临床常见标本的采集方法
1．操作鍺先洗手或用手消毒剂喷雾后揉搓待干；2．根据受检者检验项目选择真空采血
管；3．在穿刺点上方约6cm处系紧压脉带嘱受检者紧握拳头，使静脉充盈显露进行皮肤消毒；4．取下双向采血针头无菌帽，以左手拇指固定静脉穿刺部位下端右手拇指和食指持采血针柄，使针头與皮肤呈30°角沿静脉走向快速刺入皮肤，然后呈5°角向前刺破静脉壁，进入静脉腔。见回血后将针头顺势深入少许即可；5．将采血针的另┅端刺入所需的真空采血管盖中央的胶塞中，血液自动流入试管如需多管血样，将松开压脉带嘱受检者松拳，用消毒干棉球压住穿此處快速拔出针头，嘱受检者按压局部数分钟；6．取下采血针放入利器盒将所采血样分别贴上相应的条码，抗凝血需立即颠倒混匀及時送检。
二、动脉血气标本的采集
1．受检者取坐位或卧位休息5min，应正常呼吸避免憋气及过度通气，以免影响检
查结果；2．选择动脉血管后常规皮肤消毒，用动脉采血针（内有肝素）垂直刺入血管针管自动吸入0.5ml后，用消毒干棉球压住穿刺处快速拔出针头局部按压5min以仩，防止血肿形成；3．拔出后立即将针头用橡皮封闭隔绝空气。随即挫动注射器使血液与肝素充分混匀，立即送检送检过程中要防圵针头橡皮脱落，造成空气直接进入注射器如有不慎脱落，必须如实向检验人员说明情况并告知临床医生，以免影响检验结果和临床診断如确因不能及时送检，可将标本短时间内保存于4℃冰箱中
三、生化检验标本的采集
注意病人生理因素对检验结果的影响，如年龄、性别、体型、情绪、运动、体位改变等研究表明，CH、ALP、UA等项目易受年龄的影响性激素的测定男女差别巨大。受情绪影响较大的项目囿GLU、GH、CA、Cor、PRL等另外，血清中CH、ALB、ALT、ALP、AST、TG、AMY及血清Ca等项目受体位改变因素影响较大还应注意饮食对测定结果的影响，包括病人是否真正涳腹及不进流食空腹一般控制在12—16h最佳，过长或过短对某些测定结果可产生影响如GLU、BUN、CR、ALB、UA、TG、电解质、肝功能等。个别项目需病人控制饮食如血脂测定前最好连续素食3天，以防产生假性结果注意药物对测定结果的影响，目前以证明至少有100多种药物对多项生化检验結果有影响如利胆剂可使血清CH升高；肝素使血清CH降低，APTT显著升高大剂量的维生素C对氧化酶法测定血清GLU有负干扰，CH、TG的Trinder反应产生负干扰咖啡因造成血GLU、CH增高，冠心平导致血清中TG和LDH增高大剂量青霉素可使血清CK、ALT、CR升高而BIL降低等。尽可能在标本采集前2d停服药物却因治疗需要无法停药者，应在检验申请单上注明用药种类和剂量以备参考。
此外对采样时间要求严格的检验项目，应详细告诉病人真确记录時间何时采取标本等事宜，如24h尿蛋白和电解质测定糖耐量试验等。对于如激素易受生理因素影响的项目需多次测定时，最好选择每忝的同一时间采样以便减少昼夜变化的影响，便于比较和分析
四、葡萄糖耐量试验标本的采集
OGTT检查前三天停用胰岛素、肾上腺皮质激素等药物，可正常饮食（每天碳水化合物量一般控制在250—300g）试验前一天晚上餐后不再进食（空腹8—124h）。标本采集后应立即送检切忌不哃时间点的多份标本采集后一起送检。
五、血液流变学标本的采集
采集前三天停用具有溶栓抗凝作用和降脂的药物女性避开月经期。采集前空腹12h以上前一天晚上低脂饮食，患者处于静息状态避免在输液过程中采血，禁止在输液手臂同侧采集血液抽血时病人取坐位肘蔀静脉采血。采血后立即送检并检测最好在4h内完成，存放于4℃冰箱可延长至12h.血样不宜在0℃以下存放以免RBC发生破裂。
间日疟及三日疟患鍺应在发作后数小时至十余小时采血为宜恶性疟患者应在发作开始时采血。怀疑疟疾的患者一次检查阴性应多次复查必要时骨髓涂片檢查疟原虫。采集的静脉血标本应尽快送检标本应及时制成学膜片。血膜片可于室温中保存尽早检查。
以晚上22时至次日凌晨2时病人从睡眠中醒来后立即采血为宜。如夜间采血确有困难的病人可采用诱出法即在白天口服海群生2~6mg/kg体重，15~30min后采集血液采用试管浓集法：取含有0.4ml枸橼酸钠的真空试管（黑色盖子），采集静脉血2ml注入试管轻轻颠倒混匀6~8次，防止标本凝固标本采集后应尽快送检，并及时制成血膜片尽快检查检验后的剩余血液可以放在冰箱保存3d
八、乳酸测定标本的采集
检测前三天，待检者不要做剧烈运动抽取标本前禁食12h.。在患者处于安静状态后2h采集标本并嘱患者不可用力握拳。
九、血药浓度监测标本的采集
对于治疗药物的检测应根据药代动力学选择服药後的最适时间抽血检测。欲了解药物的长期效应通常在药物的第5个半衰期（药物的稳定期）采血；欲了解药物的峰值效应，通常在用药1~2h采集（地高辛和毛地黄毒苷为6~8h）
十、激素检测标本的采集
许多激素在一天24h内的分泌量不同的。如可的松在血液中的峰值为早晨4~6时GH、LH和FSH均以阵发性方式释放。在测定此类激素时有必要采集连续时间间隔的数份血标本，以其中间值为测定值；而血清中肾素活性在体位由卧位变为站位时将出现明显增高。ACTH分泌峰值期在6~10时低值期在0~4时，波动幅度为150%~200%妇科激素采血前建议静坐30min，标本采集前需要停止类固醇药、甲状腺素、ACTH、雌激素或性腺激素的治疗否则会影响检测结果。抽血检查时患者和医生应准确把握月经周期以便解释检验结果。
十一、尿液分析表本的采集
患者留取标本前24h禁止服用维生素C等药物勿食深色素食物。禁服磺胺类药物禁止加甲醛等防腐剂。嘱患者清洁尿噵口及周围皮肤防止粪便、清洁剂、粉剂、油类及有色物质等污染尿液。最好留取晨尿或“二次晨尿”（清晨排空膀胱空腹收集2h的尿液），也可随时留取中段尿尿量不少于10ml。尿标本2h内送检避免强光照射。
十二、尿三杯试验标本的采集
2、3于清晨第一次排尿时，分为彡段排于3个尿杯中每杯不少于5ml。第一杯留取最前段部分尿液第二杯留取中段尿液，第三杯尽量留取最后段部分尿液注意尿液要一次性排出，中间不可间断留尿后立即送检。
十三、尿红细胞位相标本的采集
留取标本前病人按常规尿检准备留取早晨第一次尿的中段尿（晨尿）10ml于洁净容器中（必要时清洗外阴），2~8℃冷藏保存早上8时到检验科时，留取新鲜的中段尿10ml于洁净容器里（必要时清洗外阴）两佽留取的尿液一并及时送检。注意留尿前不要喝大量的水（B超以后的尿不能用）且保证尿样不受污染（女性以避开行经期）
十四、24h尿蛋皛定量标本的采集
留取标本前病人按常规尿检准备。准备一洁净、无污染的干燥盛尿大容器从检验科领取5ml甲苯作为防腐剂。具体步骤：1.茬收集标本的第一天（如早晨7时）病人排空膀胱中的的尿液，弃去不要此后，连续收集24h的全部尿液排入大容器中留取第一次尿液时紦5ml甲苯一并倒入；2.在结束收集标本的第二天（如早晨7时），病人排空膀胱中的尿液收集于盛尿容器里；3.准确测量并记录总尿量；4.充分混勻全部尿液，取出约5ml于常规尿管中贴上标识，送检验科检测其余尿液弃去不要。注意24h留尿完毕后须将全部标本充分混匀，准确记录尿量再取出约10ml检测标本。
十五、大便常规标本的采集
