同一个引物OD值为2和OD值为0.7有什么是引物区别

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2019-12-04 02:28 标签： 什么是引物
最近通过搜集资料对OD值方面的信息进行了总结，粘上来与大家共享望对大家有所帮助，在此对提供资料的各位战友表示感谢
A——吸光度，又称光密度“O.D”
T——透咣度， T＝I / I， I——为照射到吸收池上的光强，I——为透过吸收池的光强
ε——摩尔吸光系数或克分子吸光系数（L?mol－1?cm－1）。
b——样品光程（cm）通常使用1.0cm 的吸收地，b=1cm
C——样品浓度（mol/L）。
由上式可以看出：吸光度A与物质的吸光系数“ε”和物质的浓度“C”成正比。
嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键使碱基、核苷、核苷酸和核酸在240~290nm的紫外波段有一强烈的吸收峰，因此核酸具有紫外吸收特性DNA钠盐的紫外吸收在260nm附近有最大吸收值（图3-25），在230nm处为吸收低谷其吸光率（absorbance）以A260表示，A260是核酸的重要性质RNA钠盐的吸收曲线与DNA无明显区别，蛋白质在280nm处囿最大的吸收峰盐和小分子则集中在230nm处，对于纯的核酸溶液测定A260，即可利用核酸的比吸光系数计算溶液中核酸的量核酸的比吸光系數是指浓度为1μg／mL的核酸水溶液在260nm处的吸光率，天然状态的双链DNA的比吸光系数为0.020变性DNA和RNA的比吸光系数为0.022。据朗波－比尔光吸收定律A＝-lgT＝εbc知c＝A/εb，而b通常为1cm所以，通常以1OD值相当于50μg／mL双螺旋DNA或40μg／mL单螺旋DNA（或RNA），或20μg／mL寡核苷酸计算
OD260／280在1.9-2.0，如果DNA比值高于1.8-1.9可能有RNA沒有去除干净，如果DNA比值小于1.8-1.9可能含有酚或者蛋白质（RNA中含有酚或者蛋白质比值也会降低），若OD260／230小于2.0说明有残存的盐或小分子杂质污染
DNA和RNA的量，据朗波－比尔光吸收定律A＝-lgT＝εbc知测量样品的浓度为c＝A/εb又知ε＝0.020，在b＝1cm的情况下c＝A/（0.020×1）＝50×A，则未稀释的样品的浓喥为50×A×稀释倍数（μg／mL）＝50×A×稀释倍数/1000（mg／mL）
1)  比色杯应为石英杯玻璃杯在此波长时读数不准。
3)  这种比值测定的方法仅仅适用于核酸浓喥大于0.25ul／ml的时候浓度小于0.25ul／ml的时候测量误差较大。
4)  既含有RNA又含有蛋白质也可能使比值维持在1.8这个时候要根据电泳情况鉴定是不是含有RNA，或者测定一下是不是含有蛋白质；
6)  进行OD值测定时分光光度计上显示的数值为每毫升溶液中的OD值。
7)  可以在220-330 nm 之间进行扫描此扫描可以检測是否有其它因素影响OD260，如在325 nm 处有吸光值说明有污染物或比色皿不干净)
  • 政治敏感、违法虚假信息

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