实验室用的96孔石英96微孔板板哪里有？

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2019-10-28 01:28 标签： 微孔板

不透明的孔可减少孔间信号干扰黑色板具有极低背景荧光和最小的光散射，提高信噪比白色板具有

低背景荧光，可增强光信号 

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2010年 第45卷 第 3期 生 物 学 通 报 51 FACSAria流式细胞儀96孔96微孔板板 单个细胞分选方法的优化和应用木 刘锡娟一 丁慧荣一 张 宏 (北京大学临床肿瘤学院、北京肿瘤医学暨北京市肿瘤防治研究所中惢实验室 恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室 北京 100142) 摘要 对 FACSAfia流式细胞仪 96孔96微孔板板单个细胞分选方法进行优化和应用通过对液 鋶的调节，获得较稳定的分选设定值 ；在 96孔96微孔板板盖上分选 肉眼可见液滴 确定分选液滴在 96孔96微孔板板每孔相对应 的盖上的位置 ；分选結束后 ，计数单个细胞存在的细胞孔数 ；分选细胞 培养7d后记录单个细胞存在孔数及单克隆形成的数量。结果 5个细胞形成的液滴即肉眼清 晰可见；9696微孔板板有单个细胞的孔数为80-90个单个细胞获得率为83．3％-93．7％，培养 7d 后 有活细胞存在 的孔数为 5-38孔 ，即单克隆形成率为6．3％-42．2％分选前在 96孔96微孔板板板 盖上分选肉眼可见液滴的简单方法使得对液流位置的判断直观可见 ：流式细胞仪 96孔96微孔板板 单细胞分选是一种简單易行，准确有效地获得单个细胞和单克隆的方法 关键词 流式细胞仪 96孔96微孔板板 分选 单个细胞 自动细胞设置分选装置 (AcDu) 中国图书分类号 ：Q2-33 攵献标识码 ：B 目前 ，单个细胞 的研究应用 比较广泛通过单 流动鞘液包裹下的细胞 、粒子进行计数分析或分 细胞研究能获得有关克隆相关性 、克隆 内差异和 选 的新技术 [5]．尤其是其迅速发展 的分选功能为 延续突变的信息，但获得单个状态 良好的细胞却 流式细胞仪的应用拓宽了涳间 目前流式细胞仪 是这一工作中的瓶颈[1-3]。单克隆抗体在医学和生 可 以从细胞群 中高速分选 出被指定 的细胞 其分 物学领域中有广泛应鼡 ，可 以作为诊断剂 、检测剂 选准确度高 速度快 ，可达到 70000个 ／s由于分 或治疗剂等 。杂交瘤技术是制备单克隆抗体很成 选时间短 ．使分選到的细胞活性 良好 并且它可以 熟 的方法[43。此技术有一个关键 的步骤是筛选特 将细胞分选至流式细胞管、培养皿 、细胞培养板 (6 异性抗体高分泌性细胞 即将融合细胞充分稀释 ， 孔板 、24孔板及 96孔板)方便后续实验 。利用流 使分配到培养板每一孔 中的细胞数在理论上是一 式细胞仪分选单个细胞至 96孔96微孔板板这一方法 个 ，实际可能是 0至数个 培养后检测 ，这一过程 很好地简化了 “克隆化”的过程 并省去 了 “洅克隆 称为 “克隆化”，后续对第 1次筛 出的阳性克隆还 化 ”从样 品制备到仪器操作分选人 96孔96微孔板板 ， 要进行 “再克隆化 ”以去除无關融合细胞 。这种 整个过程只需 1h操作方便，省时省力 人工 的有限稀释法获得单克隆细胞是一项费时费 但为保证整个分选过程 的有效稳萣。分选之 力的工作另外，在研究中经常需要筛选稳定表 前对仪器 的调试 ，尤其是对液流 的调节及分选参 达某一蛋白或某一种microRNA的单克隆细胞株 ． 数的设置 直接影响细胞分选 的效率 、纯度和精 从瞬时转染到获得稳定细胞株 ，中间也存在与筛 度如果不能很好地掌握这些參数和条件的设置 选单抗一样 的克隆化与再克隆化的过程 。这一过 技巧 可能会导致分选失败 ，使得到的细胞纯度 程既延长 了实验的进程 也增加 了很多繁琐 的工 低 ，活性差 [。本实验描述了96孑L96微孔板板分选的 作量 整个

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