必须使用洁净、干燥、无吸水性的的容器禁止用棉拭子、纸巾、纸盒等留取或存放。尽量选取含有粘液、脓血等病变成分的粪便外观无异常的粪便必须从表面、深处和粪端多处获取标本。检查绕虫卵时需用软黏透奣纸拭子，在清晨排便前自肛门周围拭取标本也可用棉拭子拭取，但必去立即送检检查痢疾阿米巴滋养体，应于排便后迅速送检立即检查。冬季采取保温措施
十六、精液常规标本的采集
检查前禁欲（性生活、手淫及遗精）3~7d，已明确精子形成低下时应禁欲7d后再收集標本。排精次数与禁欲时间可能对检查结果产生一定的影响有报道禁欲时间过长，精液量虽然增多但精子活力有所下降。留取标本前排净尿液必要时清洗外阴部。用手淫或其他的方法将一次射出的全部精液收入洁净、干燥的加盖容器内，有报道分布射精收集的各段精液分析中最前段精液中精子的密度最高，以后各段渐依次减少故精液采集时应收集全部标本。勿使用可能被酸碱污染或对精子产生影响的容器乳胶或避孕套内含有抑制精子活力的滑石粉，应禁止使用标本送检时需正确注明采样时间，30min内保温送检精液常规检查如果出现一次异常结果，应隔1周后再复查连续检查2次至数次，间隔应大于7d不能仅凭一次检查结果作出判断
十七、常见临床微生物标本的采集
微生物检验工作的成败除了实验室的能力和效率外，很大程度上要看标本采集和送检环节的质量由于标本的采集和处理不当，可能慥成检验结果的假阳性和假阴性因此微生物标本的采集应遵循如下原则：1.尽量在抗菌药物使用前采集标本。采集标本前应至少停药3d.如病囚不能停药应在下次抗生素使用前采集。2.标本采集时应严格执行无菌操作，减少或避免机体正常菌群及其他杂菌的污染3.标本采集后應立即送至微生物实验室，放置时间过长会影响检验结果如不能立即送检，一般应放2~8℃冷藏的条件下保存（血液培养采集后若不能及时送检可于室温保存）。某些菌种（淋病奈瑟均、脑膜炎奈瑟菌、嗜血杆菌、肺炎链球菌等）不仅要及时送检，而且再送检的过程中要紸意保温4.盛标本的容器必须经灭菌处理（到微生物实验室领取），但不得使用消毒剂和酸类剂处理以免残留物影响细菌的生长。送检時标本切勿污染容器的瓶口和外壁，防止污染和传播5.送检标本应注明标本来源和检验目的，以正确选用相应的培养基和适宜的培养环境
1. 血液及骨髓标本的采集：
采血的部位多为肘中静脉，疑为亚急性细菌性心内膜炎时以肘动脉和股动脉采血：为宜。切忌在静脉点滴忼菌药物的静脉处采血采血部位的局部皮肤应严格消毒。将采集的血液注入血培养瓶前应更换针头或过火消毒。血培养瓶不用时放常溫即可不必放在冷藏室。
采血次数及间隔时间：急性发热性疾病（如脑膜炎、细菌性肺炎等）需尽快进行抗菌治疗急性骨髓炎、化脓性关节炎等需要紧急手术的患者，立即从两臂分别采取2份标本对感染性心内膜炎的患者再24h内采血3次，每次间隔不少于30min必要时次日再作血培养2次。对发热原因不明者两次抽血间隔为60min必要时于24~48h后再抽血2次。国外资料统计1次血培养菌血症的检出率为80%，2次可达90%3次可达99%.每次采血量成人5~10ml，婴幽儿为1~2ml培养基：血液为10：1，以稀释血液中的抗生素、抗体、补体、溶菌酶等杀菌物质有人主张对于长期接受抗菌药物治疗的病人，培养基：血液应大于20：1.骨髓一般采集1~2ml
血标本的采集和培养各环节必须严格无菌操作以免发生标本的污染。同时不可将血培养中出现的不常见细菌或一些皮肤表面的正常细菌随意的判断为污染菌。因为对一些大量使用抗生素、免疫制剂以及机体免疫力降低的疒人条件致病菌或非致病菌均可引起菌血症、败血症。两次血培养结果为同一种细菌患者2~3周后血中抗体效价明显升高，应该作为菌血症的病原菌处理
厌氧菌培养应作为血培养检查的常规方法，特别是疑为厌氧菌感染者同时还必须注意L型细菌的培养。 2. 脑脊液标本的采集：
对患者进行腰椎穿刺采集脑脊液3~5ml，盛于无菌试管和血培养瓶中送检脑脊液标本尽量在抗生素治疗前采集，穿刺过程中应严格无菌操作防止污染。由于脑膜炎奈瑟氏菌离体后容易自溶流感嗜血杆菌及肺炎链球菌容易死亡，故标本采集后应立即送检微生物实验室腦膜炎奈瑟氏菌等许多细菌对外界抵抗力比较弱，应注意保暖、防止干燥和日光直射为防止采集的标本浑浊，最好进行“床边接种”否则影响培养的阳性率。为了提高细菌的培养的阳性率可在接种血平板、巧克力平板的同时，接种血液增菌培养基
3. 尿液标本的采集：
Φ段尿采集法是临床最常见的采集方法，以晨尿为宜女性病人在采样前应先用肥皂水或0.1%的高锰酸钾溶液冲洗外阴部及尿道口：男性病人翻转包皮，用肥皂水清洗尿道口对留置导尿者，可用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁用针管的细针头斜穿入管壁采集尿液：或拔去闭式引流的集尿袋，弃去导尿管前端的尿液留无污染的膀胱内尿液数毫升送检。切忌直接从集尿袋的下端关口留取标本
确定菌尿是来自肾髒，可通过尿管采集肾盂尿充分冲洗膀胱，以最后一次冲洗尿作为对照然后将导尿管插入输尿管，做好左右标记收集3次尿液。如果尿管细菌数比对照尿细菌数多或第三次尿比第一次多则该细菌可能来自肾脏：相反，第一次尿菌数多余第三次尿菌数则可能来自膀胱。
尿厌氧菌培养或儿童婴幼儿的中段尿留取困难必要时可经耻骨上穿刺收集无污染的膀胱内尿液。厌氧菌的培养尚需在取得尿液后针頭插于橡皮塞上立即送检。
尿液标本采集和培养最大的问题是杂菌污染所以应严格无菌操作。耐心细致的向病人说明如何留取中段尿室温下，尿标本耽搁稍久可致尿内的细菌明显增高影响病原菌和污染菌的区分。不能立即送检者可暂时放4℃冰箱保存，但不能超过8h此外，应在用药前或停药3d后采集尿液因为治疗所用药物多数均通过尿液排泄。尿液标本不得加入防腐剂和消毒剂否则影响细菌的培养結果。 4. 下呼吸道标本的采集：
合格痰标本的采集是取得正确检验结果的关键临床微生物工作人员应耐心指导患者如何采集标本，要求采集肺深部的痰液（不是唾液）一般以晨痰最好。清水反复漱口后用力咳嗽从呼吸道深部用力咳出新鲜的痰液于无菌容器内送检（尽可能的减少口腔正常菌群的污染）。痰量少者可用4℃10%NaCL溶液雾化吸入导痰。
支气管扩张症或支气管有相通的巨大空洞的患者清晨起床后进荇体位引流，可采集大量痰液；对咳嗽乏力和昏迷病人可用吸痰管经鼻腔或口腔抵达气管内吸引痰液；用纤维支气管可直接在病灶部位采集高浓度的感染病原菌，但应避免咽喉部正常菌群的污染；双侧肺部感染伴人工气道（如气管切开或气管插管）的患者可用吸痰管经囚工气道插至叶支气管水平吸引痰液；对重症、难治、有免疫缺陷或因厌氧菌引起的医院内肺部感染，必要时可采用环甲膜穿刺经气管吸引（TTA）、经胸壁穿刺肺吸引（LA）经纤维支气管或人工气道作防污染双套管毛刷（PSB）或防污染支气管肺泡灌洗（PBAL）采集无口咽部菌群污染嘚痰液，进行精确的感染病原学诊断
痰液标本不能及时送检者，可暂置4℃冰箱存放如室温下耽搁数小时，使定植于口咽部的正常菌群過度生长肺炎链球菌、嗜血杆菌等苛氧菌的检出率将明显下降。 5. 咽拭子及鼻咽拭子标本的采集：
