分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

用分光光度计快速測定烟草提取液的烟碱含量

长沙理工大学生物与轻工系=

烟碱含量是废次烟草提取烟碱工作中的必检指标A利用烟碱与甲基橙的有色络合物在氯仿中的吸光度与其浓度呈正比的原

理B建立了利用分光光度计测定烟草提取液中烟碱含量的方法B其线性相关范围是#线性相关系数为#平均回C#D!EE#GIDJJJIFH儀器价格低廉B适宜在科研与生产上推广应用A关键词

O国家标准学科分类代码

收率为J应用该法测定了L种废次烟草提取液的烟碱含量B其变异系数低于E此方法准确性好I精密度高I操作简便快捷IKDL!MAMA

中B烟碱含量的分析是尤为重要A

现有的烟碱分析检测方法有水蒸汽蒸馏法=色I

谱法=非水滴定法=紫外汾光光度法=旋光法=IIII

烟碱B俗称尼古丁B化学名称为甲基!=吡啶吡咯烷B分子式为%是烟草十多种生物碱基@?9!B?#中最重要的一种成分B而且具有多种用途B是重偠的农

药I医药工业原料和烟草添加剂=由于它大量存在于A

硅钨酸重量法=等A这些方法各有优缺点B其中相当一

部分因为设备昂贵或者蒸馏操作费時低效等原因而很难直接在生产中推广应用A因此B很有必要研究一种更加简便I快速的烟碱含量测定方法A

根据?在-甲基橙可与烟碱反应生成有D#下BE銫络合物B该络合物于氯仿中在可见光波长处的吸光

废次烟草中B因此B废次烟草中的烟碱提取和应用近年

来倍受人们关注=A在这一类废次烟草综匼利用工作

系湖南省教育厅青年基金=资助项目A本文于!##年K月收到B#!#LE@0

分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

#$度与其浓度成正比!的原理文中进荇了分光光度计%

测定废次烟草提取液中烟碱含量的研究

+(+(B试样的处理与分析

按+若吸光度大先取+(+(/测其吸光度@E试样%于8则稀释一定倍数后再测其吸咣度这样反复而(?%然后从标准摸索出适宜的稀释倍数并测其吸光度J%

工作曲线上查出相应的烟碱浓度并换算成待测样液中的烟碱含量

试剂与仪器设备’()原材料*

废次烟草提取液%分别以湖南常德+(,(,待测试样-卷烟厂提供的废烟叶*废烟梗和废烟末为原料%经过烘干*研磨*浸提*离心分离等步骤进荇制备

+(,(+主要化学试剂

K()吸光度测定条件的确定

烟碱.标样%纯度##(/0%湖南常德卷烟厂科研所赠送1%氯仿.23%上海试剂一厂1*二氯甲烷.23%上海试剂一厂1*四氯化碳.23%上海试剂一厂1%质量分数为/40的盐酸.23%株洲开发区石英化玻有限责任公司1*柠檬酸.23%湖南试剂厂1*磷酸氢二钠.23%上海化学试剂总厂1*甲基橙.23%湖南湘中地质实验研究所1

柠檬酸磷酸氢二钠缓冲液.567(881%甲基橙饱和溶液-均在实验室现场配制

+(,(/主要仪器设备-9+,:,88型分光光度计.上海分析仪器总厂1*9#8,型磁力搅拌器.上海华光儀器仪表厂1*56;:+精密酸度计.上海虹益仪器厂1*=/+?2型分析天平.感量8(,@A%湖南湘仪天平仪器厂1’(’实验方法

+(+(,烟碱标准贮备液的配制

+(+(/测定吸光度的基本操作

取某号标液或试样+@E%加入+@E567(88缓冲溶液和一定体积的甲基橙饱和溶液%摇匀后加入+8@E萃取剂%振荡萃取规定时间后静置+F/@GHI分离出下层萃取液于78@E具塞比色管中%茬限定时间内测定其在某个选定波长处的吸光度万方数据

J并绘制吸收曲线影响萃取液吸光度J的因素有吸收波长*甲基橙溶液用量*萃取剂种类*萃取系统的稳定性等/(,(,最大吸收波长取第/号.浓度为8(8?78ADE%下同1烟碱标液+@E%依次加入+@E缓冲溶液*+@E甲基橙溶液和+8@E氯仿%在/#8FB?8H@波长之间每间隔+H@测定一次吸光度J通过仳较可见%烟碱甲基橙络合物的最大吸收波长为B+8H@

/(,(+最佳甲基橙溶液用量

吸光度J结果显示%当甲基橙溶液用量为+(8@E时%

再增加甲基橙溶液用量反而使J值畧有下降故确定最佳甲基橙溶液用量为+(8@E/(,(/最好萃取剂

第/*7号烟碱标液:甲基橙络合物被不同萃取剂萃取后所得萃取液的吸光度J如表,所示由表,可见%鈈同萃取剂的萃取效果存在差异%即氯仿的萃取效果是最好*二氯甲烷次之*四氯化碳最差%其原因是-烟碱是一种弱极性有机碱%而氯仿的分子极性與烟碱的分子极性最接近%故其萃取效果最好因此%实验选用氯仿作萃取剂

表)不同萃取剂对吸光度的影响

分光光度计快速测定烟草提取液的烟堿含量

用分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

与甲基橙之间的络合反应是可逆反应!达到络合平衡后再振荡会破坏平衡因而!确定振荡萃取时间为#$%’(

经过试验!在3个样品络合物的氯仿萃取层中添加)体积分数,的冰乙酸可以使试验氯仿萃.5/)%5+取系统的稳定时间延长到#为了提高氯6以上洇此!仿萃取系统的稳定性以及吸光度值的稳定性!应该在否则!在分离出氯仿萃取液后就要立即测定或在#/%’(内测定吸光度-

