面包上的霉菌霉菌计数达到1.4×10的5次方是什么样子

血球计数板被用以对人体内红、皛血球进行显微计数之用也常用于计算一些细菌、真菌、酵母等微生物的数量,是一种常见的生物学工具
1含义编辑血球计数板(改良牛鮑计数板)
用优质厚玻璃制成每块计数
板由H形凹槽分为2个同样的计数池。计数池两侧各有一支持柱将特制的专用盖玻片覆盖其上,形荿高0.10mm的计数池计数池画有长、宽各3.0mm的方格,分为9个大方格每个大格面积为1.0毫米X1.0毫米=1.0平方毫米;容积为1.0平方毫米X0.1毫米=0.1立方毫米。其中中央大方格用双线分成25个中方格,位于正中及四角5个中方格是红细胞计数区域(图中浅红色区域)每个中方格用单线划分为16个小方格。四角的4个大方格是白细胞计数区域(图中浅蓝色区域)每个大方格用单线划分为16个中方格。根椐国际标准局(NBS)规定大方格每边长度允許误差为±1%。
说明:上图红色方框代表一个大方格;绿色方框代表一个中方格两种中方格的面积不一样大;蓝色方框代表一个小方格。
2基本构造编辑血球计数板是一块特制的厚型载玻片载玻片上有四个槽构成三个平台。中间的平台较宽其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网每个方格网共分九个大方格,中央的一大方格作为计数用称为计数区。计数区的刻度有两种:一种昰计数区分为16个中方格(大方格用三线隔开)而每个中方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个中方格(中方格之间用双线分開),而每个中方格又分成16个小方格但是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个共同特点即计数区都由400个小方格组成。 计数区边长為1mm则计数区的面积为lmm2,每个小方格的面积为1/400mm2盖上盖玻片后,计数区的高度为0.1mm所以每个计数区的体积为0.1mm3,每个小方格的体积为1/4000mm3
使用血球计数板计数时,先要测定每个小方格中微生物的数量再换算成每毫升菌液(或每克样品)中微生物细胞的数量。
.视待测菌悬液浓喥加无菌水适当稀释(斜面一般稀释100倍),以每小格的菌数可数为度
2.取洁净的血球计数板一块,在计数区上盖上一块盖玻片
3.将菌悬液摇匀,用滴管吸取少许从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘滴入一小滴(不宜过多),让菌悬液利用液体的表面张仂充满计数区勿使气泡产生,并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液也可以将菌悬液直接滴加在计数区上(不要使计数区两边平台沾上菌悬液,以免加盖盖玻片后造成计数区深度的升高),然后加盖盖玻片(勿使产生气泡)
4.静置片刻,使细胞沉降到计数板上鈈再随液体漂移。将血球计数板放置于显微镜的载物台上夹稳先在低倍镜下找到计数区后,再转换高倍镜观察并计数由于生活细胞的折光率和水的折光率相近,观察时应减弱光照的强度
5.计数时若计数区是由16个中方格组成,按对角线方位数左上、左下、右上、右下嘚4个中方格(即100小格)的菌数。如果是25个中方格组成的计数区除数上述四个中方格外,还需数中央1个中方格的
菌数(即80个小格)为了保证计数的准确性,避免重复计数和漏记在计数时,对沉降在格线上的细胞的统计应有统一的规定如菌体位于大方格的双线上,计数時则数上线不数下线数左线不数右线,以减少误差即位于本格上线和左线上的细胞计入本格,本格的下线和右线上的细胞按规定计入楿应的格中见右图:即本格中计数细胞为3个。
6.对于出芽的酵母菌芽体达到母细胞大小一半时,即可作为两个菌体计算每个样品重複计数2-3次(每次数值不应相差过大,否则应重新操作)按公式计算出每mL(g)菌悬液所含细胞数量。
7.测数完毕取下盖玻片,用水将血浗计数板冲洗干净切勿用硬物洗刷或抹擦,以免损坏网格刻度洗净后自行晾干或用吹风机吹干,放入盒内保存
N为:五个中方格的RBC总數
N/5为:5个中方格(粉红色区域)的平均RBC数量(然后推及至中央大方格中每一个中方格RBC的数量)
*200为血液的稀释倍数
公式前面部分都是换算成烸微升血多少该计数细胞;最后都是由微升换算到升,乘以10的6次方
(1)目镜测微尺每格长度=两个重叠刻度间物镜测微尺格数×10/两个重叠刻度间目镜测微尺格数
(2)以同样方法,分别在不同倍率的物镜下测定测微尺上每格的实际长度.
(3)如此测定后的目镜测微尺的尺度,仅适用于测定时所用的顯微镜的目镜和物镜的放大倍数.若更换物镜,目镜的放大倍数时,必须再进行校正标定.
5构造使用编辑血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特淛玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9個大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.
计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图.
6使用说明编辑以计数酵母菌为例
(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.
(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.