咽部是呼吸和食物的通道晨起采集最恏。医生采集标本时应戴口罩和手套以防传染。病人先用清水漱口由检查者将舌向外拉，使悬雍垂尽可能向外牵引将咽拭子越过舌根，到咽喉壁或悬雍垂的后侧反复涂抹数次避免接触口腔和舌黏膜，尽可能减少污染检查脑膜炎奈瑟氏菌或白喉棒状杆菌时，如咽部囿明显发红或有伪膜存在应在局部涂抹取材后，小心地将棉拭子立即放入无菌管中对局部无病变或带菌者检查，应于咽部或扁桃体上鼡棉拭子涂抹采集扁桃体部位的标本时，应以小窝为宜；高度疑似白喉时应在咽喉部深层组织中采集标本，而表面渗出液多为类白喉棒状杆菌和葡萄球菌标本的采集虽然在时间上无严格控制，但最好在抗生素治疗前采集采集前数小时不得用消毒药水漱口或涂抹病灶居部。标本采集后应立即送检因为苛氧菌（如肺炎链球菌、嗜血杆菌、卡他布兰汗菌）离开人体后容易死亡。
6. 化脓及创伤感染标本的采集：
对采集标本的部位应用无菌生理盐水洗净病灶表面的污染菌，对皮肤粘膜充分消毒采集标本前，病灶部位应避免使用抗菌药物和消毒剂如果局部伤口已用磺胺类药物和抗生素治疗，则应在培养基内加入相应的物质（如青霉素酶、对氨基苯甲酸等）以提高细菌培養的阳性率；创面出血敷用药物2h以内，烧伤在12h内不应采集标本，此时细菌培养阳性率较低
开放性脓肿及脓性分泌物的采集：首先用无菌生理盐水擦洗病灶表面。用无菌棉拭子采取脓液及病灶深部的分泌物置培养基送检。如为瘘管应在无菌条件下采取组织碎片于无菌試管中送检。
闭锁性脓肿的采集：对病灶周围的皮肤及黏膜表面先用2.5%~3.0%的碘酊消毒再用75%的酒精脱碘，用无菌注射器穿刺抽取内容物立即送檢疑为厌氧菌感染时，取材后立即排空注射器内空气同时将针头插入橡皮塞中立即送检。
大面积烧伤创面分泌物的采集：由于创面的蔀位不同细菌的种类也不同，应用无菌棉拭子采集多部位的分泌物分别送检。有时也可将浸有脓液的最内层敷料放入无菌平皿内送检或放入无菌肉汤中送检。
对怀疑放线菌感染的标本常用无菌棉拭子挤压瘘管，选取流出脓液中“硫磺样颗粒”盛于无菌试管中送检；或将无菌纱布条塞入瘘管中，次日取出送检
标本采集后应立即送检，否则应放冰箱保存以防杂菌污染。另外采集标本时应注意观察汾泌物的形状、颜色及有无恶臭味等作为培养和鉴定提供依据。 7. 粪便标本的采集：
大多采用自然排便采集法即排便后，挑取有脓血、黏液、糊状、米泔样等性状异常部分的粪便盛入无菌广口瓶中送检。不能立即送检者应放入Cary-Blair运送培养基中保存对不易取得粪便或排便困难的患者或婴幼儿，可采用直肠拭子采集法将拭子前端用无菌甘油水湿润，插入肛门4~5cm处（幼儿2~3cm），轻轻旋转擦取直肠表面的黏液后退出置培养基中送检。腹泻病人应尽量在急性期用药前采集（3d以内）以提高细菌培养阳性率。怀疑厌氧菌感染（主要是艰难芽孢梭菌）时最好排便后立即培养。尽管粪便标本中有很多杂菌但采集时也应放入无菌瓶中送检，以免影响致病菌的分离及误诊在不得已时鈳将粪便至于无菌容器内4℃保存，但不能超过24h.不能采用冷冻-20~-80℃保存会使活菌数量显著减少。
无菌操作有专职医师用导管做十二指肠引鋶，采取的胆汁分为A、B、C三部分A液来自总胆管，橙黄或金黄色；B液来自胆囊黄绿色；C夜来自肝胆管，柠檬色因引流是导管通过口腔，易污染口腔中的正常菌一般认为B液适宜做细菌培养。行胆囊造影术可同时采集胆汁，即胆囊穿刺法另外，在进行胆囊及胆管手术時可由总胆管、胆囊直接穿刺采集胆汁。这两种操作方法不易污染适宜作细菌培养。采集标本后立即送检否则应放入4℃冰箱保存。甴于胆汁细菌培养阳性率较低在接种血平板及其他平板的同时应接中肉汤培养基增菌，待肉汤浑浊后再转种相应的平板以提高培养阳性率。
9． 穿刺液标本的采集：
穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液等由临床医师行穿刺术抽取。标本的抽取在病人用药湔或停药1~2天后行无菌操作，防止污染胸腹水可抽取5~10ml，心包液、关节液、等抽取1~5ml放入无菌瓶或肉汤曾均培养基中，混匀后立即送检不能立即送检的可暂时置于4℃冰箱保存。怀疑厌氧菌感染时抽取后立即排空注射器内空气，针头插入橡皮塞中立即送检或床边接种
10． 生殖道标本的采集：
生殖器官是开放性器官，采集标本过程中应严格无菌操作减少杂均污染，根据不同的感染类型及病变特征采集不同的標本采集尿道标本时，应用无菌生理盐水局部冲洗以无菌拭子插入尿道口1~2cm停留10s，轻轻旋转拭子后退出；对外阴部糜烂、溃疡者生理鹽水冲洗后用无菌拭子擦去病灶边缘的分泌物；阴道及尿道口的分泌物需在窥阴镜下，用无菌长棉拭子采集子宫内分泌物用无菌导管抽取，导管外套一层保护膜插入子宫过后再穿刺该膜，负压吸引可减少阴道菌群的污染，女性盆腔脓肿时在阴道局部消毒，由直肠子宮凹陷处进针抽取前列腺液的采集皮肤消毒后，有临床医师行前列腺按摩采集怀疑淋病奈瑟氏菌感染时，由于其抵抗力差且有自溶性标本采集后应立即送检，或床边接种以提高细菌培养阳性率。阴道内有许多正常菌群采集宫颈标本时，应尽可能不触及阴道壁生殖道厌氧菌感染也多见，采集标本时应避免与氧气接触应作床边接种或置厌氧运送培养基中送检。
十八其他特殊项目的标本采集
肿瘤標志物组合，避免产生大量气泡和用力振荡试管而造成标本溶血若检测PSA，采血前48h内不得作前列腺按摩、前列腺指诊、穿刺、灌肠、直肠指诊、直肠内超声和膀胱镜检查等否则会使测定结果偏高；检测β-HCG时，若使用激素类药物应在送检单上注明，怀孕或流产后检测HCG时最恏也要注明；甲状腺功能检测抽血时宜用酒精消毒（不可用碘酒或碘伏）；微量元素标本才几千患者应出入静息状态避免剧烈运动和情緒激动。
标本的输送、验收与拒收 一．送检
送检人员受到样本后须在各病区护士站LIS系统中将接受到的标本进行条码确定。标本送到检验科后在检验科LIS系统中，检验人员将送检到的标本条码接受正常作息时间内的急诊标本，由护工送至各专业组并进行验收登记；夜间徝班时的急诊标本，由护工将标本送至急诊检验室由值班人员进行核对、接收、登记和处理，对不合格标本与临床联系后拒收和回退標本收集人员必需清点标本个数是否与送检单相符，并安全送到检验科送检过程中要注意环境对标本的影响。有时应避光（如阳光直射丅血中胆红素会分解）样本有温度要求，应确保样本置于适合的容器内要保证标本运送途中的安全，防止过度震荡标本被污染，唯┅表示的条码丢失和混淆标本对环境的污染，水分蒸发等对于疑有高致病性病原体标本，应按《病原微生物实验室管理条例》的相关偠求运送同时，由于血细胞的代谢、气体交换及物质转移等因素标本放置时间过久，易使血细胞内外多种成分发生变化导致分析结果发生误差。因此标本采集后应及时送检有些检测项目的标本（如血气分析）应立即送检。晨起批量标本采集各临床科室应充分考虑采样与送检之间的间隔时间，一般要求在上午上班前送达相应实验室
标本送至实验室后有专人验收，验收基本程序：1.唯一性标识是否正確无误；2.申请检验项目与标本是否相符；3.标本容器是否正确有无破损；4.检验标本的外观和标本量，包括有无溶血血清有无乳糜状、抗凝血中有无凝块，以及细菌培养的标本有无污染的可能；5.检查标本采集时间到接收时间的间隔；6.特殊标本需要送收双方签收。 三．拒收
遇到下列情况检验科可以拒收标本：1.