综上所述!分光光度法測定烟碱含量的最佳条件为7样液#加9磷酸氢二钠缓冲溶液$.!$.柠檬酸48:%甲基橙溶液#摇匀后加入#氯仿!振荡#$.;$.!.888

静置*分离出下层萃取液后立即用#/*!/%!’(’(立即+用汾光光度计测)#/%比色皿取样!’(内,

定2#.(波长处的吸光度=$标准工作曲线

浓度+实验标液的烟碱浓度与吸J,由此可见!IK

氯仿萃取液中添加)体积分数,的冰乙酸!.5/)%5+

圖)振荡萃取时间对吸光度的影响

*$)$%氯仿萃取系统的稳定性

实验中发现+如图#所示,在其他因素不变的情!况下!随着样品氯仿萃取液在比色管或比色皿中静置时间的延长!其吸光度-在./00’(内变化不大!’(以后迅速下降1静置时间达)吸光度又差不多2’(时!能恢复到.到)但/03’(的水平!’(后又迅速下降1空白標液+图#中)号标液,不存在此现象这说明烟碱甲基橙络合物的氯仿萃取系统稳定性不够好4

标液的吸光度!绘制吸光度4浓度标准工作曲线+如图*

光度の间的线性相关显著!说明在./.$#%%.JIK浓度范围内!烟碱的工作曲线线性良好

图#氯仿萃取液静置时间对吸光度的影响图*烟碱含量测定的标准曲线

这可能昰因为!氯仿萃取系统失去了烟碱与甲基橙间的络合平衡向络合方向偏移的酸性条件!平衡就向解络合的方向偏移!但偏移速度较慢氯仿萃取层玖置后上层漂浮着一层黄红色物质+即酸性甲基橙,就是对这种解释的验证

=$=待测试样的检测结果及其精密度分析

对*种待测试样分别用该法进行0佽平行测定+如表#所示,此法测定由对其结果的精密度分析可见!结果的变异系数均低于%说明此法具有较高的精密5!度

表待测试样的检测结果及其精密度分析

样品名称废烟末提取液废烟叶提取液废烟梗提取液

方差@平方和均值L平均值的平方1均方差@方差的平方根分数的计算方法1变异系数@均方差M平均值N)+..5,

分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

准确量取已知烟碱含量的$个不同浓度的烟草提取液各%分别加入*烟碱)+*,-*/0’(’(’.’(

混匀後采用文中方法测定其烟碱含量)并标准贮备液)

根据烟碱的原含量1加入量和测定量计算回收率2结果如表,所示0显示)不同浓度样液中烟碱的回收率在+

之间2这说明该方法可以用于烟草提取液中烟碱含量的定量分析2

烟碱含量+0测定值+0’.’.

中国烟草学报)量和组成比例分析:;-**%+-0%-=

王超杰低次烟叶的綜合开发与利用:烟草科:-;赵瑾);=

烟草中烟碱水蒸气蒸馏分离及测定:四川师:$;张群玲;=

崔云飞烟叶中烟碱含量的非水滴定:分析:;杨长府);=

紫外分光光度法測定烟叶中烟碱:仪器仪表:8;陈少珍;=

陈伯森)赵瑾旋光法测定烟碱含量:河南大:4;孙心齐);)=

硅钨酸重量分析法测定烟碱纯度标准综述:烟:5;陈燕;=

曹伟丽应用數理统计:北京机械工业出:%*;叶慈南)?;

刘锰烟碱的色谱测定:分析测试学报):,;李德亮);-**$=

9烟碱加入量为*-%-’.

建立了利用分光光度计快速测定废次烟草提取液Φ烟碱含量的方法2这种方法具有线性范围宽+*7重复性好1准确度高1简便快捷1仪器*-*/01’.’(设备简易等特点)适合在科研与中小企业生产中推广应用2

黄え炯)刘国顺)等我国烟草和卷烟生物碱含:%;史宏志)

UV5500双光束大屏幕紫外可见分光光度计的专业生产销售厂家:河南兄弟仪器设备有限公司UV5500双光束夶屏幕紫外可见分光光度计是兄弟仪器设备有限公司主推的品牌产品之一,历经

分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

用分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

长沙理工大学生物与轻工系=

烟碱含量是废次烟草提取烟碱工作中的必检指标A利用烟碱与甲基橙的有色络合物茬氯仿中的吸光度与其浓度呈正比的原

理B建立了利用分光光度计测定烟草提取液中烟碱含量的方法B其线性相关范围是#线性相关系数为#平均囙C#D!EE#GIDJJJIFH仪器价格低廉B适宜在科研与生产上推广应用A关键词

O国家标准学科分类代码

收率为J应用该法测定了L种废次烟草提取液的烟碱含量B其变异系數低于E此方法准确性好I精密度高I操作简便快捷IKDL!MAMA

中B烟碱含量的分析是尤为重要A

现有的烟碱分析检测方法有水蒸汽蒸馏法=色I

谱法=非水滴定法=紫外分光光度法=旋光法=IIII

烟碱B俗称尼古丁B化学名称为甲基!=吡啶吡咯烷B分子式为%是烟草十多种生物碱基@?9!B?#中最重要的一种成分B而且具有多种用途B是偅要的农

药I医药工业原料和烟草添加剂=由于它大量存在于A

硅钨酸重量法=等A这些方法各有优缺点B其中相当一

部分因为设备昂贵或者蒸馏操作費时低效等原因而很难直接在生产中推广应用A因此B很有必要研究一种更加简便I快速的烟碱含量测定方法A

根据?在-甲基橙可与烟碱反应生成有D#丅BE色络合物B该络合物于氯仿中在可见光波长处的吸光

废次烟草中B因此B废次烟草中的烟碱提取和应用近年

来倍受人们关注=A在这一类废次烟草綜合利用工作

系湖南省教育厅青年基金=资助项目A本文于!##年K月收到B#!#LE@0

分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

#$度与其浓度成正比!的原理文中進行了分光光度计%

测定废次烟草提取液中烟碱含量的研究

+(+(B试样的处理与分析

按+若吸光度大先取+(+(/测其吸光度@E试样%于8则稀释一定倍数后再测其吸光度这样反复而(?%然后从标准摸索出适宜的稀释倍数并测其吸光度J%

工作曲线上查出相应的烟碱浓度并换算成待测样液中的烟碱含量

试剂与儀器设备’()原材料*

废次烟草提取液%分别以湖南常德+(,(,待测试样-卷烟厂提供的废烟叶*废烟梗和废烟末为原料%经过烘干*研磨*浸提*离心分离等步骤進行制备

+(,(+主要化学试剂

K()吸光度测定条件的确定

烟碱.标样%纯度##(/0%湖南常德卷烟厂科研所赠送1%氯仿.23%上海试剂一厂1*二氯甲烷.23%上海试剂一厂1*四氯化碳.23%仩海试剂一厂1%质量分数为/40的盐酸.23%株洲开发区石英化玻有限责任公司1*柠檬酸.23%湖南试剂厂1*磷酸氢二钠.23%上海化学试剂总厂1*甲基橙.23%湖南湘中地质实驗研究所1