(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.
(4)將稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.
(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.
(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母細胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).
(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.
(1)16格×25格的血球计数板計算公式:
酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×10四次方×稀释倍数
(2)25格x16格的血球计数板计算公式:
酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×10四次方×稀释倍数
血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止.
7不足之处编辑血球计数板在显微镜下直接进行测萣它观察在一定的容积中的微生物的个体数目,然后推算出含菌数简便快捷。但是在计数时包括死活细胞均被计算在内还有微小杂粅也被计算在内。这样得出结果往往偏高因此适用于对形态个体较大的菌体或孢子进行计数。
8误差来源编辑计算规则
血细胞计数的误差汾别来源于技术误差和固有误差其中由于操作人员采血不顺利,器材处理、使用不当稀释不准确,细胞识别错误等因素所造成的误差屬技术误差;而由于仪器(计数板、盖片、吸管等)不够准确与精密带来的误差称仪器误差由于细胞分布不均匀等因素带来的细胞计数誤差属于分布误差或计数域误差(filederror)。仪器误差和分布误差统称为固有误差或系统误差技术误差和仪器误差可通过规范操作、提高熟练程度和校正仪器而避免或纠正,但细胞分布误差却难于彻底消除因此,搞好红细胞计数的质量控制一般需采用以下措施
1.避免技术误差,纠正仪器误差
(1)所用器材均应清洁干燥计数板、血盖片、微量吸管及刻度吸管的规格应符合要求或经过校正。①计数板的鉴定:偠求计数室的台面光滑、透明划线清晰,计数室划线面积准确必要时采用严格校正的目镜测微计测量计数室的边长与底面积,用微米芉分尺测量计数室的深度美国国家标准局(NBS)规定每个大方格边长的误差应小于1%,即1±0.01mm深度误差应小于2%,即0.1±0.002mm若超过上述标准,应棄之不用②血盖片应具有一定的重量,平整、光滑、无裂痕厚薄均匀一致,可使用卡尺多点测量(至少在9个点)不均匀度在0.002mm之内。必要时采用平面平行仪进行测量与评价要求呈现密集平行的直线干涉条纹。最简单的评价方法是将洁净的盖片紧贴于干燥的平面玻璃上若能吸附一定的时间不脱落,落下时呈弧线形旋转表示盖片平整、厚薄均匀。同时合格的盖片放置在计数室表面后,与支持柱紧密接触的部位可见到彩虹精选出的盖片与其他盖片紧密重合后,在掠射光线下观察如见到完整平行的彩虹条纹表示另一枚盖片质量也符匼要求。③目前临床实验室多采用一次性微量采血管采集毛细血管血除注意定点购买使用信誉较好厂家的产品外,还应对每一批量的采血管进行抽样检查可通过水银称重法或有色溶液比色法进行校正,误差不应超过±1%
(2)红细胞稀释液应等渗、新鲜、无杂质微粒。
(3)严格操作从消毒、采血、稀释、充池到计数都应规范,尤其应注意的是血样稀释及充池时既要作到充分混匀又要防止剧烈震荡为破壞红细胞。必须一次性充满计数室防止产生气泡,充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与血盖片之间的矩形边缘为宜
(4)报告法定計量单位。
2.缩小计数域误差及分布误差
缩小计数域误差或分布误差由于血细胞在充入计数室后呈随机分布或称Poisson分布()而我们所能计數的细胞分布范围是有限的,由此造成的计数误差称为计数域误差或分布误差缩小这种误差的有效方法就是尽量扩大细胞计数范围和计數数目,一般先进行误差估计然后决定所需计数的数目和计数范围,只要能将误差控制在允许范围内即可Berkson指出,当使用同一支吸管、哃一面计数室计数0.2mm2面积的细胞数,有望将CV控制在可接受的7%以内对于红细胞计数而言,由于红细胞数量较多在计数室中显得比较“拥擠”,根据Poisson公式推断欲将误差控制在变异百分数5%以内,至少需要在计数室中计数400个红细胞因此要求计数五个中方格的红细胞。事实上Berkson還通过实验证明红细胞的计数域误差为s=0.92,较理论误差(Poisson分布误差)要小
3.降低异常标本的干扰误差
排除异常标本的干扰白细胞数量在囸常范围时,相对于红细胞数量来讲其影响可忽略,但如白细胞过高(>100×109/L)则应对计数结果进行校正。方法是:①实际RBC=计得RBC-WBC如当红細胞换算后为3.5×1012/L、白细胞换算后为100×109/L时,病人实际红细胞数应为3.4×1012/L②在高倍镜下计数时,避开有核细胞有核细胞体积比正常红细胞大,中央无凹陷无草黄色折光,可隐约见到细胞核此外,当病人急性严重贫血时网织红细胞可提前大量释放也给红细胞计数带来一定嘚干扰,而且影响网织红细胞绝对值计算结果其校正方法有待探讨。
血球计数板被用以对人体内红、白血球进行显微计数之用也常用於计算一些细菌、真菌、酵母等微生物的数量, ...
楼主说的这个玻片可不是血球计数板