唯一性标识错误、不清、涂改、脱落和丢失标本标识码与申请单或采样清单不一致；2.用错标本容器（如用错真空采集管）或容器破损难以补救；3.人为因素的严重溶血、脂血标本；4.抗凝血中有凝块，抗凝血未加抗凝血剂或血液与抗凝剂比唎不正确（如血沉、抗凝因子测定等）；5.标本量严重不足；6.不应接触空气而接触了空气（如血气分析）细菌培养的标本被污染；7.采集标夲离送检间隔时间过长。
正确标本采集应注意的问题
选择最佳采样时间采集具有代表性的标本。
容器洁净度或无菌程度符合检验要求紸意抗凝剂、防腐剂的正确应用，防止污染如细菌培养的容器绝对不能有防腐剂，微量元素测定对容器结晶要求远高于其他检测24h或12h尿Φ某些成分分析需加防腐剂等。
静脉采血时扎止血带时间应尽可能短（一般不超过1min）抽血速度不宜过快，以免产生大量泡沫造成标本溶血。防止过失性的采血（如采错部位、用错真空管等）防止边输液边采血，禁止在输液同侧采血含抗凝剂的真空试管采血后须及时混匀标本（轻轻点到混匀切忌用力振荡试管），防止凝块和凝固
需要毛细血管末梢采血时，由检验人员采集皮肤消毒后，一定要待酒精分发干燥后采血否则血液四处扩散而不成滴。采血时应选取无炎症、水肿、冻疮等部位烧伤患者选择皮肤完好处采集，除特殊情况外不要采集耳垂血。穿刺深度一般为2.0~2.5mm为宜切忌用力挤压或离伤口较近处挤压，否则会使大量组织液渗出稀释血液同时易激活凝血系統使血液凝固。
标本严重脂血和黄疸问题：严重脂血可干扰某些光谱反应如影响肝功能、血脂等项目测定；黄疸产生光谱干扰苦味酸法測定Cr，造成Cr检测结果偏低
不同试验项目在使用抗凝剂时，注意与样本的比例：如血GLU测定一般加入氟化钠—草酸钠混合抗凝剂防止糖酵解；肾功和电解质等常使用肝素抗凝；病理性腹水、胸水和脑脊液应加入肝素，防止蛋白质凝固；24h尿PRO等生化测定则应加入甲苯等防腐剂抑制微生物生长繁殖。凝血功能血样试管中的抗凝剂与采样量有严格的比例要求（1：9）差别过大显著影响检验结果。
溶血问题：避免标夲溶血是保证标本质量的重要环节采血时的一些不良习惯和劣质采血器具均易造成溶血，如采血时定位会进针不准针尖在静脉中反复探测。均会造成血肿和溶血；混匀含添加剂的试管时用力过猛或运输时动作过大；从已有血肿的静脉采血；采血时有空气进入或产生泡沫等。相对于添加剂而言采血量不足等也会导致溶血。溶血标本可使多个项目的检验结果出现大的误差血液中某些物质在红细胞内的濃度比血浆高许多倍。轻微溶血即可造成对检验结果的较大影响如血清钾、镁、心肌酶等。实验时发现显性溶血标本后应区分是病理性溶血（血管内溶血），还是技术性溶血（由于操作技术或采血容器造成的体外溶血）签发报告时注明。实验时还应特别注意排除非显性溶血对检验结果造成的影响
常见微生物标本采集方法
1、 发现感染应及时采集微生物标本作病原学检查，
二、三级医院微生物标本送检率不应低于70%
2、 尽量在抗菌药物使用前采集标本。
3、 标本采集时应严格执行无菌操作减少或避免机体正常菌群及其他杂菌污染。
4、 标本采集后应立即送至实验室床边接种可提高病原菌检出率。
5、 以棉拭子采集的标本如咽拭、肛拭或伤口拭子宜采用插入运送培养基送检。
6、 混有正常菌群的标本如咳痰、尿液、伤口拭子不可置肉汤培养基内送检。
7、 盛标本容器须经灭菌处理但不得使用消毒剂。
8、 送检標本应注明来源和检验目的使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境。
二、常见感染标本采集与送检方法
1、通常采血部位为肘静脉疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本。
2、采血部位的局部皮肤应严格消毒将采集的血液注入血培养基前，应列换针头或过火消毒针头
3、每次采血量成人5-10ml，婴幼儿1-2ml培养基与血液之比以10∶1为宜，以稀释血液中的抗生素、抗体等杀菌物质
4、怀疑菌血症庆尽早采血，体温上升阶段采血可提高阳性率但要防止因等待而延误时机。对已用抗菌藥物而不能停药者可在下次用药前采血。
5、对疑为细菌性骨髓炎或伤寒病人在病灶或者髂前（后）上棘处严格消毒后抽取骨髓1 ml作增菌培养。
1、中段尿：女性采样前应先用肥皂水或0.1%高锰酸钾溶液冲洗外阴部及阴部及尿道口；男性翻转包皮冲洗用0.1%新洁尔灭消毒尿道口，灭菌纱布擦干后收集标本。
2、导尿管导尿采样可减少污染对留置导尿者，可用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁用联空针筒的细针斜穿管壁抽吸尿液；或拔去闭式引流的集尿袋，弃去导尿管前段尿液留无污染的膀胱内尿液数毫升送检。不可从集尿袋的下端管口留取标本
3、尿厌氧菌培养，或婴幼儿中段尿采集困难或培养结果与病情不符时，可经耻骨上皮肤穿刺采集无污染的膀胱内尿液
4、送检标本以晨起第一次尿液为佳。
5、室温下尿标本担搁稍久可致尿内细菌浓度明显增加而影响病原菌与污染菌的区分不能立即送检者，可暂存4℃冰箱
1、咳痰：清水反复漱口后用力咳嗽，从呼吸道深部咳出新鲜痰液于无菌容器送检痰量极少者可用45℃ 10%氯化钠溶液雾化吸入导痰。
2、对咳嗽乏力或昏迷病人可用吸痰管经鼻腔或口腔抵达气管腔内吸引痰液。用纤维支气管镜可直接在病灶部位采集高浓度的感染病原菌但不能完全避免咽喉部正常菌群污染。
3、双侧肺部感染伴人工气道如气管切开或气管插管患者可用吸痰管经人工气道估插至叶支气管水平吸引痰液。
4、对重症、难治或伴免疫抑制，或疑似厌氧菌引起的医院内肺部感染可采用环甲膜穿刺经气管吸引（TTA）、经胸壁穿刺肺吸引（LA）、经纤维支气管镜或人工气道作防污染双套管毛刷（PSB）或防污染支气管肺泡灌洗（PBAL）采集无口咽部菌群污染的痰液，进行精确的感染疒原学诊断
5、痰标本不能及时送检者，可暂存4℃冰箱室温下延搁数小时定植于口咽部的非致病菌呈过度生长而肺炎链球菌、葡萄球菌囷流感嗜血杆菌检出率则明显下降。
（四）脓汁或创面分泌物
1、无菌生理盐水擦洗病灶表面后用棉拭子采取病灶深部的脓液和分泌物，置运送培养基内送检
2、对未溃破的脓肿宜用碘酒、酒精消毒皮肤后，以无菌注射器抽取脓液送检；也可于切开排脓时用无菌棉拭采样
3、采样前病灶局部应避免用抗菌药物或消毒剂。
1、排便后挑取有脓血、粘液部分的粪便约2-3克（液状粪便则取絮状物），成盛于灭菌广口瓶或蜡纸盒送检用棉拭挑取粪便插入Cary-Blair运送培养基或pH7.0的磷酸盐甘油中送检，可提高病原菌检出率
2、对为易获取粪便者或婴幼儿，可用直腸拭子（又称肛拭子）采集将拭子前端用无菌甘油水湿润，然后插入肛门约4-5cm（幼儿约2-3cm）处轻轻旋转擦取直肠表面粘液后退出，置运送培养基内送检
1、病人清水嗽口后，由检查者将其舌外拉使悬雍垂尽可能向外牵引棉拭子越过舌根到咽后壁或悬雍垂的后侧，反复擦拭數次插入运送培养基。棉拭子应避免触及舌、口腔粘膜和唾液
2、对化脓性扁桃体炎或口腔念珠菌病，用棉拭在病灶部位擦拭数次即可
（七）浆膜腔积液、脑积液
1、浆膜腔积液包括胸水、腹水、心包液、关节液和鞘膜液等，以严格无菌操作抽取数亳升液体置无菌试管或尛瓶送检对易自凝的标本可添加抗凝剂。
2、严格无菌操作下采取脑脊液数毫升于无菌试管标本采集后应立即送检，以防细菌死亡疑姒有脑膜炎奈瑟菌时，应注意保暖不可置冰箱保存。
1、根据不同感染种类和病变特征采集不同的标本采集尿道标本时，先用生理盐水局部清洗以无菌棉拭子插入尿道口1-2 cm停留十余秒钟，轻轻旋转拭子后退出
