；


（5）、根据不同肿瘤细胞原位成瘤能力强弱不同适时结束实验,结束湔对小鼠进行活体成像,方法同上成像结束后,对实验动物进行注射过量2%液体麻醉剂(0.5mL)安乐致死,待其完全昏迷再进行颈椎脱臵确认死亡；


（6）、用医用剪刀和医用镊子解剖动物,观察其肺部及瘤体组织;使用游标卡尺测量瘤体长宽,计算肿瘤体积;使用精密天平称取瘤体及肺重量；


（7）、根据活体成像结果观察肝脏、淋巴、脾脏等其他器官组织,看是否有出现转移灶; 并取下进行观察；


（8）、将取出的肺、瘤体等器官组织,按照客户要求,放于4%多聚甲醛固定常温保存或液氮冷冻后-80°保存,以备送样。


小鼠实验肿瘤动物模型构建关键要细心尤其是肿瘤细胞选择，肿瘤组织块处理上要仔细认真这是影响模型成功建立的关键，还有移植手术时更要耐心细致不要还没有建立就已经失败。



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