SCoT-PCR扩增步骤是什么意思?

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摘 要:本试验以马银花(R.ovatum)DNA为模板,采用L16(45)正交试验对目标起始密码子多态性-聚合酶链式反应(SCoT-PCR)体系中5因素(Taq聚合酶用量,Mg^2+浓度,模板DNA用量,dNTPs浓度,引物浓度)进行了优化,建立了杜鹃花植物SCoT-PCR反应体系结果表明,在20μL的反应体系中,模板DNA 1.00 DNA聚合酶〉dNTPs〉Mg^2+〉模板DNA。并运用了杜鹃属的4个不同种对最优体系进行了稳定性驗证,选择了10个通用性的引物进行筛选,发现10个引物均能扩增出条带,其中有6个引物能够得到清晰可辨、多态性丰富的条带该体系的建立将为杜鹃花遗传多样性、差异基因的表达分析,分子辅助育种、遗传图谱构建等研究提供技术支持。

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