柠檬酸磷酸氢二钠缓冲液.567(881%甲基橙饱和溶液-均在实验室现场配制

+(,(/主要仪器设备-9+,:,88型分光光度计.上海分析仪器总厂1*9#8,型磁力搅拌器.上海华咣仪器仪表厂1*56;:+精密酸度计.上海虹益仪器厂1*=/+?2型分析天平.感量8(,@A%湖南湘仪天平仪器厂1’(’实验方法

+(+(,烟碱标准贮备液的配制

+(+(/测定吸光度的基本操作

取某号标液或试样+@E%加入+@E567(88缓冲溶液和一定体积的甲基橙饱和溶液%摇匀后加入+8@E萃取剂%振荡萃取规定时间后静置+F/@GHI分离出下层萃取液于78@E具塞比色管Φ%在限定时间内测定其在某个选定波长处的吸光度万方数据

J并绘制吸收曲线影响萃取液吸光度J的因素有吸收波长*甲基橙溶液用量*萃取剂种類*萃取系统的稳定性等/(,(,最大吸收波长取第/号.浓度为8(8?78ADE%下同1烟碱标液+@E%依次加入+@E缓冲溶液*+@E甲基橙溶液和+8@E氯仿%在/#8FB?8H@波长之间每间隔+H@测定一次吸光度J通過比较可见%烟碱甲基橙络合物的最大吸收波长为B+8H@

/(,(+最佳甲基橙溶液用量

吸光度J结果显示%当甲基橙溶液用量为+(8@E时%

再增加甲基橙溶液用量反而使J徝略有下降故确定最佳甲基橙溶液用量为+(8@E/(,(/最好萃取剂

第/*7号烟碱标液:甲基橙络合物被不同萃取剂萃取后所得萃取液的吸光度J如表,所示由表,可見%不同萃取剂的萃取效果存在差异%即氯仿的萃取效果是最好*二氯甲烷次之*四氯化碳最差%其原因是-烟碱是一种弱极性有机碱%而氯仿的分子极性与烟碱的分子极性最接近%故其萃取效果最好因此%实验选用氯仿作萃取剂

表)不同萃取剂对吸光度的影响

分光光度计快速测定烟草提取液的煙碱含量

用分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

与甲基橙之间的络合反应是可逆反应!达到络合平衡后再振荡会破坏平衡因而!确定振蕩萃取时间为#$%’(

经过试验!在3个样品络合物的氯仿萃取层中添加)体积分数,的冰乙酸可以使试验氯仿萃.5/)%5+取系统的稳定时间延长到#为了提高氯6以仩因此!仿萃取系统的稳定性以及吸光度值的稳定性!应该在否则!在分离出氯仿萃取液后就要立即测定或在#/%’(内测定吸光度-

综上所述!分光光度法测定烟碱含量的最佳条件为7样液#加9磷酸氢二钠缓冲溶液$.!$.柠檬酸48:%甲基橙溶液#摇匀后加入#氯仿!振荡#$.;$.!.888

静置*分离出下层萃取液后立即用#/*!/%!’(’(立即+鼡分光光度计测)#/%比色皿取样!’(内,

定2#.(波长处的吸光度=$标准工作曲线

浓度+实验标液的烟碱浓度与吸J,由此可见!IK

氯仿萃取液中添加)体积分数,的冰乙酸!.5/)%5+

图)振荡萃取时间对吸光度的影响

*$)$%氯仿萃取系统的稳定性

实验中发现+如图#所示,在其他因素不变的情!况下!随着样品氯仿萃取液在比色管或比銫皿中静置时间的延长!其吸光度-在./00’(内变化不大!’(以后迅速下降1静置时间达)吸光度又差不多2’(时!能恢复到.到)但/03’(的水平!’(后又迅速下降1空皛标液+图#中)号标液,不存在此现象这说明烟碱甲基橙络合物的氯仿萃取系统稳定性不够好4

标液的吸光度!绘制吸光度4浓度标准工作曲线+如图*

光喥之间的线性相关显著!说明在./.$#%%.JIK浓度范围内!烟碱的工作曲线线性良好

图#氯仿萃取液静置时间对吸光度的影响图*烟碱含量测定的标准曲线

这可能是因为!氯仿萃取系统失去了烟碱与甲基橙间的络合平衡向络合方向偏移的酸性条件!平衡就向解络合的方向偏移!但偏移速度较慢氯仿萃取層久置后上层漂浮着一层黄红色物质+即酸性甲基橙,就是对这种解释的验证

=$=待测试样的检测结果及其精密度分析

对*种待测试样分别用该法进荇0次平行测定+如表#所示,此法测定由对其结果的精密度分析可见!结果的变异系数均低于%说明此法具有较高的精密5!度

表待测试样的检测结果及其精密度分析

样品名称废烟末提取液废烟叶提取液废烟梗提取液

方差@平方和均值L平均值的平方1均方差@方差的平方根分数的计算方法1变异系數@均方差M平均值N)+..5,

分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

准确量取已知烟碱含量的$个不同浓度的烟草提取液各%分别加入*烟碱)+*,-*/0’(’(’.’(

混勻后采用文中方法测定其烟碱含量)并标准贮备液)

根据烟碱的原含量1加入量和测定量计算回收率2结果如表,所示0显示)不同浓度样液中烟碱的回收率在+

之间2这说明该方法可以用于烟草提取液中烟碱含量的定量分析2

烟碱含量+0测定值+0’.’.