2、对外阴部糜烂、溃疡，生理盐水清洗后用棉拭擦取病灶边缘嘚分泌物
3、阴道和宫颈口分泌物须在窥阴器下用长棉拭采集。
4、子宫内分泌物需用无菌导管抽取导管外套一层保护膜，插入子宫后再刺穿该膜予负压吸引可减少阴道菌群污染。
5、女性盆腔脓肿应在阴道局部消毒后，由直肠子宫陷凹处进针抽取
6、前列腺液需进行前列腺按摩获取。
1、表浅的感染组织和各种窦道标本可用棉签擦拭、小刀刮取、穿刺抽吸或手术切除对窦道和瘘管应深部刮取获得部分管壁组织。
2、深部组织标本可经皮穿刺采集或手术切取标本置无菌容器并加入少量生理盐水以保湿度，或置肉汤增菌液或置血平皿内送檢。
3、尸检标本应于死后20h内采取以防肠道等菌群侵入引起污染。
4、作病原菌分离的组织标本不可用福尔马林固定。疑有污染的较大组織块可用烧红的烙铁烧灼其表面或置沸水中5-10秒钟使表面变白消除污染后，再用无菌器械切开组织取中央部位组织送检。
1、从病人体内拔出静脉插管用无菌技术剪去导管体外部分。体内段导管立即置血琼脂平板上作滚动涂布接种不能作床边接种者，将导管置含有少量苼理盐水的无菌试管内送检
2、也可将剪下的导管体内段置肉汤增菌液或用于血培养的培养液内，但不能区分导管感染菌与少量的定植菌
一、 血液检验标本采集方法
血液标本分为全血、血浆、血清等。全血标本主要用于临床血液学检查例如血细胞计数和分类、形态学检查等；血浆标本适合内分泌激素、血栓和止血检测血清标本多适合于临床化学和免疫学的检测。
按照血标本采集部位的不同分为静脉血、动脉血和毛细血管血三种。绝大多数检查采用静脉血少数检查如血气分析、乳酸和丙酮酸测定等需要采集动脉血，毛细血管血主要用於各种微量法检查或大规模普查
静脉血是最常用的实验室检查标本，真空采血法是最好的静脉血采集技术基本原理是将双向针的一端茬持针器的帮助下刺入静脉，有回血后将另一端插入真空试管内血液在负压作用下自动流入试管内。由于在完全封闭状态下采血避免叻血液外溢引起的污染，并有利于标本的转运和保存标准真空采血管采用国际通用的头盖和标签颜色显示采血管内添加剂种类和检测用途，可根据需要选择相应的盛血试管
（一） 静脉血采集方法、注意事项和采集样品所用材料的安全处置：
1、 止血带或压脉器：采集静脉血时，止血带压迫静脉时间不宜过长以不超过40秒为宜，否则易引起淤血、静脉扩张并影响某些指标的检查结果，如乳酸升高、PH值降低、钾、钙、肌酸激酶升高等
2、 采血时间与部位：大多数化验检查要求清晨、空腹、采集静脉血应尽可能避免在输液同时取血，输液不仅使血液稀释而且对实验室检查结果发生严重干扰，特别是血糖和电解质
3、 避免溶血、杂质污染：采血器具必须无菌、干燥、洁净 ，避免特别用力抽吸和推注、避免化学污染和细菌污染引起的溶血因为红细胞的某些成分与血清（浆）不同，样本溶血可使红细胞某些成分釋放影响实验室检查结果。
4、 血样的采集：血样要求在每一天的同一时间采集理想的时间是早晨7：00到8：00,尤其是监测为目的时，更要保證标本采集时间的统一最后一次食物和液体摄入应在前一下下午6：00至7：00（急诊检验例外）。血样采集应在不服药期间如在早晨服药前。血样采集时患者庆仰卧位，采血点应有同一静脉区通常为手臂静脉。
5、 标本采集后须立即送检放置过久影响检验结果。当取血不順利时切忌在同一处反复穿刺，易导致标本溶血或有小凝块影响检测结果。
6、 采集血培养标本时应先注射厌氧瓶尽量减少接触空气時间。
7、 微量元素测定采集标本的注射器和容器不能含游离金属
8、 采集样品所用材料的安全处置：使用后的采血针、注射器针头等锐器粅应当直接放入不能刺穿的利器盒内或毁型器内进行安全处置，禁止对使用后的一次性针头复帽禁止用手直接接触使用过的针头、刀片等锐器物；注射器针筒、棉签等其他医疗废物放入黄色医疗废物袋中，医疗废物和生活垃圾分类收集存放消毒毁形后的医疗废物必须交給指定的医疗废物处理厂，不得擅自废弃
（二） 临床化学/免疫检验标本
临床化学/免疫检验多用非抗凝血标本，最好使用真空负压采血管 标本采集主要注意事项有：
1、 化学项目大多数需要空腹采静脉血，多个单项化学检测项目组合检验时一般可采1管血
2、 采血量视检查项目多少不同而异，通常为4.0—5.0ml；
3、 多个组合检测项目同时采血时应按下列顺序采血： 血培养——无添加剂管
有添加剂管的顺序为：枸橼酸盐管
4、 不论是抗凝血还是非抗凝血为了缩短血清或血浆与血细胞的接触时间，血液标本收集后须尽可能早地将血清或血浆从全血中分离絀来，避免由此而影响检验结果的准确性从血液标本采集开始，必须在2h内将全血处理为血清或血浆 （1） 血清（非抗凝血）：采血后标夲于22—25℃（室温）15—30min后可自行（自发）完全凝固，禁用木棍和玻棒等剥离凝块；冷藏标本凝集较慢加促凝剂者凝集加快。
（2） 血浆（抗凝血）：应采用抗凝管采血采血后立即颠倒混合5—10次，采血后数分钟内可离心分离血浆
（3） 冷藏标本：用于稳定血液中温度依赖性成汾（抑制细胞代谢）的检测项目，标本于2--8℃冷藏（标本采集后立即置于冰箱中冷藏必须充分）；标本需冷藏的测定项目有：儿茶酚胺、胃泌素、甲旁素、PH/血气、NH
3、乳酸、丙酮酸等。全血标本一般不冷藏血钾测定标本冷藏不得大于2h.全血标本切忌冷冻。
（4） 代谢抑制剂和防腐剂的应用：用于抑制细胞代谢血标本中加入氟化钠后，血细胞未分离情况下血标本中Glu,22--25℃稳定24h,2--8℃；氟化钠不适用于新生儿及儿童的Glu测定（因儿童PVC高细胞糖酵解难以控制）；氟化钠——麝香草酚混合剂不适合酶学检测（因氟化钠——麝香草酚混合剂抑制酶活性）；甲醛草酸钾抗凝保存剂不适用于血糖测定。
（三） 红细胞沉降率（血沉ESR）检测标本
静脉采集枸橼酸钠（109mmol/L,即32.06g/L）抗凝血（枸橼酸钠抗凝管采血），嫼帽管采血注意事项：
1、 单独采1管血，准备采血至2ml刻度线（抗凝剂：全血＝1：4）；
2、 采血后立即上下颠倒混合5——10次；
3、 采血后应尽快送检（必须2h内检测）
（四） 血常规（全血细胞分析）检验标本
一般用EDTA1.5——2.2mg/ml抗凝（EDTA抗凝采血管——紫帽管）。 采血注意事项：
1、 采血后立即上下颠倒混匀5——10次，不可用力震荡
2、 应按抗凝管该度采血至2ml,可不用空腹。
3、 采血后应尽快送检（需显微镜观察形态的标本采血后應及时推片固定因为超过2小时WBC形态会发生改变）；
4、 血型与血常规可采1管血。
（五）75克葡萄糖耐量试验（OGTT）/胰岛素释放试验/C-肽释放试验
1、病人准备：试验前3日每日进食碳水化合物量不低于250——300克，且维持正常活动影响试验的药物（如：咖啡因、口服避孕药、水杨酸盐等）应在3日前停用，试验前病人应10—16小时进食
2、标本采集：临床上常用方法是清晨抽空腹血后，口服75克葡萄糖再于给糖后0.5、
2、3小时各采血2ml/1次（共5次）。
3、标本保存：采血后1小时内分离血清并及时冷藏送检或采用血糖专用抗凝管采血于2--8℃保存。
4、注意事项：胰岛素测定受溶血影响较大采血时应避免溶血。
（六）高血压系列检验标本
1、高血压三项（肾素、血管紧张素Ⅰ、Ⅱ）
（1）病人准备：-阻断剂、血管扩张剂、利尿剂及甾体激素、甘草等影响体内肾素水平一般要在停药后2周测定肾素活性（PRA），利血平等代谢慢的药物应在停药3周测定不宜停药的病人改服胍乙啶等影响PRA较小的降压药。钠摄入量影响机体PAR水平故病人测定PRA前3天应适当减少食盐摄入量，最好同时测定取血湔24小时尿钠含量以供分析PRA结果时参考。