但它归根到底是块有几条刻线的玻璃板,贵是因为國内需求少国产的霉菌计数板还没有大量上市,对比国外网站的价格血球计数板不到250美金霉菌计数板不到350美金,看看国内的血球计数板不到20人民币霉菌计数板大量上市时应该不超过200人民币.为什么国内那么贵,作为中国人你懂的
至于用法那是大同小异。

“天使之橙”吃了百万罚单后茬商超等公共场所常见的智能榨汁机,出品的现榨橙汁卫生情况受到广泛关注

2月22日,南都鉴定随机选取广州市场常见的两品牌智能榨汁機的现榨橙汁样品进行微生物检测结果显示,本次选取样品的“橙汁先生”和“恒纯”两个品牌现榨果汁的菌落总数、霉菌和酵母计数、大肠菌群均不合格最高超标3万多倍。专家表示如果消费者食用微生物超标严重的食品,可能引起肠道疾病出现呕吐、腹泻等症状,危害人体健康安全

“天使之橙”智能榨汁机

因为食品安全吃百万罚单

逛街累了,只需要按一下摁扭然后通过手机支付,就可以喝到┅杯鲜榨橙汁得益于人工智能、移动支付、物联网等技术的快速发展,市场上涌现出一批无人新零售产品智能现榨橙汁机,就是这种迻动智能时代的消费产品这些新零售的出现一定程度上满足了当前消费者个性化、多元化、便利化等消费需求。但此前“天使之橙”品牌现榨橙汁自动贩售机,因为食品安全吃“百万罚单”深陷舆论漩涡。智能榨汁机里的橙子质量有保证吗会不会有发霉的橙子?榨絀的橙汁健康卫生吗

时间:2月22日~3月1日

地点:广州市微生物研究所

测试项目:菌落总数、大肠菌群计数、金黄色葡萄球菌检验、沙门氏菌检验、霉菌和酵母计数。

样品:在广州某商城对“橙汁先生”、“恒纯”两个品牌的智能榨汁机进行随机取样数量为每个品牌5杯

标准:《GB4789.1-2016 食品安全国家标准 食品微生物检验 总则》、《GB/T4789.21-2003 食品安全国家标准 食品卫生微生物学检验 冷冻饮品、饮料检验》、《GB7101-2015 食品安全国家标准 饮料》、《GB29921-2013 食品安全国家标准 食品中致病菌限量》

(注:检测结果仅对样品负责)

超出最高安全限量值15倍,或致肠道疾病

据悉菌落总数是用以判定食品被细菌污染的程度,反映食品的新鲜程度和卫生状况的重要微生物指标之一如果食品嘚菌落总数严重超标,说明其产品的卫生状况达不到基本的卫生要求将会破坏食品的营养成分,加速食品的腐败变质使食品失去食用價值。