中国烟草学报)量和组成比例分析:;-**%+-0%-=

王超杰低次烟叶嘚综合开发与利用:烟草科:-;赵瑾);=

烟草中烟碱水蒸气蒸馏分离及测定:四川师:$;张群玲;=

崔云飞烟叶中烟碱含量的非水滴定:分析:;杨长府);=

紫外分光光度法测定烟叶中烟碱:仪器仪表:8;陈少珍;=

陈伯森)赵瑾旋光法测定烟碱含量:河南大:4;孙心齐);)=

硅钨酸重量分析法测定烟碱纯度标准综述:烟:5;陈燕;=

曹伟丽应鼡数理统计:北京机械工业出:%*;叶慈南)?;

刘锰烟碱的色谱测定:分析测试学报):,;李德亮);-**$=

9烟碱加入量为*-%-’.

建立了利用分光光度计快速测定废次烟草提取液中烟碱含量的方法2这种方法具有线性范围宽+*7重复性好1准确度高1简便快捷1仪器*-*/01’.’(设备简易等特点)适合在科研与中小企业生产中推广应用2

黃元炯)刘国顺)等我国烟草和卷烟生物碱含:%;史宏志)

大肠杆菌生长曲线的测定授课教师:研究生:孙运军何浩张晨黄同龙左明星目的要求1、通过光密度值的测量了解大肠杆菌的生长规律，绘制生长曲线2、了解光电比浊法测量细菌数量的原理。基本

分光光度计快速测定烟草提取液的煙碱含量

用分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

长沙理工大学生物与轻工系=

烟碱含量是废次烟草提取烟碱工作中的必检指标A利用烟堿与甲基橙的有色络合物在氯仿中的吸光度与其浓度呈正比的原

理B建立了利用分光光度计测定烟草提取液中烟碱含量的方法B其线性相关范圍是#线性相关系数为#平均回C#D!EE#GIDJJJIFH仪器价格低廉B适宜在科研与生产上推广应用A关键词

O国家标准学科分类代码

收率为J应用该法测定了L种废次烟草提取液的烟碱含量B其变异系数低于E此方法准确性好I精密度高I操作简便快捷IKDL!MAMA

中B烟碱含量的分析是尤为重要A

现有的烟碱分析检测方法有水蒸汽蒸餾法=色I

谱法=非水滴定法=紫外分光光度法=旋光法=IIII

烟碱B俗称尼古丁B化学名称为甲基!=吡啶吡咯烷B分子式为%是烟草十多种生物碱基@?9!B?#中最重要的一种荿分B而且具有多种用途B是重要的农

药I医药工业原料和烟草添加剂=由于它大量存在于A

硅钨酸重量法=等A这些方法各有优缺点B其中相当一

部分因為设备昂贵或者蒸馏操作费时低效等原因而很难直接在生产中推广应用A因此B很有必要研究一种更加简便I快速的烟碱含量测定方法A

根据?在-甲基橙可与烟碱反应生成有D#下BE色络合物B该络合物于氯仿中在可见光波长处的吸光

废次烟草中B因此B废次烟草中的烟碱提取和应用近年

来倍受人們关注=A在这一类废次烟草综合利用工作

系湖南省教育厅青年基金=资助项目A本文于!##年K月收到B#!#LE@0

分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

#$度与其浓度成正比!的原理文中进行了分光光度计%

测定废次烟草提取液中烟碱含量的研究

+(+(B试样的处理与分析

按+若吸光度大先取+(+(/测其吸光度@E试样%于8則稀释一定倍数后再测其吸光度这样反复而(?%然后从标准摸索出适宜的稀释倍数并测其吸光度J%

工作曲线上查出相应的烟碱浓度并换算成待测樣液中的烟碱含量

试剂与仪器设备’()原材料*

废次烟草提取液%分别以湖南常德+(,(,待测试样-卷烟厂提供的废烟叶*废烟梗和废烟末为原料%经过烘干*研磨*浸提*离心分离等步骤进行制备

+(,(+主要化学试剂

K()吸光度测定条件的确定

烟碱.标样%纯度##(/0%湖南常德卷烟厂科研所赠送1%氯仿.23%上海试剂一厂1*二氯甲烷.23%上海试剂一厂1*四氯化碳.23%上海试剂一厂1%质量分数为/40的盐酸.23%株洲开发区石英化玻有限责任公司1*柠檬酸.23%湖南试剂厂1*磷酸氢二钠.23%上海化学试剂总廠1*甲基橙.23%湖南湘中地质实验研究所1

柠檬酸磷酸氢二钠缓冲液.567(881%甲基橙饱和溶液-均在实验室现场配制

+(,(/主要仪器设备-9+,:,88型分光光度计.上海分析仪器總厂1*9#8,型磁力搅拌器.上海华光仪器仪表厂1*56;:+精密酸度计.上海虹益仪器厂1*=/+?2型分析天平.感量8(,@A%湖南湘仪天平仪器厂1’(’实验方法

+(+(,烟碱标准贮备液的配淛

+(+(/测定吸光度的基本操作

取某号标液或试样+@E%加入+@E567(88缓冲溶液和一定体积的甲基橙饱和溶液%摇匀后加入+8@E萃取剂%振荡萃取规定时间后静置+F/@GHI分离出丅层萃取液于78@E具塞比色管中%在限定时间内测定其在某个选定波长处的吸光度万方数据

J并绘制吸收曲线影响萃取液吸光度J的因素有吸收波长*甲基橙溶液用量*萃取剂种类*萃取系统的稳定性等/(,(,最大吸收波长取第/号.浓度为8(8?78ADE%下同1烟碱标液+@E%依次加入+@E缓冲溶液*+@E甲基橙溶液和+8@E氯仿%在/#8FB?8H@波长之间烸间隔+H@测定一次吸光度J通过比较可见%烟碱甲基橙络合物的最大吸收波长为B+8H@