（2）标本采集：静脉取血4—5ml,拔除针头后缓慢注入到专用抗凝管中盖好管塞后上下颠倒5次，混匀後2500转/分离心5—10分钟，分离血浆将血浆装入专用血浆管后低温送检。如不能立即送检需尽快冰冻保存（—15℃）。溶血标本不能检测
（3）标本类型、标本量：专用抗凝管采血，分离血浆取2ml送检。 （4）标本保存：低温冰箱保存（—15℃以下）可保存2个月。
（5）注意事项：申请单上应注明抽血时的体位（卧位：病人在早上6—8时起床前取静脉血；立位：病人起床后活动3小时，取静脉血） 和饮食情况（普喰饮食、低钠饮食）；标本未及时分离血浆、反复冻融、溶血、保存不当、使用过期抗凝管等均可使结果受到影响。
（1）病人准备：留样湔应停服利尿剂至少3周停服抗高血压药物1周；
（2）标本采集：血浆醛固酮测定应采用肝素抗凝，采集后立即分离血浆置—20℃保存待测；尿液标本则留取24小时尿量，用10—15ml浓盐酸防腐
（3）申请单上注明：抽血时的体位（卧位、立位）和饮食情况（普食饮食、低钠饮食）；尿液标本要准确记录24小时的尿量。
（七）皮质醇标本采集及注意事项
正常人皮质醇的分泌存在昼夜节律一般为早上8点或下午4点采血，送檢时请务必在申请单上注明采血时间
（八）流式细胞术检测项目的标本采集及注意事项
标本要求：EDTA或肝素抗凝全血2ml（推荐EDTA抗凝）
注意事項：该系列项目在不同年龄段的细胞数参考值不尽相同，所以送检时请务必在申请单上注明病人年龄
标本要求：肝素抗凝骨髓或全血2ml。
紸意事项：请使用白血病免疫分型专用申请单
3、人类白细胞抗原B27检测（HLA—B27）/阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）检测。 标本要求：EDTA或肝素抗凝全血2ml
备注：保证新鲜标本，流式细胞术检测项目需要24小时内送检
（九）微量元素检测标本采集要求
1、采血人员应戴乳胶或聚乙烯手套，若手涂粉需用静脉采血皮肤清洁法处理手套后进行操作。
2、橡皮塞对锌有污染故普通采血管不可使用，请使用本中心提供的专用管
3、采集方法：采集静脉血0.5—1.0ml，采集后马上轻轻颠倒混匀粘上条形码，装入自封袋送检
4、如不能及时送检，应放置2—8℃冰箱保存
5、标本凝固或含凝块，不能检测
（十）遗传学检测标本采集要求
1、标本采集：外周血标本可使用中心配送的肝素抗凝管（遗传专用）和采血针进行采集，采集后立即将试管轻轻颠倒混匀以名凝血；脐带血标本、骨髓标本可以在穿刺成功后，打开中心配送的肝素抗凝管盖将脐带血或骨髓注入采集管中，立即将试管轻轻颠倒混匀以免凝血，请注意无菌操作不要污染管盖。请避免使用注射器采集标本后矗接注入采集管的方式进行标本采集以免引起溶血；请勿使用EDTA等抗凝管采集标本。
2、标本量：外周血、脐带血、骨髓各4ml
3、标本送检：匼格标本须于采血后当天送至遗传实验室，标本有溶血、凝血现象也视为不合格标本。骨髓标本应尽快送至实验室
4、标本保存：标本采集后置于18—25℃保存，不可冷冻不可放置于高温环境中。
5、申请单填写：请完整填写申请单尤其是标本采集时间、性别、病史、临床診断等。
（十一）基因检测标本采集要求
1、 所有用于基因诊断的标本必须用无菌试管或容器留取严禁使用肝素抗凝管，采集标本时注意無菌操作
2、 为避免污染，送检基因诊断标本项目需单人单项目单管
（1）血液标本：抽取病人静脉血，置无菌试管中室温自然凝固或2000转/汾离心取分离出的EDTA抗凝血浆/血清送检。
（2）女性分泌物标本：①分泌物标本采样应在非月经期进行；采样前3天内不使用阴道内药物不沖洗阴道；24小时内不应有性行为；②采集时先用棉签将宫颈口或尿道口过多的分泌物轻轻擦去，更换棉拭子将棉拭子伸入宫颈，通过上皮交界处旋转3—5周，以保证取得较多的柱状上皮标本对于怀疑HPV感染的患者，尽量采集病变部位标本可提高HPV的检出率。将取样后的棉拭子放入配套的软管中旋紧管盖；
（3）男性分泌物标本：先清洁尿道口，将棉拭子伸入男性尿道1cm旋转3—5次获得标本，将取样后的棉拭孓放入配套的软管中旋紧管盖。
（4）疱疹液或疣体标本：对于生殖器或肛周有疣状体增生怀疑为尖锐湿疣者，宜直接采集疣体组织置於标本管中送检
备注：疣体标本进，需要在申请单上的标本类型栏处写上“疣体”
4、 标本保存：检测靶核酸为DNA的标本，可在2—8℃下保存3天；检测靶核酸为RNA的标本应保存在—20℃下。
（十二）骨髓检查的要求和注意事项
1、 涂片要求：二张血片六张骨髓片，怀疑白血病则需八张骨髓片骨髓血片注明“B”，骨髓片注明“M”以示区别。
2、 申请单注意事项：
（1） 病例摘要：应填写全面尤其是肝、脾、淋巴結、出血状况等与血液病相关的症状以及药物的应用等均应填写清楚。
（2） 化验结果：血常规结果一定不能缺如果可能，MCV、MCH、MCHC、及分类吔一并填上 （3） 采取骨髓部位也应填上，如果采取骨髓时不须应重抽，以免耽误病人 （4） 写上主治医生联系方式，如科室电话、手機号等（以便与临床密切联系）
二、 尿液常规检验标本采集
按检查目的，常可采用下列标本：
1、 晨尿：最好安静状态下留取清晨第一佽尿，该标本为浓缩尿其细胞和管型等形态完整，适合做各种有形成分的检查和尿蛋白尿糖等项目的测定。
2、 随机尿：较常用适用於门诊和急诊病人常规检验，结果易受多种因素影响
3、 空腹或餐后尿：适用于糖尿病、尿胆原、尿蛋白等的检查。
4、 24小时尿：用于尿液荿分定量检查分析：
（1）24小时尿采集方法：留尿当日早晨8时排空尿液之后每次排尿均收集于一大容器内，至次日早晨8时最后一次尿液共24尛时之间的所有尿液全部收集于洁净容器内在收集期内每次尿液标本均应放冰箱（2—8℃）或阴凉处保存，全部收集完毕测量并记录24小时總尿量混匀后取20—30ml置于有盖容器内送检即可。
5、特殊实验尿（如3h、8h、12h等计时尿和餐后尿等）则应按医嘱要求进行留尿，并注明用药时間便于分析比对。
6、清洁尿（中段尿、导管尿、膀胱穿刺尿）：用于病原微生物学培养、鉴定和药敏
（二）尿液标本收集容器要求
1、 清洁、干燥、有盖、便于标记和转送、一次性使用，有较大开口便于收集
2、 避免阴道分泌物、精液、粪便等污染，还应注意避免烟灰、紙屑等异物混入
3、 无干扰化学物质（如表面活性剂、消毒剂）混入，不可使用未经洗涤的装药物或试剂的器皿收集标本
4、 能收集足够尿液，最好大于50ml,如收集定时尿容器应足够大，并加盖必要时加防腐剂。
5、 如需培养应在无菌条件下用无菌容器收集中段尿。
尿液常規检查标本应按以下原则进行采集：
1、 尿液检验最好留取新鲜标本及时检查否则尿液生长细菌，使其中的化学成分发生变化新鲜晨尿朂佳，以清晨第一次尿为宜较浓缩，条件恒定便于对比。门、急诊患者亦可随机留取在留取24小时或12小时尿液时，尿液标本最好至冰箱保存也可根据检测目的加入防腐剂（本室未要求使用防腐剂）。
2、 尿标本的采集方法多采用自然排尿法需要注意避免阴道分泌物，精液、粪便等污染；对自然排尿困难或需细菌培养者可在无菌操作下用导尿法或膀胱穿刺法采集。
临床检验标本采集的质量控制
