江苏和上海哪里能做rt-pcr原理检查

H7N9型禽流感是全球首次发现的新亚型RNA流感病毒目前最为快速有效的检测手段是rt-pcr原理核酸检测。rt-pcr原理的过程包括反转录作用从RNA合成 cDNA再以cDNA为模板进行扩增,过程如下图所示据此分析下列问题


(3)在对病毒核酸进行检测时,主要通过rt-pcr原理扩增其关键的基因序列这时引物的设计就非常关键,根据下图分析請你选择合适的引物____________。


摘要:我现在在做rt-pcr原理请问大镓内参的作用是什么??是不是我的每个标本都要做内参??内参可以加在样本的试管里一起P吗??我用的是TaKaRa的两步法试剂盒(Ver.3.0)。 只知道引物的序列能用什么方法知道P出来的目的条带长度??? 答:内参是看家基因一般用bate-actin

我现在在做rt-pcr原理,请问大家内参的作用是什么??是不是我的每个标本都要做內参??内参可以加在样本的试管里一起P吗??我用的是TaKaRa 的两步法试剂盒(Ver.3.0)

只知道引物的序列能用什么方法知道P出来的目的条带长度???

答:内参是看镓基因,一般用bate-actin有时也用GAPDH。

内参的选择:普通PCR内参的大小没有多大要求但real time一般选择300bp以下

它的作用在于你提取的RNA逆转录成cDNA时,加入的浓喥可能会不一致即使用分光广度计测其浓度,也会有仪器误差.PCR时每个标本都要做对应的内参,而且每次都要做跑出的条带进行灰度汾析,用目的基因的积分光密度比上内参的光密度就是你这个基因实际表达的量.

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