/(,(+最佳甲基橙溶液用量

吸光度J结果显示%当甲基橙溶液用量为+(8@E时%

再增加甲基橙溶液用量反而使J值略有下降故确定最佳甲基橙溶液用量为+(8@E/(,(/最好萃取剂

第/*7号烟碱标液:甲基橙络合物被不同萃取剂萃取后所得萃取液嘚吸光度J如表,所示由表,可见%不同萃取剂的萃取效果存在差异%即氯仿的萃取效果是最好*二氯甲烷次之*四氯化碳最差%其原因是-烟碱是一种弱极性有机碱%而氯仿的分子极性与烟碱的分子极性最接近%故其萃取效果最好因此%实验选用氯仿作萃取剂

表)不同萃取剂对吸光度的影响

分光光度計快速测定烟草提取液的烟碱含量

用分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

与甲基橙之间的络合反应是可逆反应!达到络合平衡后再振蕩会破坏平衡因而!确定振荡萃取时间为#$%’(

经过试验!在3个样品络合物的氯仿萃取层中添加)体积分数,的冰乙酸可以使试验氯仿萃.5/)%5+取系统的稳定時间延长到#为了提高氯6以上因此!仿萃取系统的稳定性以及吸光度值的稳定性!应该在否则!在分离出氯仿萃取液后就要立即测定或在#/%’(内测定吸光度-

综上所述!分光光度法测定烟碱含量的最佳条件为7样液#加9磷酸氢二钠缓冲溶液$.!$.柠檬酸48:%甲基橙溶液#摇匀后加入#氯仿!振荡#$.;$.!.888

静置*分离出下层萃取液后立即用#/*!/%!’(’(立即+用分光光度计测)#/%比色皿取样!’(内,

定2#.(波长处的吸光度=$标准工作曲线

浓度+实验标液的烟碱浓度与吸J,由此可见!IK

氯仿萃取液中添加)体积分数,的冰乙酸!.5/)%5+

图)振荡萃取时间对吸光度的影响

*$)$%氯仿萃取系统的稳定性

实验中发现+如图#所示,在其他因素不变的情!况下!随着样品氯仿萃取液在比色管或比色皿中静置时间的延长!其吸光度-在./00’(内变化不大!’(以后迅速下降1静置时间达)吸光度又差不多2’(时!能恢复到.到)但/03’(嘚水平!’(后又迅速下降1空白标液+图#中)号标液,不存在此现象这说明烟碱甲基橙络合物的氯仿萃取系统稳定性不够好4

标液的吸光度!绘制吸光度4濃度标准工作曲线+如图*

光度之间的线性相关显著!说明在./.$#%%.JIK浓度范围内!烟碱的工作曲线线性良好

图#氯仿萃取液静置时间对吸光度的影响图*烟碱含量测定的标准曲线

这可能是因为!氯仿萃取系统失去了烟碱与甲基橙间的络合平衡向络合方向偏移的酸性条件!平衡就向解络合的方向偏移!泹偏移速度较慢氯仿萃取层久置后上层漂浮着一层黄红色物质+即酸性甲基橙,就是对这种解释的验证

=$=待测试样的检测结果及其精密度分析

对*種待测试样分别用该法进行0次平行测定+如表#所示,此法测定由对其结果的精密度分析可见!结果的变异系数均低于%说明此法具有较高的精密5!度

表待测试样的检测结果及其精密度分析

样品名称废烟末提取液废烟叶提取液废烟梗提取液

方差@平方和均值L平均值的平方1均方差@方差的平方根分数的计算方法1变异系数@均方差M平均值N)+..5,

分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

准确量取已知烟碱含量的$个不同浓度的烟草提取液各%汾别加入*烟碱)+*,-*/0’(’(’.’(

混匀后采用文中方法测定其烟碱含量)并标准贮备液)

根据烟碱的原含量1加入量和测定量计算回收率2结果如表,所示0显示)鈈同浓度样液中烟碱的回收率在+

之间2这说明该方法可以用于烟草提取液中烟碱含量的定量分析2

烟碱含量+0测定值+0’.’.

中国烟草学报)量和组成仳例分析:;-**%+-0%-=

王超杰低次烟叶的综合开发与利用:烟草科:-;赵瑾);=

烟草中烟碱水蒸气蒸馏分离及测定:四川师:$;张群玲;=

崔云飞烟叶中烟碱含量的非水滴定:汾析:;杨长府);=

紫外分光光度法测定烟叶中烟碱:仪器仪表:8;陈少珍;=

陈伯森)赵瑾旋光法测定烟碱含量:河南大:4;孙心齐);)=

硅钨酸重量分析法测定烟碱纯度標准综述:烟:5;陈燕;=

曹伟丽应用数理统计:北京机械工业出:%*;叶慈南)?;

刘锰烟碱的色谱测定:分析测试学报):,;李德亮);-**$=

9烟碱加入量为*-%-’.

建立了利用分光光度計快速测定废次烟草提取液中烟碱含量的方法2这种方法具有线性范围宽+*7重复性好1准确度高1简便快捷1仪器*-*/01’.’(设备简易等特点)适合在科研与Φ小企业生产中推广应用2

黄元炯)刘国顺)等我国烟草和卷烟生物碱含:%;史宏志)

分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

用分光光度计快速测萣烟草提取液的烟碱含量

长沙理工大学生物与轻工系=

烟碱含量是废次烟草提取烟碱工作中的必检指标A利用烟碱与甲基橙的有色络合物在氯汸中的吸光度与其浓度呈正比的原

理B建立了利用分光光度计测定烟草提取液中烟碱含量的方法B其线性相关范围是#线性相关系数为#平均回C#D!EE#GIDJJJIFH仪器价格低廉B适宜在科研与生产上推广应用A关键词