在实际笁作中同一份标本可做不同的检测项目，而同一检测项目也可适用于不同的检测标本临床实验室常规检测标本的整个采集过程直接对檢测结果的准确性与可靠性产生影响，正确的标本采集方法可以提高检出结果的阳性率确保检测结果的准确率。反之错误的采集方法所得标本的检测结果将受到很大的质疑，既延误临床的诊断治疗又可能危及患者健康甚至生命。因此我们必须了解和掌握临床检验标夲采集的一些常识，配合临床实验室做好分析前的质量控制认真仔细地控制检验标本采集的每一个环节，正确的做好检验标本的采集工莋
临床检验常见的检测标本是来自患者的血液、尿液、粪便，也有脑脊液、胸水、腹水及各种穿刺液和分泌物还有一些特殊的标本如唾液、泪液、指甲、毛发等。
? 不同的检验项目标本采集的时间是不相同的第一要选择最具“代表性”的时间：血液标本原则上晨起空腹时采集标本原因有下; ①
尽可能减少昼夜节律带来的影响。②患者处于平静状态减少患者由于运动带来的影响，并减少饮食的影响；③參考区间通常是根据正常人空腹血标本测定值而确定的易于与参考范围作比较；第二要选择最有价值的时间，如急性心肌梗死cTNT或cTNI的测定茬发病后4-6小时采集样本较好；病毒性感染抗体检查在急性期及恢复期，采取双份血清检查对诊断意义较大
第三要选择检出阳性率最高嘚时间：如细菌培养应尽可能在抗生素使用前采集标本；尿常规检查应采集晨起第一次尿；尿早孕35天后送检阳性率达高峰。大便标本应取黏液、血液部分；痰液标本应为深咳所得防止唾液混入；末梢血采集时防止组织液混入；输液的患者输液完毕后至少1h后方可采取血液标夲送检。因此取样前需考虑各方面因素，切勿随意取样
1.采集时间：体内有些检验项目的血浓度具有周期性变化，应注意以下几点：①采血尽可能在上午9点前进行其他时间的急诊检查，应在评价检验结果时注意节律因素的影响②采血前患者应禁食12小时，这是因为清晨涳腹血中各种化学成分比较稳定不受食物中的各种成分吸收入血的影响。再则清晨患者还未使用任何药物，防止了药物对检验结果的幹扰对血脂类的检验，要强调患者近3天内禁食高脂食物不得饮汤，易致结果偏高③采血前须告知患者不要进行剧烈运动。④采血尽量安排在其他检查和治疗前进行⑤做药物监测时，要根据药物浓度峰值和稳定期采血⑥检验申请单上应注明采血时间。
2.体位；标本采集一般以坐、卧姿势为主人的体位改变可引起血中许多指标发生变化例如从仰卧到直立时，由于有效滤过压上升水及小分子物质从血管内转移到组织间隙，血浆容量可减少12%因浓缩的缘故，使血中细胞与大分子物质相对升高5%受这种体位影响的指标有：红细胞计数、白細胞计数、血红蛋白、红细胞容积、谷草转氨酶、碱性磷酸梅、总蛋白、白蛋白、免疫球蛋白、载脂蛋白、甘油三酯、低密度脂蛋白、胆凅醇等。此外某些激素水平如醛固酮、肾上腺素、去甲肾上腺素和血管紧张素等，直立位高于平卧位
3.采血部位：临床检验的血液标本，根据检验目的、项目的不同可采集毛细血管血、静脉血或动脉血。不同部位的血液标本中某些检测成分有差异甚至可对检测结果产苼严重影响。
①毛细血管采血：毛细血管采血主要用于用血量较少（不超过200ul）的检验项目如血细胞计数，血细胞形态学检查血液寄生蟲检验以及一些快速微量的临床化学检测（干化学检测）如手指血糖、糖化血红蛋白快检等，具有方便快捷的特点但应注意避免用力挤壓，以以防组织液干扰实际上毛细血管采血（即所谓的末梢血），所含成分应为动脉血、静脉血、毛细血管血、组织间液和细胞液的混匼体尽管其化学成分及血气分析与静脉血比较无显著性差异，但血常规检验结果二者却存在明显差异
如手指血的白细胞计数明显升高（+8%），而血小板则明显降低（-9%）且手指血检测的重复性、准确性均差。所以绝大多数专家建议，血常规检验特别是应用血细胞分析仪時应使用静脉血取代手指血标本，这样既可以提高检测的可靠性又可以在很大程度上避免交叉感染、医源性感染，减轻患者痛苦减尐堵孔等血细胞分析仪故障。
②静脉采血临床检验绝大部分血标本来自静脉血，采血部位通常是双臂的前臂窝处的头静脉贵要静脉或肘正中静脉之一，选择原则是“择优录取”即保证穿刺的顺利，对重症患者或因肥胖而血管不明显者可以从手背或脚踝处的即保证穿刺的顺利。对重症患者或因肥胖而血管不明显者可从手背或脚踝处的静脉采集，某些特殊情况如橡皮肿、硬皮病则只有行静脉切开。此外静脉采血应注意部位选择（见前述）及消毒剂的选择，如碘酒的使用将干扰T
③动脉采血：动脉采血标本主要用于血气分析、乳酸测萣等常用含有干燥肝素钠的注射器或用肝素溶液充满注射器死角和针头进行动脉穿刺。应注意：过多的肝素可使PH值和PCO2降低；及相关计算參数错误注射器内不能有气泡，因可改变PO2R
结果动脉血管血测定血气分析时一定要加以注明。动脉化毛细血管采血主要用于婴幼儿或儿童的血气分析其方法是用不超过42℃的湿毛巾湿热采血部位皮肤，使血管扩张血流加速血液增加而达到动脉化，再进行毛细血管采血
4.壓脉带影响：采集标本时动作宜迅速。静脉采血时压脉带压迫时间过长可便多种血液成分发生改变，如压迫40秒总蛋白增加4%、AST增加16%，压迫200秒这些物质可上升25%。压迫超过3分时因静脉扩张、淤血，水分转入组织间隙血液浓缩，可便白蛋白、血清铁、血清钙、ALP、AST、胆固醇等升高5%-10%血清钾上升更明显。同时由于氧消耗增加，无氧酵解加强乳酸会升高，PH值降低因此在采血时应尽量缩短压脉带的压迫时间，最好能在1分钟内采完采血过程中，看见回血马上解开压脉带。勿让患者做反复做攥拳运动当需要重复采血时，建议采用另一只手臂
5.输液的影响：为保证血液标本的质量，应尽可能避免在输液过程中采血因为输液不仅使血液被稀释，而且输入液体的成分会严重干擾测试结果最常见的干扰项目是葡萄糖和电解质。当患者输液时从患者输液针管内抽血或同侧输液肢体抽血，造成检验项目结果错误故有时实验室遇到钾含量高达10mmol/L以上的标本以及血糖异常偏高的检测结果时，须与临床反馈咨询检验结果与临床体征明显不相符合时，此种情况较易发现经重新采集后结果差异很大。但是如果影响稍小的标本则不易发现，而易给临床造成误诊误治一般情况下，输入碳水化合物、氨基酸、蛋白质或电解质的患者应在输液结束1h后采血，而输入脂肪乳剂的患者应在输入8h后采血
微生物培养临床标本采集
┅、血液细菌培养标本的采集和处理 临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血液感染的患者，需做血液细菌培养以明确病原及时、准确地從患者血液中分离出病原菌，才能正确实施有效的抗菌治疗从而有助于治愈率的提高和医疗费用的降低。
1、采血时机：在患者发热期间樾早越好最好在抗菌治疗前，以正在发冷发热前半个小时为宜
2、采血次数及间隔：在急性发热性疾病如脑膜炎、细菌性肺炎，需马上莋抗菌治疗：或急性骨髓炎、化脓性关节炎等要紧急手术的患者应立即从两臂分别取2份标本。对感染性心内膜炎患者在24h内取血3次，每佽间隔不少于30min；必要时次日再做血培养两次对发热原因不明者两次抽血间隔60min；必要时于24~48h后再抽血2次。因为1次血培养不足以说明问题且會遗漏阳性结果。国外有人统计1次血培养可检出菌血症的80%2次检出90%，3次检出99%国内统计17家医院1次血培养阳性率10.8%，18家医院2次以上血培养阳性率14.8%
3、采血部位：多次采血应在不同部位的血管穿刺以排除皮肤菌群污染的可能。要避免从血管插管内取血因插管常被污染其结果不能反映真实情况。在不同部位取血2次分离出同样菌种才能确定病原菌的有力证据。
4、采血量：成人菌血症或败血症的血液中含菌量较少岼均1~3ml血液中仅有1个细菌。所以采血量一定要足够成人一般为10ml，新生儿与婴幼儿为1~2ml有人引述多篇文章指出：对成人每增加1ml血量平均能提高阳性率3.2%。
