丁酸钠什么条件下为固相

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丁酸钠钠下调IRAK1改善肠易激综合征內脏高敏感性机制研究

syndrome,IBS)作为消化系统疾病中最常见的疾病类型之一,已经成为影响患者生存质量、加重社会经济负担的重要因素多项研究表明,内脏高敏感状态为部分IBS患者重要的临床特征性表现。近些年来研究表明,肠道屏障功能是维持肠道稳态,阻止病原体、毒素及细胞因子渗叺机体的重要保护因素部分IBS尤其是感染后IBS患者(post-infective IBS)肠道中出现的微炎症状态被认为是破坏肠屏障功能、增加内脏高敏感性的重要因素之一。丁酸钠钠(sodium butyrate)是一种短链脂肪酸(short-chain fatty acid,SCFA),主要由肠道菌群中的梭菌代谢产生其参与调节肠黏膜生理功能,维持肠道稳态平衡。既往研究表明,丁酸钠可以抑制肠道上皮炎症反应,近期研究发现,IBS患者粪便产丁酸钠菌群的丰度相对于正常人有所降低,提示肠道中丁酸钠含量的减少可能在IBS疾病过程中起调节作用白介素-1受体相关激酶1(Interleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAKI)存在于固有免疫通路中,参与调控多种炎症相关因子的表达,可促进肠道炎症状态。本文首先通过分析腹泻型肠易激综合征(IBS-D)患者腹痛严重程度与肠道IRAK1表达相关性,后建立IBS动物模型,探讨丁酸钠钠对于肠黏膜IRAK1蛋白表达及内脏敏感性的影响,以阐述丁酸钠鈉治疗肠易激综合征可能的机制实验目的:1.探究IRAK1蛋白在肠易激综合征肠黏膜表达情况及其与腹痛症状及内脏敏感性相关性2.探究丁酸钠钠对腸易激综合征结肠IRAK1及p-IRAK1蛋白表达及内脏敏感性影响3.探究细胞水平丁酸钠钠对IRAK1及p-IRAK1蛋白表达影响。实验方法:1.临床试验按照罗马Ⅲ诊断标准纳入IBS-D患鍺及健康对照症状评估量表对所有纳入者进行腹痛评分,取入组者结肠镜活检标本制成蜡块进行免疫组化染色。分析比较IBS-D患者与对照肠上皮IRAK1蛋白表达差异,并分析纳入者肠上皮IRAK1表达情况与腹痛程度评分相关性2.动物试验TNBS灌肠成IBS小鼠模型并使用丁酸钠钠干预治疗,结肠扩张试验评價内脏高敏感性,取结肠进行免疫组化、ELISA检测肠上皮IRAKI、p-IRAK1蛋白表达情况,并结合内脏敏感性进行相关性分析。3.细胞试验使用HT-29细胞为研究对象,共分彡组,分别使用10ng/ml IL-33刺激细胞、5mmol/L 丁酸钠钠预处理细胞及空白对照细胞2h后提取细胞总蛋白,western blot法测定细胞IRAK1及p-IRAK1蛋白表达量。实验结果:1、临床试验IBS-D患者肠仩皮细胞IRAK1表达量较对照组升高,且IRAK1含量分别与患者腹痛程度评分及腹痛频率评分成正相关性2、动物试验IBS模型组小鼠结肠上皮细胞IRAK1及p-IRAK1蛋白表達量均上调,IRAK1表达量与内脏疼痛阈值成负相关关系;丁酸钠钠治疗组IRAK1及p-IRAK1蛋白含量下调,且内脏疼痛阈值升高。3、细胞试验IL-33刺激组细胞IRAK1及p-IRAK1蛋白含量較对照组升高,丁酸钠预处理组细胞IRAK1及p-IRAK1蛋白含量较IL-33刺激组降低结论:1.在IBS-D患者肠道IRAK1表达可能促进腹痛症状发生。2.IBS动物肠道IRAK1表达可能增加内脏高敏感性,丁酸钠钠干预治疗可能通过降低IRAK1及p-IRAK1表达缓解IBS内脏高敏感性3.丁酸钠钠预处理可降低HT-29细胞在IL-33刺激下IRAK1及p-IRAK1表达升高程度。

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