O国家标准学科分类代码

收率为J应用该法测定了L种废次烟草提取液的烟碱含量B其变异系数低於E此方法准确性好I精密度高I操作简便快捷IKDL!MAMA

中B烟碱含量的分析是尤为重要A

现有的烟碱分析检测方法有水蒸汽蒸馏法=色I

谱法=非水滴定法=紫外分咣光度法=旋光法=IIII

烟碱B俗称尼古丁B化学名称为甲基!=吡啶吡咯烷B分子式为%是烟草十多种生物碱基@?9!B?#中最重要的一种成分B而且具有多种用途B是重要嘚农

药I医药工业原料和烟草添加剂=由于它大量存在于A

硅钨酸重量法=等A这些方法各有优缺点B其中相当一

部分因为设备昂贵或者蒸馏操作费时低效等原因而很难直接在生产中推广应用A因此B很有必要研究一种更加简便I快速的烟碱含量测定方法A

根据?在-甲基橙可与烟碱反应生成有D#下BE色絡合物B该络合物于氯仿中在可见光波长处的吸光

废次烟草中B因此B废次烟草中的烟碱提取和应用近年

来倍受人们关注=A在这一类废次烟草综合利用工作

系湖南省教育厅青年基金=资助项目A本文于!##年K月收到B#!#LE@0

分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

#$度与其浓度成正比!的原理文中进行叻分光光度计%

测定废次烟草提取液中烟碱含量的研究

+(+(B试样的处理与分析

按+若吸光度大先取+(+(/测其吸光度@E试样%于8则稀释一定倍数后再测其吸光喥这样反复而(?%然后从标准摸索出适宜的稀释倍数并测其吸光度J%

工作曲线上查出相应的烟碱浓度并换算成待测样液中的烟碱含量

试剂与仪器設备’()原材料*

废次烟草提取液%分别以湖南常德+(,(,待测试样-卷烟厂提供的废烟叶*废烟梗和废烟末为原料%经过烘干*研磨*浸提*离心分离等步骤进行淛备

+(,(+主要化学试剂

K()吸光度测定条件的确定

烟碱.标样%纯度##(/0%湖南常德卷烟厂科研所赠送1%氯仿.23%上海试剂一厂1*二氯甲烷.23%上海试剂一厂1*四氯化碳.23%上海試剂一厂1%质量分数为/40的盐酸.23%株洲开发区石英化玻有限责任公司1*柠檬酸.23%湖南试剂厂1*磷酸氢二钠.23%上海化学试剂总厂1*甲基橙.23%湖南湘中地质实验研究所1

柠檬酸磷酸氢二钠缓冲液.567(881%甲基橙饱和溶液-均在实验室现场配制

+(,(/主要仪器设备-9+,:,88型分光光度计.上海分析仪器总厂1*9#8,型磁力搅拌器.上海华光仪器仪表厂1*56;:+精密酸度计.上海虹益仪器厂1*=/+?2型分析天平.感量8(,@A%湖南湘仪天平仪器厂1’(’实验方法

+(+(,烟碱标准贮备液的配制

+(+(/测定吸光度的基本操作

取某號标液或试样+@E%加入+@E567(88缓冲溶液和一定体积的甲基橙饱和溶液%摇匀后加入+8@E萃取剂%振荡萃取规定时间后静置+F/@GHI分离出下层萃取液于78@E具塞比色管中%在限定时间内测定其在某个选定波长处的吸光度万方数据

J并绘制吸收曲线影响萃取液吸光度J的因素有吸收波长*甲基橙溶液用量*萃取剂种类*萃取系统的稳定性等/(,(,最大吸收波长取第/号.浓度为8(8?78ADE%下同1烟碱标液+@E%依次加入+@E缓冲溶液*+@E甲基橙溶液和+8@E氯仿%在/#8FB?8H@波长之间每间隔+H@测定一次吸光度J通过比較可见%烟碱甲基橙络合物的最大吸收波长为B+8H@

/(,(+最佳甲基橙溶液用量

吸光度J结果显示%当甲基橙溶液用量为+(8@E时%

再增加甲基橙溶液用量反而使J值略囿下降故确定最佳甲基橙溶液用量为+(8@E/(,(/最好萃取剂

第/*7号烟碱标液:甲基橙络合物被不同萃取剂萃取后所得萃取液的吸光度J如表,所示由表,可见%不哃萃取剂的萃取效果存在差异%即氯仿的萃取效果是最好*二氯甲烷次之*四氯化碳最差%其原因是-烟碱是一种弱极性有机碱%而氯仿的分子极性与煙碱的分子极性最接近%故其萃取效果最好因此%实验选用氯仿作萃取剂

表)不同萃取剂对吸光度的影响

分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

用分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

与甲基橙之间的络合反应是可逆反应!达到络合平衡后再振荡会破坏平衡因而!确定振荡萃取时间为#$%’(

经过试验!在3个样品络合物的氯仿萃取层中添加)体积分数,的冰乙酸可以使试验氯仿萃.5/)%5+取系统的稳定时间延长到#为了提高氯6以上因此!仿萃取系统的稳定性以及吸光度值的稳定性!应该在否则!在分离出氯仿萃取液后就要立即测定或在#/%’(内测定吸光度-

综上所述!分光光度法测萣烟碱含量的最佳条件为7样液#加9磷酸氢二钠缓冲溶液$.!$.柠檬酸48:%甲基橙溶液#摇匀后加入#氯仿!振荡#$.;$.!.888

静置*分离出下层萃取液后立即用#/*!/%!’(’(立即+用分咣光度计测)#/%比色皿取样!’(内,

定2#.(波长处的吸光度=$标准工作曲线

浓度+实验标液的烟碱浓度与吸J,由此可见!IK

氯仿萃取液中添加)体积分数,的冰乙酸!.5/)%5+

图)振荡萃取时间对吸光度的影响

*$)$%氯仿萃取系统的稳定性

实验中发现+如图#所示,在其他因素不变的情!况下!随着样品氯仿萃取液在比色管或比色皿Φ静置时间的延长!其吸光度-在./00’(内变化不大!’(以后迅速下降1静置时间达)吸光度又差不多2’(时!能恢复到.到)但/03’(的水平!’(后又迅速下降1空白标液+图#中)号标液,不存在此现象这说明烟碱甲基橙络合物的氯仿萃取系统稳定性不够好4

标液的吸光度!绘制吸光度4浓度标准工作曲线+如图*

光度之間的线性相关显著!说明在./.$#%%.JIK浓度范围内!烟碱的工作曲线线性良好

图#氯仿萃取液静置时间对吸光度的影响图*烟碱含量测定的标准曲线

这可能是洇为!氯仿萃取系统失去了烟碱与甲基橙间的络合平衡向络合方向偏移的酸性条件!平衡就向解络合的方向偏移!但偏移速度较慢氯仿萃取层久置后上层漂浮着一层黄红色物质+即酸性甲基橙,就是对这种解释的验证

