核酸检测实验室建设要求设计有哪些要求

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PCR实验指的是基因扩增实验其特點是能将微量的DNA大幅增加,是分子生物学研究和实验的常规方法PCR实验室广泛应用于生物学各个领域,例如:艾滋病检测乙型肝炎,禽疫病癌基因的检测和诊断,DNA指纹个体识别,亲子鉴定及法医物证等等华测实验室今天就PCR实验室设计、建设要求和要点进行详解。

PCR实驗指的是基因扩增实验其特点是能将微量的DNA大幅增加,是分子生物学研究和实验的常规方法PCR实验室广泛应用于生物学各个领域,例如:艾滋病检测乙型肝炎,禽疫病癌基因的检测和诊断,DNA指纹个体识别,亲子鉴定及法医物证等等华测实验室今天就PCR实验室设计、建设要求和要点进行详解。

  一.PCR实验室布局

  PCR实验室原则上为试剂准备区样品制备区,扩增区和扩增产物分析区四个单独的工作区域并设有专用走廊,各工作区域应设缓冲间工作区与缓冲间宜安装连锁装置。不同功能的工作区应是分隔独立的各工作区有明显的標志,不能直通如果紧密连接,需安装物品传递窗前两区为扩增前区,后两区为扩增后区即从:试剂准备区——样品制备区——PCR扩增室——产物分析室,不得逆向流动实验室的气流也应从扩增前区流向扩增后区,不得逆向流动各工作区顶部应该安装紫外灯,紫外燈波长为254mm,每20㎡一支40W的紫外灯

  二.实验室各区功能及主要设备

  1. 试剂准备区:主要进行试剂的制备,分装和主反应混合液的制备试劑盒用于样品制作的材料应直接运送至该区域。试剂原材料必须贮存在本区内并在本区内制备成所需的试剂。本区主要设备有天平冰箱,离心机加样器,振荡器等对于气流压力的控制,本区并没有严格的要求一般为+10Pa。

  2. 样品制备区:主要进行样品的保存核酸提取,贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成本区主要设备有冰箱,生物安全柜离心机,加样器振荡器等。本区的压力梯度要求為:相对于邻近区域为正压以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染,一般为+10Pa

  3. 扩增区:主要进行DNA扩增。此外已制备的DNA模板(来自样品制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂准备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。本区主要设备有:扩增仪冰箱,离心机加样器等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压以避免气溶从本区漏出一般为-25Pa。

  4. 扩增产物分析区:扩增产物的测定本区主偠设备有酶标仪,洗板机.加样器和水浴箱等本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,一般为-25Pa以避免扩增产物从本区扩散至其它区域

  三. PCR实验室通风系统及压力控制

  各区域之间应具备单间的实验工艺流,物流人流与气流,形成单向流程的保护屏障避免实验室之间的相互干扰,防止气溶胶扩散对实验过程造成污染

  PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为避免各个实验区域交叉污染嘚可能性宜采用全送全排的气流组织形式,严格控制送排风的比例以保证个实验区的压力要求。

  四.PCR实验室装饰

  实验室围护结構应牢固气密性好;所有阴阳角宜采用圆弧过度;墙体内壁光洁,不积尘耐腐蚀,易清洗消毒;地面使用PVC卷材或环氧树脂自流坪材料应满足无缝隙,无渗漏光洁,耐腐蚀的要求

  五.PCR实验室注意事项

  1.几个区域的大小设置情况,试剂准备区扩增区,扩增产物分析区空间可以相对小一些,样品制备区要放置生物安全柜和低温冰箱空间应大一些。

  2.试剂准备区样品制备区设紧急洗眼器,以保证操作人员的安全

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