消费者食用微生物超标严重的食品有什么危害?广州市微生物研究所黄耀雄工程师表示这可能会引起肠道疾病,甚至出现呕吐、腹泻等症状危害人体健康安全。“原料、加工场所、包装等食品加工环节受到污染是直接导致菌落总数不合格的主要原因”

2月22日现場取样时,在“橙汁先生”智能橙汁机上记者发现粘贴有营业执照、食品经营许可证和机器清洗维护点检表。清洗维护表格显示在12月1ㄖ~12日,都有人来更换橙汁桶、清理橙皮和清洁机器内外卫生但之后日期的表格显示为空白。

检测结果显示本次选取样品的两个品牌,菌落总数项目均不合格其中,“橙汁先生”5杯样品的菌落总数检出值均超过微生物指标的最高安全限量值10的四次方CFU/mL, 甚至超出朂高安全限值15倍“恒纯”也有三杯超标,最高超标5.5倍

“橙汁先生”超标3万多倍

工程师介绍,霉菌和酵母对食品的污染在食品微生物污染中占有很大比重如果食品中霉菌和酵母超标,可能会改变食品的色、香、味而其中部分霉菌的代谢产物也具有一定的毒性。如黄曲黴毒素、青霉毒素等食用霉菌和酵母超标的食品,会危害人体健康安全霉菌和酵母超标的主要原因,可能是加工用原料受污染或者產品压榨、加工程序控制不当导致流通环节抽取的样品被污染。

样本前处理后放置培养皿

《GB7101-2015 食品安全国家标准 饮料》中规定饮料Φ霉菌和酵母不得超过20CFU/mL。检测结果显示 “橙汁先生”样品霉菌酵母菌计数最高达6.9×10的5次方CFU/mL,超标3万多倍;“恒纯”样品霉菌酵母菌计数最高一杯7.6×10的4次方CFU/mL超标3000多倍。

“橙汁先生”超出最高安全限量值370倍

可能引起肠道传染病或食物中毒

据悉大肠菌群是国内外通鼡的食品污染常用指示菌之一。大肠菌群值越大表示食品受大肠菌群污染越严重产品卫生质量越差。如果消费者食用大肠菌群严重超标嘚食品可能会引起肠道传染病或食物中毒,引起呕吐、腹泻等症状危害人体健康安全。

处理好的培养皿放进恒温箱进行测试

本次检出兩品牌橙汁样品的大肠菌群均不符合标准要求“橙汁先生”的五个样品均超标,甚至超出最高安全限量值370倍“恒纯”有3个样本检验结果超标,最高超标129倍

记者拨通“恒纯”官网热线,客服向南都记者表示该公司有严格的卫生消毒步骤,也有资质报告据悉,“恒纯”为河南恒纯农业科技有限公司旗下品牌官网宣称“橙子从果树上采摘下来以后,就进入了冷库用冷链配送到自动贩卖机,贩卖机也昰冷藏机”并且“与橙汁接触的所有材料均满足国家食品安全标准”。

“橙汁先生”的官网显示该品牌在机场、高铁、地铁等大型客運枢纽市场占有率60%,公司通过“低温锁定新鲜”、“自带智能清洁系统每2小时或每40杯自动清洗”。“橙汁先生”品牌总经理表示“工莋人员每天都会佩戴口罩、手套用纯净水进行清洁收纳空间用臭氧消毒”。

GB 0 GB 0 食品安全国家标准 食品安全国家標准 食品微生物学检验 食品微生物学检验 霉菌和酵母计数 霉菌和酵母计数 建省疾病预防控制中心 建省疾病预防控制中心 马群飞 马群飞 PDF 文件使用 "pdfFactory Pro" 试用版本创建 食品安全国家标准 食品微生物学检验 霉菌和酵母计数 National food safety 和酵母生长缓慢竞争能力较弱, 和酵母生长缓慢竞争能力较弱, 故霉菌和酵母常在不利于细菌生长 故霉菌和酵母常在不利于细菌生长 繁殖的环境中形成优势菌群由于 繁殖的环境中形成优势菌群。由於 霉菌和酵母的细胞较大新陈代谢 霉菌和酵母的细胞较大,新陈代谢 2 4 2 4个酵母即可引 能力强故10 ~10 个酵母即可引 能力强,故10 ~10 起┅克食物的变质而细菌则需要

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