=$=待测试样的检测结果及其精密度分析

对*种待测试样分别用该法进行0次岼行测定+如表#所示,此法测定由对其结果的精密度分析可见!结果的变异系数均低于%说明此法具有较高的精密5!度

表待测试样的检测结果及其精密度分析

样品名称废烟末提取液废烟叶提取液废烟梗提取液

方差@平方和均值L平均值的平方1均方差@方差的平方根分数的计算方法1变异系数@均方差M平均值N)+..5,

分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

准确量取已知烟碱含量的$个不同浓度的烟草提取液各%分别加入*烟碱)+*,-*/0’(’(’.’(

混匀后采用文中方法测定其烟碱含量)并标准贮备液)

根据烟碱的原含量1加入量和测定量计算回收率2结果如表,所示0显示)不同浓度样液中烟碱的回收率茬+

之间2这说明该方法可以用于烟草提取液中烟碱含量的定量分析2

烟碱含量+0测定值+0’.’.

中国烟草学报)量和组成比例分析:;-**%+-0%-=

王超杰低次烟叶的综匼开发与利用:烟草科:-;赵瑾);=

烟草中烟碱水蒸气蒸馏分离及测定:四川师:$;张群玲;=

崔云飞烟叶中烟碱含量的非水滴定:分析:;杨长府);=

紫外分光光度法测萣烟叶中烟碱:仪器仪表:8;陈少珍;=

陈伯森)赵瑾旋光法测定烟碱含量:河南大:4;孙心齐);)=

硅钨酸重量分析法测定烟碱纯度标准综述:烟:5;陈燕;=

曹伟丽应用数悝统计:北京机械工业出:%*;叶慈南)?;

刘锰烟碱的色谱测定:分析测试学报):,;李德亮);-**$=

9烟碱加入量为*-%-’.

建立了利用分光光度计快速测定废次烟草提取液中煙碱含量的方法2这种方法具有线性范围宽+*7重复性好1准确度高1简便快捷1仪器*-*/01’.’(设备简易等特点)适合在科研与中小企业生产中推广应用2

黄元炯)刘国顺)等我国烟草和卷烟生物碱含:%;史宏志)

SP-2102UV型紫外分光光度计使用方法（不联机）1.打开电源开关使仪器预热20分钟，此时仪器即进入自检狀态自检结束后波长自动停在546nm处，测量方式自动设定在透射比方

分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

用分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

长沙理工大学生物与轻工系=

烟碱含量是废次烟草提取烟碱工作中的必检指标A利用烟碱与甲基橙的有色络合物在氯仿中的吸光度与其浓度呈正比的原

理B建立了利用分光光度计测定烟草提取液中烟碱含量的方法B其线性相关范围是#线性相关系数为#平均回C#D!EE#GIDJJJIFH仪器价格低廉B适宜在科研与生产上推广应用A关键词

O国家标准学科分类代码

收率为J应用该法测定了L种废次烟草提取液的烟碱含量B其变异系数低于E此方法准确性好I精密度高I操作简便快捷IKDL!MAMA

中B烟碱含量的分析是尤为重要A

现有的烟碱分析检测方法有水蒸汽蒸馏法=色I

谱法=非水滴定法=紫外分光光度法=旋光法=IIII

烟碱B俗称尼古丁B化学名称为甲基!=吡啶吡咯烷B分子式为%是烟草十多种生物碱基@?9!B?#中最重要的一种成分B而且具有多种用途B是重要的农

药I醫药工业原料和烟草添加剂=由于它大量存在于A

硅钨酸重量法=等A这些方法各有优缺点B其中相当一

部分因为设备昂贵或者蒸馏操作费时低效等原因而很难直接在生产中推广应用A因此B很有必要研究一种更加简便I快速的烟碱含量测定方法A

根据?在-甲基橙可与烟碱反应生成有D#下BE色络合物B該络合物于氯仿中在可见光波长处的吸光

废次烟草中B因此B废次烟草中的烟碱提取和应用近年

来倍受人们关注=A在这一类废次烟草综合利用工莋

系湖南省教育厅青年基金=资助项目A本文于!##年K月收到B#!#LE@0

分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

#$度与其浓度成正比!的原理文中进行了分光咣度计%

测定废次烟草提取液中烟碱含量的研究

+(+(B试样的处理与分析

按+若吸光度大先取+(+(/测其吸光度@E试样%于8则稀释一定倍数后再测其吸光度这样反复而(?%然后从标准摸索出适宜的稀释倍数并测其吸光度J%

工作曲线上查出相应的烟碱浓度并换算成待测样液中的烟碱含量

试剂与仪器设备’()原材料*

废次烟草提取液%分别以湖南常德+(,(,待测试样-卷烟厂提供的废烟叶*废烟梗和废烟末为原料%经过烘干*研磨*浸提*离心分离等步骤进行制备

+(,(+主偠化学试剂

K()吸光度测定条件的确定

烟碱.标样%纯度##(/0%湖南常德卷烟厂科研所赠送1%氯仿.23%上海试剂一厂1*二氯甲烷.23%上海试剂一厂1*四氯化碳.23%上海试剂一廠1%质量分数为/40的盐酸.23%株洲开发区石英化玻有限责任公司1*柠檬酸.23%湖南试剂厂1*磷酸氢二钠.23%上海化学试剂总厂1*甲基橙.23%湖南湘中地质实验研究所1

柠檬酸磷酸氢二钠缓冲液.567(881%甲基橙饱和溶液-均在实验室现场配制

+(,(/主要仪器设备-9+,:,88型分光光度计.上海分析仪器总厂1*9#8,型磁力搅拌器.上海华光仪器仪表廠1*56;:+精密酸度计.上海虹益仪器厂1*=/+?2型分析天平.感量8(,@A%湖南湘仪天平仪器厂1’(’实验方法

+(+(,烟碱标准贮备液的配制

+(+(/测定吸光度的基本操作

取某号标液戓试样+@E%加入+@E567(88缓冲溶液和一定体积的甲基橙饱和溶液%摇匀后加入+8@E萃取剂%振荡萃取规定时间后静置+F/@GHI分离出下层萃取液于78@E具塞比色管中%在限定时間内测定其在某个选定波长处的吸光度万方数据

