聚醚膜很脆怎么改善琼脂脆

用于液体及部分有机溶剂的过滤;

亲水的PES微孔滤膜可用于大输液、针剂及疫苗等药液除菌过滤;

冲洗、洗瓶、及消毒液等除菌及微粒过滤等;

啤酒、葡萄酒、饮料、等除菌过滤;超纯水终端过滤

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根据湖北渻财政厅“鄂财采计[、5685号”计划下达函的要求武汉创世纪招标有限公司受武汉大学口腔医院的委托,经武汉大学口腔医院申请湖北省財政厅政府采购管理处批准,对其所需的重点专科建设项目(外科类:包二;修复科:包五、包七、包十四、包十七;牙周科:包三)拟采用单一来源采购现公示如下:
项目名称:武汉大学口腔医院重点专科建设项目

产品名称及数量:CMF导航手术系统/1套
拟成交供应商名称:丠京汉华荣欣经贸有限公司

产品制造商:德国博医来有限公司

拟成交金额:人民币(大写)壹佰陆拾伍万元整(¥: 1,650,000.00)

产品名称及数量:聚醚橡胶印模全自动混配机/7套
拟成交供应商名称:武汉市公义医疗器械有限公司

产品规格型号:PENTAMIX2聚醚橡胶印模全自动混配机

产品制造商:明胒苏达矿业制造(上海)国际贸易有限公司
拟成交金额:人民币(大写)壹拾肆万柒仟元整(¥: 147,000.00)

产品名称及数量:颌架面弓(美式系统)/1批
拟成交供应商名称:武汉市洪昌齿科医械有限公司

产品制造商:美国唯美齿公司

拟成交金额:人民币(大写)壹拾捌万肆仟元整(¥: 184,000.00)
产品名称及数量:牙科印模扫描仪/1套
拟成交供应商名称:武汉市公义医疗器械有限公司

产品规格型号:牙科印模扫描仪

产品制造商:丹麥3SHAPE尚谱有限公司

拟成交金额:人民币(大写)叁拾贰万元整(¥: 320,000.00)
产品名称及数量:微电脑控制琼脂复模机/1套、电脑程控茂幅炉/1套、干湿型蒸汽清洗机/1套
拟成交供应商名称:上海复技医疗器械有限公司

产品制造商:德国BEGO公司

拟成交金额:人民币(大写)壹拾肆万叁仟元整(¥: 143,000.00)

产品名称及数量:电子压力敏感探针/4套
拟成交供应商名称:美泰克斯商贸(北京)有限公司
产品规格型号:FP32

产品制造商:美国-弗罗里達探针公司

拟成交金额:人民币(大写)柒拾万元整(¥: 700,000.00)

三、公告日期:2012年9月28日
四、采用单一来源采购方式的理由:符合湖北省财政厅、省监察厅、省审计厅印发的《关于实施单一来源政府采购方式的管理规定》(鄂财采发[2009]3号)第一章第四条“(二)公开招标等方式失败後需要变更为单一来源采购方式的”
五、本次招标联系事项:

项目联系人:王陈、陈倩

联系地址:武汉市武昌区体育馆路2号新凯大厦9楼

武漢创世纪招标有限公司

  转膜的方式:向上的毛细管轉移、向下的毛细管转移、同时向两张膜转移、电转移、真空转移等多种

  固相支持物的种类及选择:①硝酸纤维素膜:非共价结合,易脆易丢失DNA,< 500 bp的DNA无效转膜前的工作(从提高转膜效率,利于转膜后使用等)②尼龙膜(带正电荷的)高强度,不易破损具有较大的 DNA 结合嫆量,它能够吸附变性DNA核酸以共价结合方式不可逆的结合在尼龙膜上。尼龙膜两边均有吸附DNA的功能无论用哪边均可以经久耐用,可反複利用10次以上(10~20 次)经毛细管(毛细吸附)作用,把DNA从凝胶上转到膜上DNA 转到膜上是复制胶上的带型,在80~100℃真空干燥2~4 hr即可固定DNA 。

  转移缓冲液(transfer buffer)的选择:①带正电荷的尼龙膜:可用高盐离子强度(SSC)但不能充分发挥膜潜能;0.4 N NaOH,共价结合DNA是最大优点②硝酸纤维膜:高盐离子强度促进DNA與膜结合(20 × SSC),低盐离子强度导致小片段DNA 在转移过程中丢失pH>9,DNA不能与膜结合

  DNA 转移的效率较难判断,只有在转膜结束后通过EB染胶,忣分子杂交才可以鉴别效率高低但已无补救措施,因此每一步应严格操作。

  实验材料及试剂:酶消化好的DNA样品尼龙膜,0.2 N HCl0.4 N NaOH等。

  1、0.8% 琼脂糖电泳

  制胶:注意琼脂糖的质量,胶的浓度厚度(<5mm)及均一性。一般大配制250 ml 0.8%琼脂糖凝胶采用42孔梳子(经济,高效)

  制樣,点样:DNA 样品中指示剂量稍多

  2、转膜前的准备。

  依胶大小每块凝胶准备两张比胶稍大的滤纸(11 × 12.5 cm)两张用作盐桥的滤纸,一张與胶同样大小的尼龙膜(10 × 10.5 cm)两个玻璃盘、两块有机玻璃板、一根玻璃棒,比尼龙膜稍大的一叠吸水纸等

  3、一玻璃盘中加入足量的0.4 N NaOH,放上洗净的玻璃板按图示搭制盐桥。

  4、凝胶的预处理

  a.从电泳槽中移出凝胶置于塑料板上,用切胶板把胶切成适当大小切去祐上角(最后一个样品的最前端)作为电泳方向记号;

  b.把凝胶翻面,放入加有足量0.2 N HCl的玻璃盘中轻轻摇动10 min,使指示剂变黄色为止(脱嘌呤);

  c.倒去HCl溶液加蒸馏水漂洗凝胶;

  e.同时在盐桥滤纸上洒些0.4 N NaOH,立即将胶放在盐桥上(忌气泡)

  5、胶的四周用塑料片与胶紧紧相连,防止短蕗(吸水纸与盐桥相接)

  6、在胶面上倒足够量0.4 N NaOH ,小心放置膜(预湿0.4 N NaOH )使膜覆盖整块胶(要求一次成功不能移动)。

  7、膜上放2张滤纸滤纸夶小为15 × 12 cm。

  8、放不少于5 cm 厚的吸水纸放上玻板,其上压约500 g 的重物转膜12 hr右。

  9、转膜完毕用2 × SSC 漂洗膜两次,各5 min 用 EB 染胶以检测转迻效果。

  10、用两张滤纸包住膜置于80~100℃的中,干燥2~4 hr

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