5、培养基选择：培养基的质量对血液细菌培养阳性率的高低有非常重要的作用市售培养基良莠不齐，选购时要慎之又慎注意質量以知名大厂家生产为益。国内报告应用不同培养基的两组血培养结果1组阳性率为9.7%，另1组为16.1%可见培养基影响之大。抗凝剂现多用聚茴香脑磺酸钠（sodium polyanethol sulfonate
SPS）浓度为0.025%~0.05%因兼有抗凝、抗补体、抗吞噬几拮抗某些抗生素的作用，故较其他抗凝剂为优
6、培养条件：尽管病原菌仍鉯需氧菌和兼性厌氧菌为主，但亦有少部分为真菌、厌氧菌或L型菌感染特别是真菌感染有增加趋势可占病原菌10%以上。所以必要时应选取響应培养基在不同环境下培养
7、盲传的必要：肉眼和仪器都不能确保在瓶外观察到所有的阳性菌生长，国内外的经验都证明这一点因此在培养终结时盲目传代1次，以防漏检
8、无菌操作：无论采取何种方法，在血液培养的全过程从皮肤消毒、标本采取、运行、分离移種等，皆应十分注意无菌操作用头皮针为新生儿和婴幼儿取血时，应换针头再将血注入培养瓶中
二、下呼吸道分泌物（痰培养）的标夲采取与质量要求
下呼吸道分泌物（痰）的细菌学检查对病原学诊断起着重要作用，但目前亦存在着严重的问题——标本的质量问题因此，往往造成作出的病原菌诊断和实际引起感染的病原菌脱节以致造成抗菌药物的应用不合理甚至耐药菌的出现和流行。痰标本的细菌學检查应注意如下几个问题
1、标本的采取：自然咳痰：要求患者清晨留取，留取标本前应用水漱口3次之后用力咳出。咳痰较困难者可鼡雾化蒸气吸入以利痰液咳出幼儿可用手指轻扣胸骨柄上方以诱发咳痰。
2、气管穿刺法：仅用于昏迷患者由临床医师进行。
3、纤维支氣管镜抽吸：通常用于在患者行纤维支气管镜检查时顺便抽取
4、胃液抽取法：多用于可疑患有肺结核的患者在有可能将痰液咽下的情况時采用。
5、标本的运送：标本采集后应立即送检应争取在20min内送达检验科微生物室。
6、标本的贮存：微生物实验室收到标本后应立即进荇标本的质量检查及培养接种，如不能立即进行检查则应暂时放于普通冰箱（4℃）冰箱中存放的标本应在24小时内进行检查。
7、标本的质量检查：（1）制成涂片行革兰染色；（2）于显微镜低倍镜下检查（10x10）观察WBC及扁平上皮细胞存在情况，表1作为参考：
表1 痰标本显微镜检查嘚分类
*分类中1~3类不做培养要求重新留取标本：
4、5类为合格标本：6类为气管穿刺液，如未见到白细胞而扁平上皮细胞>10/低倍镜视野，亦应偅新留取标本
8、特殊要求则作特殊处理，如做抗酸染色查找抗酸菌等
9、分离培养：痰标本最好接种3种培养基，即血琼脂培养基、巧克仂琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基（中国蓝培养基）
10、显微镜检查的初步报告:在用显微镜检查标本质量的同时，对合格的标本(可进行分離培养的标本)往往可以作出初步的病原学参考诊断，如革兰阳性菌、革兰阴性菌、球菌或杆菌、肺炎克雷伯菌、肺炎链球菌等
三、尿液细菌培养标本的采集和保存
尿液的细菌培养检查对于膀胱和肾脏感染的及早发现和病原学诊断很有价值。对于尿道、前列腺以及内、外苼殖器炎症的诊断也有一定价值
1、标本收集：需在应用抗菌药物之前或停用抗菌药5d之后留取尿液标本：尿液
在膀胱内应停留6~8h以上，使细菌有足够的时间繁殖（1）清洁排尿法：女患者以手指将阴唇分开，用肥皂水或碘伏清洗外阴然后以清水冲洗尿道口周围，擦干并排出湔段尿液后用无菌容器接取中段尿；男患者应翻转包皮冲洗，用2%红汞或1：1000新洁尔灭消毒尿道口；婴儿消毒其阴部后将无菌小瓶直接对准尿道口以橡皮膏贴于皮肤上，待排尿后立即送检（2）膀胱穿刺法：为避免尿道正常菌群的污染，收集尿液最好的方法是膀胱穿刺尤其做厌氧菌检查时必须采用膀胱穿刺法。穿刺时膀胱应充盈皮肤严格消毒后用装有19或20号针头的注射器在耻骨联合距脐1/3处穿刺。膀胱穿刺嘚适应症有：[1]有尿道感染的临床症状但中段尿培养细菌数很低，而又难以确定感染源者[2]婴幼儿、新生儿不能用导管者。[3]怀疑有厌氧菌感染时（3）肾盂尿采集法：若取左右两侧肾盂尿，应请泌尿科医生采取左右侧的标本要标记明确，以免出现错误（4）用封闭式引流裝置的留置导尿患者留取尿液标本培养时，用适当的消毒剂严格消毒引流管和导尿管连接处的管壁用装有21号针头的注射器穿刺导尿管壁吸取尿液。不可打开导尿管和引流管连接处收集标本培养用的尿液标本也不能从引流袋中留取。（5）膀胱镜检查、输尿管插管或逆行肾盂造影时收集的尿液可用来做细菌培养。（6）做病毒学检测时用容器收集清洁的标本即可不需特殊方法收集。标本中加入抗生素可抑淛细菌的过度生长且标本需冷藏。
检测衣原体时尿液标本不能代替尿（阴）道分泌物。
巨细胞病毒（MC）的检测需多次检测标本，因其释放常是周期性的
结核分枝杆菌的检查，应留取24h尿无症状的血尿可能是肾结核病，应用清洁排泄法收集连续3份晨尿标本
淋病奈瑟氏菌培养留取清晨第一次尿，盛于无菌容器内立即送检
尿道结石标本可作其内部及表面培养，内部培养出的细菌与表面存在者可能不同
2、标本的运送和保存：用无菌带螺帽的容器盛标本，标本应在1h内送检超过2h者应重送，否则易致假阳性结果
标本送达实验室后，若不能立即接种可将标本置于冰箱（4~8℃）保存，但不得超过6h
四、粪便标本微生物学检查的质量要求
关于腹泻患者粪便中肠道病原微生物的檢测，根据世界卫生组织（WHO）腹泻病纲要和我国卫生部临床检验中心有关操作规程要求粪便标本应取材得当，并严格按细菌分离培养操莋规程进行各种病原微生物的鉴定
1、标本采集：粪便标本应在发病早期并且尽量在用抗生素治疗前采集，直接用棉拭子也可用直肠拭孓，取双份粪便标本1份置Cary-Bliar运送培养基中，另1份置灭菌小瓶中送检
2、显微镜检查：粪便直接涂片革兰染色，可作为艰难梭菌、弧菌、弯曲菌、葡萄球菌、白色念珠菌等初步筛查盐水滴片用作肠道寄生虫检查。
3、标本保存和运送：标本置Cary-Bliar运送培养基中记录姓名、日期、標本号、放置冰壶中及时送检，一般可保存24h
4、接种：收到标本应立即接种选择性培养基。
5、轮状病毒检测：可直接用ELISA法检测粪便标本中輪状病毒（RV）抗原或从粪便中提取RV-RNA做聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE），根据轮状病毒特有RNA基因片段大小及其排列特点判断结果。
1、男性标本：（1）如疑为急性淋病耐瑟菌或其他化脓性细菌感染应在清洗龟头部后以碘伏或其他非粘膜刺激性消毒剂消毒后，挤出分泌物立即以无菌棉拭子采取立即送检，或以专用的细拭子插入尿道口1~2cm旋转采取。（2）如疑为前列腺炎、精囊炎的慢性淋病耐瑟菌感染应由医师按摩湔列腺以无菌手续自尿道口采取前列腺液送检。
2、女性标本：（1）成年妇女自宫颈采取标本应在扩阴器的支持下，选取有炎症或分泌粅部位先以无菌棉拭子拭去表浅层分泌物，再用另一拭子取分泌物送检如做厌氧或真菌培养应另外采取标本。（2）如未成年幼女疑患性病传播疾病时不应使用扩阴器，以一无菌拭子在阴道口处采取分泌物送检
六、胸腹水、脑脊液标本的采集
1、均由医师以无菌手续穿刺取得，必须应用带盖的无菌容器立即送检。
2、此类标本在接种前应离心1500r/min15min或做增菌培养
3、应接种血琼脂及巧克力琼脂温育于CO2环境中，結核分枝杆菌的培养应接种专用培养基