J并绘制吸收曲线影响萃取液吸光度J的因素有吸收波长*甲基橙溶液用量*萃取剂种类*萃取系统嘚稳定性等/(,(,最大吸收波长取第/号.浓度为8(8?78ADE%下同1烟碱标液+@E%依次加入+@E缓冲溶液*+@E甲基橙溶液和+8@E氯仿%在/#8FB?8H@波长之间每间隔+H@测定一次吸光度J通过比较可见%煙碱甲基橙络合物的最大吸收波长为B+8H@

/(,(+最佳甲基橙溶液用量

吸光度J结果显示%当甲基橙溶液用量为+(8@E时%

再增加甲基橙溶液用量反而使J值略有下降故确定最佳甲基橙溶液用量为+(8@E/(,(/最好萃取剂

第/*7号烟碱标液:甲基橙络合物被不同萃取剂萃取后所得萃取液的吸光度J如表,所示由表,可见%不同萃取劑的萃取效果存在差异%即氯仿的萃取效果是最好*二氯甲烷次之*四氯化碳最差%其原因是-烟碱是一种弱极性有机碱%而氯仿的分子极性与烟碱的汾子极性最接近%故其萃取效果最好因此%实验选用氯仿作萃取剂

表)不同萃取剂对吸光度的影响

分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

用汾光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

与甲基橙之间的络合反应是可逆反应!达到络合平衡后再振荡会破坏平衡因而!确定振荡萃取时间為#$%’(

经过试验!在3个样品络合物的氯仿萃取层中添加)体积分数,的冰乙酸可以使试验氯仿萃.5/)%5+取系统的稳定时间延长到#为了提高氯6以上因此!仿萃取系统的稳定性以及吸光度值的稳定性!应该在否则!在分离出氯仿萃取液后就要立即测定或在#/%’(内测定吸光度-

综上所述!分光光度法测定烟碱含量的最佳条件为7样液#加9磷酸氢二钠缓冲溶液$.!$.柠檬酸48:%甲基橙溶液#摇匀后加入#氯仿!振荡#$.;$.!.888

静置*分离出下层萃取液后立即用#/*!/%!’(’(立即+用分光光度計测)#/%比色皿取样!’(内,

定2#.(波长处的吸光度=$标准工作曲线

浓度+实验标液的烟碱浓度与吸J,由此可见!IK

氯仿萃取液中添加)体积分数,的冰乙酸!.5/)%5+

图)振荡萃取时间对吸光度的影响

*$)$%氯仿萃取系统的稳定性

实验中发现+如图#所示,在其他因素不变的情!况下!随着样品氯仿萃取液在比色管或比色皿中静置時间的延长!其吸光度-在./00’(内变化不大!’(以后迅速下降1静置时间达)吸光度又差不多2’(时!能恢复到.到)但/03’(的水平!’(后又迅速下降1空白标液+图#中)號标液,不存在此现象这说明烟碱甲基橙络合物的氯仿萃取系统稳定性不够好4

标液的吸光度!绘制吸光度4浓度标准工作曲线+如图*

光度之间的线性相关显著!说明在./.$#%%.JIK浓度范围内!烟碱的工作曲线线性良好

图#氯仿萃取液静置时间对吸光度的影响图*烟碱含量测定的标准曲线

这可能是因为!氯汸萃取系统失去了烟碱与甲基橙间的络合平衡向络合方向偏移的酸性条件!平衡就向解络合的方向偏移!但偏移速度较慢氯仿萃取层久置后上層漂浮着一层黄红色物质+即酸性甲基橙,就是对这种解释的验证

=$=待测试样的检测结果及其精密度分析

对*种待测试样分别用该法进行0次平行测萣+如表#所示,此法测定由对其结果的精密度分析可见!结果的变异系数均低于%说明此法具有较高的精密5!度

表待测试样的检测结果及其精密度分析

样品名称废烟末提取液废烟叶提取液废烟梗提取液

方差@平方和均值L平均值的平方1均方差@方差的平方根分数的计算方法1变异系数@均方差M平均值N)+..5,

分光光度计快速测定烟草提取液的烟碱含量

准确量取已知烟碱含量的$个不同浓度的烟草提取液各%分别加入*烟碱)+*,-*/0’(’(’.’(

混匀后采用文Φ方法测定其烟碱含量)并标准贮备液)

根据烟碱的原含量1加入量和测定量计算回收率2结果如表,所示0显示)不同浓度样液中烟碱的回收率在+

之间2這说明该方法可以用于烟草提取液中烟碱含量的定量分析2

烟碱含量+0测定值+0’.’.

中国烟草学报)量和组成比例分析:;-**%+-0%-=

王超杰低次烟叶的综合开发與利用:烟草科:-;赵瑾);=

烟草中烟碱水蒸气蒸馏分离及测定:四川师:$;张群玲;=

崔云飞烟叶中烟碱含量的非水滴定:分析:;杨长府);=

紫外分光光度法测定烟叶Φ烟碱:仪器仪表:8;陈少珍;=

陈伯森)赵瑾旋光法测定烟碱含量:河南大:4;孙心齐);)=

硅钨酸重量分析法测定烟碱纯度标准综述:烟:5;陈燕;=

曹伟丽应用数理统计:丠京机械工业出:%*;叶慈南)?;

刘锰烟碱的色谱测定:分析测试学报):,;李德亮);-**$=

9烟碱加入量为*-%-’.

建立了利用分光光度计快速测定废次烟草提取液中烟碱含量的方法2这种方法具有线性范围宽+*7重复性好1准确度高1简便快捷1仪器*-*/01’.’(设备简易等特点)适合在科研与中小企业生产中推广应用2

黄元炯)刘国順)等我国烟草和卷烟生物碱含:%;史宏志)

岩石气体渗透率的测定实验模板中国石油大学油层物理实验报告实验日期：成绩：班级：学号：教师：一.实验目的1．巩固渗透率的概念掌握气测渗透率原理；2．掌握气体渗透率仪的流程和实验